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鸡传染性法氏囊病病毒直接免疫荧光检测方法的建立及初步应用
1
作者 姜艳平 孙健 +8 位作者 刘薇 李博龙 白慧涛 杨景 李佳璇 崔文 周晗 韩建春 唐丽杰 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第9期4368-4378,共11页
【目的】利用R-藻红蛋白荧光素(R-PE)标记鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus, IBDV)单克隆抗体,建立快速检测组织和细胞中IBDV的直接免疫荧光方法。【方法】试验取单克隆抗体细胞4C12复苏后,免疫小鼠制备单克隆抗... 【目的】利用R-藻红蛋白荧光素(R-PE)标记鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus, IBDV)单克隆抗体,建立快速检测组织和细胞中IBDV的直接免疫荧光方法。【方法】试验取单克隆抗体细胞4C12复苏后,免疫小鼠制备单克隆抗体腹水,用层析柱进行纯化,通过间接免疫荧光法和ELISA方法对其进行鉴定,并测定抗体效价;通过偶联试剂盒对单克隆抗体进行标记,建立直接免疫荧光法并优化反应条件,检测其特异性、敏感性及稳定性。利用建立的方法对感染IBDV的鸡法氏囊和脾脏进行检测。【结果】纯化的4C12单克隆抗体腹水效价为1∶10^(8);用R-PE标记4C12单克隆抗体,成功建立了直接免疫荧光检测方法,确定最佳反应条件为:IBDV感染DT40细胞48 h、4%多聚甲醛和无水乙醇为固定剂进行双重固定、R-PE-4C12株单克隆抗体工作浓度为24μg/mL、抗体孵育90 min,此条件下荧光效果最佳。建立的直接免疫荧光方法与禽白血病病毒(ALV)、禽网状内皮组织增生症病毒(REV)、禽脑脊髓炎病毒(AEV)和减蛋综合症病毒(EDSV)不发生交叉反应,特异性较好;该方法在病毒含量为10^(3)鸡胚半数感染量(ELD_(50))时仍能检测到阳性信号,灵敏性较好;稳定性试验显示,R-PE-4C12在4℃保存21 d后,仍能产生稳定的荧光信号。建立的直接免疫荧光方法中R-PE-4C12能与感染组织中IBDV结合产生特异性红色荧光;与间接免疫荧光法相比,两者荧光效果没有明显差异。【结论】本研究建立的直接免疫荧光方法具有较好的特异性、敏感性和稳定性,可以用于组织和细胞中IBDV的检测,为实验室IBDV检测提供一种快速有效的检测方案。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV) 直接免疫荧光法 单克隆抗体 R-藻红蛋白荧光素
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一例肉鸡传染性法氏囊病引发的防控思考
2
作者 徐从贝 《中国畜牧业》 2025年第13期96-97,共2页
鸡传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病毒(IBDV)引起的一种急性、接触性、免疫抑制性传染病。IBDV属于双RNA病毒科禽双RNA病毒属,其基因组包括两条双链RNA,即A、B节段。该病不仅导致鸡只的直接死亡和淘汰率增加,更重要的是对鸡体的... 鸡传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病毒(IBDV)引起的一种急性、接触性、免疫抑制性传染病。IBDV属于双RNA病毒科禽双RNA病毒属,其基因组包括两条双链RNA,即A、B节段。该病不仅导致鸡只的直接死亡和淘汰率增加,更重要的是对鸡体的免疫器官法氏囊造成严重损伤,使鸡对各种疾病的抵抗力下降,易感性增高,从而引发继发感染,增加了治疗难度和病死率。 展开更多
关键词 免疫抑制 IBDV 双RNA病毒 传染性法氏囊病
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鸡传染性法氏囊病的防治分析
3
作者 闫琪 王向辉 《吉林畜牧兽医》 2025年第2期73-75,共3页
传染性法氏囊病(IBD)是禽类的一种急性、高度接触性的免疫抑制病。这是一种对禽类具有重要影响的疾病,野生鸟类在传染性法氏囊病病毒(IBDV)传播中发挥的作用尚不清楚。我国于1979年首次在广州发生,1980年从北京的鸡群中分离到IBDV,该病... 传染性法氏囊病(IBD)是禽类的一种急性、高度接触性的免疫抑制病。这是一种对禽类具有重要影响的疾病,野生鸟类在传染性法氏囊病病毒(IBDV)传播中发挥的作用尚不清楚。我国于1979年首次在广州发生,1980年从北京的鸡群中分离到IBDV,该病引起的经济损失很高,尽管加强了疫苗接种制度,但该病疫情仍频繁暴发,在全世界范围内广泛传播,出现了各种不同的IBDV变种,每种病毒的毒力不同。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病 免疫抑制病 疫苗接种 野生鸟类 IBDV 禽类 发挥的作用 防治分析
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肉鸡源传染性法氏囊病新型重排毒株的分离鉴定及遗传进化分析 被引量：2
4
作者 左文博 蒲德粉 +3 位作者 王威威 王林果 韦平 何秀苗 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期890-896,共7页
[目的]明确云南某肉鸡场疑似传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染病例的病原类型及分子特征,以了解IBDV新型重排毒株在肉鸡中的流行情况、分子进化趋势,为制定有效的传染性法氏囊病(IBD)防控和疫苗选用策略提供参考依据。[方法]对疑似IBDV感... [目的]明确云南某肉鸡场疑似传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染病例的病原类型及分子特征,以了解IBDV新型重排毒株在肉鸡中的流行情况、分子进化趋势,为制定有效的传染性法氏囊病(IBD)防控和疫苗选用策略提供参考依据。[方法]对疑似IBDV感染的病鸡法氏囊进行研磨处理后,采用巢式RT-PCR进行检测,后将IBDV阳性的法氏囊组织悬液接种于9日龄SPF鸡胚并进行病毒分离,对病毒的vVP2和VP1-b基因扩增并进行遗传变异分析。[结果]成功分离出一株新型IBDV重排毒株(命名为YN-YX221110),接种9日龄SPF鸡胚后,胚体整体呈现弥漫性出血,头、颈以及背部皮肤有出血点。基于vVP2基因序列,分离株YN-YX221110与新型变异株(nvIBDV)参考株的核苷酸相似性最高,为93.2%~97.9%,分离株YN-YX221110的vVP2基因222A特征性氨基酸位点与UK661、HK46等超强毒株(vvIBDV)参考株相同,249K、256V、279N、284A、294L、299S等位点与新型变异株(nvIBDV)参考株中的SHG19相同;在基于vVP2基因的遗传进化树中,分离株YN-YX221110与GX-QZ191002、SHG19等nvIBDV参考株聚为一支,属于A2d分支。基于VP1-b基因序列,分离株YN-YX221110与参考株中的经典毒株(cIBDV)类似株核苷酸相似性最高,为97.8%~98.4%,分离株YN-YX221110的vVP2基因特征性氨基酸位点240D、242D、287T、390L和393E与致弱毒株(attIBDV)参考株中的B87、Gt相同;在基于VP1-b基因序列的系统发育进化树中,分离株YN-YX221110与参考株Gt、B87和CEF94等cIBDV类似株中的attIBDV聚为一支,属于B1a分支。分离株YN-YX221110基因型为A2dB1a。[结论]成功分离得到肉鸡源IBDV分离株YN-YX221110,其A片段来源于nvIBDV,B片段来源于cIBDV类似株中的attIBDV,为新型IBDV重排毒株。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒(IBDV) 新型变异株 分离鉴定 基因重排 分子遗传进化
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鸡传染性法氏囊病的诊断与防治 被引量：1
5
作者 孙贯群 《现代农村科技》 2024年第3期79-79,共1页
传染性法氏囊病(IBDV)的病原是传染性法氏囊病病毒,此病具有发病急、极易发生接触性传染的特点。患病鸡大多为雏鸡,会突然发病,短时间内大量死亡,病情发展迅速且不好控制,很难治愈。此病的临床表现为法氏囊肿胀、表面黏膜有出血点,腿部... 传染性法氏囊病(IBDV)的病原是传染性法氏囊病病毒,此病具有发病急、极易发生接触性传染的特点。患病鸡大多为雏鸡,会突然发病,短时间内大量死亡,病情发展迅速且不好控制,很难治愈。此病的临床表现为法氏囊肿胀、表面黏膜有出血点,腿部和胸部有条状出血,肾脏肿胀并伴有斑点沉积。本文总结了鸡传染性法氏囊病的症状及防治方法。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病 出血点 接触性传染 诊断与防治 症状及防治 IBDV 大量死亡 法氏囊
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雏鸡在感染IBDV后红细胞免疫功能变化的研究 被引量：22
6
作者 陈龙 殷定忠 +2 位作者 庞训胜 王成明 毛鑫智 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期280-284,共5页
在经ＩＢＤ弱毒苗免疫和未免疫的３０～５９日龄ＡＡ鸡研究了感染ＩＢＤＶ后红细胞免疫功能的变化。结果表明：从以ＩＢＤＶ攻毒前１天到攻毒后头５天内，未免疫攻毒鸡（Ａ组）和免疫攻毒鸡（Ｂ组）ＲＢＣ－ＣＲ１花环率降低或显著降低... 在经ＩＢＤ弱毒苗免疫和未免疫的３０～５９日龄ＡＡ鸡研究了感染ＩＢＤＶ后红细胞免疫功能的变化。结果表明：从以ＩＢＤＶ攻毒前１天到攻毒后头５天内，未免疫攻毒鸡（Ａ组）和免疫攻毒鸡（Ｂ组）ＲＢＣ－ＣＲ１花环率降低或显著降低，而未免疫未攻毒鸡（Ｃ组）没有类似变化，高于Ｂ组，明显高于Ａ组，以后Ａ和Ｂ组逐渐回升到攻毒前水平。Ａ和Ｂ组ＲＢＣ－ＩＣ花环率在ＩＢＤＶ攻毒后第５天明显降低，均显著低于Ｃ组水平，以后Ａ组仍处于较低水平上变动，Ｂ组即逐渐回升，三组比较，Ａ组仍低于Ｃ组，同时也低于Ｂ组。 展开更多
关键词 雏鸡 IBDV 红细胞 免疫功能
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传染性法氏囊病病毒变异株主要免疫原基因cDNA的克隆及鉴定 被引量：21
7
作者 曹永长 毕英佐 +3 位作者 罗文新 杨永成 梁志清 林文量 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1997年第9期3-5,共3页
采用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），从１株传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）本地分离株ＧＺ９０２中扩增到编码ＩＢＤＶ主要免疫蛋白ＶＰ２的ｃＤＮＡ片断，大小约为１３５０ｂｐ。将该ｃＤＮＡ片断插入ｐＢｓＫ质粒中，用重组... 采用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），从１株传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）本地分离株ＧＺ９０２中扩增到编码ＩＢＤＶ主要免疫蛋白ＶＰ２的ｃＤＮＡ片断，大小约为１３５０ｂｐ。将该ｃＤＮＡ片断插入ｐＢｓＫ质粒中，用重组质粒转化大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅ，成功获得重组质粒转化菌。对重组质粒ＤＮＡ进行酶切鉴定，证明插入的ＤＮＡ片断与ＰＣＲ扩增的ＤＮＡ片段大小相符。对ＧＺ９０２高可变区进行了序列分析。其核苷酸序列与３株ＩＢ－ＤＶ变异株Ａ、ＧＬＳ、Ｅ的同源性分别达到９８．９％，９６．２％和９５．５％。而与其他Ⅰ型毒株的同源性较低。比较从ＤＮＡ序列推导出的氨基酸序列，发现ＧＺ９０２高可变区的两个亲水区均发生了一个氨基酸的变化，而在２４９和２５４位上的氨基酸分别为Ｋ和Ｓ，与以上３个变异株相同，但与所有标准Ⅰ型毒株不同。这两个氨基酸可以作为ＩＢＤＶ变异株的标志。 展开更多
关键词 变异株 基因克隆 序列分析 IBDV
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雏鸡混合感染IBDV与CAV的研究 被引量：16
8
作者 王笑梅 王秀荣 +1 位作者 邱冬 王积海 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第5期321-324,共4页
实验分为 4组 :空白对照组、CAV感染组、IBDV感染组、IBDV_CAV混合感染组。选择IBDV发病严重期 (6日龄 )与CAV发病严重期 (13日龄 )测定并计算各组鸡的法氏囊、胸腺和体重的比值 ;分离外周血、法氏囊和胸腺中的淋巴细胞 ,加入适量的刀... 实验分为 4组 :空白对照组、CAV感染组、IBDV感染组、IBDV_CAV混合感染组。选择IBDV发病严重期 (6日龄 )与CAV发病严重期 (13日龄 )测定并计算各组鸡的法氏囊、胸腺和体重的比值 ;分离外周血、法氏囊和胸腺中的淋巴细胞 ,加入适量的刀豆蛋白 (ConA)和商陆凝集素 (PAM)作为有丝分裂刺激原 ,利用MTT法检测实验鸡免疫细胞的功能变化 ;统计死亡率 ,绘制死亡曲线。研究发现 ,IBDV与CAV的混合感染较单独感染严重降低了感染鸡免疫活性细胞的增殖功能 ,并同时增强了IBDV或CAV的致病力 ,出现两次死亡高峰 ,病死率达 10 0 %。 展开更多
关键词 IBDV CAV 混合感染
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浙江地区传染性法氏囊病毒变异株分离及鉴定 被引量：10
9
作者 周继勇 叶伟成 于涟 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期567-573,共7页
　７ 株鸡传染性法氏囊病的法氏囊组织直接在鸡胚成纤维细胞盲传２ ～１５ 代后，均能不同程度产生细胞病变效应（ ＣＰＥ） ，并通过病毒血清中和试验、动物回归试验、电镜观察、琼脂免疫扩散试验，理化特性测定等试验证实七株病原为... 　７ 株鸡传染性法氏囊病的法氏囊组织直接在鸡胚成纤维细胞盲传２ ～１５ 代后，均能不同程度产生细胞病变效应（ ＣＰＥ） ，并通过病毒血清中和试验、动物回归试验、电镜观察、琼脂免疫扩散试验，理化特性测定等试验证实七株病原为传染性法氏囊病病毒。在此基础上将７ 个浙江地区的ＩＢＤＶ 野毒株、１ 个四川地区的ＩＢＤＶ 野毒株和２ 个疫苗毒株经病毒—血清交叉中和试验获得了抗原性不同的五个亚型毒株或变异株。根据交叉中和试验所得的Ｒ 值，应用聚类分析法分析了各亚型毒株之间的亲缘关系，显示传染性法氏囊病病毒的变异存在地或性差异。 展开更多
关键词 IBD 鉴定 法氏囊病 IBDV 分离 鸡
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传染性法氏囊病毒VP2蛋白抗原表位多肽P22的免疫原性及生物学功能鉴定 被引量：8
10
作者 宋幸辉 王睿 +6 位作者 王选年 鲍登克 杨苏珍 卢清侠 王寅彪 赵东 张改平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期692-697,共6页
为鉴定IBDV VP2蛋白线性B细胞抗原表位肽P22的免疫原性及生物学功能,作者采用固相多肽合成方法合成多肽P22,经纯化后用SMCC法分别与牛血清白蛋白(BSA)和细胞穿膜肽(PNT)进行偶联,得到免疫抗原P22-BSA和检测抗原P22-PNT;用P22-BSA免疫BAL... 为鉴定IBDV VP2蛋白线性B细胞抗原表位肽P22的免疫原性及生物学功能,作者采用固相多肽合成方法合成多肽P22,经纯化后用SMCC法分别与牛血清白蛋白(BSA)和细胞穿膜肽(PNT)进行偶联,得到免疫抗原P22-BSA和检测抗原P22-PNT;用P22-BSA免疫BALB/c小鼠3只,经3次免疫后得到多抗血清3份。应用ELISA检测了抗P22抗体的特异性,并通过抗P22多肽抗体作为特异性抗体检测了P22多肽结合CEF细胞的特性。结果经鉴定3份多抗血清均与P22多肽特异性反应,效价均达到1∶105,且能特异性检测P22多肽与CEF细胞的特异性结合。本试验成功制备了P22免疫原,获得了效价高、特异性较好的鼠源抗P22多抗血清,并证明P22多肽与CEF细胞能够特异性结合,为进一步研究多肽疫苗的设计或试纸条的研制及表位单抗的制备提供了新的思路和基础。 展开更多
关键词 IBDV VP2蛋白 P22多肽 抗原表位 免疫
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硫酸化黄芪多糖对CEF生长及抵抗IBDV感染的影响 被引量：10
11
作者 黄小燕 胡元亮 +6 位作者 王德云 王君敏 赵晓娜 张帆 郭振环 卢宇 孙峻岭 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期110-114,共5页
采取一步醇沉和分步醇沉法提取4种黄芪多糖APSt、APS40、APS50和APS60,用氯磺酸-吡啶法进行硫酸化修饰,得到4种硫酸化黄芪多糖(sAPS)sAPSt、sAPS40、sAPS50和sAPS60,用MTT法比较了4种硫酸化黄芪多糖对鸡胚成纤维细胞(CEF)的生长及抵抗... 采取一步醇沉和分步醇沉法提取4种黄芪多糖APSt、APS40、APS50和APS60,用氯磺酸-吡啶法进行硫酸化修饰,得到4种硫酸化黄芪多糖(sAPS)sAPSt、sAPS40、sAPS50和sAPS60,用MTT法比较了4种硫酸化黄芪多糖对鸡胚成纤维细胞(CEF)的生长及抵抗鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)感染的影响,以未修饰的APSt为对照。结果显示,APSt显著促进CEF生长,细胞毒性较低,但抵抗鸡传染性法氏囊病毒感染细胞的作用较弱;sAPS抵抗鸡传染性法氏囊病毒感染的作用显著增强,显效浓度降低,但安全浓度也降低。表明通过硫酸化修饰可以提高黄芪多糖的抗病毒活性,但高浓度sAPS的细胞毒性增强。 展开更多
关键词 黄芪多糖 硫酸化修饰 鸡胚成纤维细胞 抗IBDV感染
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传染性法氏囊病快速诊断技术的建立及其应用 被引量：13
12
作者 龙进学 韦平 阳秀英 《广西大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2003年第2期103-108,共6页
根据已发表的IBDV各致病型毒株的序列,在病毒结构蛋白VP2编码基因的高变区(VP2variabledo-main,vVP2)两端外侧的保守序列内设计合成了2条寡核苷酸引物,对各种不同致病型的12株参考毒株进行逆转录酶—聚合酶链式反应(RT-PCR)的检测.结果1... 根据已发表的IBDV各致病型毒株的序列,在病毒结构蛋白VP2编码基因的高变区(VP2variabledo-main,vVP2)两端外侧的保守序列内设计合成了2条寡核苷酸引物,对各种不同致病型的12株参考毒株进行逆转录酶—聚合酶链式反应(RT-PCR)的检测.结果12个参考毒株均能扩增出约679bp的目的片段,而对作为阴性对照的常见5种鸡病病原NDV、IBV、CAIV、E.coli、pM均没有扩增出任何片段;应用建立的技术对疑似IBD的34份临床病料进行检测,并同时在基础RT-PCR扩增的片段内设计另一对引物进行Nested-PCR检测.结果基础RT-PCR方法检测到11份阳性,Nested-PCR检测到23份阳性.研究的结果表明建立的IBD的RT-PCR诊断技术具有特异、快捷、敏感的特点.在此基础上设计的Nested-PCR则大大提高了阳性检出率(提高52.1%). 展开更多
关键词 IBDV vVP2 RT—PCR Nested—PCR 快速诊断
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鸡β-防御素-1对鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因DNA疫苗的免疫佐剂作用 被引量：6
13
作者 张辉华 杨小梅 +4 位作者 谢青梅 马静云 罗艳娜 曹永长 毕英佐 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期402-408,共7页
本文旨在研究鸡β-防御素-1(AvBD1)对鸡IBDVVP2基因DNA疫苗的免疫佐剂作用。通过基因工程技术,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-AvBD1与pcDNA3.1(+)-VP2。14日龄岭南黄肉鸡随机分成5组,分别免疫PBS、空质粒载体pcDNA3.1(+)、重组质粒pcDNA3... 本文旨在研究鸡β-防御素-1(AvBD1)对鸡IBDVVP2基因DNA疫苗的免疫佐剂作用。通过基因工程技术,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-AvBD1与pcDNA3.1(+)-VP2。14日龄岭南黄肉鸡随机分成5组,分别免疫PBS、空质粒载体pcDNA3.1(+)、重组质粒pcDNA3.1(+)-VP2、重组质粒pcDNA3.1(+)-AvBD1与pcD-NA3.1(+)-VP2联合免疫、IBD弱毒苗。收集免疫后不同时期的外周血血清样本,用ELISA方法检测血清中IB-DV VP2特异性抗体水平,通过流式细胞仪检测CD3+、CD4+与CD8+T淋巴细胞的含量。结果表明,联合免疫组(即pcDNA3.1(+)-AvBD1与pcDNA3.1(+)-VP2共同免疫)VP2特异性抗体水平显著高于其他组;单独免疫质粒pcDNA3.1(+)-VP2组VP2特异性抗体水平与免疫IBD弱毒苗组相当,显著高于PBS组与空质粒载体pcD-NA3.1(+)组。在二免后第7天,联合免疫组外周血中CD3+、CD4+与CD8+T淋巴细胞的含量也显著高于单独免疫质粒pcDNA3.1(+)-VP2组,其它时间无显著性差异。IBDV攻毒后的保护率也是联合免疫组高于单独免疫pcDNA3.1(+)-VP2组。这些结果表明,鸡AvBD1可以作为一种免疫佐剂用于增强IBDVVP2基因DNA疫苗的免疫力。 展开更多
关键词 鸡β-防御素-1(AvBD1) 免疫佐剂 IBDV DNA疫苗
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中药提取物对IBDV感染SPF鸡的防治效果 被引量：5
14
作者 朱买勋 唐红梅 +2 位作者 闫志强 陈春林 翟少钦 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期25-31,共7页
为了确定中药提取物对IBDV感染的防治效果,将150羽SPF雏鸡随机分为对照组、模型组和中药提取物高、中、低剂量组,中药提取物高、中、低剂量组分别在饮水中添加10.0、5.0、2.5 g/L的中药提取物,连续添加7 d,对照组和模型组不添加任何药... 为了确定中药提取物对IBDV感染的防治效果,将150羽SPF雏鸡随机分为对照组、模型组和中药提取物高、中、低剂量组,中药提取物高、中、低剂量组分别在饮水中添加10.0、5.0、2.5 g/L的中药提取物,连续添加7 d,对照组和模型组不添加任何药物。给药后,除对照组外,其余组雏鸡分别通过滴鼻接种IBDV,攻毒后连续观察2周。统计雏鸡的成活率,荧光定量PCR检测IBDV在组织中的载量,分析病毒在脏器中的分布。结果显示:中药提取物能提高雏鸡成活率,高、中、低剂量组雏鸡成活率分别为86.67%、93.33%和70.00%,高剂量组雏鸡脾脏和法氏囊指数显著降低,中剂量组的胸腺和法氏囊指数显著降低。高、中剂量组脾脏、胸腺、法氏囊病毒载量极显著低于模型组,脾脏、胸腺病毒载量极显著低于低剂量组,法氏囊病毒载量显著低于低剂量组。表明中药提取物能提高雏鸡的成活率,促进IBDV核酸转阴,改善脾脏、胸腺、法氏囊等免疫器官状况,降低病毒在脾脏、法氏囊、胸腺的载量,且中剂量组效果优于其他剂量组。 展开更多
关键词 SPF雏鸡 IBDV 中药提取物 抗病能力 病毒载量
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高亲和力抗IBDV单克隆抗体的产生与免疫学鉴定 被引量：5
15
作者 杨艳艳 张改平 +2 位作者 郭军庆 陈凤民 袁麦顺 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第7期384-386,共3页
目的：生产高亲和力的抗IBDV不同抗原决定簇的单克隆抗体，为IBD的快速检测准备试剂。方法：用IBDV抗原诱导Balb/c小鼠产生最强最适当的反应，将免疫脾细胞与NSO瘤细胞融合，通过对大量的杂交细胞培养上清进行检测和鉴定，筛选出分泌高... 目的：生产高亲和力的抗IBDV不同抗原决定簇的单克隆抗体，为IBD的快速检测准备试剂。方法：用IBDV抗原诱导Balb/c小鼠产生最强最适当的反应，将免疫脾细胞与NSO瘤细胞融合，通过对大量的杂交细胞培养上清进行检测和鉴定，筛选出分泌高亲和力单克隆抗体的杂交瘤细胞。结果：获得分泌高亲和力单克隆抗体的杂交瘤21株，其中4株YNZ-1、YNZ－12、YNZ-8和YNZ-26的间接ELISA效价分别为：1：2560、1：1280、1：2560、1：640；腹水间接ELLSA效价分别为：1×10－6、5×10－5、1×10－6和1×10-5。结论：单抗YNZ－1和YNZ-18、YNZ－12和YNZ－26亲和力高，识别IBDV不同的抗原决定簇，可作为制备快速诊断IBD的特异单克隆抗体。 展开更多
关键词 IBDV 单克隆抗体 亲和力 抗原决定簇 制备
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雏鸡在感染IBDV后血浆cAMP、cGMP和IL-2水平变化 被引量：3
16
作者 陈龙 庞训胜 +2 位作者 毛鑫智 高勤学 殷定忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期157-163,共7页
在经ＩＢＤ弱毒苗免疫和未免疫的３０～５９日龄ＡＡ鸡研究了感染ＩＢＤＶ后血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ和ＩＬ２水平动态变化。结果表明：未免疫攻毒鸡（Ａ组）、免疫攻毒鸡（Ｂ组）和未免疫未攻毒鸡（Ｃ组）在ＩＢＤＶ攻毒前１天血浆ｃ... 在经ＩＢＤ弱毒苗免疫和未免疫的３０～５９日龄ＡＡ鸡研究了感染ＩＢＤＶ后血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ和ＩＬ２水平动态变化。结果表明：未免疫攻毒鸡（Ａ组）、免疫攻毒鸡（Ｂ组）和未免疫未攻毒鸡（Ｃ组）在ＩＢＤＶ攻毒前１天血浆ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ水平Ｂ组明显高于Ａ和Ｃ组，ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值同样是Ｂ组高于或明显高于Ａ和Ｃ组，ＩＬ２水平三组之间无明显差异。在攻毒后的头５天内，Ｂ和Ｃ组ｃＡＭＰ明显升高，而Ａ组没有类似的变化，第５天明显低于Ｂ和Ｃ组，以后Ｂ和Ｃ组仍高于或显著高于攻毒前和同期Ａ组水平。在攻毒后Ａ和Ｂ组ｃＧＭＰ均呈波动性上升趋势，第７天明显高于攻毒前水平并高于Ｃ组，以后Ａ、Ｂ、Ｃ三组均下降，但Ａ组比Ｂ和Ｃ组下降更快。在攻毒后２８天内，Ａ组ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值无明显变化，Ｂ组波动上升，Ｃ组处于高水平上，Ｂ和Ｃ组均高于或明显高于Ａ组。血浆ＩＬ２水平Ａ和Ｂ组在ＩＢＤＶ攻毒后的头７天内呈逐渐下降趋势，但Ａ组下降的更剧烈，Ｃ组无明显差异性变化，三组相比，Ｂ和Ｃ组均高于或明显高于Ａ组，以后Ａ和Ｂ组逐渐回升。 展开更多
关键词 雏鸡 IBDV 血浆 cAMP CGMP IL-2 鸡 法氏囊病
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鸡混合感染血清4型禽腺病毒和传染性法氏囊病病毒的诊治 被引量：6
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作者 亓丽红 宋玲玲 +5 位作者 于可响 王友令 马秀丽 鞠艳 刘涛 艾武 《中国家禽》 北大核心 2018年第15期60-62,共3页
2017年6月,山东某养殖场43日龄蛋鸡群出现发热、精神沉郁、拉黄绿色稀便、黄疸、冠髯苍白、衰弱等症状,剖检表现为:心包腔蓄积大量淡黄色水样液体,肝脏充血、肿大、质脆、色淡,心肌松弛,脾脏、肾脏充血肿大,腺胃乳头有弥散性出血点,肺... 2017年6月,山东某养殖场43日龄蛋鸡群出现发热、精神沉郁、拉黄绿色稀便、黄疸、冠髯苍白、衰弱等症状,剖检表现为:心包腔蓄积大量淡黄色水样液体,肝脏充血、肿大、质脆、色淡,心肌松弛,脾脏、肾脏充血肿大,腺胃乳头有弥散性出血点,肺脏水肿,法氏囊肿大,腿肌点状或条状出血,个别肌肉苍白。根据临床症状、剖检病变、琼脂扩散试验和PCR检测结果确诊为血清4型禽腺病毒和传染性法氏囊病病毒混合感染。 展开更多
关键词 FAdV-4 IBDV 混合感染 诊治
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家蚕表达传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的免疫原性初步研究(英文) 被引量：11
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作者 于涟 宋坤华 +2 位作者 张耀洲 黄耀伟 李建荣 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CSCD 北大核心 2000年第1期9-16,共8页
在家蚕培养细胞及幼蚕中表达传染性法氏囊病病毒 ( IBDV)主要宿主保护性抗原 VP2蛋白的基础上 ,初步研究了该表达产物的免疫原性 .Western免疫印迹和 ELISA均检测到春蚕和秋蚕中的 VP2蛋白活性 .含 VP2的春蚕蚕血制成的注射疫苗皮下注射... 在家蚕培养细胞及幼蚕中表达传染性法氏囊病病毒 ( IBDV)主要宿主保护性抗原 VP2蛋白的基础上 ,初步研究了该表达产物的免疫原性 .Western免疫印迹和 ELISA均检测到春蚕和秋蚕中的 VP2蛋白活性 .含 VP2的春蚕蚕血制成的注射疫苗皮下注射 18日龄非免疫鸡 ,两周后二免 ;含 VP2的秋蚕蚕血冻干制成口服疫苗 ,隔天喂服 18日龄非免疫鸡 .于首免后第 10 ,13,2 1,2 8,37日分别采血 ,第 37日攻毒 .病毒血清中和试验显示注射组及口服组的中和抗体滴度最高可达 1∶ 42 11.3和 1∶ 3118.9,攻毒结果显示它们对 IBDV中国标准强毒株 BC6/85的攻击保护率为 10 0 %和 80 %.以上研究表明家蚕表达的 VP2蛋白具有良好的免疫原性 ,从而为开发实用化低成本的疫苗打下了扎实基础 . 展开更多
关键词 家蚕 IBDV VP2基因 重组疫苗 免疫原性 表达系统
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抗鸡传染性法氏囊病病毒单链抗体库的构建及其中和抗体的筛选 被引量：4
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作者 周兵 李天鹤 +10 位作者 李宁 徐黎明 郭茉 马蕾 张瑛杰 叶贤龙 赵景壮 衣春霖 韩晓辉 丁良君 李德山 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期227-231,共5页
为构建抗鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）的细菌展示单链抗体（scFv）库并筛选出具有高亲和力和中和活性的scFv。本研究从IBDV免疫鸡的法氏囊提取总RNA，采用RT-PCR的方法分别扩增鸡抗体的VH和VL编码序列，插入含有（Gly4Ser）3 linker的p... 为构建抗鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）的细菌展示单链抗体（scFv）库并筛选出具有高亲和力和中和活性的scFv。本研究从IBDV免疫鸡的法氏囊提取总RNA，采用RT-PCR的方法分别扩增鸡抗体的VH和VL编码序列，插入含有（Gly4Ser）3 linker的pTlinker载体中，再将VH-linker-VL片段亚克隆到细菌展示载体pBSD中。以FITC标记的VP2 蛋白为诱饵，通过流式细胞术筛选出5株阳性scFv，其氨基酸同源性为82.16 %～87.27 %。将5株scFv基因分别插入原核表达载体pET-27b（＋）中，构建重组表达质粒pET-IBDV-scFv。将其转化大肠杆菌Rosetta进行诱导和表达，该5株scFv相对分子质量均约为28 ku。此外，利用纯化的scFv包被于ELISA检测板中作为扑捉抗体，检测结果显示scFv对VP2蛋白和不同IBDV株均具有特异性结合能力。而且通过体外中和试验结果表明，仅有一株scFv具有病毒中和活性，可以有效阻断IBDV（B87 株）对鸡胚成纤维细胞（DF1）的感染。该研究结果为进一步研制IBDV治疗性抗体奠定了基础。 展开更多
关键词 IBDV 细菌展示 单链抗体 中和活性
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传染性法氏囊病病毒在次代鸡胚成纤维细胞上的增殖 被引量：5
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作者 李有根 聂峰光 +2 位作者 戚艺华 顾铭 欧阳藩 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1998年第3期10-14,共5页
研究了用次代鸡胚成纤维细胞（SCEF）增殖传染性法氏囊病病毒（IBDV）的可能性。在研究了原代鸡胚成纤维细胞（PCEF）与SCEF的生长特性的基础上，就各种培养方式采用PCEF与SCEF增殖IBDV进行了比较。结果表明，可用SCEF代替PCEF进行IBDV... 研究了用次代鸡胚成纤维细胞（SCEF）增殖传染性法氏囊病病毒（IBDV）的可能性。在研究了原代鸡胚成纤维细胞（PCEF）与SCEF的生长特性的基础上，就各种培养方式采用PCEF与SCEF增殖IBDV进行了比较。结果表明，可用SCEF代替PCEF进行IBDV的增殖培养。 展开更多
关键词 IBDV SCEF 病毒增殖 细胞培养 PCEF
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