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利用CRISPR/Cas9技术敲除转基因水稻中的潮霉素标记基因
被引量：
1
1
作者
彭梅芳
甘凤
+3 位作者
潘春梅
宋健兰
范晓丽
陈克贵
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2020年第5期901-906,共6页
【目的】在植物转基因研究中,使用选择标记基因(Selectable Marker Gene,SMG)使得转化子的筛选更准确便利,但存在SMG的转基因植株可能对人类健康及生态环境造成潜在危害,这也限制了转基因植物商业化的应用前景。因此去除转基因植物中的...
【目的】在植物转基因研究中,使用选择标记基因(Selectable Marker Gene,SMG)使得转化子的筛选更准确便利,但存在SMG的转基因植株可能对人类健康及生态环境造成潜在危害,这也限制了转基因植物商业化的应用前景。因此去除转基因植物中的SMG十分必要。【方法】本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,针对水稻转基因中常用的SMG潮霉素抗性基因(hygromycin phosphotransferase II,hptII)设计构建了编辑载体,利用农杆菌(LBA4404)介导的遗传转化方法转化水稻日本晴,得到转化植株,再将转化植株与带有hptII基因的植株进行杂交。【结果】通过遗传转化及分子鉴定,本研究得到了18株可用于编辑hptII基因的转化植株,进一步对转化植株与带有hptII基因的植株杂交的F1代进行检测,经PCR检测及测序验证表明,在杂交F1代植株中,hptII基因的DNA确有编辑发生,包括碱基缺失、替换以及插入等,使得hptII基因不能成功转录。【结论】利用CRISPR/Cas9技术,成功获得了删除hptII基因的转基因水稻。这为植物转基因研究实现无选择标记基因(marker-free)奠定了基础。
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关键词
水稻
遗传转化
潮霉素抗性基因
无选择标记基因
CRISPR/Cas9
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职称材料
题名
利用CRISPR/Cas9技术敲除转基因水稻中的潮霉素标记基因
被引量：
1
1
作者
彭梅芳
甘凤
潘春梅
宋健兰
范晓丽
陈克贵
机构
四川省农业科学院生物技术核技术研究所
出处
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2020年第5期901-906,共6页
基金
四川省财政创新能力提升工程(2016QNJJ-001
2016ZYPZ-002)
成都市科技局农业技术研发项目(2015-NY02-00068-NC)。
文摘
【目的】在植物转基因研究中,使用选择标记基因(Selectable Marker Gene,SMG)使得转化子的筛选更准确便利,但存在SMG的转基因植株可能对人类健康及生态环境造成潜在危害,这也限制了转基因植物商业化的应用前景。因此去除转基因植物中的SMG十分必要。【方法】本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,针对水稻转基因中常用的SMG潮霉素抗性基因(hygromycin phosphotransferase II,hptII)设计构建了编辑载体,利用农杆菌(LBA4404)介导的遗传转化方法转化水稻日本晴,得到转化植株,再将转化植株与带有hptII基因的植株进行杂交。【结果】通过遗传转化及分子鉴定,本研究得到了18株可用于编辑hptII基因的转化植株,进一步对转化植株与带有hptII基因的植株杂交的F1代进行检测,经PCR检测及测序验证表明,在杂交F1代植株中,hptII基因的DNA确有编辑发生,包括碱基缺失、替换以及插入等,使得hptII基因不能成功转录。【结论】利用CRISPR/Cas9技术,成功获得了删除hptII基因的转基因水稻。这为植物转基因研究实现无选择标记基因(marker-free)奠定了基础。
关键词
水稻
遗传转化
潮霉素抗性基因
无选择标记基因
CRISPR/Cas9
Keywords
Rice
Genetic transformation
hygromycin
phosphotransferase
ⅱ
(
hpt
ⅱ
)
Marker-free
CRISPR/Cas9
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用CRISPR/Cas9技术敲除转基因水稻中的潮霉素标记基因
彭梅芳
甘凤
潘春梅
宋健兰
范晓丽
陈克贵
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2020
1
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