目的:利用慢病毒(LV)介导的RNA干扰下调老龄人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)中p16基因的表达,研究p16表达下调与h UC-MSCs衰老的关系。方法:实验分为第3代(P3)h UC-MSCs组(P3组)、P15 h UC-MSCs组(P15组)、LV-sip16感染P15 h UC-MSCs组(L...目的:利用慢病毒(LV)介导的RNA干扰下调老龄人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)中p16基因的表达,研究p16表达下调与h UC-MSCs衰老的关系。方法:实验分为第3代(P3)h UC-MSCs组(P3组)、P15 h UC-MSCs组(P15组)、LV-sip16感染P15 h UC-MSCs组(LV-sip16组)和LV-NC感染P15 h UC-MSCs组(空病毒组)。采用CCK-8法检测细胞增殖,β-半乳糖苷酶染色计算衰老细胞率,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,qRT-PCR检测衰老相关基因p16、p21、p53、p CNA、sirt1、sirt2、Cyclin D1、CDK4 mRNA的表达。结果:LV-sip16感染能促进P15 h UCMSCs增殖,降低衰老细胞率,促使细胞周期进入S期,抑制h UC-MSCs的早期凋亡(P均<0.05);同时,LV-sip16组细胞中p16、p21、p53 mRNA表达量较P15组降低,而p CNA、sirt1、sirt2、Cyclin D1、CDK4 mRNA表达量升高(P均<0.05)。结论:下调P15 h UC-MSCs中p16基因的表达能够延缓和改善h UC-MSCs的衰老。展开更多
文摘目的:利用慢病毒(LV)介导的RNA干扰下调老龄人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)中p16基因的表达,研究p16表达下调与h UC-MSCs衰老的关系。方法:实验分为第3代(P3)h UC-MSCs组(P3组)、P15 h UC-MSCs组(P15组)、LV-sip16感染P15 h UC-MSCs组(LV-sip16组)和LV-NC感染P15 h UC-MSCs组(空病毒组)。采用CCK-8法检测细胞增殖,β-半乳糖苷酶染色计算衰老细胞率,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,qRT-PCR检测衰老相关基因p16、p21、p53、p CNA、sirt1、sirt2、Cyclin D1、CDK4 mRNA的表达。结果:LV-sip16感染能促进P15 h UCMSCs增殖,降低衰老细胞率,促使细胞周期进入S期,抑制h UC-MSCs的早期凋亡(P均<0.05);同时,LV-sip16组细胞中p16、p21、p53 mRNA表达量较P15组降低,而p CNA、sirt1、sirt2、Cyclin D1、CDK4 mRNA表达量升高(P均<0.05)。结论:下调P15 h UC-MSCs中p16基因的表达能够延缓和改善h UC-MSCs的衰老。
