肉桂酸对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和分化的影响 被引量：26

1

作者 王国红 郭直岳 +1 位作者 石松林 李祺福 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1262-1266,共5页

目的研究中药有效成分肉桂酸对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和分化的影响。方法肉桂酸处理MG-63细胞前后,台盼蓝拒染法进行活细胞计数;流式细胞仪检测细胞周期时相变化;光镜和电镜观察细胞形态和超微结构;VanGieson染色检测细胞Ⅰ型胶原表达;... 目的研究中药有效成分肉桂酸对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和分化的影响。方法肉桂酸处理MG-63细胞前后,台盼蓝拒染法进行活细胞计数;流式细胞仪检测细胞周期时相变化;光镜和电镜观察细胞形态和超微结构;VanGieson染色检测细胞Ⅰ型胶原表达;茜素红染色观察钙化骨结节形成;免疫细胞化学检测骨粘素和骨钙蛋白表达。结果肉桂酸明显抑制MG-63细胞增殖,D7抑制率达54.94%±4.69%。周期分析结果显示,肉桂酸处理后G0/G1期细胞比例较对照组明显升高(P<0.01)。光镜和电镜结果显示,肉桂酸处理组MG-63细胞形态和超微结构发生明显改变,呈现相应正常细胞的形态和超微结构特征。肉桂酸促进成骨细胞分化标志物Ⅰ型胶原、骨粘素和骨钙蛋白的表达与钙沉积以及典型骨结节的形成。结论肉桂酸可抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖并诱导其向成骨细胞分化。 展开更多

关键词 肉桂酸 人骨肉瘤mg-63细胞 增殖 分化 骨肉瘤 成骨细胞

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人成骨肉瘤MG-63细胞分化特性及分化过程中的基因表达 被引量：8

2

作者 罗湘杭 廖二元 +1 位作者 周后德 伍贤平 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期107-110,共4页

观察人成骨肉瘤MG 6 3细胞分化特性及分化过程中的基因表达。在细胞培养的不同时间 ,用α 磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶 (ALP)活性 ;放射免疫法测定骨钙素 (BGP)含量 ;半定量逆转录聚合酶链反应测I型胶原、基质金属蛋白酶 (MMP) 1和基质... 观察人成骨肉瘤MG 6 3细胞分化特性及分化过程中的基因表达。在细胞培养的不同时间 ,用α 磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶 (ALP)活性 ;放射免疫法测定骨钙素 (BGP)含量 ;半定量逆转录聚合酶链反应测I型胶原、基质金属蛋白酶 (MMP) 1和基质金属蛋白酶抑制因子 (TIMP) 1基因mRNA表达 ;VanGieSon氏苦味酸酸性复红染色法染色细胞I型胶原。结果表明MG 6 3细胞接种培养第 7d后I型胶原基因表达较高。MMP 1表达量随时间推移逐渐增加 ,至第 2 4d达到高峰。第 1～ 9dTIMP 1表达量逐渐增加 ,其后基本恒定。ALP活性第 0～ 12d逐渐增高 ,至第 12d达最高 ,其后逐渐下降。第 18d后 ,细胞有许多大小不等的结节形成 ,I型胶原结节染色较无结节处深。MG 6 3细胞具有成骨细胞表型特征。MG 6 3细胞生长分为细胞增殖、骨基质成熟、骨基质矿化阶段 ,且I型胶原 ,MMP 1,TIMP 1基因表达及ALP活性呈时间特异性。 展开更多

关键词 mg-63细胞 细胞分化 骨肿瘤 基因表达 人成骨肉瘤

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人参皂甙Rg1对人成骨肉瘤MG-63细胞形态结构和终末分化指标的影响 被引量：4

3

作者 石松林 李祺福 +3 位作者 王国红 马宗源 史建陆 林昌健 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期392-398,共7页

为了研究人参皂甙Rg1对人成骨肉瘤MG-63细胞(以下简称"MG-63细胞")形态与超微结构及终末分化指标的影响,鉴定其对MG-63细胞的诱导分化作用,以50μg/mL人参皂甙Rg1处理MG-63细胞,光学显微镜与电子显微镜观察MG-63细胞形态、超... 为了研究人参皂甙Rg1对人成骨肉瘤MG-63细胞(以下简称"MG-63细胞")形态与超微结构及终末分化指标的影响,鉴定其对MG-63细胞的诱导分化作用,以50μg/mL人参皂甙Rg1处理MG-63细胞,光学显微镜与电子显微镜观察MG-63细胞形态、超微结构变化,免疫细胞化学方法检测成骨细胞相关终末分化蛋白的表达变化,并同步以HMBA处理MG-63细胞作为阳性对照.光学显微镜与电子显微镜观察结果显示细胞形态与超微结构产生了细胞形态规则、大小一致、细胞铺展体积增大,核质比例减小、核内核仁数目减少、细胞器丰富发达等与正常细胞相似的恢复性变化.观察到MG-63细胞终末分化指标I型胶原、骨粘素、骨钙蛋白的阳性表达及钙化糖原颗粒的增多与典型骨节结的形成,其变化结果与HMBA处理细胞类似.本研究证实人参皂甙Rg1能显著改变MG-63细胞形态与超微结构恶性特征,并增强成骨细胞相关的终末分化指标的表达,从而对MG-63细胞的终末分化具有一定的诱导作用. 展开更多

关键词 人参皂甙RG1 诱导分化 人成骨肉瘤mg-63细胞 细胞形态 细胞超微结构 细胞终末分化

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姜黄素诱导人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡过程中hnRNP A2/B1表达与定位

4

作者 赵振利 陈兰英 +5 位作者 李祺福 石松林 杨海波 荆光军 武福云 孔海燕 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期546-555,共10页

姜黄素(curcumin)诱导处理的人成骨肉瘤MG-63细胞,在光镜和电镜观察细胞凋亡的基础上,对hnRNP A2/B1在核基质中存在、分布及其与凋亡相关基因产物在MG-63细胞中的共定位关系进行了研究.经姜黄素处理后,细胞出现染色质凝聚、细胞核固缩... 姜黄素(curcumin)诱导处理的人成骨肉瘤MG-63细胞,在光镜和电镜观察细胞凋亡的基础上,对hnRNP A2/B1在核基质中存在、分布及其与凋亡相关基因产物在MG-63细胞中的共定位关系进行了研究.经姜黄素处理后,细胞出现染色质凝聚、细胞核固缩、凋亡小体等典型的细胞凋亡形态特征;双向凝胶电泳和质谱鉴定结果显示,hnRNP A2/B1存在于MG-63细胞核基质蛋白组分中,在姜黄素处理后细胞核基质蛋白中表达下调.蛋白质印迹杂交结果,证实hnRNP A2/B1在姜黄素处理前后的MG-63细胞核基质蛋白中的存在及其表达下调变化.免疫荧光显微镜观察显示,hnRNP A2/B1定位于MG-63细胞核基质纤维上,经姜黄素处理后出现分布位置与表达水平变化.激光扫描共聚焦显微镜的观察结果显示,hnRNP A2/B1在MG-63细胞凋亡过程中与Bax、Bcl-2、Fas和p53等基因产物具有共定位关系,且其共定位区域发生了变化.研究结果证实了hnRNP A2/B1定位于核基质纤维上,是一种核基质蛋白,在姜黄素诱导人成骨肉瘤MG-63凋亡过程中的表达与分布变化及其与凋亡相关基因的关系显然对MG-63细胞凋亡具有重要影响,这为深入揭示肿瘤细胞凋亡的机制提供了重要科学依据和深入探索的新方向. 展开更多

关键词 姜黄素 HNRNP A2/B1 核基质 人成骨肉瘤mg-63细胞 细胞凋亡

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直接原位RT-PCR检测人成骨肉瘤MG-63细胞株雌激素受体亚型表达 被引量：3

5

作者 杨开初 廖二元 +1 位作者 罗湘杭 周后德 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第4期440-444,共5页

目的观察人成骨肉瘤MG63细胞株雌激素受体亚型mRNA表达特征。方法用直接原位RTPCR及激光共聚焦显微镜观察MG63细胞株在培养第6及第9天ERα、ERβmRNA表达。结果各检测点均见一定量的荧光弥散于细胞内。阳性对照点荧光较其他两点强,阴性... 目的观察人成骨肉瘤MG63细胞株雌激素受体亚型mRNA表达特征。方法用直接原位RTPCR及激光共聚焦显微镜观察MG63细胞株在培养第6及第9天ERα、ERβmRNA表达。结果各检测点均见一定量的荧光弥散于细胞内。阳性对照点荧光较其他两点强,阴性对照点荧光明显减弱,仅见少量背景荧光。ERα的荧光强度强于ERβ。结论(1)MG63细胞株作为成骨细胞模型,存在ERα和ERβ基因的mRNA表达。(2)骨基质成熟早期阶段MG63细胞株的ERα表达比ERβ丰富,这表明两者在功能上存在差异。 展开更多

关键词 人 成骨肉瘤 mg-63细胞株 雌激素受体亚型 原位RT-PCR 激光共聚焦显微镜 检测

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人参皂苷Rh2对人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的影响 被引量：2

6

作者 王立民 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1715-1719,共5页

目的:探讨人参皂苷Rh2对人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的影响,并初步探讨可能的分子机制。方法:采用流式细胞术Annexin V-PI双染法和MTT法检测MG-63细胞的凋亡变化;免疫印迹法检测Bcl-2、Bax、Cyt C和激活型caspase-3的蛋白水平。结果:流式细... 目的:探讨人参皂苷Rh2对人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的影响,并初步探讨可能的分子机制。方法:采用流式细胞术Annexin V-PI双染法和MTT法检测MG-63细胞的凋亡变化;免疫印迹法检测Bcl-2、Bax、Cyt C和激活型caspase-3的蛋白水平。结果:流式细胞术和MTT法结果显示人参皂苷Rh2呈浓度依赖性促进MG-63细胞的凋亡。免疫印迹法结果表明,与空白对照组相比,给药组细胞Bax的蛋白表达显著增加,Bcl-2的蛋白表达显著减少,Bcl-2/Bax比值减少;线粒体中Cyt C蛋白表达显著减少,而胞浆中表达显著增加;激活型caspase-3蛋白水平显著增加(P<0.05)。结论:人参皂苷Rh2呈浓度依赖性促进MG-63细胞的凋亡,其凋亡过程可能与调控线粒体凋亡通路相关蛋白有关。 展开更多

关键词 人参皂苷RH2 人骨肉瘤细胞mg-63 细胞凋亡

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LJH-OS人骨肉瘤裸鼠原位移植模型的建立及其生物学特性 被引量：10

7

作者 师长宏 施新猷 朱德生 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1999年第2期102-106,共5页

用人成骨肉瘤细胞系LJH- OS的传代移植瘤组织作为移植材料,进行胫骨原位移植及皮下移植。结果发现胫骨原位移植的潜伏期较短,生长快。皮下移植瘤呈局限性膨胀性生长,有不完整的纤维包膜,未见肺转移,观察7 周无明显消瘦;而胫骨原位移植... 用人成骨肉瘤细胞系LJH- OS的传代移植瘤组织作为移植材料,进行胫骨原位移植及皮下移植。结果发现胫骨原位移植的潜伏期较短,生长快。皮下移植瘤呈局限性膨胀性生长,有不完整的纤维包膜,未见肺转移,观察7 周无明显消瘦;而胫骨原位移植瘤浸润基层,无纤维包膜,且发生肺转移,7 周时有明显消瘦。原位移植的裸鼠血清ALP水平高于皮下移植者。说明裸鼠胫骨微环境较皮下组织更适于人骨肉瘤的浸润及转移表达,裸鼠胫骨原位移植模型的恶性生物学行为更接近临床骨肉瘤患者的实际情况,该原位移植模型的建立为骨肉瘤的研究提供了良好的实验模型。 展开更多

关键词 胫骨 原位移植模型 裸鼠 人骨肉瘤 肺转移 皮下移植 纤维包膜 生长 生物学特性 传代

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Ad-ING4-IL-24对骨肉瘤生长抑制效应的实验研究 被引量：2

8

作者 李正祎 缪竞诚 +4 位作者 盛伟华 韩亚丽 庄文卓 井莹莹 杨吉成 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期349-353,共5页

目的:研究肿瘤生长抑制因子4(ING4)和人白细胞介素24(hIL-24)双基因共表达腺病毒载体对MG-63人骨肉瘤细胞及其裸鼠移植瘤的抑癌增效作用。方法:将Ad-ING4-IL-24腺病毒感染MG-63细胞,用RT-PCR法检测ING4和(或)IL-24基因在肿瘤细胞中的表... 目的:研究肿瘤生长抑制因子4(ING4)和人白细胞介素24(hIL-24)双基因共表达腺病毒载体对MG-63人骨肉瘤细胞及其裸鼠移植瘤的抑癌增效作用。方法:将Ad-ING4-IL-24腺病毒感染MG-63细胞,用RT-PCR法检测ING4和(或)IL-24基因在肿瘤细胞中的表达。MTT法和流式细胞仪(FCM)检测ING4和(或)IL-24基因的表达对MG-63的生长抑制和促凋亡的影响。用骨肉瘤细胞的裸鼠移植瘤动物模型,检测Ad-ING-IL-24对移植瘤生长的抑制作用,并通过免疫组化法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3等基因的表达。结果:ING4和IL-24基因在MG-63细胞中成功表达,并对MG-63增殖有明显抑制作用,并能引起细胞凋亡,其凋亡机制可能与Bax/Bcl-2比值升高有关。动物实验表明Ad-ING4-IL-24能显著抑制移植瘤生长,瘤重抑瘤率达75.7%。免疫组化结果显示Ad-ING4-IL-24能明显上调Bax、P21和Caspase-3等基因的表达,同时下调Bcl-2和CD34的表达。结论:Ad-ING4-IL-24在肿瘤基因治疗中是非常理想的抑癌增效载体。 展开更多

关键词 骨肉瘤 ING4基因 IL-24基因 腺病毒载体 mg-63人骨肉瘤细胞 肿瘤抑制

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重组人γ干扰素对人骨肉瘤细胞糖皮质激素受体的下调作用及其生物学意义 被引量：1

9

作者 宋亮年 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期115-120,共6页

以人骨肉瘤细胞系（ＨＯＳ－８６０３）为模型，研究重组人γ干扰素（ｒｈＩＦＮ－γ）对糖皮质激素受体（ＧＲ）的调节作用及其生物学意义。方法：ＧＲ结合活性的测定采用放射配体结合分析法；ＧＲｍＲＮＡ的测定用分子杂交法。结果：... 以人骨肉瘤细胞系（ＨＯＳ－８６０３）为模型，研究重组人γ干扰素（ｒｈＩＦＮ－γ）对糖皮质激素受体（ＧＲ）的调节作用及其生物学意义。方法：ＧＲ结合活性的测定采用放射配体结合分析法；ＧＲｍＲＮＡ的测定用分子杂交法。结果：极低浓度的ｒｈＩＦＮ－γ对ＧＲ具有下调作用，但对受体亲和力无明显影响；量效关系研究表明，当ｒｈＩＦＮ－γ浓度为１０ＩＵ／ｍｌ时，ＧＲ浓度已降至最低水平；时效关系研究表明，ｒｈＩＦＮ－γ作用３６ｈ后对ＧＲ的下调作用达到最大效应。用分子杂交方法研究表明，ｒｈＩＦＮγ下调ＧＲ的同时，伴有ＧＲｍＲＮＡ水平的相应降低；ｒｈＩＦＮ－γ本身虽然对ＨＯＳ－８６０３细胞的增殖分化过程无明显影响，但却可明显削弱糖皮质激素对该细胞系的增殖抑制作用和对碱性磷酸酶活性的诱导作用。结论：ｒｈＩＦＮ－γ对ＨＯＳ－８６０３细胞ＧＲ有非常明显的下调作用，且主要由ＧＲｍＲＮＡ表达减弱引起；ｒｈＩＦＮ－γ对ＧＲ的调节作用伴有受体功能活性的相应降低，表现为细胞对糖皮质激素的反应性明显减弱。 展开更多

关键词 糖皮质激素 受体 骨肉瘤细胞 rhIFN-r

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17β-雌二醇和孕酮对人成骨细胞胰岛素受体底物家族的作用

10

作者 黄秋霞 周后德 +1 位作者 廖二元 杜巍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第2期140-145,共6页

目的观察17β-雌二醇和孕酮对人成骨细胞和人成骨肉瘤MG-63细胞胰岛素受体底物家族 (insulin receptor substrate IRS)表达的影响。探讨雌、孕激素对骨的作用机制。方法从正常骨折病人骨组织中分离正常人成骨细胞,经纯化和培养后,用Van ... 目的观察17β-雌二醇和孕酮对人成骨细胞和人成骨肉瘤MG-63细胞胰岛素受体底物家族 (insulin receptor substrate IRS)表达的影响。探讨雌、孕激素对骨的作用机制。方法从正常骨折病人骨组织中分离正常人成骨细胞,经纯化和培养后,用Van Gieson行Ⅰ型胶原染色、钙钴法行碱性磷酸酶染色、茜素红行钙化结节染色进行成骨细胞鉴定。用半定量RT-PCR检测细胞IRS-1、- 2、-3 mRNA表达量。结果分离和培养的细胞具有正常人成骨细胞的形态,能分泌Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶并形成钙化结节。17β-雌二醇和／或孕酮均不影响人成骨细胞和MG-63细胞IRS-1mRNA 的表达(P>0．05),可诱导人成骨细胞和MG-63细胞IRS-2 mRNA的表达上调(P<0．05),IRS- 3 mRNA的表达下调(P<0．05)。二者联合干预时作用明显加强(P<0．01)。结论 17β-雌二醇和孕酮均不影响IRS-1 mRNA的表达,但可使人成骨细胞和MC-63细胞IRS-2 mRNA的表达上调, IRS-3mRNA的表达下调,二者联合干预具有正性协同效应。不同的IRS家族成员对同一细胞具有效应的多样性。 展开更多

关键词 17Β-雌二醇 胰岛素受体底物 人成骨细胞 孕酮 mg-63细胞 receptor IRS-1 碱性磷酸酶染色 mRNA表达量 IRS-2 钙化结节 表达上调 表达下调 人成骨肉瘤 PCR检测 培养的细胞 作用机制 骨折病人 胶原染色 细胞鉴定 Ⅰ型胶原

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快中子及光子照射人成骨肉瘤OS-732细胞系的实验研究

11

作者 冯林春 马林 +6 位作者 黄靖香 杨东 王迎选 孙明学 唐锦华 常葳克 刘成祥 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第15期841-843,共3页

目的:观察快中子及光子对人成骨肉瘤细胞系OS-732的杀伤作用。方法:用快中子、光子及混合射线照射OS-732细胞系,检测各组细胞受照射后的活细胞率、死细胞率及集落形成率。结果:单次照射后24、48及72h单纯快中子及高比例快中子混合线组... 目的:观察快中子及光子对人成骨肉瘤细胞系OS-732的杀伤作用。方法:用快中子、光子及混合射线照射OS-732细胞系,检测各组细胞受照射后的活细胞率、死细胞率及集落形成率。结果:单次照射后24、48及72h单纯快中子及高比例快中子混合线组对该细胞系的杀伤力强。结论:快中子及高比例快中子混合线对OS-732细胞系有较强的杀伤作用,对临床上应用快中子治疗骨肉瘤有一定指导意义。 展开更多

关键词 人成骨肉瘤 OS-732细胞系 快中子 光子 放射治疗

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Notch-1下调对双氢青蒿素抗人骨肉瘤细胞株U-2OS存活率的影响 被引量：3

12

作者 齐磊 段永刚 +4 位作者 丁英奇 张龙 刘玉章 唐晓龙 伍骥 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2120-2125,共6页

目的:探讨Notch-1下调对双氢青蒿素抗人骨肉瘤细胞株U-2OS细胞存活率的影响及其作用机制。方法:双氢青蒿素(5、10、15和20μmol/L)孵育U-2OS细胞后,采用免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链反应检测骨肉瘤细胞中Notch-1、基质金属蛋白酶(MMP... 目的:探讨Notch-1下调对双氢青蒿素抗人骨肉瘤细胞株U-2OS细胞存活率的影响及其作用机制。方法:双氢青蒿素(5、10、15和20μmol/L)孵育U-2OS细胞后,采用免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链反应检测骨肉瘤细胞中Notch-1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和Notch-1通路下游基因Hes-1的蛋白和mRNA的表达水平。下调Notch-1表达后,采用MTT法、免疫印迹法和细胞迁移实验检测在双氢青蒿素作用下U-2OS细胞的存活率,MMP-2、MMP-9和Hes-1的蛋白表达以及U-2OS细胞的迁移能力。结果:免疫印迹法与逆转录聚合酶链反应结果显示双氢青蒿素呈剂量依赖性降低U-2OS细胞中Notch-1、MMP-2、MMP-9和Hes-1的蛋白和mRNA的表达水平(P<0.05);下调Notch-1表达后,增强了双氢青蒿素抑制U-2OS细胞生长的作用,MMP-2、MMP-9和Hes-1的蛋白表达及细胞迁移能力进一步降低,显著低于加药组(P<0.05)。结论:双氢青蒿素可抑制U-2OS细胞中Notch-1通路的活性;下调Notch-1的表达可增强双氢青蒿素抗骨肉瘤的作用。 展开更多

关键词 NOTCH-1 双氢青蒿素 人骨肉瘤细胞株U-2OS 细胞存活率

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