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人类滤泡树突状细胞的分离 被引量：2
1
作者 姜拥军 范霞 +1 位作者 康辉 Tylor Thacker 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期152-154,共3页
目的 :为探讨人类滤泡树突细胞 (FDC)在HIV致病机制中的作用 ,摸索分离出提取人FDC的最佳方法。方法 :用胶原酶Ⅳ和DNA酶消化人扁桃体 ,Percoll连续梯度分层液分离含有FDC的细胞层 ,经MACS分选 ,得到富含FDC的细胞 ,用γ 射线将混有的B... 目的 :为探讨人类滤泡树突细胞 (FDC)在HIV致病机制中的作用 ,摸索分离出提取人FDC的最佳方法。方法 :用胶原酶Ⅳ和DNA酶消化人扁桃体 ,Percoll连续梯度分层液分离含有FDC的细胞层 ,经MACS分选 ,得到富含FDC的细胞 ,用γ 射线将混有的B细胞、T细胞照射致死。结果 :流氏细胞仪分析FDC纯度约为 70 7% ,3H掺入法实验证明分离提取的细胞具有FDC细胞的活性 ,IL 6和IL 2的测定结果显示分离提取的细胞具有FDC的特征。结论 :此方法为一种行之有效的FDC分离提取方法 。 展开更多
关键词 人类滤泡树突状细胞 分离方法 FDC 艾滋病 发病机制
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人类滤泡树突状细胞增强HIV的感染 被引量：4
2
作者 姜拥军 尚红 王亚男 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第8期438-441,共4页
目的 :研究人类滤泡树突状细胞 (folliculardendriticcell,FDC)能否增强艾滋病病毒的感染 ,并探讨其可能机制。方法 :提取人扁桃体滤泡树突状细胞 ,与感染HIV 1IIIB的外周血淋巴细胞或扁桃体T淋巴细胞共培养 ,测定HIVP2 4含量 ,HIV 1env... 目的 :研究人类滤泡树突状细胞 (folliculardendriticcell,FDC)能否增强艾滋病病毒的感染 ,并探讨其可能机制。方法 :提取人扁桃体滤泡树突状细胞 ,与感染HIV 1IIIB的外周血淋巴细胞或扁桃体T淋巴细胞共培养 ,测定HIVP2 4含量 ,HIV 1envDNA及HIV 1nefRNA。结果 :FDC与感染HIV病毒的异体淋巴细胞共培养 ,P2 4抗原含量高于对照组 6～ 7倍 (P <0 0 1)。PCR结果显示FDC组HIV 1env基因扩增条带密度高于对照组。FDC与感染HIV病毒的自体T淋巴细胞共培养 ,P2 4抗原高于对照组 10倍以上 (P <0 0 1)。FDC与感染HIV病毒的异体淋巴细胞共培养 4或 6h ,可增加 2～ 3倍的HIV 1nefRNA的表达 (P <0 0 1)。结论 :人类滤泡树突状细胞能够增强HIV在淋巴细胞中的感染 ,其相关机制为FDC可促进HIV在淋巴细胞内的复制。 展开更多
关键词 人类滤泡树突状细胞 HIV 感染
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滤泡树突状细胞增强HIV感染机制的体外研究 被引量：2
3
作者 潘莹 陈欢 +1 位作者 崔华露 姜拥军 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期377-378,388,共3页
目的:探讨滤泡树突状细胞(FDC)增强HIV感染的机制。方法:应用细胞培养、transwell隔膜、ELISA等方法探讨FDC对淋巴细胞趋化及对HIV结合、进入淋巴细胞的作用。结果:FDC趋化的淋巴细胞(1.95±0.21)×105个高于PRMI1640培养液对照... 目的:探讨滤泡树突状细胞(FDC)增强HIV感染的机制。方法:应用细胞培养、transwell隔膜、ELISA等方法探讨FDC对淋巴细胞趋化及对HIV结合、进入淋巴细胞的作用。结果:FDC趋化的淋巴细胞(1.95±0.21)×105个高于PRMI1640培养液对照组(0.75±0.2)×105个,P<0.05;FDC对HIV与淋巴细胞的结合无影响,P>0.05;FDC或FDC培养上清使HIV进入淋巴细胞(203.3±31.0pg/ml,111.7±29.4.0pg/ml)的量高于对照组(64.0±1.0pg/ml),P<0.05。结论:FDC可能通过趋化淋巴细胞、促进HIV进入淋巴细胞达到增进HIV在淋巴细胞内的感染。 展开更多
关键词 滤泡树突状细胞 人类免疫缺陷病毒 淋巴细胞
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人卵泡液游离DNA提取及定量检测方法的比较
4
作者 池梅 刘宇 +5 位作者 申秋子 邹敏 李自立 张衷源 杜欣 张玲 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期375-380,共6页
目的:比较不同的DNA提取方法、实时荧光定量PCR(qPCR)的引物及荧光染料对人卵泡液游离核DNA(cf-nDNA)和游离线粒体DNA(cf-mtDNA)定量检测的影响。方法:收集2018年3月~10月在华中科技大学同济医学院生殖医学中心进行体外受精/卵胞浆内单... 目的:比较不同的DNA提取方法、实时荧光定量PCR(qPCR)的引物及荧光染料对人卵泡液游离核DNA(cf-nDNA)和游离线粒体DNA(cf-mtDNA)定量检测的影响。方法:收集2018年3月~10月在华中科技大学同济医学院生殖医学中心进行体外受精/卵胞浆内单精子显微注射技术(IVF/ICSI)的40例患者卵泡液样本,分别用4种不同的方法(方法一:BeaverBeads^(TM) Circulating DNA试剂盒、方法二:蛋白酶K(PK)法、方法三:Hieff^(■) qPCR SYBR^(■) Green Master Mix和方法四:KOD SYBR^(■) qPCR Mix)提取和纯化卵泡液中的游离DNA(cf-DNA)样本;用4种cf-nDNA引物(ALU115、B2MF1、GAPDH和β-globin)和4种cf-mtDNA引物(ND1-primer1、ND1-primer2、hmito3和hmito5)分别定量检测卵泡液cf-nDNA和cf-mtDNA水平;比较qPCR实验中SYBR Green化学染料和TaqMan探针两种方法在定量检测上的差异。结果:提取cf-nDNA的浓度按以下顺序排列:方法一>方法四>方法二>方法三(P<0.05),提取cf-mtDNA的浓度按以下顺序排列:方法一>方法四>方法三>方法二(P<0.05);样本中cf-nDNA的扩增浓度按照以下顺序排列:ALU115>GAPDH>β-globin>B2MF1(P<0.05),4种cf-nDNA引物无相关性(P>0.05)。cf-mtDNA的扩增浓度按以下顺序排列:ND1-primer1>ND1-primer2>hmito5>hmito3(P<0.05)。ND1-primer1和ND1-primer2有很强的相关性(r=0.517,P<0.05),hmito3和hmito5也有很强的相关性(r=0.989,P<0.05);在以β-globin和ND1-primer1为引物的qPCR实验中,TaqMan探针法检测的Ct值高于SYBR Green化学染料法(P<0.05)。结论:人卵泡液样本的提取方法、引物和荧光染料的选择均影响cf-nDNA和cf-mtDNA的定量,建议根据不同的研究目的选择合适的方法。 展开更多
关键词 游离核DNA 游离线粒体DNA 人卵泡液 检测方法
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