猕猴静脉推注加滴注重组人碱性成纤维细胞生长因子后的药代动力学 被引量：6

1

作者 刘秀文 汤仲明 +3 位作者 宋海峰 朱宝珍 王丽萍 张洋 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期220-222,共3页

目的　研究猕猴静脉推注加滴注 (2 0 %∶80 % )10、2 0和 4 0 μg·kg- 1重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)后血清抗原浓度 时间变化和药代动力学并与静脉推注比较。方法　ELISA法 ,测定浓度的专一性、灵敏度、重现性和测定范... 目的　研究猕猴静脉推注加滴注 (2 0 %∶80 % )10、2 0和 4 0 μg·kg- 1重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)后血清抗原浓度 时间变化和药代动力学并与静脉推注比较。方法　ELISA法 ,测定浓度的专一性、灵敏度、重现性和测定范围 ,血清回收率和精密度均良好。结果　猕猴血清内源性水平(14 4± 10 1)ng·L- 1;静脉推注后即刻浓度最高 ,分别为 (33± 16 ) ,(5 6± 8)和 (91± 2 8) μg·L- 1,滴注期间稳定在 2 2～ 2 7,37～ 4 4和 6 3～ 6 5 μg·L- 1,提示控制药量和滴注速率可使浓度维持在不同水平。停药后浓度迅速下降 ,平均末端相半衰期 (t1/ 2 )为 2 .6～2 .9h。AUC( 0～∞ ) 随剂量成正比增大 ,全身清除率Cls不变。结论　在给药量范围内表现为线性药代动力学。静脉推注药代动力学与推注加滴注组相近。 展开更多

关键词 猕猴 静脉推注 静脉滴注 重组人碱性成纤维细胞生长因子 药代动力学 酶联免疫吸附测定

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ET-1、rhEGF、bFGF对培养的兔角膜内皮细胞的影响 被引量：6

2

作者 胡维琨 张虹 +2 位作者 李贵刚 王毓琴 李鹏程 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期501-503,511,518,共5页

目的　研究内皮素 1(ET 1)、重组人表皮生长因子 (rhEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对培养的兔角膜内皮细胞增殖能力的影响及其相互作用。方法　在体外培养的兔角膜内皮细胞中单独使用或联合应用ET 1、rhEGF、bFGF ,采用MTT方法... 目的　研究内皮素 1(ET 1)、重组人表皮生长因子 (rhEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对培养的兔角膜内皮细胞增殖能力的影响及其相互作用。方法　在体外培养的兔角膜内皮细胞中单独使用或联合应用ET 1、rhEGF、bFGF ,采用MTT方法观察对细胞增殖的影响 ,免疫组化染色法和计算机图像分析系统检测对细胞增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的影响。结果　一定浓度ET 1促进培养的兔角膜内皮细胞的增殖 ,且呈剂量相关性。 10 pmol/L时起作用 ,2 0 0 pmol/L时发挥最大作用。 10ng/mlrhEGF、 2ng/mlbFGF也促进培养的兔角膜内皮细胞的增殖。联合应用ET 1+rhEGF、ET 1+bFGF、ET 1+rhEGF +bFGF ,细胞吸光度 (A)值明显高于单独使用相应药物时A值之和。ET 1、rhEGF、bFGF单独使用可促进培养的兔角膜内皮细胞PCNA表达 ,联合应用时PCNA表达平均吸光度A值明显强于单独使用相应药物时表达强度之和。结论　ET 1可作为一种生长因子 ,它和rhEGF、bFGF单独使用可促进培养的兔角膜内皮细胞增殖能力 ,联合应用时具有协同作用。 展开更多

关键词 ET-1 RHEGF BFGF 兔 角膜 内皮细胞 RHEGF 内皮素-1 细胞增殖 增殖细胞核抗原

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重组人碱性成纤维细胞生长因子对缩小兔急性心肌梗死面积作用的观察 被引量：5

3

作者 李易 马雁冰 +3 位作者 孙林 冮宏映 光雪峰 蒲里津 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期232-234,共3页

目的 :探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)对缩小兔急性心肌梗死面积的作用。方法 :将 3 6只日本大耳白兔分为 2组 :①生理盐水对照组 (n =11) ,②rhbFGF组 (n =2 5 )。在无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支 ,建立急性心肌... 目的 :探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)对缩小兔急性心肌梗死面积的作用。方法 :将 3 6只日本大耳白兔分为 2组 :①生理盐水对照组 (n =11) ,②rhbFGF组 (n =2 5 )。在无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支 ,建立急性心肌梗死动物模型 ;制备rhbFGF蛋白 ,将其直接 4点注入兔缺血心肌内 ,通过心肌酶学及心电图QRS积分观察rhbFGF对兔急性心肌梗死面积的影响。结果 :①血清心肌酶学观察 :2组左前降支结扎后 2 4h与基础值比较血清谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶同工酶、肌酸激酶、肌酸激酶MB同工酶、α 羟丁酸脱氢酶均明显增高 ,有非常显著性差异 (P <0 0 1) ,2组左前降支结扎后48h与基础值比较 ,除生理盐水组的谷草转氨酶和rhbFGF组的谷草转氨酶及乳酸脱氢酶同工酶外 ,其它均明显增高 ,有非常显著性差异 (P <0 0 1)。左前降支结扎后 48h ,rhbFGF组较生理盐水对照组乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶同工酶、肌酸激酶及肌酸激酶MB同工酶明显降低 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。生理盐水对照组乳酸脱氢酶同工酶 ,左前降支结扎后48h与左前降支结扎后 2 4h比较升高 ,而在rhbFGF组降低 ,均有显著性差异 (P <0 0 5 )。②心电图QRS积分 :左前降支结扎后 6周rhbFGF组QRS积分 (4 3 0± 0 95 ) 展开更多

关键词 重组人碱性成纤维细胞生长因子 急性心肌梗死 心肌酶学 心电图

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重组人碱性成纤维细胞生长因子突变体[Ser^(69,87)]的表达、纯化及其稳定性研究 被引量：2

4

作者 吴晓萍 冯辉 +3 位作者 李校堃 苏志坚 郑青 黄亚东 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期168-172,共5页

目的:对野生型人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)进行突变改造以提高其稳定性。方法:采用PCR突变方法,将hbFGFcDNA第6 9位和87位的Cys密码子突变为Ser密码子,所得的突变片断插入表达载体pET3c的表达框架中,构建了表达菌株BL2 1(DE3) /pET... 目的:对野生型人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)进行突变改造以提高其稳定性。方法:采用PCR突变方法,将hbFGFcDNA第6 9位和87位的Cys密码子突变为Ser密码子,所得的突变片断插入表达载体pET3c的表达框架中,构建了表达菌株BL2 1(DE3) /pET3c [Ser69,87]hbFGF ,IPTG诱导表达。通过离子交换、肝素亲和两步层析的方法分离纯化突变体蛋白[Ser69,87]hbFGF。MTT法测定重组蛋白的促分裂活性。并对突变体蛋白的抗蛋白酶水解能力、热稳定性及其酸碱稳定性进行了检测。结果:所构建的表达菌株,其[Ser69,87]hbFGF的表达量占菌体总蛋白的30 %以上。经两步层析纯化,获得了纯度达98%的突变体[Ser69,87]hbFGF。纯化的样品促Balb/c 3T3细胞增殖的活性与野生型hbFGF相当。突变体[Ser69,87]hbFGF抗胰蛋白酶水解的能力较野生型hbFGF强;热稳定性和酸碱稳定性也较野生型hbFGF高。结论:突变体[Ser69,87]hbFGF的生物学活性与野生型hbFGF相当,其稳定性明显高于野生型hbFGF。 展开更多

关键词 人碱性成纤维细胞生长因子 突变体 稳定性

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重组人碱性成纤维细胞生长因子促进急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管再生 被引量：2

5

作者 王晓杰 李晶 +6 位作者 田海山 马吉胜 周鑫 刘孝菊 王艳芳 姚娜 李校堃 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期979-982,F0002,共5页

目的:研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)对急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管再生的作用,探讨通过心肌缺血区小血管再生治疗冠心病的新途径。方法:制备急性心肌梗死大鼠模型,60只大鼠随机分为心肌梗死模型组、rhbFGF高剂量组(50mg&#... 目的:研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)对急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管再生的作用,探讨通过心肌缺血区小血管再生治疗冠心病的新途径。方法:制备急性心肌梗死大鼠模型,60只大鼠随机分为心肌梗死模型组、rhbFGF高剂量组(50mg·L-1)、rhbFGF低剂量组(25mg·L-1)和假手术组;造模前心肌内多点注射rhbFGF。24h、2周和4周后利用形态学和组织学方法测定各组心肌梗死面积,并进行缺血心肌微血管密度和病理组织学检查。结果:大鼠急性心肌梗死24h、2和4周后,rhbFGF高、低剂量组心肌梗死面积缩小,与模型组比较差异有显著性(P<0.05);2和4周后,rhbFGF高、低剂量组血管生成增加,与模型组及假手术组比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05);24h、2和4周后,病理切片HE染色,模型组显示梗死区心肌细胞水肿,心肌纤维断裂,部分心肌细胞溶解,炎细胞浸润;rhbFGF高、低剂量组梗死区亦出现心肌细胞水肿,少见心肌纤维断裂、心肌细胞溶解。结论:rhbFGF有促进缺血心肌血管再生,缩小急性心肌梗死大鼠心肌梗死面积的作用。 展开更多

关键词 心肌梗死 重组人碱性成纤维细胞生长因子 血管再生

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bFGF对人毛囊黑素细胞增殖、活化和黑素合成作用的研究 被引量：6

6

作者 周春丽 叶庆佾 +1 位作者 郝飞 刁庆春 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1245-1247,共3页

目的　研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对人毛囊黑素细胞 (Hairfolloclemelanocyte ,HFM )增殖活化和黑素合成的影响。方法　体外培养正常人HFM ,观察不同浓度bFGF(0 3～ 1 2ng ml)对HFM形态、增殖、酪氨酸酶活性和黑素含量的影响... 目的　研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对人毛囊黑素细胞 (Hairfolloclemelanocyte ,HFM )增殖活化和黑素合成的影响。方法　体外培养正常人HFM ,观察不同浓度bFGF(0 3～ 1 2ng ml)对HFM形态、增殖、酪氨酸酶活性和黑素含量的影响。结果　bFGF处理HFM 7d后 ,HFM树突增多延长 ,酪氨酸酶活性和黑素含量增加显著高于对照组 (P <0 0 1) ,以 0 6ng ml组为著。结论　bFGF能诱导HFM增殖。 展开更多

关键词 细胞增殖 人毛囊黑素细胞 黑素合成 细胞活化 碱性成纤维细胞生长因子 白癜风

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人bFGF基因克隆表达及表达产物的纯化和生物学活性分析 被引量：2

7

作者 王莉馨 李永勇 +3 位作者 张娅捷 范洪学 张金三 林剑 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 1999年第1期11-13,共3页

目的：通过融合蛋白表达方式将编码人碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）ｃＤＮＡ在大肠杆菌ＤＨ５α中的表达，为ｂＦＧＦ进一步研究提供材料来源。方法：用多聚酶链反应（ＰＣＲ）及ＤＮＡ重组技术将ＰＣＲ产物克隆到ｐＧＥＭ－５Ｚ... 目的：通过融合蛋白表达方式将编码人碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）ｃＤＮＡ在大肠杆菌ＤＨ５α中的表达，为ｂＦＧＦ进一步研究提供材料来源。方法：用多聚酶链反应（ＰＣＲ）及ＤＮＡ重组技术将ＰＣＲ产物克隆到ｐＧＥＭ－５Ｚ载体并测序，然后克隆到表达载体ｐＸＨ上。结果：转化重组质粒ｐＬＸ１的大肠杆菌经４２℃温控诱导４５ｈ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析显示融合蛋白的分子量约３５０００，薄层扫描分析表明该蛋白占菌体总蛋白量的９９％。经ＦａｃｔｏｒＸａ酶切后得到分子量约为１７０００的ｂＦＧＦ，其生物学活性ＥＤ５０为２２９ｎｇ／ｍｌ。结论：经ＰＣＲ方法扩增的ｂＦＧＦ可在大肠杆菌中高效表达。 展开更多

关键词 BFGF 基因克隆 纯化 高效表达

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hEGF和hbFGF的C端(78-154aa)融合蛋白的表达、纯化及活性测定 被引量：3

8

作者 余榕捷 张玲 +4 位作者 林剑 谢秋玲 孙奋勇 蒲含林 李志英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期367-370,共4页

目的 :将人表皮生长因子 (hEGF)与人碱性成纤维细胞生长因子 (hbFGF)的C端连接 ,构建出既可与肝素结合 ,又具有促进细胞生长活性的融合蛋白 ,并在大肠杆菌中高效表达。方法 :将PCR扩增hEGF全基因与PCR扩增hbFGF 5 端的 2 31bp的片段连... 目的 :将人表皮生长因子 (hEGF)与人碱性成纤维细胞生长因子 (hbFGF)的C端连接 ,构建出既可与肝素结合 ,又具有促进细胞生长活性的融合蛋白 ,并在大肠杆菌中高效表达。方法 :将PCR扩增hEGF全基因与PCR扩增hbFGF 5 端的 2 31bp的片段连接 ,克隆到表达载体pJN ,构建出含融合基因的表达质粒pJRH。将pJRH转化BL2 1(DE3)表达菌株 ,获得融合蛋白的表达菌株pJRH(BL)。Westernblot检测表达产物免疫学活性。表达产物上肝素亲和柱和分子筛进行纯化。结果 :融合蛋白表达产量为 30 % ,融合蛋白不仅能与肝素结合 ,而且具有促细胞增殖的活性。Westernblot检测结果显示融合蛋白有EGF的免疫活性。融合蛋白的等电点为 5 2。结论 :本研究构建了一个hEGF和hbFGF的C端的融合蛋白 ,该蛋白基本保持了两者原有的生物活性。作为一个新的活性因子 ,本研究为探讨活性因子蛋白结构与功能的关系奠定基础。 展开更多

关键词 表皮生长因子 尿抑胃素 成纤维细胞生长因子 碱性 重组融合蛋白类 大肠杆菌 HEGF

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利用昆虫杆状病毒载体表达人碱性成纤维细胞生长因子 被引量：2

9

作者 王雅梅 孙丽翠 +3 位作者 闫豫东 司杨 张静宜 祁雅慧 《首都医科大学学报》 CAS 2007年第2期229-233,共5页

目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将人碱性成纤维细胞生长因子(human basic fibroblast growth factor,hbFGF)基因进行表达,并检测重组蛋白的特异性及生物学活性。方法将人bFGF的cDNA克隆至杆状病毒转座载体pFastBacHTb中,并转化到... 目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将人碱性成纤维细胞生长因子(human basic fibroblast growth factor,hbFGF)基因进行表达,并检测重组蛋白的特异性及生物学活性。方法将人bFGF的cDNA克隆至杆状病毒转座载体pFastBacHTb中,并转化到含穿梭载体Bacmid的感受态细菌DH10Bac中,获得重组Bacmid/bFGF;纯化DNA后,转染昆虫细胞Sf21,PCR鉴定重组病毒;进一步将重组病毒感染Sf21细胞,在Sf21细胞中进行表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳、Western bloting分析;MTT法检测表达产物的生物活性。结果重组Bacmid/bFGFDNA直接转染昆虫细胞得到重组病毒rAcV-Bac-bFGF,病毒滴度MOI值≈8。重组病毒在感染后48h开始出现一相对分子质量为23000大小的特异带,感染后72h蛋白量明显增加,96h蛋白量达到最大,120h蛋白量开始减少。在正常昆虫Sf21细胞的对照中未见该蛋白带。Western bloting显示目的蛋白条带与人bFGF抗体发生特异反应。MTT结果显示重组蛋白能明显促进3T3细胞的分裂增殖。结论利用杆状病毒表达系统可成功表达具有生物学活性的bFGF蛋白。 展开更多

关键词 人碱性成纤维细胞生长因子 Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 昆虫细胞 基因表达

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重组大肠杆菌高效表达hbFGF的培养条件 被引量：1

10

作者 廖美德 谢秋玲 +3 位作者 林剑 洪岸 孙奋勇 梁世中 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期73-75,80,共4页

对工程菌hbFGF/BL2 1(DE3) pLysS高效表达hbFGF的培养条件的研究结果表明 ,接种量 (φ)为 5 % ,当培养液菌体浓度为 0 .8OD6 0 0 时 ,添加 0 .5mmol/L诱导剂IPTG可以获得较高的hbFGF表达量 ,30 %的溶解氧和较低的醋酸浓度有利于hbFGF的... 对工程菌hbFGF/BL2 1(DE3) pLysS高效表达hbFGF的培养条件的研究结果表明 ,接种量 (φ)为 5 % ,当培养液菌体浓度为 0 .8OD6 0 0 时 ,添加 0 .5mmol/L诱导剂IPTG可以获得较高的hbFGF表达量 ,30 %的溶解氧和较低的醋酸浓度有利于hbFGF的表达 . 展开更多

关键词 人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF) hbFGF/BL21(DE3)pLysS 培养条件

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圆锥角膜组织中EGF和bFGF变化免疫组织化学的研究 被引量：1

11

作者 赵桂秋 刘绍辉 +3 位作者 姜涛 马玉娜 王传富 王青 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2003年第3期273-275,共3页

目的　观察正常人及圆锥角膜中表皮生长因子 (EGF)和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的表达 ,探讨EGF和bFGF在圆锥角膜中的变化。方法　采用免疫组织化学SABC法检测角膜组织中EGF、bFGF的表达。结果　在圆锥角膜上皮层、Bowman层和内皮层... 目的　观察正常人及圆锥角膜中表皮生长因子 (EGF)和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的表达 ,探讨EGF和bFGF在圆锥角膜中的变化。方法　采用免疫组织化学SABC法检测角膜组织中EGF、bFGF的表达。结果　在圆锥角膜上皮层、Bowman层和内皮层有EGF表达 ,EGF比正常角膜的表达强 ;在圆锥角膜的上皮层、实质层和内皮层可见bFGF的阳性表达 ,圆锥角膜的基质瘢痕区bFGF有较强的阳性表达。结论　圆锥角膜组织中EGF水平增高 ,促进上皮细胞和基质细胞的DNA合成 ,从而使组织愈合。bFGF表达增强可以促进角膜上皮。 展开更多

关键词 圆锥角膜 免疫组织化学 人类 EGF BFGF

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人胎内耳中碱性成纤维细胞生长因子的定位表达 被引量：2

12

作者 陈向东 董雪蕾 董明敏 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2002年第5期616-618,F003,共4页

目的 :研究人胎内耳中碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的定位表达情况。方法 :合法水囊引产胎儿 1 0个 ,制备火棉胶包埋颞骨切片 ,采用免疫组织化学技术观察bFGF在内耳中表达情况。结果 :耳蜗毛细胞、支持细胞、螺旋神经节细胞、神经纤... 目的 :研究人胎内耳中碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的定位表达情况。方法 :合法水囊引产胎儿 1 0个 ,制备火棉胶包埋颞骨切片 ,采用免疫组织化学技术观察bFGF在内耳中表达情况。结果 :耳蜗毛细胞、支持细胞、螺旋神经节细胞、神经纤维均有bFGF表达 ,成熟毛细胞表达很弱 ;前庭毛细胞、支持细胞、上皮下组织和神经纤维均有bFGF表达。结论 :bFGF参与人内耳发育 。 展开更多

关键词 人 胎儿 内耳 碱性成纤维细胞生长因子 定位表达

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水蛭素对牙龈成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β_1表达的影响 被引量：7

13

作者 郑怡 禤坤 +1 位作者 南澜 莫水学 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期6-10,共5页

目的观察水蛭素对人牙龈成纤维细胞(HGFs)碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达变化的规律,探讨水蛭素影响牙龈改建的可能作用机制。方法体外培养并鉴定HGFs,利用不同浓度的水蛭素分别作用于正常(对照组)和受... 目的观察水蛭素对人牙龈成纤维细胞(HGFs)碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达变化的规律,探讨水蛭素影响牙龈改建的可能作用机制。方法体外培养并鉴定HGFs,利用不同浓度的水蛭素分别作用于正常(对照组)和受长期机械外力作用后增生的HGFs(实验组),通过实时定量聚合酶链反应法和免疫细胞化学法检测TGF-β1及b FGF的表达。结果未加入水蛭素时,受长期机械外力作用后,实验组促进HGFs增殖胶原合成的TGF-β1表达升高,而抑制胶原合成的b FGF表达降低(P<0.05)。加入水蛭素干预增生的HGFs后,可正向调节b FGF表达,而负向调节TGF-β1的表达(P<0.05)。结论外力作用干扰了HGFs胶原合成与降解之间的平衡,水蛭素可能通过调节这一平衡而促进牙龈改建过程。 展开更多

关键词 水蛭素 人牙龈成纤维细胞 转化生长因子-Β1 碱性成纤维细胞生长因子

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人源饲养层对人胚胎干细胞生长的影响 被引量：1

14

作者 刘彩霞 周灿权 +1 位作者 李涛 闻安民 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期33-38,共6页

【目的】选择最佳人源饲养层,并检测不同组织来源的人源饲养层细胞碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的分泌情况,探讨其水平与人胚胎干细胞(hESCs)生长是否相关。【方法】原代培养包皮真皮、子宫内膜基质、绒毛、输卵管、胎儿真皮、胎儿肌... 【目的】选择最佳人源饲养层,并检测不同组织来源的人源饲养层细胞碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的分泌情况,探讨其水平与人胚胎干细胞(hESCs)生长是否相关。【方法】原代培养包皮真皮、子宫内膜基质、绒毛、输卵管、胎儿真皮、胎儿肌肉及胎鼠成纤维细胞(MEFs);按组织来源分为7组(MEFs为对照),同期接种同一株hESCs,从饲养层细胞密度、丝裂霉素作用时间等,寻找不同饲养层适合hESCs生长的最佳条件;按人体组织分6组,ELISA方法检测各种人源饲养层细胞分泌的bFGF。【结果】根据饲养层细胞生长特性,饲养层从优到劣依次为:包皮、子宫内膜、绒毛、输卵管、胎皮、胎肌;根据hESCs生长状况,饲养层排序为:包皮、输卵管、子宫内膜、绒毛、胎肌、胎皮。输卵管、包皮、绒毛、胎肌、子宫内膜、胎皮分泌的bFGF(pg·10-5·mL-1)分别为13.23±3.39,1.99±0.17,1.40±0.17,2.02±1.59,0.38±0.28,0.29±0.29。输卵管与其它组织细胞分泌的bFGF差异均有统计学意义(P<0.01);包皮、绒毛、胎肌之间差异无统计学意义(P>0.05),与子宫内膜、胎皮差异有统计学意义(P<0.05);子宫内膜与胎皮之间差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】包皮来源的饲养层最佳,输卵管细胞分泌的bFGF量最高,饲养层细胞自身分泌的bFGF和hESCs生长无必然相关性。 展开更多

关键词 人源饲养层 人胚胎干细胞 碱性成纤维细胞生长因子

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碱性成纤维细胞生长因子对人椎间盘细胞外基质合成及软骨调节素表达的影响 被引量：2

15

作者 李想 王以朋 +5 位作者 洪毅 唐和虎 张军卫 白金柱 姜树东 王方永 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2012年第6期539-543,共5页

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人椎间盘细胞基质合成能力以及血管生长抑制因子软骨调节素-1(ChM-1)表达的影响,为椎间盘退变的生物学治疗提供可供参考的生长因子。方法取4例因腰椎间盘退变性疾病而于本院行腰椎间盘切除手术... 目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人椎间盘细胞基质合成能力以及血管生长抑制因子软骨调节素-1(ChM-1)表达的影响,为椎间盘退变的生物学治疗提供可供参考的生长因子。方法取4例因腰椎间盘退变性疾病而于本院行腰椎间盘切除手术患者的椎间盘组织,分别进行髓核和纤维环细胞培养及表型鉴定。取传代细胞继续培养1周后,向培养基中加入不同浓度的bFGF(0,0.1 ng/ml,1 ng/ml和10 ng/ml),72 h后收集细胞。采用Real-time RT-PCR检测各组细胞中Aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA表达情况;同时利用Real-time RT-PCR和Western blot方法检测bFGF对ChM-1 mRNA和蛋白表达的影响。结果 bFGF可明显抑制人椎间盘细胞外基质成分Aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA的表达(P<0.05)。Real-time RT-PCR和Western blot方法均提示bFGF可抑制ChM-1的表达水平(P<0.05),并具有剂量依赖性。结论 bFGF在发挥分解代谢功能的同时还具有潜在的促进血管生长作用。 展开更多

关键词 椎间盘 碱性成纤维细胞生长因子 软骨调节素 退变 人

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PLGA-Ⅱ型胶原复合rhBMP-2/bFGF修复兔膝关节软骨的缺损 被引量：7

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作者 束志勇 查振刚 +4 位作者 汪炬 黄春华 刘宁 吴昊 王双利 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期180-184,共5页

目的:探讨经Ⅱ型胶原涂层改性后的聚丙交酯-乙交酯(PLGA)材料(PLGA-Ⅱ型胶原)用作生长因子重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)和碱性成纤维生长因子(bFGF)载体来修复兔膝关节软骨缺损的可行性和有效性。初步探讨生长因子rhBMP-2和bFGF之间... 目的:探讨经Ⅱ型胶原涂层改性后的聚丙交酯-乙交酯(PLGA)材料(PLGA-Ⅱ型胶原)用作生长因子重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)和碱性成纤维生长因子(bFGF)载体来修复兔膝关节软骨缺损的可行性和有效性。初步探讨生长因子rhBMP-2和bFGF之间在修复兔膝关节软骨缺损中的协同作用机制。方法:将45只成年新西兰兔随机分成A^E 5组,每组9只,用在兔右侧膝关节内侧髁钻孔的方式建立软骨缺损模型,A组植入PLGA-Ⅱ型胶原/rhBMP-2+bFGF复合物,B组植入PLGA-Ⅱ型胶原/rhBMP-2复合物,C组植入PLGA-Ⅱ型胶原/bFGF复合物,D组植入单纯PLGA-Ⅱ型胶原支架材料,E组未植入任何材料。将A、B、C组统称为实验组,D、E组统称为对照组。分别于术后4周,8周,12周处死动物,取材进行大体、组织学观察。结果:实验组的复合材料对软骨缺损的修复都有不同程度的促进作用,其中A组的效果最佳,对照组的软骨缺损的修复不明显,实验组总评分与对照组相比差异有显著性意义(P<0.05)。结论:3种带生长因子的复合体材料对兔软骨缺损的修复都有明显的促进作用。PLGA-Ⅱ型胶原复合物可用作生长因子rhBMP-2和bFGF的载体材料。生长因子rhBMP-2、bFGF对软骨缺损的修复均有促进作用,并且在剂量比为0.5 mg∶50 ng时存在着协同作用。 展开更多

关键词 聚丙交酯-乙交酯 重组人骨形态发生蛋白 碱性成纤维细胞生长因子 关节软骨缺损 修复

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骨形成蛋白-2和碱性成纤维细胞生长因子对人骨髓基质细胞的生物学作用 被引量：4

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作者 钱奇春 刘彦普 +1 位作者 杨维东 张晓东 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2003年第5期350-352,共3页

目的 :探讨重组人骨形成蛋白 - 2 (rhBMP - 2 )和碱性成纤维细胞生长因子 (b -FGF)单独或联合作用对人骨髓基质细胞 (HBMSC)增殖和分化的影响。方法 :利用四唑盐比色法 (MTT)、碱性磷酸酶 (ALP)测定法观察不同浓度的rhBMP - 2和b -FGF... 目的 :探讨重组人骨形成蛋白 - 2 (rhBMP - 2 )和碱性成纤维细胞生长因子 (b -FGF)单独或联合作用对人骨髓基质细胞 (HBMSC)增殖和分化的影响。方法 :利用四唑盐比色法 (MTT)、碱性磷酸酶 (ALP)测定法观察不同浓度的rhBMP - 2和b -FGF单独或联合作用时HBMSC的增殖和分化情况。结果 :rhBMP - 2对HBMSC的增殖和ALP表达均有促进作用 ;b -FGF促进HBMSC增殖 ,但抑制ALP表达 ;rhBMP - 2和b -FGF联合作用时HBMSC的增殖和ALP活性较单独作用有显著提高。结论 :rhBMP - 2和b 展开更多

关键词 骨形成蛋白-2 碱性成纤维细胞生长因子 人骨髓基质细胞 生物学作用 增殖 分化

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黄芪对腹膜间皮细胞致纤维化细胞生长因子分泌与表达的影响 被引量：9

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作者 蒋春明 张苗 孙琤 《医学研究生学报》 CAS 2005年第11期972-976,共5页

目的:了解黄芪注射液对体外培养的人腹膜间皮细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)分泌及其mRNA表达的影响。方法:取择期手术患者的网膜间皮细胞进行体外培养传代,第三代细胞用于实验,待细胞同步后分为五组(对... 目的:了解黄芪注射液对体外培养的人腹膜间皮细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)分泌及其mRNA表达的影响。方法:取择期手术患者的网膜间皮细胞进行体外培养传代,第三代细胞用于实验,待细胞同步后分为五组(对照组、腹膜透析组、黄芪1组、2组和3组)观察。单四唑(MTT)法检测各组间皮细胞的增殖活性。用ELISA法检测细胞上清液中TGF-β1和bFGF的含量,并进行比较。采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)法检测两种细胞因子mRNA表达情况并进行比较。结果:腹膜间皮细胞在PDS干预下还原能力明显下降,A值显著低于对照组和黄芪组(P<0.05);分泌TGF-β1和bFGF明显增加,与对照组比较,P<0.05。腹膜间皮细胞经含不同浓度黄芪注射液的PDS干预后,TGF-β1和bFGF分泌与PDS组比较显著下降(P<0.05),黄芪2组和3组显著低于黄芪1组(P<0.05),黄芪3组和2组间比较无显著差异(P>0.05)。腹膜间皮细胞在PDS干预下TGF-β1和bFGF mRNA表达明显升高,分别比对照组上升62.43%和37.68%。黄芪组TGF-β1和bFGF mRNA表达显著低于PDS组(P<0.05);黄芪2组和3组表达显著低于黄芪1组(P<0.05),黄芪3组和2组间比较无显著差异。结论:黄芪注射液具有抑制PDS导致的腹膜间皮细胞TGF-β1和bFGF过度分泌和表达的作用。 展开更多

关键词 黄芪 腹膜间皮细胞 转移生长因子-Β1 碱性成纤维细胞生长因子

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SHH和bFGF体外诱导人牙髓干细胞向神经细胞分化的研究 被引量：6

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作者 张智慧 胡伟平 +2 位作者 郭阳 曹潇方 袁梦桐 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期631-635,共5页

目的:研究体外使用音猬因子(SHH)、碱性成纤维生长因子(bFGF)体外诱导人牙髓干细胞(DPSCs)分化为神经细胞的可行性,以优化人牙髓干细胞向神经细胞分化的诱导条件。方法:从因正畸或阻生拔除的第一前磨牙或第三磨牙中提取牙髓,采用酶消化... 目的:研究体外使用音猬因子(SHH)、碱性成纤维生长因子(bFGF)体外诱导人牙髓干细胞(DPSCs)分化为神经细胞的可行性,以优化人牙髓干细胞向神经细胞分化的诱导条件。方法:从因正畸或阻生拔除的第一前磨牙或第三磨牙中提取牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液,有限稀释法培养分离的原代人牙髓干细胞,并进行克隆化培养,检测间充质干细胞特异性标志物STRO-1的表达。将人牙髓干细胞分别接种于含有不同浓度诱导液,MTT法检测不同时间、两种因子单独或联合对细胞增殖能力的影;免疫荧光法检测抗微管相关蛋白(MAP-2)、神经元烯醇化酶(NSE)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。透射电镜观察诱导前后细胞超微结构。结果:克隆来源细胞的间充质干细胞特异性标志物STRO-1表达阳性。100μg/L音猬因子SHH与20μg/L碱性成纤维生长因子bFGF单独作用促增殖作用最强(P<0.05),碱性成纤维生长因子bFGF单独作用各组及对照组均未检测出神经元样细胞。音猬因子SHH作用各组检测到阳性细胞。而100μg/L音猬因子SHH与20μg/L碱性成纤维生长因子bFGF联合增殖和分化作用均优于其它组。透射电镜观察到神经元样细胞表现。结论:100μg/L音猬因子和20μg/L碱性成纤维生长因子联合可以在体外有效诱导人牙髓干细胞分化为神经细胞。 展开更多

关键词 人牙髓干细胞 音猬因子 碱性成纤维生长因子 分化

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LIF和bFGF对脐带间充质干细胞体外自我维持和更新的影响 被引量：5

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作者 胡文龙 吴平平 +2 位作者 殷嫦嫦 施剑明 殷明 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期184-190,共7页

目的:研究LIF联合bFGF对人脐带间充质干细胞hUC-MSC增殖、干性维持及衰老的影响。方法:实验分为4组:对照组加入完全培养基(含10%FBS的α-MEM)常规培养;LIF组,加入含10 ng/ml LIF的完全培养液;bFGF组,加入含10 ng/ml bFGF的完全培养液;... 目的:研究LIF联合bFGF对人脐带间充质干细胞hUC-MSC增殖、干性维持及衰老的影响。方法:实验分为4组:对照组加入完全培养基(含10%FBS的α-MEM)常规培养;LIF组,加入含10 ng/ml LIF的完全培养液;bFGF组,加入含10 ng/ml bFGF的完全培养液;联合组,加入含10 ng/ml LIF和10 ng/ml bFGF的完全培养液。采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)测定各组第4代hUC-MSC生长曲线;在倒置相差显微镜下观察各组hUC-MSC形态变化;β-半乳糖苷酶染色检测各组细胞衰老情况;RT-PCR检测表达情况。结果:4组细胞生长曲线均近似S形,细胞增殖速率表现为联合组>bFGF组>LIF组>对照组。对照组细胞较早出现衰老,增殖减慢;LIF组细胞早期形态维持较好,但增殖相对缓慢,后期大部分细胞衰老;bFGF组部分细胞呈衰老改变,但增殖较快;联合组细胞增殖迅速,能长期维持hUC-MSC形态特征,仅有少量衰老细胞。RT-PC R显示,LIF和bFGF均能上调PCNA、OCT4、NANOG,下调P16、P21、P53的表达,其联合作用效果更明显。结论LIF联合bFGF不仅可以促进hUC-MSC增殖,维持其干性而且能够延缓hUC-MSC的衰老。 展开更多

关键词 h UC-MSC LIF b FGF 自我更新 自我维持

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