目的对浙江省肾综合征出血热（Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome，HFRS）疫区-龙泉，新分离到的毒株的S基因片段进行克隆并进行序列测定及分析，以确定毒株的型别和基因变异程度，为进一步研究病毒进化和变异提供了有利条件。方...目的对浙江省肾综合征出血热（Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome，HFRS）疫区-龙泉，新分离到的毒株的S基因片段进行克隆并进行序列测定及分析，以确定毒株的型别和基因变异程度，为进一步研究病毒进化和变异提供了有利条件。方法采用直接免疫荧光检测疫区鼠肺HV抗原。将HV抗原阳性的鼠肺标本接种Vero-E6细胞，分离病毒。参考GenBank发表的汉坦病毒核蛋白基因序列，设计合成一对引物，提取分离株细胞培养物的总RNA，应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法扩增新毒株S片段基因，并克隆入载体，纯化后进行核苷酸序列测定及分析。结果成功分离到的新毒株S片段的全基因序列共1 700个核苷酸，只有一个开放读码框架，共编码429个氨基酸。新毒株与HTN型毒株比较，核苷酸同源率为85.7%-91.9%。与SEO型毒株比较，核苷酸同源率为71.2%-75%，表明该毒株为HTN型毒株。结论浙江HFRS疫区新分离汉坦病毒株可以定型为HTN型毒株，可能为新的亚型。展开更多
