CYFIP1对结直肠癌细胞HT29增殖和凋亡的影响 被引量：1

1

作者 余富龙 李亮 +6 位作者 强昊 袁慧 王松 程晓虎 江闰犇 杨雅茹 刘志宁 《中国药理学通报》 CAS 北大核心 2025年第1期116-121,共6页

目的分析CYFIP1(cytoplasmic FMR1-interacting protein-1,CYFIP1)在结直肠癌中的表达水平,并探究敲低CYFIP1对结直肠癌细胞HT29增殖与凋亡的影响及其可能机制。方法通过免疫组化实验检测32例结直肠癌组织及对应癌旁组织中CYFIP1的表达... 目的分析CYFIP1(cytoplasmic FMR1-interacting protein-1,CYFIP1)在结直肠癌中的表达水平,并探究敲低CYFIP1对结直肠癌细胞HT29增殖与凋亡的影响及其可能机制。方法通过免疫组化实验检测32例结直肠癌组织及对应癌旁组织中CYFIP1的表达水平;通过GEPIA2数据库筛选共表达基因,预测二者相关性及可能结合位点;构建siRNA-CYFIP1后,分别用CCK-8、细胞凋亡荧光Hoechst 33342/PI双染实验和Western blot分别检测HT29细胞的增殖、凋亡水平以及细胞凋亡相关蛋白表达水平的变化。结果免疫组化结果显示结直肠癌组织中CYFIP1的表达水平明显高于其对应的癌旁组织(P<0.05);CYFIP1的表达与患者的年龄、性别无关,与TNM分期,淋巴结转移相关(P<0.05);利用GEPIA2、JASPAR数据库和rVista 2.0启动子预测软件在CYFIP1基因上游的3kbps的DNA区域预测了一个保守的TP53结合位点;HT29转染siRNA-CYFIP1后,细胞增殖能力均明显降低(P<0.05);HT29转染siRNA-CYFIP1后细胞凋亡相关蛋白cleaved caspase-3水平升高,caspase-3,Bcl-2的表达水平降低(P<0.05),这可能与CYFIP1与TP53相互作用有关。结论CYFIP1在结直肠癌中高表达,与TNM分期,以及淋巴结转移相关,敲低CYFIP1后可以抑制结直肠癌细胞HT29的增殖、影响相关凋亡蛋白表达。 展开更多

关键词 结直肠癌 CYFIP1 凋亡 增殖 ht29 小分子干扰RNA

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新型酪氨酸激酶抑制剂BSSD-1对斑马鱼血管生成及大肠癌HT29裸鼠肿瘤的抑制作用 被引量：5

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作者 韩利文 王思锋 +5 位作者 王加宁 何秋霞 陈贯虹 袁延强 陈锡强 刘可春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1434-1438,共5页

目的探讨化合物BSSD-1对斑马鱼新生血管的影响以及对大肠癌HT29裸鼠肿瘤的抑制作用。方法采用24hpf(hours post fertilization)健康TG(VEGFR2:GFP)系血管荧光转基因斑马鱼作为实验动物模型,加入不同剂量BSSD-1与胚胎共同孵育24 h,在荧... 目的探讨化合物BSSD-1对斑马鱼新生血管的影响以及对大肠癌HT29裸鼠肿瘤的抑制作用。方法采用24hpf(hours post fertilization)健康TG(VEGFR2:GFP)系血管荧光转基因斑马鱼作为实验动物模型,加入不同剂量BSSD-1与胚胎共同孵育24 h,在荧光显微镜下观察背部节间血管(intersegmental vessels,ISV)生成情况,并计数评价抑制程度;进而建立人大肠癌HT29细胞裸小鼠模型,观察BSSD-1不同剂量作用下对裸鼠肿瘤的抑制作用,根据瘤体积及瘤重,计算相对肿瘤增殖率和肿瘤生长抑制率。结果化合物BSSD-1在0.25～25.0 mg·L-1范围抑制斑马鱼背部节间血管生成具有剂量相关性,12.5 mg·L-1抑制率可达98.8%;裸鼠肿瘤抑制试验中,大、中、小剂量组肿瘤生长抑制率试验结果分别为31.1%、40.0%和40.0%,统计学处理3组差异均有显著性。结论 BSSD-1可以抑制荷瘤裸鼠移植瘤的生长,该作用与抑制肿瘤新生血管生成有关。 展开更多

关键词 BSSD-1 斑马鱼 抗肿瘤作用 节间血管 血管生成 ht29 大肠癌

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毛兰素通过Hedgehog信号通路调控结直肠癌HT29细胞的上皮间质转化和血管生成 被引量：6

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作者 张国 张波 +1 位作者 马刚 胡安祥 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期689-694,共6页

目的:基于Hedgehog信号通路探讨石斛提取物毛兰素(erianin,ER)抑制结直肠癌HT29细胞上皮间质转化(EMT)和血管生成的作用机制。方法:将HT29细胞分为空白对照组、ER-L(25μg/mL)组、ER-M(50μg/mL)组、ER-H(75μg/mL)组、ER-H(75μg/mL)+P... 目的:基于Hedgehog信号通路探讨石斛提取物毛兰素(erianin,ER)抑制结直肠癌HT29细胞上皮间质转化(EMT)和血管生成的作用机制。方法:将HT29细胞分为空白对照组、ER-L(25μg/mL)组、ER-M(50μg/mL)组、ER-H(75μg/mL)组、ER-H(75μg/mL)+PM(Hedgehog通路激活剂,1.5μmol/L)组。MTT法检测细胞增殖活力,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移与侵袭能力,血管拟态形成实验检测血管生成能力,WB法检测与EMT进程、Hedgehog信号通路和拟态血管生成相关蛋白质的表达。结果:HT29细胞增殖活性随着ER质量浓度的升高而逐渐降低(P<0.05);与空白对照组比较,ER各组细胞克隆形成率、迁移与侵袭能力、血管形成能力、间质标志蛋白(N-cadherin、vimentin)、血管生成相关蛋白(VEGF、VE-cadherin)及Hedgehog通路相关蛋白(SHH、GLI1、SMO、c-Myc)表达均显著下降(均P<0.05),上皮标志蛋白(Ecadherin)、Hedgehog通路中融合蛋白抑制剂(SUFU)蛋白表达均显著上升(均P<0.05);PM处理在一定程度上逆转了ER对于HT29细胞增殖、EMT和血管生成的抑制作用(均P<0.05)。结论:ER可以抑制结直肠癌HT29细胞的增殖、迁移与侵袭、EMT和血管生成,其机制可能与抑制Hedgehog信号通路激活有关。 展开更多

关键词 毛兰素 结直肠癌 ht29细胞 上皮间质转化 HEDGEHOG信号通路 血管生成

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吴茱萸碱和盐酸小檗碱对大肠癌HT29细胞端粒酶活性的影响 被引量：9

4

作者 常金荣 陈蔚文 王建华 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2011年第7期1326-1329,共4页

目的:探讨左金丸的主要成分吴茱萸碱和盐酸小檗碱对结肠癌HT29细胞凋亡及端粒酶催化亚基(hTERT)表达的影响,为临床应用左金丸治疗大肠癌提供实验依据。方法:体外培养人结肠癌HT29细胞,加入不同浓度的吴茱萸碱及盐酸小檗碱进行培养,采用... 目的:探讨左金丸的主要成分吴茱萸碱和盐酸小檗碱对结肠癌HT29细胞凋亡及端粒酶催化亚基(hTERT)表达的影响,为临床应用左金丸治疗大肠癌提供实验依据。方法:体外培养人结肠癌HT29细胞,加入不同浓度的吴茱萸碱及盐酸小檗碱进行培养,采用活细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,TRAP法检测端粒酶活性,RT-PCR法检测hTERT的表达。结果:吴茱萸碱和盐酸小檗碱作用HT29细胞后,增殖明显受到抑制,呈剂量和时间依赖性;能够降低HT29端粒酶活性,但二者无协同作用;并且端粒酶hTERT表达降低,具有剂量依赖关系。结论:吴茱萸碱和盐酸小檗碱对结肠癌HT29细胞具有显著生长抑制作用,该抑制作用可能通过下调端粒酶hTERT基因表达,降低端粒酶的活性,为临床治疗大肠癌提供实验依据。 展开更多

关键词 吴茱萸碱 盐酸小檗碱 ht29细胞 端粒酶活性 HTERT

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大果沙棘果渣黄酮对HT29肿瘤细胞活性抑制及DNA损伤作用研究 被引量：8

5

作者 焦岩 常影 王振宇 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期362-364,共3页

目的:研究大果沙棘果渣黄酮(Seabuckthorn residue flavonoids,SRF)对人结肠癌HT29细胞生长抑制和DNA损伤的作用。方法:利用MTT比色法测定大果沙棘果渣黄酮对HT29结肠癌细胞生长的抑制率;用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)观察大果沙棘果渣黄... 目的:研究大果沙棘果渣黄酮(Seabuckthorn residue flavonoids,SRF)对人结肠癌HT29细胞生长抑制和DNA损伤的作用。方法:利用MTT比色法测定大果沙棘果渣黄酮对HT29结肠癌细胞生长的抑制率;用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)观察大果沙棘果渣黄酮对HT29细胞DNA的损伤情况。结果:大果沙棘果渣黄酮在浓度20～200mg/L时对结肠癌细胞有明显的抑制作用,作用72h最大抑制率为81.28%;单细胞凝胶电泳显示大果沙棘果渣黄酮作用细胞48h后可见明显的彗星状拖尾。结论:大果沙棘果渣黄酮可抑制HT29细胞的生长,对其DNA有致损效应。 展开更多

关键词 大果沙棘果渣 黄酮 ht29肿瘤细胞 DNA损伤

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RhoGAP结构域在DLC-1基因抑制人结肠癌HT29细胞增殖、侵袭中的作用 被引量：3

6

作者 吴鹏 吴平平 +3 位作者 金治 李楠 杨琳 黄培林 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1383-1388,共6页

目的:探讨Rho蛋白GTP酶活化蛋白(Rho GTPase activation protein,RhoGAP)结构域在肝癌缺失基因1(frequentlydeleted in liver,DLC-1)抑制人结肠癌HT29细胞的增殖、侵袭中的作用。方法:脂质体转染DLC-1基因及RhoGAP结构域缺失的ΔDLC-1... 目的:探讨Rho蛋白GTP酶活化蛋白(Rho GTPase activation protein,RhoGAP)结构域在肝癌缺失基因1(frequentlydeleted in liver,DLC-1)抑制人结肠癌HT29细胞的增殖、侵袭中的作用。方法:脂质体转染DLC-1基因及RhoGAP结构域缺失的ΔDLC-1亚克隆至大肠癌HT29细胞株;应用MTT、平板克隆实验检测细胞增殖的改变;Transwell实验观察细胞侵袭迁移能力的改变;流式细胞术检测细胞周期。结果:转染成功后,全长DLC-1基因转染组(pcDNA3.1-DLC1-HT29)与野生型及空载组相比,细胞增殖能力下降,侵袭能力减弱,细胞周期G1期阻滞并诱导凋亡,而ΔDLC-1亚克隆转染组(pcDNA3.1-ΔDLC1-HT29)对细胞增殖、侵袭及细胞周期均无明显影响。结论:DLC-1基因可能是通过其内在的RhoGAP结构域抑制人结肠癌细胞HT29的增殖和侵袭。 展开更多

关键词 肝癌缺失基因-1 转染 RhoGAP结构域 ht29细胞株

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复合螺旋藻多糖对人结肠癌HT29细胞的抑制作用 被引量：3

7

作者 乔明霞 唐纯青 +2 位作者 高宗霞 郝言芝 王清吉 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2009年第4期589-592,共4页

研究复合螺旋藻多糖对人结肠癌HT29细胞的抑制作用。螺旋藻多糖(PSP)与银杏叶有效成分(GBE)1∶1比例复合组、1∶2比例复合组和2∶1比例复合组对人结肠癌HT29细胞的抑瘤率,高剂量时分别比空白对照组提高68.04%(P<0.01)、59.88%(P<0... 研究复合螺旋藻多糖对人结肠癌HT29细胞的抑制作用。螺旋藻多糖(PSP)与银杏叶有效成分(GBE)1∶1比例复合组、1∶2比例复合组和2∶1比例复合组对人结肠癌HT29细胞的抑瘤率,高剂量时分别比空白对照组提高68.04%(P<0.01)、59.88%(P<0.01)和58.82%(P<0.01);中剂量时分别比空白组提高47.52%(P<0.01)、51.98%(P<0.01)和40.31%(P<0.01);低剂量时分别比空白对照组提高39.70%(P<0.01)、29.88%(P<0.01)和27.31%(P<0.01)。各复合制剂组的抑瘤率都高于相对应剂量的单一成分组,PSP与GBE联合使用对抑制人结肠癌HT29细胞能产生协同增效作用。 展开更多

关键词 螺旋藻多糖 银杏叶有效成分 ht29细胞 抑瘤率

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枸杞子多肽的分离纯化及其组分1对HT29细胞的作用 被引量：1

8

作者 张志斐 杨兆勇 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期299-300,310,共3页

目的分离纯化枸杞子多肽(PFL),探讨其组分1(PFL-1)对HT29细胞的作用。方法应用SpherisorC18色谱柱和乙腈溶液组成的HPLC色谱系统,检测波长214nm,对枸杞子多肽(PFL)进行分离,并对此多肽的各组分进行分峰收集;对所收集的各组分进行纯度分... 目的分离纯化枸杞子多肽(PFL),探讨其组分1(PFL-1)对HT29细胞的作用。方法应用SpherisorC18色谱柱和乙腈溶液组成的HPLC色谱系统,检测波长214nm,对枸杞子多肽(PFL)进行分离,并对此多肽的各组分进行分峰收集;对所收集的各组分进行纯度分析。用MTT比色法测定了不同剂量的PFL-1对HT29细胞的抑制率。结果由PFL可分得三种组分,分别命名为PFL-1、PFL-2、PFL-3;PFL-1可使HT29细胞增值减弱,并与浓度呈正相关。结论PFL由三种成分组成,PFL-1对HT29细胞有抑制作用。 展开更多

关键词 枸杞子 多肽 ht29细胞 抑制作用

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RNA干扰对HT29细胞PIDD蛋白表达及细胞耐药性影响的研究

9

作者 彭晶晶 李建军 +3 位作者 梁后杰 边志衡 陈克力 江恒 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1444-1446,共3页

目的观察氟尿嘧啶(5-FU)刺激后PIDD蛋白在结肠癌HT29细胞中分布的改变,以及小干扰RNA(siRNA)干扰PIDD蛋白前后,HT29细胞耐药性的变化。方法用siRNA干扰HT29细胞内PIDD蛋白的表达,用5-FU刺激HT-29细胞。West-ern blotting法检测干扰前后... 目的观察氟尿嘧啶(5-FU)刺激后PIDD蛋白在结肠癌HT29细胞中分布的改变,以及小干扰RNA(siRNA)干扰PIDD蛋白前后,HT29细胞耐药性的变化。方法用siRNA干扰HT29细胞内PIDD蛋白的表达,用5-FU刺激HT-29细胞。West-ern blotting法检测干扰前后细胞PIDD的表达,并比较5-FU刺激后干扰与未干扰HT-29细胞内PIDD在细胞中分布的变化。MTT比色法检测siRNA干扰前后细胞对5-FU的敏感性,并计算各组细胞的IC50值。结果未受5-FU刺激前,PIDD蛋白主要分布于细胞质中;受5-FU刺激后,PIDD蛋白迁移至细胞核。siRNA干扰后细胞中PIDD表达总量有所下降,胞质及胞核中的表达均降低,受5-FU刺激后PIDD的表达也未见升高,迁移至胞核的PIDD也未增加。MTT检测证明5-FU对转染组(PIDD-360转染12h后的HT29细胞)的IC50值为0.23±0.06μg/ml,与正常组(未作处理的HT29细胞,IC50为2.71±0.70μg/ml)和对照组(阴性对照试剂转染12h后的HT29细胞,IC50为2.78±1.03μg/ml)比较显著降低(P<0.05)。结论经siRNA干扰PIDD蛋白后,HT29细胞的耐药性明显下降,推测其机制与胞核中PIDD降低导致的NF-κB活性降低,细胞凋亡增多有关。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 PIDD蛋白 ht29细胞 RNA干扰 抗药性 肿瘤

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结直肠癌患者血清与LoVo细胞、HT29细胞培养液比较蛋白质组学研究

10

作者 高春芳 梁延春 +3 位作者 王秀丽 赵光 郑国宝 李冬晖 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期463-464,共2页

目的　对LoVo细胞、HT29细胞培养液与结直肠癌患者血清中特异蛋白质组进行对比研究。方法　应用美国Cipher Gen公司金属亲和表面(IMAC3)芯片和蛋白质芯片仪检测LoVo细胞培养液、HT29细胞培养液与结直肠癌患者血清。结果　结直肠癌患者... 目的　对LoVo细胞、HT29细胞培养液与结直肠癌患者血清中特异蛋白质组进行对比研究。方法　应用美国Cipher Gen公司金属亲和表面(IMAC3)芯片和蛋白质芯片仪检测LoVo细胞培养液、HT29细胞培养液与结直肠癌患者血清。结果　结直肠癌患者血清与LoVo细胞培养液中都含有质荷比为11 731Da的蛋白质。HT29细胞培养液与结直肠癌患者血清中无相同的蛋白质。结论　LoVo细胞培养液与结直肠癌患者血清中有相同的蛋白质。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 蛋白质组学 肿瘤标记 生物学 LOVO细胞 ht29细胞

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EGF和受体FLT-1、FLK-1在大肠癌中的表达及siRNA沉默VEGF基因对大肠癌细胞系Caco-2、HT29、HCT116生物学特性的影响

11

作者 吴文清 张洪福 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第6期836-836,共1页

目的研究VEGF和受体FLT-1、FLK-1在大肠癌组织中的表达和临床病理因素之间的关系;观察siRNA干扰VEGF基因对不同分化人大肠癌细胞系生物学特性的影响。方法应用免疫组织化学S-P法,检测82例大肠癌及14例大肠正常黏膜组织中VEGF和FLT-1、FL... 目的研究VEGF和受体FLT-1、FLK-1在大肠癌组织中的表达和临床病理因素之间的关系;观察siRNA干扰VEGF基因对不同分化人大肠癌细胞系生物学特性的影响。方法应用免疫组织化学S-P法,检测82例大肠癌及14例大肠正常黏膜组织中VEGF和FLT-1、FLK-1的表达,分析大肠癌组织中FLT-1、FLK-1的表达与大肠癌临床病理参数之间的关系;以脂质体lip-2000为载体,用针对VEGF特异靶点的siRNA转染入3种不同分化人大肠癌细胞系Caco-2、HT29、HCT116后,免疫细胞化学S-P法、WesternBlot检测VEGF蛋白表达变化,MTT法检测对细胞增殖的影响;流式细胞技术检测细胞凋亡。结果①大肠癌组织VEGF和受体FLT-1、FLK-1阳性表达率显著高于正常大肠组织(P<0.05)。VEGF的表达在有无淋巴结转移组和不同的Duke分期中亦有显著差异(P<0.05)。FLT-1和FLK-1在大肠癌组织的阳性表达呈显著正相关,(r=0.457,P<0.05)。②VEGF-siRNA转染Caco-2、HT29、HCT116细胞后,免疫细胞化学结果显示:3种大肠癌细胞系的正常对照组,脂质体对照组及阴性错配对照组VEGF表达均呈深棕黄色强阳性表达,3组无明显差别;转染VEGF-siRNA组阳性细胞数均无明显减少,阳性细胞细胞浆呈浅棕黄色弱阳性表达。Westernblot结果显示:Caco-2、HT29、HCT116细胞VEGF-siRNA组细胞的蛋白条带亮度均明显低于正常对照组、脂质体对照组和阴性错配对照组,3种细胞的VEGF-siRNA组VEGF蛋白表达均较对照组明显下降。③MTT检测结果:与阴性对照组相比,3种细胞的VEGF-siRNA组细胞生长出现明显的抑制(P<0.05)。同一种细胞系VEGF-siRNA组中,不同时段(24h、48h、72h)肿瘤细胞增殖抑制率之间差异有统计学意义(P<0.05),且随着作用时间的增加,抑制率呈上升趋势,表明细胞生长抑制率在一定剂量范围内随时间的增加而增加,具有时间依赖性。同一时间阶段不同细胞(Caco-2、HT29、HCT116)的VEGF-siRNA组的抑制率之间差异有统计学意义(P<0.05)。④流式细胞术检测结果表明:与正常对照和阴性对照细胞组相比,Ca-co-2、HT29、HCT116细胞的VEGF-siRNA组,均出现明显亚二倍体峰,三种大肠癌细胞系VEGF-siRNA组的凋亡率显著高于正常对照组,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 VEGF和受体FLT-1、FLK-1与大肠癌的发生密切相关,VEGF与大肠癌的预后有关。siRNA干扰VEGF基因能有效抑制人大肠癌细胞系VEGF蛋白表达,细胞增殖能力减弱,促进细胞凋亡。以VEGF基因为靶点,利用siRNA技术进行基因治疗有可能成为一种新的有效手段。 展开更多

关键词 HCT116细胞 受体FLT-1 siRNA干扰 大肠癌细胞系 VEGF基因 CACO-2 FLK-1 ht29

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黄芪多糖对毒胡萝卜素诱导人结肠癌系HT29细胞内质网应激的影响 被引量：9

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作者 郑烈 张亚利 戴彦成 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第2期122-125,I0021,共5页

目的探讨黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,AP)对毒胡萝卜素内酯(Thapsigargin,Tg)诱导人结肠癌系HT29细胞发生内质网应激(Endoplasmic Reticulum Stress,ERS)时内质网结构变化及相关分子GRP78和CHOP的影响。方法常规培养HT29细胞后... 目的探讨黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,AP)对毒胡萝卜素内酯(Thapsigargin,Tg)诱导人结肠癌系HT29细胞发生内质网应激(Endoplasmic Reticulum Stress,ERS)时内质网结构变化及相关分子GRP78和CHOP的影响。方法常规培养HT29细胞后,将细胞分为4组:①空白细胞组(Control组):细胞不做任何药物处理;②细胞模型组(Model组):采用1μmol/L Tg诱导HT29细胞建立ERS模型;③黄芪多糖低浓度组(AP-L组);④黄芪多糖高浓度组(AP-H组)。CCK8法检测黄芪多糖对HT29细胞活性,透射电镜观察内质网结构变化,Real-time PCR法检测ERS时GRP78、CHOP mRNA表达情况。结果黄芪多糖浓度分别为1、10μg/mL,且分别作用HT29细胞12、24、36、48 h时,细胞存活率随着浓度的增加而增加,说明对细胞无明显毒副作用。透射电镜观察Control组内质网结构呈网膜状结构,网膜腔不扩张;Model组内质网形态迥异,大小不一,呈空泡状改变,部分可见融合成簇现象;AP-L组内质网网膜腔扩张程度减轻,空泡体积减小和数量减少;AP-H组内质网形态基本恢复正常,呈网膜状结构,可见数量较少,形态较小的空泡状结构。Real-time PCR法检测结果:与Control组相比,Model组HT29细胞GRP78、CHOP mRNA表达明显增加(P<0.05);与Model组比较,AP-L组和AP-H组HT29细胞GRP78、CHOP mRNA表达均减少(P<0.05);与AP-L组比较,AP-H组HT29细胞GRP78、CHOP mRNA表达减少(P<0.05)。结论黄芪多糖能够抑制Tg诱导HT29细胞发生ERS,其机制可能与降低GRP78和CHOP的表达、减轻内质网应激有关。 展开更多

关键词 黄芪多糖 毒胡萝卜素内酯 ht29细胞 内质网应激 GRP78 CHOP

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Salubrinal保护人结肠癌系HT29细胞内质网应激凋亡的实验研究 被引量：2

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作者 郑烈 张亚利 戴彦成 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第5期1051-1054,共4页

目的:探讨Salubrinal对毒胡萝卜素内酯(Thapsigargin,Tg)诱导的人结肠癌系HT29细胞凋亡的保护作用及机制。方法:以HT29细胞为研究对象,分别给予不同浓度的Salubrinal(1、10、50μg/mL)预处理,30 min后加入Tg(1μmol/L),继续培养24 h后... 目的:探讨Salubrinal对毒胡萝卜素内酯(Thapsigargin,Tg)诱导的人结肠癌系HT29细胞凋亡的保护作用及机制。方法:以HT29细胞为研究对象,分别给予不同浓度的Salubrinal(1、10、50μg/mL)预处理,30 min后加入Tg(1μmol/L),继续培养24 h后通过流式细胞和TUNEL检测方法对HT29细胞凋亡进行检测;Western Blot法检测凋亡蛋白Caspase-12的表达变化。结果:通过流式细胞仪测定,HT29细胞早期凋亡率为(9.67±1.03)%,经1μmol/L Tg诱导24 h后HT29细胞凋亡率为(35.64±1.62),明显增加(P<0.05);与模型组比较,加用Salubrinal(1、10、50μg/mL)干预后,随着剂量的增加,各组细胞凋亡率均明显降低(P<0.05);且Salubrinal(50μg/mL)细胞凋亡率明显低于Salubrinal(10μg/mL)。TUNEL检测正常空白组细胞凋亡率为(6.94±0.97)%,经1μmol/L Tg诱导24 h后HT29细胞凋亡率为(34.56±1.45)%(P<0.05);与模型组比较,加用Salubrinal(1、10、50μg/mL)干预后,各组细胞凋亡率均明显降低(P<0.05);且Salubrinal(50μg/mL)细胞凋亡率明显低于Salubrinal(10μg/mL)(P<0.05)。Western Blot检测结果表明,Caspase-12在正常空白组表达较低,HT29细胞经药物干预24后,在1μmol/L Tg诱导模型组表达增高(P<0.05);通过不同浓度Salubrinal干预后,随着其浓度的增加凋亡蛋白Caspase-12表达逐渐降低(P<0.05)。结论:Salubrinal对毒胡萝卜素内酯诱导的人结肠癌系HT29细胞凋亡具有保护作用,作用机制可能与抑制内质网应激凋亡通路有关。 展开更多

关键词 Salubrinal 毒胡萝卜素内酯 ht29细胞 内质网应激 细胞凋亡

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竹节香附素A对肠癌HT29细胞凋亡及周期的影响 被引量：5

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作者 孟春芹 王瑞平 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第23期3858-3863,共6页

目的观察竹节香附素A(RA)对人结肠癌HT29细胞凋亡及周期的影响,并探讨其相关机制。方法 1、2、4、8、16μmol/L的RA分别作用细胞12、24、48 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测RA对HT29细胞的增殖抑制作用,计算半数抑制浓度IC50;荧光显微镜... 目的观察竹节香附素A(RA)对人结肠癌HT29细胞凋亡及周期的影响,并探讨其相关机制。方法 1、2、4、8、16μmol/L的RA分别作用细胞12、24、48 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测RA对HT29细胞的增殖抑制作用,计算半数抑制浓度IC50;荧光显微镜下观察Hoechst33258染色,RA对细胞凋亡形态学的影响;流式细胞术(FCM)检测RA对HT29细胞凋亡及细胞周期的影响;蛋白质印迹法(Westernblot,WB)检测Cleaved-caspase-3、Cleaved-PARP、Cyclin B、CDK1等蛋白的表达情况。结果竹节香附素A能够抑制HT29细胞的增殖,并与浓度、时间呈正相关(P<0.05),12、24、48 h IC50分别为为(9.31±0.63)μmol/L,(4.88±1.02)μmol/L,(3.60±0.89)μmol/L。Hochest33258染色发现细胞出现核固缩、核碎裂;流式细胞术显示:随着给药浓度的增大凋亡率逐渐增加(P<0.05);WB结果显示Cleaved-caspase-3、Cleaved-PARP蛋白表达增加。竹节香附素A作用于HT29细胞后,与对照组相比,G2/M期细胞比例逐渐增高;且Cyclin B、CDK1蛋白表达随着给药浓度的增大而减少。信号通路PI3K/AKT中PI3K、AKT蛋白表达上调,p-PI3K、p-AKT表达下调。结论 RA能够抑制肠癌HT29细胞的增殖,其机制可能是通过调控PI3K/AKT信号通路诱导细胞凋亡和阻滞细胞周期实现的。 展开更多

关键词 竹节香附素A ht29细胞 细胞凋亡 细胞周期 P13K/AKT信号通路

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峨参石油醚提取物联合氟尿嘧啶对HT29多细胞球模型的作用及机制研究

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作者 吴姗姗 陈玉英 +3 位作者 马超英 黄艳娇 张欢 耿耘 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第4期822-826,共5页

目的:探讨峨参石油醚提取物联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对HT29多细胞球模型的作用及机制。方法:建立HT29三维多细胞球模型,采用MTT法检测峨参石油醚提取物联合5-FU对HT29三维多细胞球增殖的影响,采用流式细胞技术检测细胞周期、细胞凋亡,采用w... 目的:探讨峨参石油醚提取物联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对HT29多细胞球模型的作用及机制。方法:建立HT29三维多细胞球模型,采用MTT法检测峨参石油醚提取物联合5-FU对HT29三维多细胞球增殖的影响,采用流式细胞技术检测细胞周期、细胞凋亡,采用western blot技术检测NF-κB P65以及MMP-9蛋白的表达。结果:峨参石油醚提取物对HT29三维多细胞球的抑制作用呈一定的药物剂量依赖性;5-FU和峨参石油醚提取物联用可将HT29结肠癌细胞阻滞于S期和G2/M期,且随着峨参石油醚提取物药物浓度的升高,细胞凋亡率有所升高,其对NF-κB P65、MMP-9的抑制作用加强。结论:峨参石油醚提取物联合5-FU能够显著提高对结肠癌HT29三维多细胞球的抑制作用,且抑制作用随着提取物浓度的增高而增加,其作用机制包括将细胞阻滞于G2/M期以及S期、促进细胞凋亡以及抑制NF-κB P65蛋白与MMP-9蛋白的表达。 展开更多

关键词 峨参石油醚提取物 氟尿密封 ht29多细胞球模型 NF-κB P65 MMP-9

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姜黄素对H_2O_2诱导的HT29细胞氧化损伤的保护作用及机制研究 被引量：8

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作者 钟宇 黄琼林 +2 位作者 莫明明 杨青锦 蔡春 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期401-407,共7页

研究姜黄素对H_2O_2诱导HT29细胞氧化应激的保护作用及其可能的分子机制。分别采用低、中、高浓度姜黄素处理H_2O_2诱导的HT29细胞氧化损伤模型,并设置H_2O_2模型组和正常对照组;MTT法确定H_2O_2最佳损伤浓度和时间及姜黄素(2.5、5、10... 研究姜黄素对H_2O_2诱导HT29细胞氧化应激的保护作用及其可能的分子机制。分别采用低、中、高浓度姜黄素处理H_2O_2诱导的HT29细胞氧化损伤模型,并设置H_2O_2模型组和正常对照组;MTT法确定H_2O_2最佳损伤浓度和时间及姜黄素(2.5、5、10μmol/L)对H_2O_2诱导的HT29细胞活性的影响;Annexin V/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡情况;PI染色流式细胞术检测细胞周期变化;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS);JC-1染色检测细胞线粒体膜电位;比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量,以及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、caspase-3和caspase-9的水平。结果显示姜黄素组(2.5、5、10μmol/L)明显提高H_2O_2诱导的HT29细胞的存活率(P<0.05,P<0.01);与H_2O_2模型组相比,姜黄素组细胞凋亡率降低(P<0.01),增殖指数增高(P<0.05,P<0.01),LDH释放量和细胞内ROS降低(P<0.05,P<0.01),线粒体膜电位上升(P<0.01),SOD活力增加(P<0.01),MDA降低(P<0.01),caspase-3和caspase-9活性增强(P<0.01),并呈剂量-效应关系。结果表明姜黄素在一定剂量范围内对H_2O_2诱导的HT29细胞氧化损伤具有较好的保护作用,该作用可能与清除ROS,减轻DNA氧化损伤,抑制线粒体通路介导的细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 姜黄素 H2O2 ht29细胞 氧化应激

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HT29和HCT116结直肠癌细胞增殖及其裸鼠移植成瘤研究

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作者 王霞 朱飞艳 +5 位作者 王晶 熊喆 韦云芳 李彬 魏红江 赵红业 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期985-991,共7页

【目的】比较HT29和HCT116两株细胞系体外培养细胞增殖和在裸鼠体内移植后的成瘤情况。【方法】检测结直肠癌细胞HT29和HCT116的细胞活力,观察克隆形成细胞的形态,检测2株细胞p53和p21蛋白的表达水平;将2株细胞移植于裸鼠右侧腹股沟皮下... 【目的】比较HT29和HCT116两株细胞系体外培养细胞增殖和在裸鼠体内移植后的成瘤情况。【方法】检测结直肠癌细胞HT29和HCT116的细胞活力,观察克隆形成细胞的形态,检测2株细胞p53和p21蛋白的表达水平;将2株细胞移植于裸鼠右侧腹股沟皮下,观察移植瘤的生长情况,记录裸鼠的体质量及移植瘤的体积。【结果】与HT29细胞相比,HCT116细胞在体外的增长率极显著升高(P<0.01),p21蛋白正常表达,p53蛋白表达水平极显著降低(P<0.01);在阿霉素存在的情况下,HCT116细胞中的p21蛋白表达水平极显著升高(P<0.01)。14 d内HCT116细胞移植量对裸鼠体质量无显著影响(P>0.05);单只细胞接种量为4×10^(5)和2×10^(6)个时,HT29细胞肿瘤体积显著高于HCT116细胞(P<0.05)。【结论】HCT116细胞在体外的增殖速率显著高于HT29细胞,但是在体内HT29细胞比HCT116细胞更易成瘤,其分子基础可能与HT29细胞中p53基因突变导致的p53蛋白高表达及其下游p21蛋白低表达有关;高浓度的癌细胞移植有利于肿瘤形成。本研究为结直肠癌动物模型的建立及其进一步研究奠定了基础。 展开更多

关键词 结直肠癌 ht29细胞 HCT116细胞 细胞增殖 皮下移植瘤

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何首乌R50部位诱导人结直肠癌细胞凋亡的作用机制 被引量：13

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作者 杨红莉 李瑞婧 +3 位作者 李子木 张瑞晨 李宝赛 孙震晓 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期51-56,共6页

目的考察何首乌R50部位对体外培养的人结直肠癌细胞活性的影响,探究其对人结直肠癌细胞周期和凋亡的作用。方法体外培养人结直肠癌HT29和HCT116细胞24 h,加入何首乌R50部位50-300 mg·L^-1继续培养24,48和72 h,MTT法检测细胞存活率... 目的考察何首乌R50部位对体外培养的人结直肠癌细胞活性的影响,探究其对人结直肠癌细胞周期和凋亡的作用。方法体外培养人结直肠癌HT29和HCT116细胞24 h,加入何首乌R50部位50-300 mg·L^-1继续培养24,48和72 h,MTT法检测细胞存活率;何首乌R50部位50,100和200 mg·L^-1分别与HCT116和HT29细胞作用48 h,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;何首乌R50部位100 mg·L^-1与HCT116和HT29细胞作用48 h,Giemsa染色检测细胞及核的变化,Western蛋白质印迹法检测胱天蛋白酶原3和Pdcd4蛋白的表达。结果何首乌R50部位对HCT116和HT29细胞存活抑制作用显著,呈时间和浓度依赖性;不同浓度何首乌R50部位与HCT116和HT29细胞作用48 h后,对细胞周期的影响均不显著;但随着何首乌R50部位浓度的增加,细胞凋亡率明显增加,200 mg·L^-1组HCT116细胞凋亡率由对照组的（5.85±0.35）%增加至（27.65±1.62）%（P〈0.05）,HT29细胞的凋亡率由（10.25±0.77）%增加至（35.35±0.35）%（P〈0.05）;何首乌R50部位100 mg·L^-1作用HCT116和HT29细胞48 h,Giemsa染色可见部分细胞出现细胞固缩、核染色质凝集、凋亡小体形成等细胞凋亡形态;胱天蛋白酶原3和Pdcd4蛋白表达均下降。结论何首乌R50部位主要通过诱导人结直肠癌HCT116和HT29细胞凋亡而使其存活率下降,并通过胱天蛋白酶依赖信号通路诱导人结直肠癌细胞凋亡,Pdcd4蛋白表达下调可能与其相关。 展开更多

关键词 何首乌R50部位 HCT116细胞 ht29细胞 细胞凋亡 胱天蛋白酶原3 Pdcd4

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TAT-N24穿膜融合多肽的表达与鉴定 被引量：7

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作者 王桂华 孙黎 +5 位作者 邓豫 李小兰 曹小年 来森艳 陶德定 胡俊波 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期175-178,共4页

目的表达并纯化TAT-N24穿膜融合多肽,初步探讨其生物学活性。方法构建pTAT-HA-N24原核表达载体,在BL21大肠埃希菌中表达并纯化TAT-N24融合多肽,利用SDS凝胶电泳检测纯化蛋白的纯度,利用免疫细胞化学和流式细胞术检测TAT-N24融合蛋白的... 目的表达并纯化TAT-N24穿膜融合多肽,初步探讨其生物学活性。方法构建pTAT-HA-N24原核表达载体,在BL21大肠埃希菌中表达并纯化TAT-N24融合多肽,利用SDS凝胶电泳检测纯化蛋白的纯度,利用免疫细胞化学和流式细胞术检测TAT-N24融合蛋白的穿膜能力和生物学活性。结果在原核表达系统中成功构建并表达纯化了TAT-N24穿膜融合多肽,其在6 mol/L尿素和DMSO中均具有较好的溶解性,纯化的融合多肽经SDS凝胶电泳分析未见明显杂蛋白混入,利用免疫细胞化学染色可见TAT-N24处理结肠HT29细胞12 h后90%以上的细胞中可检测到TAT-N24,流式细胞术检测细胞周期可见TAT-N24能够有效地诱导细胞周期阻滞,抑制结肠癌细胞生长。结论TAT-N24具有高效的穿膜能力,并能有效抑制结肠癌细胞增殖,可望开发成为有效的肿瘤分子治疗药物。 展开更多

关键词 TAT-N24穿膜融合多肽 ht29细胞 肿瘤分子治疗

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Hath1基因抑制结肠癌细胞的增殖 被引量：3

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作者 朱代华 龚建平 +2 位作者 任柯 孙建明 魏思东 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1005-1008,1011,共5页

目的研究Hath1基因对结肠癌细胞增殖的影响。方法将重组质粒pcDNA3.1(+)-Hath1转化至HT29结肠癌细胞中,随机挑选3个过表达Hath1的HT29细胞克隆,通过定量实时RT-PCR方法检测Hath1 mRNA、Muc2mRNA的表达;Western blotting检测Hath1、Muc2... 目的研究Hath1基因对结肠癌细胞增殖的影响。方法将重组质粒pcDNA3.1(+)-Hath1转化至HT29结肠癌细胞中,随机挑选3个过表达Hath1的HT29细胞克隆,通过定量实时RT-PCR方法检测Hath1 mRNA、Muc2mRNA的表达;Western blotting检测Hath1、Muc2、cyclinD1和p27表达;通过软琼脂克隆形成实验和裸鼠移植实验,观察Hath1基因对HT29细胞增殖能力的影响。结果 Hath1基因可上调p27和下调cyclinD1的表达,抑制HT29细胞的增殖。结论 Hath1基因可能在结肠癌的发病中扮演抗癌基因的作用。 展开更多

关键词 Hath1基因 结肠肿瘤 ht29 MUC2 CYCLIND1 P27

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