本研究旨在探讨肝复胶囊(Gan Fu capsule, GFC)对TGF-1诱导HSC-T6细胞增殖的影响及作用机制。试验采用制备空白血清和GFC含药血清,体外培养HSC-T6细胞24 h后,CCK8法筛选最佳给药血清浓度,采用不同浓度TGF-1诱导HSC-T6细胞,CCK8法筛选最...本研究旨在探讨肝复胶囊(Gan Fu capsule, GFC)对TGF-1诱导HSC-T6细胞增殖的影响及作用机制。试验采用制备空白血清和GFC含药血清,体外培养HSC-T6细胞24 h后,CCK8法筛选最佳给药血清浓度,采用不同浓度TGF-1诱导HSC-T6细胞,CCK8法筛选最佳造模浓度,将细胞分为空白组(CON)、模型组(MOD)、肝复胶囊低剂量组(GFC-L)、肝复胶囊中剂量组(GFC-M)、肝复胶囊高剂量组(GFC-H),采用细胞增殖检测(CCK8)法检测各组细胞增殖情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-6、IL-1 、TNF-含量,蛋白免疫印记试验(Western blot)检测各细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis associated speck-like protein containing a caspase activating recruitment domain, ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(Cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)及-平滑肌动蛋白(Alpha-smooth muscle actin,-SMA)的表达。结果表明,与CON组相比,GFC能抑制HSC-T6细胞的增殖能力,减少HSC分泌IL-6、IL-1 、TNF-含量,降低HSC中NLRP3、ASC、Caspase-1及-SMA的表达量。GFC可能通过调节NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路和减少-SMA蛋白表达,从而抑制HSC-T6增殖,起到抗肝纤维化的作用。展开更多
目的观察三甲益肝颗粒(San Jia Yi Gan granula,SJG)含药血清对HSC-T6细胞形态、增殖和凋亡的作用,探讨SJG抗肝纤维化的细胞学基础。方法雄性SD大鼠30只按随机数字表法分为5组,每组6只,分别为生理盐水对照组(Control)、水飞蓟宾组(Sily...目的观察三甲益肝颗粒(San Jia Yi Gan granula,SJG)含药血清对HSC-T6细胞形态、增殖和凋亡的作用,探讨SJG抗肝纤维化的细胞学基础。方法雄性SD大鼠30只按随机数字表法分为5组,每组6只,分别为生理盐水对照组(Control)、水飞蓟宾组(Sily)、低剂量SJG组(SJG-L)、中剂量SJG组(SJG-M)和高剂量SJG组(SJG-H)。SJG按低、中、高(1.7、3.4、6.8g/kg)3个剂量灌胃大鼠制备含药血清,并用不同体积分数(5%、10%、20%、40%)SJG含药血清干预HSC-T6细胞株,用倒置相差显微镜观察HSC-T6细胞形态学的变化,MTT法检测SJG药物血清对HSC-T6细胞增殖的影响,流式细胞仪检测SJG药物血清诱导HSC-T6细胞早期凋亡。结果含药血清干预后,细胞形态发生明显改变:药物组细胞较对照组细胞明显减少,细胞间隙较宽,细胞皱缩,核染色质浓集呈球形。MTT实验结果显示各组药物血清均可抑制HSC-T6细胞的增殖,SJG-M、SJG-H组对HSC-T6细胞增殖的抑制均显著高于Sily组(P<0.05),SJG-L组与Sily组对HSC-T6细胞增殖的抑制无显著差异(P>0.05)。SJG-M、SJG-H组凋亡率分别为(7.09±1.04)%、(11.63±1.53)%,显著高于Sily组[(4.38±1.07)%]、SJG-L组[(4.17±0.30)%]和对照组[(1.74±0.11)%]。与对照组比较,各药物血清干预组细胞凋亡数明显增加,以SJG-H组增加最为明显。结论SJG含药血清可显著抑制HSC-T6细胞的活化、增殖,并诱导其凋亡。展开更多
文摘目的观察三甲益肝颗粒(San Jia Yi Gan granula,SJG)含药血清对HSC-T6细胞形态、增殖和凋亡的作用,探讨SJG抗肝纤维化的细胞学基础。方法雄性SD大鼠30只按随机数字表法分为5组,每组6只,分别为生理盐水对照组(Control)、水飞蓟宾组(Sily)、低剂量SJG组(SJG-L)、中剂量SJG组(SJG-M)和高剂量SJG组(SJG-H)。SJG按低、中、高(1.7、3.4、6.8g/kg)3个剂量灌胃大鼠制备含药血清,并用不同体积分数(5%、10%、20%、40%)SJG含药血清干预HSC-T6细胞株,用倒置相差显微镜观察HSC-T6细胞形态学的变化,MTT法检测SJG药物血清对HSC-T6细胞增殖的影响,流式细胞仪检测SJG药物血清诱导HSC-T6细胞早期凋亡。结果含药血清干预后,细胞形态发生明显改变:药物组细胞较对照组细胞明显减少,细胞间隙较宽,细胞皱缩,核染色质浓集呈球形。MTT实验结果显示各组药物血清均可抑制HSC-T6细胞的增殖,SJG-M、SJG-H组对HSC-T6细胞增殖的抑制均显著高于Sily组(P<0.05),SJG-L组与Sily组对HSC-T6细胞增殖的抑制无显著差异(P>0.05)。SJG-M、SJG-H组凋亡率分别为(7.09±1.04)%、(11.63±1.53)%,显著高于Sily组[(4.38±1.07)%]、SJG-L组[(4.17±0.30)%]和对照组[(1.74±0.11)%]。与对照组比较,各药物血清干预组细胞凋亡数明显增加,以SJG-H组增加最为明显。结论SJG含药血清可显著抑制HSC-T6细胞的活化、增殖,并诱导其凋亡。
