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下调Hsa-circ-0101216表达对胰腺癌吉西他滨化疗耐药的影响及其机制
1
作者 刘海潮 刘少朋 +5 位作者 闫宏宪 白明辉 张继翔 李迎博 王闯 邹凯 《解放军医学杂志》 北大核心 2025年第6期656-664,共9页
目的分析Hsa-circ-0101216对胰腺癌吉西他滨(GEM)化疗耐药的影响及其机制。方法采用GEO数据库分析筛选胰腺癌GEM耐药细胞与亲本细胞间差异表达的circRNAs。采用间歇浓度梯度递增法构建胰腺癌GEM耐药细胞株(BxPC-3-GEM、Capan-1-GEM),采... 目的分析Hsa-circ-0101216对胰腺癌吉西他滨(GEM)化疗耐药的影响及其机制。方法采用GEO数据库分析筛选胰腺癌GEM耐药细胞与亲本细胞间差异表达的circRNAs。采用间歇浓度梯度递增法构建胰腺癌GEM耐药细胞株(BxPC-3-GEM、Capan-1-GEM),采用qRT-PCR检测细胞中Hsa-circ-0101216的表达情况。取胰腺癌GEM耐药细胞,设置sh-circ-0101216组(敲低circ-0101216)、sh-NC组(转染sh-NC)、空白对照组(不做任何处理),采用CCK-8法、EdU增殖实验检测各组细胞的GEM半数抑制浓度(IC50)及增殖能力,Western blotting检测多药耐药相关蛋白1(MRP1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、人类平衡型核苷转运体-1(hENT-1)的表达情况。构建人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,并设置sh-NC+GEM组与sh-circ-0101216+GEM组(n=6),比较两组裸鼠移植瘤体积及重量变化,采用Western blotting及免疫组化法检测移植瘤组织中MRP1、BCRP、hENT-1蛋白的表达,EdU增殖实验检测肿瘤细胞增殖能力。结果GEO数据库筛选出的胰腺癌GEM耐药细胞株中存在Hsa-circ-0101216表达上调。成功构建胰腺癌GEM耐药细胞株,且胰腺癌GEM耐药细胞BxPC-3-GEM、Capan-1-GEM中Hsa-circ-0101216表达水平及IC50值明显高于亲本细胞(P<0.05)。sh-circ-0101216组胰腺癌GEM耐药细胞BxPC-3-GEM、Capan-1-GEM中GEM IC50值、细胞活力、EdU阳性率及MRP1、BCRP蛋白表达水平均明显低于空白对照组及sh-NC组,hENT-1蛋白表达水平明显高于空白对照组及sh-NC组(P<0.05或P<0.001)。sh-circ-0101216+GEM组裸鼠皮下移植瘤重量、体积,瘤体内MRP1、BCRP蛋白表达水平和阳性表达率,以及EdU阳性率均明显低于sh-NC+GEM组,hENT-1蛋白表达水平及阳性表达率明显高于sh-NC+GEM组(P<0.05)。结论Hsa-circ-0101216在GEM耐药的胰腺癌细胞中高表达,敲低后可抑制胰腺癌细胞增殖,并增强胰腺癌细胞对GEM的化疗敏感性,其机制可能与调节跨膜转运蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 hsa-circ-0101216 胰腺癌 吉西他滨 增殖
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hsa-miR-126和hsa-miR-518b在食管鳞癌中的表达 被引量：10
2
作者 蔡惠 王健生 +2 位作者 张明鑫 段小艺 马仁强 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期23-27,共5页
目的探讨食管鳞癌及正常组织微小RNA(miRNA)分子表达谱的差异,寻找并验证具有差异表达的miRNA。方法随机选3例首次诊治食管鳞癌患者的手术切除标本,取癌组织及正常粘膜。采用荧光探针杂交芯片扫描技术,获得食管鳞癌miRNA表达谱,并对表... 目的探讨食管鳞癌及正常组织微小RNA(miRNA)分子表达谱的差异,寻找并验证具有差异表达的miRNA。方法随机选3例首次诊治食管鳞癌患者的手术切除标本,取癌组织及正常粘膜。采用荧光探针杂交芯片扫描技术,获得食管鳞癌miRNA表达谱,并对表达谱的可靠性进行荧光实时定量RT-PCR验证。另取15例首次诊治食管鳞癌患者手术切除标本的癌组织及正常粘膜,对其中具有表达差异的hsa-miR-126和hsa-miR-518b进行进一步验证。结果得到了食管鳞癌及正常组织的MicroRNA表达谱,分析得到表达变化且具有统计学意义(单侧t检验,P<0.05)的miRNA11个,其中上调1个,下调10个。在另外15对验证样本中,hsa-miR-126上调10例(配对t检验,P<0.05),hsa-miR-518b下调12例(配对t检验,P<0.05)。结论 hsa-miR-126和hsa-miR-518b在食管鳞癌组织和正常组织中存在差异表达,hsa-miR-126在食管癌组织中上调,hsa-miR-518b下调。 展开更多
关键词 食管鳞癌 hsa-miR-126 hsa-miR-518b MIRNA
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肿瘤源性外泌体hsa-miR-29c-3p通过靶向ATAD2B调控宫颈鳞状细胞癌的血管生成
3
作者 张芳 李亚 +1 位作者 周菲 谭松红 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第2期151-160,共10页
目的:探讨宫颈癌(CC)细胞SiHa源性外泌体hsa-miR-29c-3p在CC血管生成中的作用。方法∶收集2019年1月至2021年12月在衡阳市中心医院妇科就诊的45例宫颈鳞状细胞癌(CSCC)患者的癌组织标本和15例正常宫颈组织标本。常规培养SiHa细胞和人脐... 目的:探讨宫颈癌(CC)细胞SiHa源性外泌体hsa-miR-29c-3p在CC血管生成中的作用。方法∶收集2019年1月至2021年12月在衡阳市中心医院妇科就诊的45例宫颈鳞状细胞癌(CSCC)患者的癌组织标本和15例正常宫颈组织标本。常规培养SiHa细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVEC),用Lipofectamine 2000将hsa-miR-29c-3p、miRNA-NC、si-hsa-miR-29c-3p和si-miRNA-NC转染至SiHa细胞中,记为miRNA-NC组、hsa-miR-29c-3p组、si-miRNA-NC组和si-hsa-miR-29c-3p组。用Lipofectamine 2000将mimic-NC、miR-29c-3p-mimic、pCMV-NC、pCMV-含AAA结构域的ATPase家族蛋白2B(ATAD2B)载体分别转染HUVEC,记为mimic-NC组、miR-29c-3p-mimic组、pCMV-NC组、pCMV-ATAD2B组和pCMV-ATAD2B+miR-29c-3p-mimic组。原位杂交(ISH)法检测CSCC组织中hsa-miR-29c-3p的表达,免疫组化(IHC)法检测CSCC组织和移植瘤组织中的CD31阳性血管。分离纯化SiHa、C33a细胞来源的外泌体,用透射电镜技术和WB法对其表征进行鉴定及进行HUVEC摄取实验。qPCR法检测SiHa、C33a细胞和外泌体中hsa-miR-29c-3p和ATAD2B mRNA的表达。成管试验、Transwell小室实验和划痕愈合实验检测外泌体对HUVEC成管和迁移能力的影响。双萤光素酶报告基因实验验证hsa-miR-29c-3p与ATAD2B的靶向结合关系,移植瘤实验检测各组SiHa细胞来源外泌体对移植瘤生长和血管增生的影响。结果:hsa-miR-29c-3p在CSCC组织中呈高表达且与其微血管密度(MVD)正相关(均P<0.05);SiHa、C33a细胞来源的外泌体完全符合典型外泌体形态和蛋白表达表征;在体外HUVEC摄取SiHa、C33a细胞来源的外泌体和其包含的hsa-miR-29c-3p;SiHa细胞来源的外泌体hsa-miR-29c-3p可在体外促进HUVEC的成管和迁移能力(均P<0.05);SiHa细胞来源的外泌体hsa-miR-29c-3p可促进移植瘤生长和血管增生;hsa-miR-29c-3p可与ATAD2B基因直接结合并调节其表达(均P<0.05)。过表达ATAD2B可逆转hsa-miR-29c-3p对HUVEC的成管、迁移和划痕愈合能力的促进作用(均P<0.05)。结论:SiHa细胞源性外泌体hsa-miR-29c-3p通过靶向ATAD2B调控CSCC组织中的血管生成。外泌体hsa-miR-29c-3p可能是CC诊疗的潜在标志物和治疗靶点。 展开更多
关键词 宫颈鳞状细胞癌 外泌体 SiHa细胞 人脐静脉内皮细胞 血管生成 hsa-miR-29c-3p 含AAA结构域的ATPase家族蛋白2B(ATAD2B)
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心血池显像剂^(99m)Tc-HYNIC-HSA的合成及小鼠生物分布研究 被引量：2
4
作者 杨建权 郭海勋 王学斌 《北京师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期89-95,共7页
合成了双功能联结剂肼基烟酰胺 (HYNIC) ,经过了 1 HNMR的确认 .用 HYNIC与人血清白蛋白 (HSA)偶联 ,经过透析纯化后得到 HYNIC- HSA.用 Sn Cl2 作为还原剂 ,EDTA作为共配体所制得的 99m Tc- HYNIC- HSA的放化纯度高于 90 % .其小鼠体... 合成了双功能联结剂肼基烟酰胺 (HYNIC) ,经过了 1 HNMR的确认 .用 HYNIC与人血清白蛋白 (HSA)偶联 ,经过透析纯化后得到 HYNIC- HSA.用 Sn Cl2 作为还原剂 ,EDTA作为共配体所制得的 99m Tc- HYNIC- HSA的放化纯度高于 90 % .其小鼠体内生物分布实验表明 99m Tc-HYNIC- HSA在血液内的摄取和滞留情况明显优于其他方法标记的 HSA,与已用于临床的 99m Tc-DMP- HSA相似 ,是一种很有潜力的新型心血池显像剂 . 展开更多
关键词 心血池显像剂 双功能联结剂 肼基烟酰胺(HYNIC) HYNIC-hsa ^99mTc-HYNIC-hsa
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中药单体川楝素介导hsa-circ-0025583/hsa-miR-671-5p/SYNGR2轴调控乳腺癌生长的分子机制研究 被引量：1
5
作者 殷飞 倪毅 +4 位作者 刘伟 钱炜伟 刘蕾 马家礼 许桐林 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第6期216-219,共4页
目的 探究中药单体川楝素介导的hsa-circ-0025583/hsa-miR-671-5p/SYNGR2轴调控乳腺癌生长的分子机制。方法 选取南通第三人民医院乳腺外科于2020年4月—2022年4月收治的乳腺癌患者40例为研究对象,患者均在医院进行手术,取患者乳腺癌及... 目的 探究中药单体川楝素介导的hsa-circ-0025583/hsa-miR-671-5p/SYNGR2轴调控乳腺癌生长的分子机制。方法 选取南通第三人民医院乳腺外科于2020年4月—2022年4月收治的乳腺癌患者40例为研究对象,患者均在医院进行手术,取患者乳腺癌及癌旁组织作为实验材料,采用定量荧光聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction, qPCR)对其hsa-circ-0025583及SYNGR2的表达水平进行测定;取乳腺癌细胞株T47D细胞,加入不同浓度的川楝素,比较不同浓度川楝素对细胞增殖的抑制率;对所选乳腺癌细胞株系进行预处理,A组不进行特殊处理,B组中加入0.5μmol/L的川楝素,C组对乳腺癌细胞进行转染,敲除hsa-miR-671-5p,并向其中加入0.5μmol/L的川楝素,比较其hsa-circ-0025583及SYNGR2的表达水平,上述实验重复3次。结果 与正常癌旁组织相比较,乳腺癌组织中提取的hsa-circ-0025583及SYNGR2 mRNA表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。hsa-circ-0025583及SYNGR2 mRNA在乳腺癌组织中均低表达,具有正相关性(r=0.965,P<0.05)。随着川楝素浓度的升高,乳腺癌细胞增殖的抑制率逐渐升高,且与0μmol/L浓度组比较均具有统计学意义(P<0.05)。对数据进行处理,得出乳腺癌细胞在24 h及48 h的半数抑制浓度分别为0.78μmol/L、0.49μmol/L。与A、C组相比较,B组的hsa-circ-0025583及SYNGR2 mRNA的表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);但A、C组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与A、C组相比较,B组24 h及48 h侵袭细胞数量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);但A、C组间侵袭细胞数量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 川楝素通过介导hsa-circ-0025583/hsa-miR-671-5p/SYNGR2轴调控hsa-circ-0025583及SYNGR2水平,进而影响乳腺癌细胞的增殖及侵袭能力,抑制乳腺癌细胞的生长。 展开更多
关键词 中药单体川楝素 hsa-circ-0025583 hsa-miR-671-5p SYNGR2 乳腺癌
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等离子点时钴－HSA金属中心的结构 被引量：4
6
作者 梁宏 杨勇飞 +3 位作者 李俊 卢方平 周永洽 申泮文 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1996年第3期70-73,共4页
用紫外光谱研究了等离子点时１：１Ｃｏ（Ⅱ）－ＨＳＡ配合物金属中心的结构，结果表明：该配合物的中心钴在低浓度时以Ｃｏ（Ⅱ）和Ｃｏ（Ⅲ）两种氧化态共存，高浓度时（＞３．０×１０－４ｍｏｌ·Ｌ－１）仅以Ｃｏ（Ⅲ）氧... 用紫外光谱研究了等离子点时１：１Ｃｏ（Ⅱ）－ＨＳＡ配合物金属中心的结构，结果表明：该配合物的中心钴在低浓度时以Ｃｏ（Ⅱ）和Ｃｏ（Ⅲ）两种氧化态共存，高浓度时（＞３．０×１０－４ｍｏｌ·Ｌ－１）仅以Ｃｏ（Ⅲ）氧化态存在；且金属中心随着浓度增大发生＂八面体→四方锥→四方平面＂的构型变化。与生理ｐＨ时金属中心的结构存在显著差别，可用ｐＨ效应加以解释。 展开更多
关键词 钴配合物 hsa 金属中心 PH效应 紫外光谱
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对氯苯甲酸构筑的铜(Ⅱ)配合物的合成、HSA结合及细胞毒性 被引量：6
7
作者 曾振芳 袁芳 +3 位作者 黄秋萍 庞华钰 杨红兰 黄秋婵 《人工晶体学报》 CAS 北大核心 2022年第1期126-131,共6页
本文合成了配合物[Cu(pcba)_(2)·(phen)(H_(2) O)](pcba=对氯苯甲酸,phen=1,10-邻菲罗啉),该配合物属于三斜晶系,P1空间群,晶胞参数为a=0.79098(2)nm,b=1.07240(4)nm,c=1.48719(6)nm,α=100.613(3)°,β=95.239(3)°,γ=10... 本文合成了配合物[Cu(pcba)_(2)·(phen)(H_(2) O)](pcba=对氯苯甲酸,phen=1,10-邻菲罗啉),该配合物属于三斜晶系,P1空间群,晶胞参数为a=0.79098(2)nm,b=1.07240(4)nm,c=1.48719(6)nm,α=100.613(3)°,β=95.239(3)°,γ=108.334(3)°,Z=2,D c=1.638 g·cm^(-3),F(000)=582,最终结构残差因子R_(1)=0.0359,wR_(2)=0.0891。采用紫外及荧光研究了配合物和人血清蛋白(HSA)的相互作用方式。结果表明,配合物静态猝灭HSA荧光,可求得配合物与HSA的猝灭常数K_(sv)=2.35×10^(5)L·mol^(-1),猝灭速率常数K_(q)=2.35×10^(13) L·mol^(-1)·s^(-1),结合常数为K_(a)=2.14×10^(13)L·mol^(-1),结合位点n=2.37。同时,研究了配合物对胃癌细胞A549、宫颈癌细胞Hela和肝癌细胞HepG2的抗增殖能力。 展开更多
关键词 配合物 铜金属配合物 人血清蛋白 对氯苯甲酸 铜(Ⅱ) hsa结合 细胞毒性
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Hsa-miR-193b抑制人子宫内膜腺癌细胞株HEC-1B侵袭能力 被引量：4
8
作者 李荣 陈雪梅 +5 位作者 何俊琳 丁裕斌 杨德辉 许皓 郑安舜 刘学庆 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第15期1594-1597,共4页
目的探讨Hsa-miR-193b对人子宫内膜腺癌细胞系HEC-1B侵袭的影响及其相关机制。方法将Hsa-miR-193b模拟物(mimics)、Hsa-miR-193b抑制剂(inhibitor)转染HEC-1B细胞,Real-time PCR证实转染是否成功;Transwell小室法检测转染Hsa-miR-193b m... 目的探讨Hsa-miR-193b对人子宫内膜腺癌细胞系HEC-1B侵袭的影响及其相关机制。方法将Hsa-miR-193b模拟物(mimics)、Hsa-miR-193b抑制剂(inhibitor)转染HEC-1B细胞,Real-time PCR证实转染是否成功;Transwell小室法检测转染Hsa-miR-193b mimics后HEC-1B细胞的侵袭能力;通过miRGen、Targetscan、Pictar数据库筛查Hsa-miR-193b指向与侵袭相关的靶基因;Real-time PCR检测转染Hsa-miR-193b mimics转染组和对照组mRNA水平;Western blot检测各组GRB7蛋白表达的水平。结果①Hsa-miR-193b mimics、Hsa-miR-193b inhibitor转染HEC-1B细胞成功,两转染组Hsa-miR-193b表达水平与未转染组比较差异有统计学意义(P<0.05)。②转染Hsa-miR-193b mimics组与对照组比较,肿瘤细胞的侵袭能力明显降低(P<0.05)。③转染后,靶基因GRB7蛋白Hsa-miR-193b mimics组表达下降(P<0.05)、Hsa-miR-193b inhibitor组表达增加(P<0.05),且各组GRB7 mRNA水平无显著变化。结论在HEC-1B中转染Hsa-miR-193b mimics能下调GRB7蛋白表达,并抑制HEC-1B细胞的侵袭。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 hsa—miR-193b GRB7 侵袭
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Hsa-miR-186在结肠癌细胞中的表达及作用 被引量：6
9
作者 陈芳 周畅 +4 位作者 陆艳霞 袁理 彭皤莉 郑林 李学农 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期654-660,共7页
目的检测hsa-miR-186在结肠癌组织及细胞中的表达,探讨hsa-mir-186对结肠癌细胞生物学特性的影响及作用。方法应用实时荧光定量PCR检测了miR-186在12对配对的结肠癌组织、癌旁组织和5株结肠癌细胞中的表达情况;扩增包含miR-186前体序列... 目的检测hsa-miR-186在结肠癌组织及细胞中的表达,探讨hsa-mir-186对结肠癌细胞生物学特性的影响及作用。方法应用实时荧光定量PCR检测了miR-186在12对配对的结肠癌组织、癌旁组织和5株结肠癌细胞中的表达情况;扩增包含miR-186前体序列在内的基因片段,并将其克隆至PLVYHM载体,将PLVTHM-miR186质粒转染SW620细胞,流式分选慢病毒感染的SW620细胞;CCK-8法、划痕实验和Transwell检测细胞检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。Western Blot检测靶基因YY1蛋白水平的表达。结果与癌组织相比,12例癌组织中miR-186的平均表达量为0.0024±0.0027-显著低于癌旁组织的0-066±0.068,P=0.008;miR-186在高转移潜能的人结肠癌细胞SW620和LOVO相对表达量分别为0.118±0.138和0.157±0.001,与在低转移潜能HT-29细胞中表达量1.000±0.00,差异具有统计学意义P<0.05;质粒双酶切及测序鉴定PLVTHM-hsa-miRl86重组质粒构建成功;荧光定量PCR表明稳定过表达miR-186的结肠癌细胞株SW620构建成功,且过表达miR-186后降低了细胞的增殖、迁移及侵袭能力,差异均具有统计学意义P<0.05。稳定过表达miR-186的细胞中,miR-186的表达明显高于对照组和未处理组,YY1蛋白质水平有所下降。结论 hsa-miR-186在结肠癌组织以及在高转移潜能的人结肠癌细胞SW620、L0VO中低表达,具有类似抑癌基因的作用;成功构建PLVTHM-miR186慢病毒重组质粒,并稳定转染结肠癌细胞SW620,抑制了细胞的增殖、迁移和侵袭能力。miR-186调控YY1表达可能是抑制结直肠癌生物特性的重要机制之一。 展开更多
关键词 结肠癌细胞 hsa MIR 186 慢病毒 增殖 迁移 侵袭
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金属-血清白蛋白的结构研究(Ⅴ)——钴离子与HSA和BSA的相互作用 被引量：5
10
作者 周永洽 刘宏 +1 位作者 车云霞 申泮文 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1991年第4期441-443,共3页
血清白蛋白是血清中含量最丰富的蛋白质,是多种金属离子的输运蛋白。钴(Ⅱ)离子在金属蛋白研究中经常被用作光谱探针。但Co(Ⅱ)与血清白蛋白的相互作用却很少被研究。50年代Rao和Lal用光谱和电泳法推断,Co(Ⅱ)与BSA(Bovine serum album... 血清白蛋白是血清中含量最丰富的蛋白质,是多种金属离子的输运蛋白。钴(Ⅱ)离子在金属蛋白研究中经常被用作光谱探针。但Co(Ⅱ)与血清白蛋白的相互作用却很少被研究。50年代Rao和Lal用光谱和电泳法推断,Co(Ⅱ)与BSA(Bovine serum albumin,牛血清白蛋白)的结合仅有羧基参与,但他们未能解释为何含氮基团完全不参与配位。本文利用紫外光谱发现在生理pH条件下,钴离子与HSA(Human serum albumin,人血清白蛋白)和BSA的1:1配合物可能有包含羧基和α-NH_2基的混合配位环境,取六配位的八面体构型,金属离子以Co(Ⅱ)和Co(Ⅲ)两种氧化态存在。 展开更多
关键词 金属 血清 清蛋白 钴离子 hsa BSA
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hsa-miR-125a-5p促进非小细胞肺癌细胞侵袭 被引量：8
11
作者 江黎黎 张清富 +2 位作者 常继红 邱雪杉 王恩华 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第9期951-955,共5页
背景与目的microRNAs(miRNAs)是小的非编码RNA,它们通过与靶mRNA不完全互补连接的方式转录后调控靶基因的表达。尽管一些失常的miRNA调节机制在人许多恶性肿瘤中被发现,但是,hsa-miR-125a-5p在肺癌细胞中的表达及功能还尚不清楚。本研... 背景与目的microRNAs(miRNAs)是小的非编码RNA,它们通过与靶mRNA不完全互补连接的方式转录后调控靶基因的表达。尽管一些失常的miRNA调节机制在人许多恶性肿瘤中被发现,但是,hsa-miR-125a-5p在肺癌细胞中的表达及功能还尚不清楚。本研究探讨了hsa-miR-125a-5p在非小细胞肺癌细胞中的表达及其与肺癌细胞侵袭的关系。方法应用real-timePCR的方法检测了hsa-miR-125a-5p在6种肺癌细胞系中的表达情况,并在A549细胞中分别转染正义的hsa-miR-125a-5p2’-O-甲基寡核苷酸24h、36h、48h、60h和72h后检测hsa-miR-125a-5p的表达情况。同时应用transwell小室观察上调hsa-miR-125a-5p后,A549细胞侵袭能力的变化。结果hsa-miR-125a-5p在6种肺癌细胞系中低表达,以LH7、NCI-H460、SPC-A-1和A549细胞最为明显。在A549细胞中,转染正义的hsa-miR-125a-5p2’-O-甲基寡核苷酸36h后,hsa-miR-125a-5p表达最高,并进一步发现,上调hsa-miR-125a-5p后A549和NCI-H460细胞侵袭能力增强。结论hsa-miR-125a-5p在肺癌细胞中低表达,但上调hsa-miR-125a-5p能够促进A549和NCI-H460细胞侵袭。 展开更多
关键词 MICRORNA MIRNA hsa-miR-125a-5p 肺肿瘤 侵袭
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等离子点附近Ni(Ⅱ)-HSA金属中心的结构 被引量：2
12
作者 梁宏 罗锦新 +2 位作者 闭献树 周永洽 申泮文 《广西师范大学学报（自然科学版）》 CAS 1993年第1期41-46,共6页
在等离子点附近研究了Ni(Ⅱ)-HSA配合物的紫外光谱,发现:与生理pH时的双金属中心结构不同,在等离子点附近,Ni(Ⅱ)-HSA仅存在一个金属中心,这一金属中心在浓度低于2.5×10^(-4)M时是五配位的四方锥构型,高于这一浓度时是四配位的四... 在等离子点附近研究了Ni(Ⅱ)-HSA配合物的紫外光谱,发现:与生理pH时的双金属中心结构不同,在等离子点附近,Ni(Ⅱ)-HSA仅存在一个金属中心,这一金属中心在浓度低于2.5×10^(-4)M时是五配位的四方锥构型,高于这一浓度时是四配位的四方平面构型。这一差异可由pH效应加以解释。 展开更多
关键词 LMCT谱带 构型 镍 hsa 络合物
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光谱法和分子对接模拟研究去甲斑蝥素酰亚胺缩肉桂醛与HSA的作用机制
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作者 曾造 解成跃 +3 位作者 樊乙宁 赵焉灵 李燕 张浩 《化学研究与应用》 北大核心 2025年第10期3069-3076,共8页
本文以去甲斑蝥素、水合肼和肉桂醛为原料,通过胺化、缩合等反应得到目标化合物NCICⅠ、NCICⅡ,其结构经NMR证实。采用光谱法和分子对接模拟研究目标产物与HSA的相互作用机制。荧光光谱实验表明,NCICⅠ、NCICⅡ对HSA的猝灭机制均为静态... 本文以去甲斑蝥素、水合肼和肉桂醛为原料,通过胺化、缩合等反应得到目标化合物NCICⅠ、NCICⅡ,其结构经NMR证实。采用光谱法和分子对接模拟研究目标产物与HSA的相互作用机制。荧光光谱实验表明,NCICⅠ、NCICⅡ对HSA的猝灭机制均为静态猝灭,NCICⅠ在288、293和308 K时猝灭常数分别为7.98×10^(12)、7.15×10^(12)和4.69×10^(12)L·mol^(-1),308K时结合位点数为1.07。NCICⅡ在288、293和308K时猝灭常数分别为1.31×10^(12)、1.03×10^(12)和9.38×10^(11)L·mol^(-1),,288 K时结合位点数为0.89。三维荧光光谱表明,NCICⅠ、NCICⅡ使HSA中氨基酸残基周围的微环境极性增强,疏水性减弱。通过热力学数据分析,焓变(ΔH)与熵变(ΔS)均小于零,因此NCICⅠ、NCICⅡ与人血清白蛋白之间的作用力主要是范德华力和氢键。分子对接模拟表明,NCIC与HSA主要存在氢键作用,NCICⅠ与HSA在亚结构域ⅡA(siteⅠ)结合,NCICⅡ与HSA在亚结构域ⅢA(siteⅡ)结合。 展开更多
关键词 去甲斑蝥素衍生物 人血清白蛋白 分子对接模拟 光谱法
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hsa-miR-125a-5p通过上调Rock-1表达促进肺癌细胞侵袭 被引量：6
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作者 江黎黎 张清富 +2 位作者 常继红 邱雪杉 王恩华 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第10期1069-1073,共5页
背景与目的MicroRNAs(miRNAs)是广泛存在于真核生物体中的内源性非编码的小分子RNA,通过与靶mRNA不完全互补连接的方式转录后调控靶基因的表达,影响了生物的许多复杂的生命过程。本研究探讨了hsa-miR-125a-5p促进肺癌细胞侵袭的作用机... 背景与目的MicroRNAs(miRNAs)是广泛存在于真核生物体中的内源性非编码的小分子RNA,通过与靶mRNA不完全互补连接的方式转录后调控靶基因的表达,影响了生物的许多复杂的生命过程。本研究探讨了hsa-miR-125a-5p促进肺癌细胞侵袭的作用机制。方法应用microRNA.org靶基因预测资源预测hsa-miR-125a-5p的靶基因及其结合位点,并进一步根据预测结果用RT-PCR和Western blot的方法检测了Rock-1的mRNA及蛋白的表达情况。用Rock-1抗体阻断的方法,检测转染正义的hsa-miR-125a-5p2’-O-甲基寡核苷酸后A549细胞侵袭能力的变化。结果转染正义的hsa-miR-125a-5p2’-O-甲基寡核苷酸36h后,A549细胞中Rock-1 mRNA和蛋白表达均增加,在转染反义的hsa-miR-125a-5p2’-O-甲基寡核苷酸的A549细胞中则减少。Transwell小室的结果显示,与未阻断组相比较,阻断Rock-1后,转染正义的hsa-miR-125a-5p2’-O-甲基寡核苷酸的A549细胞侵袭能力减弱。结论hsa-miR-125a-5p能够上调Rock-1的表达,并促进肺癌细胞侵袭。 展开更多
关键词 MICRORNA hsa-miR-125a-5p 肺肿瘤 侵袭
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Hsa-miR-181a在子宫内膜癌变过程中的表达及意义 被引量：4
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作者 何淑明 曾淑梅 +1 位作者 陈秀卿 梁秋红 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第12期1895-1897,共3页
目的:探讨hsa-miR-181a(miR-181a)在子宫内膜癌变过程中的表达及其意义。方法:选取甲醛固定石蜡包埋组织75例,其中正常子宫内膜13例,子宫内膜增生症18例,子宫内膜癌44例。提取总RNA,采用实时荧光定量PCR技术检测各组子宫内膜组织中miR-1... 目的:探讨hsa-miR-181a(miR-181a)在子宫内膜癌变过程中的表达及其意义。方法:选取甲醛固定石蜡包埋组织75例,其中正常子宫内膜13例,子宫内膜增生症18例,子宫内膜癌44例。提取总RNA,采用实时荧光定量PCR技术检测各组子宫内膜组织中miR-181a的表达量。结果:在甲醛固定石蜡包埋组织中可检测到miR-181a的表达。miR-181a在子宫内膜癌组织中的表达高于子宫内膜增生症,在子宫内膜增生症组织中的表达高于正常子宫内膜,差异均有统计学意义(P<0.05);miR-181a的表达与FIGO分期有关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-181a在子宫内膜癌组织中表达上调,可能起到了癌基因的作用;miR-181a在子宫内膜癌变过程中的差异表达可能与子宫内膜癌的发生、发展有关。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 hsa—miR-181a MICRORNA 甲醛固定石蜡包埋组织
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Hsa-miR-125b在人胃癌耐药细胞株中的表达及其靶基因的功能分析 被引量：4
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作者 程燕 陈琳 +2 位作者 曹忻 哈斯其美格 谢小冬 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期119-126,共8页
研究表明,Hsa-miR-125b在人胃癌耐氟尿嘧啶细胞株BGC823/Fu中表达下降。为进一步探讨hsa-miR-125b在获得性耐药中所起的作用,文章应用miRbase、靶基因预测软件、Gene Ontology数据库及KEGG数据库对hsa-miR-125b的序列特征、进化保守性... 研究表明,Hsa-miR-125b在人胃癌耐氟尿嘧啶细胞株BGC823/Fu中表达下降。为进一步探讨hsa-miR-125b在获得性耐药中所起的作用,文章应用miRbase、靶基因预测软件、Gene Ontology数据库及KEGG数据库对hsa-miR-125b的序列特征、进化保守性、靶基因及功能以及靶基因所参与的信号通路等进行了深入的生物信息学分析。结果显示:has-miR-125b在多个物种之间具有高度序列保守性;通过软件预测获得hsa-miR-125b靶基因79个,其分子功能包括转录调节、蛋白质结合和肽酶类活性等(P<0.001),其所参与的生物学过程主要有细胞周期、细胞增殖、细胞凋亡的正性或负性调控以及细胞因子刺激反应性、药物反应性、DNA损伤反应性等(P<0.001),调控包括MAPK、Wnt、p53等多条信号转导通路(P<0.01)。上述结果表明hsa-miR-125b可能参与调控多个生物学过程和信号转导通路,而其中细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期等生物学过程以及MAPK、Wnt、p53等信号通路已被证实与肿瘤耐药的发生有关。因此,hsa-miR-125b可能通过调控上述环节中的靶基因来影响肿瘤细胞对药物的敏感性,从而为hsa-miR-125b在肿瘤耐药中的作用机制提供新的研究线索。 展开更多
关键词 hsa-miR-125b 生物信息学 靶基因 肿瘤化疗耐药 胃癌
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小麦热胁迫相关蛋白Hsa32基因的克隆 被引量：4
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作者 李国良 张红梅 周人纲 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第6期1-5,共5页
热胁迫相关蛋白Hsa32主要存在于陆生植物中,Hsa32参与植物获得性耐热性的维持。本研究以37℃热胁迫1 h的小麦幼苗叶子为材料,提取总RNA,结合RT-PCR和RACE的方法克隆获得小麦Hsa32基因,该基因完整的开放阅读框全长885 bp,编码294个氨基... 热胁迫相关蛋白Hsa32主要存在于陆生植物中,Hsa32参与植物获得性耐热性的维持。本研究以37℃热胁迫1 h的小麦幼苗叶子为材料,提取总RNA,结合RT-PCR和RACE的方法克隆获得小麦Hsa32基因,该基因完整的开放阅读框全长885 bp,编码294个氨基酸。编码的氨基酸与水稻中Hsa32(OsHsa32)同一性最高,达83%,与拟南芥中Hsa32(AtHsa32)有66%的同一性,与番茄中Hsa32(LeHsa32)有63%的同一性,由此将其命名为TaHsa32。Northern杂交结果表明,TaHsa32是一个诱导型热激蛋白。 展开更多
关键词 小麦 热激蛋白 hsa32 克隆
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hsa-miR-138的生物信息学分析及分子调控通路预测 被引量：3
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作者 孙丹 于萌 +2 位作者 郑明星 高营 朱育焱 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期481-486,共6页
目的对hsa-miR-138进行靶基因、功能富集分析(GO分析)、信号通路富集分析及转录因子预测等生物信息学分析,为后续深入研究hsa-miR-138功能提供实验验证的理论基础。方法通过UCSC基因组浏览器、Target Scan、starbase、DAVID及KEGG公共... 目的对hsa-miR-138进行靶基因、功能富集分析(GO分析)、信号通路富集分析及转录因子预测等生物信息学分析,为后续深入研究hsa-miR-138功能提供实验验证的理论基础。方法通过UCSC基因组浏览器、Target Scan、starbase、DAVID及KEGG公共数据库、Chipbase等在线工具分析hsa-miR-138序列,预测hsa-miR-138-1的靶基因,对预测的靶基因进行GO分析和信号通路富集分析,预测hsa-miR-138的可能转录调控因子。结果 hsa-miR-138序列在各物种间具有高度保守性。通过对目前文献的检索,发现hsa-miR-138-1的靶基因中既有抑癌基因,也有癌基因。GO分析发现hsa-miR-138-1靶基因主要富集在转录调控、转录、RNA代谢过程的调节、基因表达、生物大分子的合成等方面(P<0.01),KEGG通路分析提示相关信号通路主要涉及癌症通路、轴突导向、细胞内噬作用、Wnt信号转导、神经营养因子信号转导等重要生理病理过程。应用Chipbase预测出hsamiR-138的19个调控转录因子。结论 hsa-miR-138可能参与多种重要的生物学过程,并作为双向调节因子调控肿瘤的生物学行为。 展开更多
关键词 hsa-miR-138 生物信息学 靶基因 信号通路
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Hsa-miR9在伯基特淋巴瘤EBV^(+/-)细胞中的差异表达及其与BCL-6调控的关系 被引量：3
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作者 代新珍 陈少红 +4 位作者 葛娟 韩西群 周新华 吴自勍 赵彤 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期661-666,共6页
目的探究hsa-miR9在伯基特淋巴瘤细胞株EBV^+Raji/EBV-Ramous中差异表达及其与BCL-6的关系。方法荧光定量PCR检测hsa-miR9和BCL-6在EBV^+Raji和EBVRamous细胞中的表达;利用Oligofectamine 2000脂质体法将化学合成的hsa-miR9-inhibitor... 目的探究hsa-miR9在伯基特淋巴瘤细胞株EBV^+Raji/EBV-Ramous中差异表达及其与BCL-6的关系。方法荧光定量PCR检测hsa-miR9和BCL-6在EBV^+Raji和EBVRamous细胞中的表达;利用Oligofectamine 2000脂质体法将化学合成的hsa-miR9-inhibitor和随机序列转染高表达hsa-miR9的EBV^+Raji细胞(Raii-miR9-inhibitor组和Raji-CON组),hsa-miR9-mimics和相应的随机序列转染低表达hsa-miR9的EBVRamous细胞(Ramous-miR9-mimics组和Ramous-CON组);运用实时荧光定量PCR、Western blotting检测转染前后BCL-6的表达,AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡率和观测凋亡细胞形态。结果 hsa-miR9和BCL-6在EBV^+Raji细胞的表达水平显著高于EBVRamous细胞(P<0.01);EBV^+Raji细胞经转染hsa-miR9-inhibitor 48 h后,BCL-6基因和蛋白水平的表达量均降低,而EBVRamous细胞经转染hsa-miR9-mimics 48 h后,BCL-6基因和蛋白水平的表达量均升高,与相应的随机序列组相比均有显著性差异(P<0.05);转染48 h后Raji-miR9-inhibitor组凋亡率明显低于Raji-CON组,Ramous-miR9-mimics组凋亡率明显高于Ramous-CON组,差异具有统计学意义(P<0.05);Raji-CON组和Ramous-miR9-mimics组可见明显凋亡细胞。结论 hsa-miR9正向调控伯基特淋巴瘤细胞株EBV^+Raji/EBVRamous细胞BCL-6的表达和凋亡。 展开更多
关键词 伯基特淋巴瘤 hsa-miR9 BCL-6 RAJI细胞 Ramous细胞 凋亡
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hsa-miR-655靶向CLCF1基因对人成骨肉瘤MG63细胞OPG/RANKL系统表达的影响 被引量：3
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作者 陈娟 谢丽华 +4 位作者 李生强 许惠娟 陈赛楠 叶云金 葛继荣 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1409-1414,共6页
目的探讨hsa-miR-655通过靶向调控心肌营养素样细胞因子1(cardiotrophin-like cytokine factor 1,CLCF1)基因表达,对人成骨肉MG63细胞系增殖、护骨素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB li... 目的探讨hsa-miR-655通过靶向调控心肌营养素样细胞因子1(cardiotrophin-like cytokine factor 1,CLCF1)基因表达,对人成骨肉MG63细胞系增殖、护骨素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)表达的影响。方法通过hsa-miR-655慢病毒转染MG63细胞进行功能获得实验。实验分阴性对照组(NC组)和hsa-miR-655过表达组(OE组),荧光显微镜和流式细胞术(flow cytometry analysis,FCM)评估转染效率,Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞增殖能力,FCM检测细胞周期分布,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hsa-miR-655、CLCF1、OPG和RANKL mRNA的水平,蛋白质印迹法(Western blot)检测CLCF1、OPG及RANKL蛋白的变化。结果荧光显微镜和FCM显示对照组和miR-655过表达组感染效率为80%以上;qRT-PCR结果显示,相对于对照组,过表达组MG63细胞hsa-miR-655表达上调,差异有统计学意义(P=0.0004);CLCF1 mRNA水平未见明显变化(P=0.0986);过表达组OPG(P=0.0384)、RANKL(P=0.0007)mRNA均有所上调,差异具有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,过表达组CLCF1蛋白水平表达下调(P=0.0053);与对照组比较,过表达组OPG(P=0.0021)、RANKL(P=0.0002)蛋白均上调,而OPG/RANKL比值却降低(P=0.0078),差异具有统计学意义(P<0.05);CCK-8细胞增殖实验结果显示,miR-655过表达后抑制MG63细胞增殖;FCM检测细胞周期结果显示,miR-655过表达后MG63细胞G0/G1期细胞比例增加,S期减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论hsa-miR-655通过负调控CLCF1基因的表达,抑制MG63细胞的增殖,下调OPG/RANKL的比值。 展开更多
关键词 hsa-miR-655 心肌营养素样细胞因子1 MG63细胞 OPG/RANKL 基因表达
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