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巯基丁二胺铜单层修饰金电极上HIV-p24抗原的电化学免疫检测
被引量：
1
1
作者
干宁
李天华
+2 位作者
陈妮
葛从辛
徐伟民
《理化检验（化学分册）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期253-255,259,共4页
制备了用巯基丁二胺铜(CuL)修饰的金电极并用作HIV-p24抗原蛋白(简称p24)免疫检测的化学传感器。CuL通过单层自组装固定在金电极表面,其覆盖率为1.02×10-11mol.cm-2,在含有1.0 mmol.L-1过氧化氢并在pH 6.2的磷酸盐缓冲溶液中,制备...
制备了用巯基丁二胺铜(CuL)修饰的金电极并用作HIV-p24抗原蛋白(简称p24)免疫检测的化学传感器。CuL通过单层自组装固定在金电极表面,其覆盖率为1.02×10-11mol.cm-2,在含有1.0 mmol.L-1过氧化氢并在pH 6.2的磷酸盐缓冲溶液中,制备的校正曲线的线性范围为0.5-150μg.L-1p24对相应的伏安响应,方法的检出限为0.2μg.L-1。在10μg.L-1p24浓度水平作精密度试验,得RSD值为3.5%,于试样中分别加入5,15,20及30μg.L-1p24进行回收率试验,所得结果在98%-102%之间。此方法毋需另加电子传递媒介体。应用此方法于临床血清分析,所得结果与放射性免疫法的结果一致,且所得RSD值均小于0.3%。
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关键词
伏安分析法
金电极
巯基丁二胺铜
hiv-p24抗原蛋白
免疫传感器
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职称材料
β2微球蛋白-接头蛋白2-人类白细胞抗原A24(β2m-linker 2-HLA A24)蛋白的生物信息学分析、真核表达与鉴定
2
作者
高雯琬
陈思吟
+1 位作者
徐敏
陶崑
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第5期398-403,共6页
目的应用生物信息学方法对β2微球蛋白-接头蛋白2-人类白细胞抗原A24(β2m-linker 2-HLA A24)蛋白进行结构、功能预测分析,并对该蛋白进行真核表达与纯化。方法运用在线蛋白质分析软件ProtParam预测β2m-linker 2-HLA A24蛋白理化性质;...
目的应用生物信息学方法对β2微球蛋白-接头蛋白2-人类白细胞抗原A24(β2m-linker 2-HLA A24)蛋白进行结构、功能预测分析,并对该蛋白进行真核表达与纯化。方法运用在线蛋白质分析软件ProtParam预测β2m-linker 2-HLA A24蛋白理化性质;磷酸化位点预测软件NetPhos和蛋白质二级结构预测软件SOPMA分析其磷酸化位点和二级结构;并利用蛋白质结构模型预测工具SWISS-MODEL建立三级结构模型。构建含组氨酸标签(His tag)的重组质粒pcDNA3.4/β2m-linker 2-HLA A24-His tag,在Expi293F细胞表达,经镍柱亲和层析获得β2m-linker 2-HLA A24蛋白;采用SDS-PAGE、Western blot、间接ELISA验证蛋白的纯度和性质。结果β2m-linker 2-HLA A24蛋白含有44个磷酸化位点,属于亲水性蛋白,二级结构以无规卷曲为主,并成功构建三级结构模型;成功构建pcDNA3.4/β2m-linker 2-HLA A24-His tag重组质粒,并在Expi293F细胞表达系统中获得可溶性表达。结论成功构建β2m-linker 2-HLA A24蛋白,生物信息学结果显示该蛋白具备与抗原肽结合并激活T细胞的功能。为后续联合使用该蛋白与抗原肽激活抗原特异性CD8^+T细胞实验奠定了基础。
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关键词
β2微球
蛋白
-接头
蛋白
2-人类白细胞
抗原
A
24
(β2m-linker
2-HLA
A
24
)
生物信息学
真核表达
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职称材料
血尿安片对IgA肾病大鼠肾小球系膜细胞增生的影响
3
作者
佟彤
叶波
+2 位作者
郎睿
徐建龙
王洪霞
《世界中医药》
北大核心
2024年第22期3473-3478,共6页
目的:观察血尿安片对IgA肾病大鼠的治疗作用及对肾小球系膜细胞增生的影响。方法:30只斯泼累格·多雷(SD)大鼠数字表法随机分为对照组、模型组、中药组,建立免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型,从第10周开始,中药组给予血尿安片灌胃,对照组...
目的:观察血尿安片对IgA肾病大鼠的治疗作用及对肾小球系膜细胞增生的影响。方法:30只斯泼累格·多雷(SD)大鼠数字表法随机分为对照组、模型组、中药组,建立免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型,从第10周开始,中药组给予血尿安片灌胃,对照组和模型组以等量生理盐水灌胃,检测各组大鼠第10周、11周、12周末24 h尿蛋白定量,第12周末检测各组大鼠的尿肌酐、血肌酐,计算肌酐清除率。取肾组织观察病理变化,免疫荧光检测免疫球蛋白A(IgA);免疫组化检测肾小球系膜细胞增殖核抗原(PCNA)表达。结果:与模型组比较,血尿安片组大鼠24 h蛋白尿定量明显降低,肾小球肌酐清除率增多,肾组织损伤减轻,免疫荧光IgA数量及亮度均减低,肾小球内PCNA表达减少。结论:血尿安片能够降低IgAN大鼠的24 h蛋白定量,延缓肾功能下降,减轻肾脏病理损伤,机制或与抑制系膜细胞增殖有关。
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关键词
IGA肾病
血尿安片
滋阴益肾
24
h
蛋白
定量
肌酐清除率
肾脏病理
肾小球系膜细胞增殖核
抗原
荧光染色
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职称材料
题名
巯基丁二胺铜单层修饰金电极上HIV-p24抗原的电化学免疫检测
被引量：
1
1
作者
干宁
李天华
陈妮
葛从辛
徐伟民
机构
新型功能材料及其制备科学国家重点实验室宁波大学材料与化工学院
出处
《理化检验（化学分册）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期253-255,259,共4页
基金
国家自然科学基金(NO.60508012)
浙江省科技攻关项目(No.2006C31040)
文摘
制备了用巯基丁二胺铜(CuL)修饰的金电极并用作HIV-p24抗原蛋白(简称p24)免疫检测的化学传感器。CuL通过单层自组装固定在金电极表面,其覆盖率为1.02×10-11mol.cm-2,在含有1.0 mmol.L-1过氧化氢并在pH 6.2的磷酸盐缓冲溶液中,制备的校正曲线的线性范围为0.5-150μg.L-1p24对相应的伏安响应,方法的检出限为0.2μg.L-1。在10μg.L-1p24浓度水平作精密度试验,得RSD值为3.5%,于试样中分别加入5,15,20及30μg.L-1p24进行回收率试验,所得结果在98%-102%之间。此方法毋需另加电子传递媒介体。应用此方法于临床血清分析,所得结果与放射性免疫法的结果一致,且所得RSD值均小于0.3%。
关键词
伏安分析法
金电极
巯基丁二胺铜
hiv-p24抗原蛋白
免疫传感器
Keywords
Voltammetry
Gold electrode
Cupric mercapto-butadiamine
hiv-p
24
antigen
Immuno-sensor
分类号
O657.1 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
β2微球蛋白-接头蛋白2-人类白细胞抗原A24(β2m-linker 2-HLA A24)蛋白的生物信息学分析、真核表达与鉴定
2
作者
高雯琬
陈思吟
徐敏
陶崑
机构
重庆医科大学基础医学院免疫教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第5期398-403,共6页
文摘
目的应用生物信息学方法对β2微球蛋白-接头蛋白2-人类白细胞抗原A24(β2m-linker 2-HLA A24)蛋白进行结构、功能预测分析,并对该蛋白进行真核表达与纯化。方法运用在线蛋白质分析软件ProtParam预测β2m-linker 2-HLA A24蛋白理化性质;磷酸化位点预测软件NetPhos和蛋白质二级结构预测软件SOPMA分析其磷酸化位点和二级结构;并利用蛋白质结构模型预测工具SWISS-MODEL建立三级结构模型。构建含组氨酸标签(His tag)的重组质粒pcDNA3.4/β2m-linker 2-HLA A24-His tag,在Expi293F细胞表达,经镍柱亲和层析获得β2m-linker 2-HLA A24蛋白;采用SDS-PAGE、Western blot、间接ELISA验证蛋白的纯度和性质。结果β2m-linker 2-HLA A24蛋白含有44个磷酸化位点,属于亲水性蛋白,二级结构以无规卷曲为主,并成功构建三级结构模型;成功构建pcDNA3.4/β2m-linker 2-HLA A24-His tag重组质粒,并在Expi293F细胞表达系统中获得可溶性表达。结论成功构建β2m-linker 2-HLA A24蛋白,生物信息学结果显示该蛋白具备与抗原肽结合并激活T细胞的功能。为后续联合使用该蛋白与抗原肽激活抗原特异性CD8^+T细胞实验奠定了基础。
关键词
β2微球
蛋白
-接头
蛋白
2-人类白细胞
抗原
A
24
(β2m-linker
2-HLA
A
24
)
生物信息学
真核表达
Keywords
β2m-linker 2-HLA A
24
bioinformatics methods
eukaryotic expression
分类号
Q811.4 [生物学—生物工程]
Q816 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
血尿安片对IgA肾病大鼠肾小球系膜细胞增生的影响
3
作者
佟彤
叶波
郎睿
徐建龙
王洪霞
机构
中国中医科学院眼科医院
北京市海淀区八里庄卫生服务中心
中国中医科学院西苑医院
出处
《世界中医药》
北大核心
2024年第22期3473-3478,共6页
基金
国家自然科学基金项目(81873300)——基于PI3K/AKT/mTOR及AMPK/mTOR/ULK1信号通路调控自噬的交互作用探讨加味黄茂赤风汤对足细胞损伤的保护机制。
文摘
目的:观察血尿安片对IgA肾病大鼠的治疗作用及对肾小球系膜细胞增生的影响。方法:30只斯泼累格·多雷(SD)大鼠数字表法随机分为对照组、模型组、中药组,建立免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型,从第10周开始,中药组给予血尿安片灌胃,对照组和模型组以等量生理盐水灌胃,检测各组大鼠第10周、11周、12周末24 h尿蛋白定量,第12周末检测各组大鼠的尿肌酐、血肌酐,计算肌酐清除率。取肾组织观察病理变化,免疫荧光检测免疫球蛋白A(IgA);免疫组化检测肾小球系膜细胞增殖核抗原(PCNA)表达。结果:与模型组比较,血尿安片组大鼠24 h蛋白尿定量明显降低,肾小球肌酐清除率增多,肾组织损伤减轻,免疫荧光IgA数量及亮度均减低,肾小球内PCNA表达减少。结论:血尿安片能够降低IgAN大鼠的24 h蛋白定量,延缓肾功能下降,减轻肾脏病理损伤,机制或与抑制系膜细胞增殖有关。
关键词
IGA肾病
血尿安片
滋阴益肾
24
h
蛋白
定量
肌酐清除率
肾脏病理
肾小球系膜细胞增殖核
抗原
荧光染色
Keywords
IgA nephropathy
Xueniaoan Tablets
Enriching yin and nourishing kidney
24
-Hour protein quantification
Creatinine clearance
Renal pathology
Proliferating cell nuclear antigen
Fluorescence staining
分类号
R256.5 [医药卫生—中医内科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
巯基丁二胺铜单层修饰金电极上HIV-p24抗原的电化学免疫检测
干宁
李天华
陈妮
葛从辛
徐伟民
《理化检验（化学分册）》
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
β2微球蛋白-接头蛋白2-人类白细胞抗原A24(β2m-linker 2-HLA A24)蛋白的生物信息学分析、真核表达与鉴定
高雯琬
陈思吟
徐敏
陶崑
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
血尿安片对IgA肾病大鼠肾小球系膜细胞增生的影响
佟彤
叶波
郎睿
徐建龙
王洪霞
《世界中医药》
北大核心
2024
0
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