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IFN-γ与HIV-1gp120融合蛋白的表达及其免疫调节作用
被引量：
2
1
作者
赵刚
吴南屏
姚航平
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
2006年第6期610-614,共5页
目的:研究gamm a干扰素(IFN-γ)对人类免疫缺陷病毒(H IV-1)gp120蛋白免疫小鼠后效果的调节作用。方法:利用分子生物学技术,构建表达中国流行株H IV-1gp 120 N端片段基因的原核质粒p et44b-gp 120,及共表达H IV-1gp 120 N端片段基因与I...
目的:研究gamm a干扰素(IFN-γ)对人类免疫缺陷病毒(H IV-1)gp120蛋白免疫小鼠后效果的调节作用。方法:利用分子生物学技术,构建表达中国流行株H IV-1gp 120 N端片段基因的原核质粒p et44b-gp 120,及共表达H IV-1gp 120 N端片段基因与IFN-γ基因的原核质粒p et44b-gp 120/IFN-γ,在E.coli BL 21(DE 3)细胞中进行低温诱导蛋白表达,然后经纯化后免疫BALB/c小鼠。实验设皮下注射gp120/IFN-γ组、gp120组和PBS三组,以检测H IV-1gp120诱导的T细胞增殖能力,CTL杀伤作用以及Th1型细胞因子(IL-2,IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4,IL-10)的表达情况。结果:通过PAGE和W estern b lot检测,证实上述两种蛋白在DE 3细胞中得到表达。免疫学实验表明,针对H IV-1 gp120的特异性T淋巴细胞增殖作用、特异性CTL杀伤作用,以及Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ表达在三组之间均有显著性差异(P<0.05),gp120/IFN-γ组高于gp120组,gp120组高于PBS组(P<0.05)。反映体液免疫反应的Th2型细胞因子IL-4和IL-10的表达在三组之间没有显著性差异(P>0.05)。结论:协同应用IFN-γ基因可明显加强H IV-1gp 120基因的细胞免疫反应。
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关键词
干扰素Ⅱ型
hiv包膜蛋白质gp120/代谢
佐剂
免疫
hiv
gp
120
IFN-Γ
融合表达
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职称材料
HIV-1 SF_2株env基因(gp41)的克隆构建及其原核表达
被引量：
1
2
作者
董梅
鲁晓青
+1 位作者
陈向伟
王斌
《山西医科大学学报》
CAS
2001年第6期481-483,共3页
目的 克隆并在大肠杆菌中表达HIVgp4 1。 方法 应用PCR技术 ,纯化HIV 1SF2 株外膜蛋白env基因 (gp4 1) ,并重组入原核高效表达载体 pBV2 2 0 ,在大肠杆菌HB10 1中进行表达。 结果 SDS PAGE电泳结果表明 ,在 4 4 0 0 0处有一条蛋白表...
目的 克隆并在大肠杆菌中表达HIVgp4 1。 方法 应用PCR技术 ,纯化HIV 1SF2 株外膜蛋白env基因 (gp4 1) ,并重组入原核高效表达载体 pBV2 2 0 ,在大肠杆菌HB10 1中进行表达。 结果 SDS PAGE电泳结果表明 ,在 4 4 0 0 0处有一条蛋白表达带。Westernblot证明 ,4 4 0 0 0蛋白带可与HIV 1阳性血清发生特异性反应。结论 该重组表达 gp4 1的融合蛋白 ,可为HIV 1gp4 1。
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关键词
hiv
-1SF2株
hiv
包
膜
蛋白质
gp
41
PBV220
原核表达
基因
克隆
大肠杆菌
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职称材料
抗HIV-1 gp41单克隆抗体的制备及意义
3
作者
邓郁青
张坤娟
+4 位作者
王从印
张征峥
宋小天
张红中
王润田
《山东医药》
CAS
北大核心
2009年第19期48-49,共2页
目的为HIV-1感染的检测和研究提供依据。方法以基因工程重组抗原HIV-1 gp41蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法制备抗gp41蛋白的单克隆抗体(mAb),用ELISA法鉴定所得mAb的Ig亚类、效价及特异性。单抗经饱和硫酸铵(SAS)...
目的为HIV-1感染的检测和研究提供依据。方法以基因工程重组抗原HIV-1 gp41蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法制备抗gp41蛋白的单克隆抗体(mAb),用ELISA法鉴定所得mAb的Ig亚类、效价及特异性。单抗经饱和硫酸铵(SAS)纯化和HRP标记后,利用双抗体夹心ELISA筛选检测gp41蛋白的最佳配伍单抗,分别包被ELISA板及作为酶标mAb,建立双mAb夹心ELISA法。结果经细胞融合、筛选、克隆化,获得了12株可分泌高效价mAb的杂交瘤细胞。纯化的腹水mAb经配对试验,选出2株mAb:7D4和9G2-HRP建立了双mAb夹心ELISA法,检测HIV-1 gp41抗原的灵敏度是1μg/L。结论获得12株效价高的抗HIV-1 gp41的mAb,建立了特异性强、灵敏度较高的检测HIV-1 gp41抗原的双抗体夹心ELISA法。
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关键词
人类免疫缺陷病毒-1
hiv
包
膜
蛋白质
gp
41
单克隆抗体
双抗体夹心ELISA
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职称材料
题名
IFN-γ与HIV-1gp120融合蛋白的表达及其免疫调节作用
被引量：
2
1
作者
赵刚
吴南屏
姚航平
机构
浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室
出处
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
2006年第6期610-614,共5页
基金
国家"十五"攻关项目(0004BA719A10)
文摘
目的:研究gamm a干扰素(IFN-γ)对人类免疫缺陷病毒(H IV-1)gp120蛋白免疫小鼠后效果的调节作用。方法:利用分子生物学技术,构建表达中国流行株H IV-1gp 120 N端片段基因的原核质粒p et44b-gp 120,及共表达H IV-1gp 120 N端片段基因与IFN-γ基因的原核质粒p et44b-gp 120/IFN-γ,在E.coli BL 21(DE 3)细胞中进行低温诱导蛋白表达,然后经纯化后免疫BALB/c小鼠。实验设皮下注射gp120/IFN-γ组、gp120组和PBS三组,以检测H IV-1gp120诱导的T细胞增殖能力,CTL杀伤作用以及Th1型细胞因子(IL-2,IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4,IL-10)的表达情况。结果:通过PAGE和W estern b lot检测,证实上述两种蛋白在DE 3细胞中得到表达。免疫学实验表明,针对H IV-1 gp120的特异性T淋巴细胞增殖作用、特异性CTL杀伤作用,以及Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ表达在三组之间均有显著性差异(P<0.05),gp120/IFN-γ组高于gp120组,gp120组高于PBS组(P<0.05)。反映体液免疫反应的Th2型细胞因子IL-4和IL-10的表达在三组之间没有显著性差异(P>0.05)。结论:协同应用IFN-γ基因可明显加强H IV-1gp 120基因的细胞免疫反应。
关键词
干扰素Ⅱ型
hiv包膜蛋白质gp120/代谢
佐剂
免疫
hiv
gp
120
IFN-Γ
融合表达
Keywords
Interferon type Ⅱ
hiv
envelope protein
gp
120/
metab
Adjuvants, immunologic
Human immunodeficiency virus
gp
120
Interleukin-γ
Recombinant expression
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
HIV-1 SF_2株env基因(gp41)的克隆构建及其原核表达
被引量：
1
2
作者
董梅
鲁晓青
陈向伟
王斌
机构
山西医科大学微生物学教研室
青岛大学医学院卫生学教研室
出处
《山西医科大学学报》
CAS
2001年第6期481-483,共3页
基金
山东省卫生厅基金资助 (96-12 )
文摘
目的 克隆并在大肠杆菌中表达HIVgp4 1。 方法 应用PCR技术 ,纯化HIV 1SF2 株外膜蛋白env基因 (gp4 1) ,并重组入原核高效表达载体 pBV2 2 0 ,在大肠杆菌HB10 1中进行表达。 结果 SDS PAGE电泳结果表明 ,在 4 4 0 0 0处有一条蛋白表达带。Westernblot证明 ,4 4 0 0 0蛋白带可与HIV 1阳性血清发生特异性反应。结论 该重组表达 gp4 1的融合蛋白 ,可为HIV 1gp4 1。
关键词
hiv
-1SF2株
hiv
包
膜
蛋白质
gp
41
PBV220
原核表达
基因
克隆
大肠杆菌
Keywords
hiv
1 SF 2 strain
hiv
gp
41
pBV220
prokaryotic expression
分类号
R378.21 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
抗HIV-1 gp41单克隆抗体的制备及意义
3
作者
邓郁青
张坤娟
王从印
张征峥
宋小天
张红中
王润田
机构
河北医科大学基础所
河北医科大学生物医学工程中心
出处
《山东医药》
CAS
北大核心
2009年第19期48-49,共2页
基金
河北省科技攻关项目(02276401D)
河北省卫生厅科技攻关项目(02001)。
文摘
目的为HIV-1感染的检测和研究提供依据。方法以基因工程重组抗原HIV-1 gp41蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法制备抗gp41蛋白的单克隆抗体(mAb),用ELISA法鉴定所得mAb的Ig亚类、效价及特异性。单抗经饱和硫酸铵(SAS)纯化和HRP标记后,利用双抗体夹心ELISA筛选检测gp41蛋白的最佳配伍单抗,分别包被ELISA板及作为酶标mAb,建立双mAb夹心ELISA法。结果经细胞融合、筛选、克隆化,获得了12株可分泌高效价mAb的杂交瘤细胞。纯化的腹水mAb经配对试验,选出2株mAb:7D4和9G2-HRP建立了双mAb夹心ELISA法,检测HIV-1 gp41抗原的灵敏度是1μg/L。结论获得12株效价高的抗HIV-1 gp41的mAb,建立了特异性强、灵敏度较高的检测HIV-1 gp41抗原的双抗体夹心ELISA法。
关键词
人类免疫缺陷病毒-1
hiv
包
膜
蛋白质
gp
41
单克隆抗体
双抗体夹心ELISA
分类号
R512.91 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
IFN-γ与HIV-1gp120融合蛋白的表达及其免疫调节作用
赵刚
吴南屏
姚航平
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
2006
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
HIV-1 SF_2株env基因(gp41)的克隆构建及其原核表达
董梅
鲁晓青
陈向伟
王斌
《山西医科大学学报》
CAS
2001
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
抗HIV-1 gp41单克隆抗体的制备及意义
邓郁青
张坤娟
王从印
张征峥
宋小天
张红中
王润田
《山东医药》
CAS
北大核心
2009
0
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