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His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性被引量：9: 1; 作者曾瑞红王卫华 +3 位作者房桂珍龚伟梅兴国魏林《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1066-1070,共5页; 目的:观察His-tag是否影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性。方法:PCR扩增G1和F/M2基因片段,插入表达载体pET-His和pET-DsbA-His中,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用Ni+螯合亲和层析法纯化得His-G1F/M2和DsbA-His-G1F/M2,将后者用... 展开更多; 关键词呼吸道合胞病毒 his-tag 重组蛋白G1F/M2 免疫原性; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于Fe_3O_4@SiO_2/Ni-NTA磁性微球的His-tag融合蛋白纯化体系的建立被引量：6: 2; 作者王文加郭晓林 +2 位作者韦安慧付常皓韩振国《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第2期303-307,共5页; 合成了表面共价结合Ni-氨基三乙酸(Ni-NTA)基团的Fe3O4@SiO2微球,这种磁性微球可用于分离含有His-tag标签的融合蛋白.微球中心由尺寸约402 nm的Fe3O4微粒组成,赋予了微球极好的磁性分离和离心分离的特性.应用Fe3O4@SiO2/Ni-NTA磁性微球... 展开更多; 关键词磁性微球 6×his-tag蛋白亲和纯化 Ni-氨基三乙酸; 在线阅读下载PDF 职称材料

His-tag对亚油酸异构酶在大肠杆菌中可溶性表达的影响被引量：1: 3; 作者张白曦许正凯 +4 位作者汪昶沛陈海琴宋元达陈卫张灏《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第18期217-220,共4页; 为了研究6×His-tag对来源于痤疮丙酸杆菌的亚油酸异构酶(PAI)可溶性重组表达的影响,我们构建了三种大肠杆菌重组菌株,表达了三种重组PAI:C端带有His-tag亲和标签、N端带有His-tag亲和标签和不加His-tag亲和标签。通过SDS-PAGE和Wes... 展开更多; 关键词亚油酸异构酶大肠杆菌 6×his-tag 可溶性; 在线阅读下载PDF 职称材料

漆酶N端融合His-tag或S-tag标签促进其在大肠杆菌中可溶性表达被引量：2: 4; 作者岳青霞张丽洁 +2 位作者田健伍宁丰姚冬生《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期178-183,共6页; 来源于地衣芽孢杆菌的漆酶具有催效率高,底物范围广等优点在工农业等领域具有重要的应用前景,但该酶在外源基因表达系统中的表达量低,影响了其在工农业等领域的应用。His-tag和S-tag两种标签由于具有分子量小,且一般不影响外源蛋白性质... 展开更多; 关键词漆酶 his-tag S-tag 高效表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

羰基还原酶ChKRED20可溶性表达的提升及酶学性质研究: 5; 作者沈悦郑红范新炯《安徽医科大学学报》北大核心 2025年第8期1365-1372,共8页; 目的探究提升羰基还原酶ChKRED20可溶性的方法并测定其酶学性质。方法合成ChKRED20基因并转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中进行异源表达,通过增减和改变His-tag位置、改变发酵条件等研究蛋白可溶性,并进一步优化诱导时间、温度及异丙基硫代... 展开更多; 关键词羰基还原酶 ChKRED20 his-tag 酶学性质大肠埃希菌蛋白可溶性; 在线阅读下载PDF 职称材料

角蛋白酶产生菌的分离鉴定及其kerC的克隆表达被引量：4: 6; 作者侯晟琦王丽华 +3 位作者赖欣陈惠吴琦韩学易《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1845-1852,共8页; 以四川农业大学养鸡场堆砌废弃羽毛处土壤为样品,筛选出一株具有较强降解羽毛能力的细菌B-3菌株.经形态学、生理生化特性和16S rRNA基因序列分析,鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为枯草芽孢杆菌B-3.并成功克隆到该菌株的... 展开更多; 关键词角蛋白酶枯草芽孢杆菌B-3 基因克隆 kerC基因原核表达 his-tag; 在线阅读下载PDF 职称材料

人干细胞因子受体膜外区1～3免疫球蛋白样结构域的表达、纯化及活性被引量：2: 7; 作者苏林刘长征 +3 位作者邓艳春杨克恭梁植权陈松森《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期154-158,共5页; 目的在原核和真核细胞中表达人干细胞因子受体（c-Kit）配体结合区膜外N端1～3免疫球蛋白样结构域（c-Kit/Ig1～3）,研究其配体结合活性.方法采用重叠延伸PCR定点诱变法合成c-Kit/Ig1～3双突变片段（c-Kit/Ig1～3DM）,构建pET16b-c-Ki... 展开更多; 关键词人干细胞因子受体免疫球蛋白样结构域 his-tag pull-down 酶联免疫结合实验; 在线阅读下载PDF 职称材料

日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶原核表达载体的构建及序列分析被引量：1: 8; 作者方桂杰乔宪凤《江西农业学报》 CAS 2010年第11期8-10,14,共4页; 为构建带有组氨酸标签(his-tag)的日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶(sjGST)表达载体。以载有sjGST基因的载体PGEX-KG为模板,PCR扩增sjGST基因,并在进行酶切和基因测序后将其克隆到pET28a载体上。运用生物学软件与具有代表性的血吸虫GST基因... 展开更多; 关键词日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶原核表达载体的构建序列分析 SCHISTOSOMA JAPONICUM Sequence Analysis 基因测序重组载体构建组氨酸标签生物学软件表达产物 PCR产物 his-tag GST基因同源性代表性 pET28a 模板酶切; 在线阅读下载PDF 职称材料

HIV-1 Gag P17m的融合表达、纯化及NMT有效底物: 9; 作者马涵慧杨力 +1 位作者杨新颖李伯良《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期458-462,共5页; 利用PCR技术扩增编码HIV 1GagP17m的DNA片段 ,进而构建了T7启动子控制下的C端His Tag融合表达质粒pMF P17mHT .SDS PAGE分析结果表明 ,融合蛋白 (约 2 1kD)在大肠杆菌BL2 1(DE3)中得到高表达 ,表达产物约占全菌蛋白 2 0 % .该融合蛋白... 展开更多; 关键词 HIV-1 GAG his-tag 融合表达蛋白质N端豆寇酰化纯化底物; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性被引量：9: 1; 作者曾瑞红王卫华房桂珍龚伟梅兴国魏林; 机构河北医科大学免疫教研室河北医科大学生物医学工程中心军事医学科学院毒物药物研究所; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1066-1070,共5页; 文摘目的:观察His-tag是否影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性。方法:PCR扩增G1和F/M2基因片段,插入表达载体pET-His和pET-DsbA-His中,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用Ni+螯合亲和层析法纯化得His-G1F/M2和DsbA-His-G1F/M2,将后者用凝血酶消化,再经Ni+螯合亲和层析法纯化得G1F/M2,将His-G1F/M2和G1F/M2免疫BALB/c小鼠,用ELISA测定抗体滴度,MTT法测定细胞毒性T细胞活性(CTL)。结果:两种蛋白在BALB/c小鼠中诱导的RSV特异性抗体和CTL活性无显著差异。结论:His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性。; 关键词呼吸道合胞病毒 his-tag 重组蛋白G1F/M2 免疫原性; Keywords Respiratory syncytial virus his-tag Recombinant protein G1F/M2 Immunogenicity; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于Fe_3O_4@SiO_2/Ni-NTA磁性微球的His-tag融合蛋白纯化体系的建立被引量：6: 2; 作者王文加郭晓林韦安慧付常皓韩振国; 机构吉林大学药学院吉林大学第一医院吉林大学中日联谊医院; 出处《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第2期303-307,共5页; 文摘合成了表面共价结合Ni-氨基三乙酸(Ni-NTA)基团的Fe3O4@SiO2微球,这种磁性微球可用于分离含有His-tag标签的融合蛋白.微球中心由尺寸约402 nm的Fe3O4微粒组成,赋予了微球极好的磁性分离和离心分离的特性.应用Fe3O4@SiO2/Ni-NTA磁性微球对含有6×His-tag(6聚组氨酸)标签的蛋白进行了分离纯化,结果表明,10 mg Fe3O4@SiO2/Ni-NTA微球能够从10 mL重组蛋白裂解液中纯化出约1 mg带有6×His-tag标签的融合蛋白.微球的高效分离效果使其能够用于含量较低的带有6×His-tag标签蛋白的分离纯化.; 关键词磁性微球 6×his-tag蛋白亲和纯化 Ni-氨基三乙酸; Keywords Magnetic sphere 6×his-tagged protein Affinity Purification Ni-nitrilotriacetic acid; 分类号 O629 [理学—有机化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名His-tag对亚油酸异构酶在大肠杆菌中可溶性表达的影响被引量：1: 3; 作者张白曦许正凯汪昶沛陈海琴宋元达陈卫张灏; 机构江南大学食品学院; 出处《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第18期217-220,共4页; 基金 "十二五"国家863计划(2011AA100901); 文摘为了研究6×His-tag对来源于痤疮丙酸杆菌的亚油酸异构酶(PAI)可溶性重组表达的影响,我们构建了三种大肠杆菌重组菌株,表达了三种重组PAI:C端带有His-tag亲和标签、N端带有His-tag亲和标签和不加His-tag亲和标签。通过SDS-PAGE和Westernblot分析重组蛋白表达情况,并利用气相色谱检测酶活。实验结果表明:在相似的诱导表达条件及生长状态下,三种大肠杆菌重组菌株均成功表达了具有亚油酸异构酶活性的重组蛋白质,三种重组PAI的表达总量相当,6×His-tag的融合表达促进了PAI蛋白质包涵体的形成,而C端6×His-tag带来的影响最大。; 关键词亚油酸异构酶大肠杆菌 6×his-tag 可溶性; Keywords linoleic acid isomerase E.coli 6×his-tag solubility; 分类号 TS201.2 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名漆酶N端融合His-tag或S-tag标签促进其在大肠杆菌中可溶性表达被引量：2: 4; 作者岳青霞张丽洁田健伍宁丰姚冬生; 机构暨南大学生命科学技术学院中国农业科学院生物技术研究所河北农业大学生命科学学院; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期178-183,共6页; 基金国家"863"计划项目(2013AA102804); 文摘来源于地衣芽孢杆菌的漆酶具有催效率高,底物范围广等优点在工农业等领域具有重要的应用前景,但该酶在外源基因表达系统中的表达量低,影响了其在工农业等领域的应用。His-tag和S-tag两种标签由于具有分子量小,且一般不影响外源蛋白性质等特点,在外源蛋白的纯化和检测中具有重要的应用。本研究发现将来源于地衣芽孢杆菌的漆酶Cot A的N端融合Histag或S-tag构建于p ET-22b载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3)后可以显著提高其在大肠杆菌中的可溶性表达量,其表达量较N端无融合标签的构建,His-tag可提高漆酶表达量约为37倍,S-tag约可提高20倍,His-tag与S-tag共作用约可提高28倍。; 关键词漆酶 his-tag S-tag 高效表达; Keywords laccase his-tag S-tag high expression; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名羰基还原酶ChKRED20可溶性表达的提升及酶学性质研究: 5; 作者沈悦郑红范新炯; 机构安徽医科大学基础医学院干细胞与组织研究中心; 出处《安徽医科大学学报》北大核心 2025年第8期1365-1372,共8页; 基金国家自然科学基金项目(编号:82173725、31400680) 高校中青年教师培养行动项目(编号:DTR2024005)。; 文摘目的探究提升羰基还原酶ChKRED20可溶性的方法并测定其酶学性质。方法合成ChKRED20基因并转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中进行异源表达,通过增减和改变His-tag位置、改变发酵条件等研究蛋白可溶性,并进一步优化诱导时间、温度及异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)浓度等以提升重组蛋白的表达,随后研究重组酶的酶学性质。结果利用ChKRED20原核表达菌株,在大肠埃希菌表达体系内去除His-tag并进行发酵条件优化,以获得最优可溶蛋白表达;无His-tag ChKRED20比携带N端和C端His-tag的蛋白酶活性分别提高了0.77和1.28倍;最适温度为55℃,最适pH为8.0;且该酶在较高温度下、碱性环境中仍具有较好的适应性。结论去除His-tag及优化发酵条件可以大大提升ChKRED20在大肠埃希菌中的可溶性。; 关键词羰基还原酶 ChKRED20 his-tag 酶学性质大肠埃希菌蛋白可溶性; Keywords carbonyl reductase ChKRED20 his-tag enzymatic properties Escherichia coli protein solubility; 分类号 R34 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名角蛋白酶产生菌的分离鉴定及其kerC的克隆表达被引量：4: 6; 作者侯晟琦王丽华赖欣陈惠吴琦韩学易; 机构四川农业大学生命科学与理学院; 出处《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1845-1852,共8页; 文摘以四川农业大学养鸡场堆砌废弃羽毛处土壤为样品,筛选出一株具有较强降解羽毛能力的细菌B-3菌株.经形态学、生理生化特性和16S rRNA基因序列分析,鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为枯草芽孢杆菌B-3.并成功克隆到该菌株的角蛋白酶基因kerC(GenBank No.:JN021789),在大肠杆菌BL21(Escherichia coli BL21)中获得了高效表达.该基因全长1146bp,GC含量46.5%,编码381个氨基酸,与已报道的枯草芽孢杆菌YYW-1的kerC基因(GenBank No.:EU362730)同源性达到100%.重组菌株经IPTG诱导后角蛋白酶酶活力达14.8U/mL,经His-Tag纯化和SDS-PAGE分析表明,重组角蛋白酶分子量约为60kDa(融合了硫氧还蛋白,Trx).重组角蛋白酶最适反应温度和pH值分别为65℃与7.0.; 关键词角蛋白酶枯草芽孢杆菌B-3 基因克隆 kerC基因原核表达 his-tag; Keywords keratinase Bacillus subtilis B-3 gene cloning kerC gene prokaryotic expression his-tag; 分类号 X172 [环境科学与工程—环境科学] Q89 [生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人干细胞因子受体膜外区1～3免疫球蛋白样结构域的表达、纯化及活性被引量：2: 7; 作者苏林刘长征邓艳春杨克恭梁植权陈松森; 机构中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室; 出处《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期154-158,共5页; 基金国家高技术发展计划(863)重大专项基金(2003AAZ3360)~~; 文摘目的在原核和真核细胞中表达人干细胞因子受体（c-Kit）配体结合区膜外N端1～3免疫球蛋白样结构域（c-Kit/Ig1～3）,研究其配体结合活性.方法采用重叠延伸PCR定点诱变法合成c-Kit/Ig1～3双突变片段（c-Kit/Ig1～3DM）,构建pET16b-c-Kit/Ig1～3DM表达质粒,转化E.coli BL21（DE3）诱导表达,稀释复性,镍柱纯化.将C端添加组氨酸标签的c-Kit/Ig1～3基因克隆入真核表达载体pEAK12中,转染HEK293 ET细胞构建c-kit/Ig1～3高效表达细胞株,从细胞培养上清中使用镍金属螯合柱收集纯化蛋白.His-tag pull-down和酶联免疫结合实验检测融合蛋白配体结合活性.结果在大肠杆菌中c-Kit/Ig1～3^DM以包涵体形式表达,复性后配体结合活性很低.在HEK293 ET细胞中筛选到2个高效表达c-Kit/Ig1～3的细胞株,上清表达量为2μg/ml,融合蛋白相对分子质量为58 000;受体配体结合实验显示真核表达的c-Kit/Ig1～3有明显的干细胞因子特异结合活性,解离常数Kd值为9.39 nmol/L.结论获得了具有较高配体结合活性的c-Kit/Ig1～3融合蛋白.; 关键词人干细胞因子受体免疫球蛋白样结构域 his-tag pull-down 酶联免疫结合实验; Keywords human stem cell factor receptor immunoglobulin-like domains his-tag pull-down enzyme-linked immunosorbent binding assay; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶原核表达载体的构建及序列分析被引量：1: 8; 作者方桂杰乔宪凤; 机构湖北工业大学生物工程学院发酵工程省部共建教育部重点实验室湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程与分子育种湖北省重点实验室; 出处《江西农业学报》 CAS 2010年第11期8-10,14,共4页; 基金湖北工业大学博士启动基金(32700224); 文摘为构建带有组氨酸标签(his-tag)的日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶(sjGST)表达载体。以载有sjGST基因的载体PGEX-KG为模板,PCR扩增sjGST基因,并在进行酶切和基因测序后将其克隆到pET28a载体上。运用生物学软件与具有代表性的血吸虫GST基因进行比对并对可能的表达产物进行分析。结果表明,PCR产物与3种sjGST基因有99%的同源性。重组载体构建成功。; 关键词日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶原核表达载体的构建序列分析 SCHISTOSOMA JAPONICUM Sequence Analysis 基因测序重组载体构建组氨酸标签生物学软件表达产物 PCR产物 his-tag GST基因同源性代表性 pET28a 模板酶切; Keywords Glutathlone S-transferase S.japonicum Gene amplification Sequence analysis Bioinformatic technique; 分类号 S [农业科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HIV-1 Gag P17m的融合表达、纯化及NMT有效底物: 9; 作者马涵慧杨力杨新颖李伯良; 机构中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期458-462,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目 (No .39770 875 )&&; 文摘利用PCR技术扩增编码HIV 1GagP17m的DNA片段 ,进而构建了T7启动子控制下的C端His Tag融合表达质粒pMF P17mHT .SDS PAGE分析结果表明 ,融合蛋白 (约 2 1kD)在大肠杆菌BL2 1(DE3)中得到高表达 ,表达产物约占全菌蛋白 2 0 % .该融合蛋白主要以可溶性形式存在 ,通过金属离子 (Ni2 +)螯合亲和层析予以纯化 ,纯度在 90 %以上 .体外标记结果表明 ,融合表达的P17mHT能被人NMT有效地N端豆蔻酰化 .这些结果为深入研究筛选HIV 1GagP17或P55的豆蔻酰化专一性抑制剂。; 关键词 HIV-1 GAG his-tag 融合表达蛋白质N端豆寇酰化纯化底物; Keywords HIV\|1 Gag, His\|Tag, fusion expression, protein N\|myristoylation; 分类号 R373.9 [医药卫生—病原生物学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性	曾瑞红王卫华房桂珍龚伟梅兴国魏林	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2008	9	在线阅读下载PDF 职称材料
2	基于Fe_3O_4@SiO_2/Ni-NTA磁性微球的His-tag融合蛋白纯化体系的建立	王文加郭晓林韦安慧付常皓韩振国	《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心	2012	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	His-tag对亚油酸异构酶在大肠杆菌中可溶性表达的影响	张白曦许正凯汪昶沛陈海琴宋元达陈卫张灏	《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	漆酶N端融合His-tag或S-tag标签促进其在大肠杆菌中可溶性表达	岳青霞张丽洁田健伍宁丰姚冬生	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	羰基还原酶ChKRED20可溶性表达的提升及酶学性质研究	沈悦郑红范新炯	《安徽医科大学学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	角蛋白酶产生菌的分离鉴定及其kerC的克隆表达	侯晟琦王丽华赖欣陈惠吴琦韩学易	《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2012	4	在线阅读下载PDF 职称材料
7	人干细胞因子受体膜外区1～3免疫球蛋白样结构域的表达、纯化及活性	苏林刘长征邓艳春杨克恭梁植权陈松森	《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶原核表达载体的构建及序列分析	方桂杰乔宪凤	《江西农业学报》 CAS	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
9	HIV-1 Gag P17m的融合表达、纯化及NMT有效底物	马涵慧杨力杨新颖李伯良	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	0	在线阅读下载PDF 职称材料