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Impact-induced energy release of typical HCP metal/PTFE/W reactive materials:Experimental study and predictive modeling via machine learning
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作者 Zhenwei Zhang Weixi Tian +7 位作者 Tianyi Wang Zhiyuan Liu Yansong Yang Chao Ge Lei Guo Yuan He Chuanting Wang Yong He 《Defence Technology(防务技术)》 2025年第5期124-138,共15页
Zirconium,titanium,and other hexagonally close-packed(HCP)metals and their alloys are representative high specific strength,high reaction enthalpy,and high thermal conductivity structural materials.In this study,two t... Zirconium,titanium,and other hexagonally close-packed(HCP)metals and their alloys are representative high specific strength,high reaction enthalpy,and high thermal conductivity structural materials.In this study,two typical HCP metals,zirconium,and titanium,were applied to reactive materials(RMs)to prepare Zr/PTFE/W RMs and Ti/PTFE/W RMs,validating the feasibility of HCP metal/PTFE/W RMs.The impact response process of typical HCP metal/PTFE/W RMs under high-velocity dynamic loads was studied using shock equations of state(EOS)based on porous mixtures and chemical reaction kinetics equations.An improved hemispherical quasi-sealed test chamber was employed to measure the energy release characteristic curves of 10 types of Zr/PTFE/W RMs and Ti/PTFE/W RMs under impact velocities ranging from 500 m/s to 1300 m/s.The datasets of the impact-induced energy release characteristics of HCP metal/PTFE/W RMs were established.Additionally,the energy release efficiency of HCP metal/PTFE/W RMs under impact was predicted using the support vector regression(SVR)kernel function model.The datasets of Zr/PTFE/W RMs and Ti/PTFE/W RMs with W contents of 0%,25%,50%,and 75%were used as test sets,respectively.The model predictions showed a high degree of agreement with the experimental data,with mean absolute errors(MAE)of 4.8,6.5,4.6,and 4.1,respectively. 展开更多
关键词 Impact-induced energy release Reactive materials hcp metal/PTFE/W Energy release efficiency Support vector regression
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lncRNA HCP5靶向miR-409-3p对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
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作者 郑云鹏 李旭阳 +3 位作者 尹婕 贾苇雪 李冬芹 尹光文 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2024年第5期612-616,共5页
目的:探讨lncRNA HCP5靶向mlR-409-3p对皮肤鳞状细胞癌(CSCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:采用qRT-PCR法检测CSCC细胞(SCC13、A431、HSC-5)中HCP5和miR-409-3p的表达情况,筛选用于实验的CSCC细胞。将抑制HCP5表达的质粒si-HCP5及... 目的:探讨lncRNA HCP5靶向mlR-409-3p对皮肤鳞状细胞癌(CSCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:采用qRT-PCR法检测CSCC细胞(SCC13、A431、HSC-5)中HCP5和miR-409-3p的表达情况,筛选用于实验的CSCC细胞。将抑制HCP5表达的质粒si-HCP5及其对照(si-NC)、过表达miR-409-3p的miR-409-3p模拟物及其对照(miR-NC)、抑制HCP5和miR-409-3p的si-HCP5+anti-miR-409-3p及其对照(si-HCP5+anti-miR-NC)分别转染SCC13细胞。采用CCK-8法和Transwell实验检测SCC13细胞增殖、迁移、侵袭能力,Western blot法检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9蛋白表达水平。通过双荧光素酶报告基因实验验证HCP5和miR-409-3p的靶向关系。结果:SCC13细胞中HCP5表达最高,miR-409-3p表达最低(P<0.05)。抑制HCP5表达后SCC13细胞增殖能力降低,细胞迁移数和侵袭数减少,CycIinD1、MMP2、MMP9蛋白表达水平降低(P<0.05)。过表达miR-409-3p后SCC13细胞增殖能力降低,细胞迁移数和侵袭数减少,CycinD1、MMP2、MMP9蛋白表达水平降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示lncRNA HCP5和miR-409-3p存在靶向关系。抑制miR-409-3p表达可减弱HCP5低表达对SCC13细胞增殖以及迁移、侵袭能力的影响(P<0.05)。结论:抑制HCP5可通过靶向促进miR-409-3p表达来抑制CSCC细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 皮肤鳞状细胞癌 lncRNA hcp5 miR-409-3p 增殖 迁移 侵袭
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类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅵ型分泌系统的Hcp1蛋白转位介导多核巨细胞形成
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作者 吴潘 饶承龙 +7 位作者 南栋琪 陈建高 张子元 刘文正 王民洋 闫晶敏 李倩 毛旭虎 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期1721-1728,共8页
目的探讨类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅵ型分泌系统溶血素共调节蛋白1(hemolysin coregulatory protein 1,Hcp1)在感染宿主细胞引起多核巨细胞(multinucleated giant cells,MNGC)形成的作用及机制。方法分别采用同源重组和质粒回补技术构建类鼻疽... 目的探讨类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅵ型分泌系统溶血素共调节蛋白1(hemolysin coregulatory protein 1,Hcp1)在感染宿主细胞引起多核巨细胞(multinucleated giant cells,MNGC)形成的作用及机制。方法分别采用同源重组和质粒回补技术构建类鼻疽菌hcp1基因缺失株(BPC006Δhcp1)和缺失回补株(BPC006Δhcp1::hcp1);分别用类鼻疽菌BPC006野生株、BPC006Δhcp1和BPC006Δhcp1::hcp1感染RAW264.7细胞,通过激光共聚焦分析Hcp1蛋白的定位情况;在293T细胞中转染Hcp1真核表达载体后进行细胞质膜分离进一步验证定位情况;在细胞感染模型上,通过吉姆萨染色检测抗Hcp1多克隆抗体封闭对MNGC形成的影响,探究Hcp1在类鼻疽菌感染导致的MNGC形成中的作用和生物学意义。结果Western blot检测结果显示BPC006Δhcp1不表达Hcp1蛋白,而BPC006Δhcp1::hcp1能恢复Hcp1蛋白的表达,成功构建类鼻疽菌BPC006Δhcp1和BPC006Δhcp1::hcp1。细胞免疫荧光共定位实验和质膜分离实验都表明Hcp1可以定位在宿主细胞膜上,且相较于对照组抗Hcp1多克隆抗体能抑制类鼻疽菌感染所诱导的MNGC形成(P<0.01)。结论类鼻疽菌感染RAW264.7细胞时Hcp1可转位至细胞膜,并在MNGC形成中发挥重要作用。 展开更多
关键词 类鼻疽伯克霍尔德菌 hcp1 多核巨细胞 基因缺失与回补
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人-信息-物理系统(HCPS)在图书馆中的应用 被引量:1
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作者 刘迅芳 丁若虹 《农业大数据学报》 2024年第3期424-432,共9页
图书馆由人、信息系统和物理系统(HCPS)组成。研究HCPS的内涵及各组成部分的关系,可为图书馆的发展指明方向。通过对早期图书馆、现代图书馆和智慧图书馆的特征分析,将HCPS理论引入图书馆中,并基于HCPS视角探讨了图书馆的演变过程,分析... 图书馆由人、信息系统和物理系统(HCPS)组成。研究HCPS的内涵及各组成部分的关系,可为图书馆的发展指明方向。通过对早期图书馆、现代图书馆和智慧图书馆的特征分析,将HCPS理论引入图书馆中,并基于HCPS视角探讨了图书馆的演变过程,分析了不同阶段图书馆HCPS的特点与作用,提出了智慧图书馆HCPS的研究框架和重点研究内容,剖析了推动图书馆发展的赋能技术,进行了智慧图书馆HCPS的实践应用与讨论。信息系统的引入及发展助力了图书馆的演变,建立智慧图书馆HCPS的重点是开展信息系统模型的建立与仿真方法研究。初次探索HCPS在图书馆中的应用,提出的概念和研究框架仍处于探索阶段,后续需要广泛地跨学科合作与交流,不断充实和细化图书馆HCPS的研究内容、方法和技术。 展开更多
关键词 图书馆 信息系统 人-信息-物理系统
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嗜水气单胞菌Hcp蛋白的原核表达·多克隆抗体制备及生物信息学分析
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作者 许艺兰 许佳乐 +8 位作者 卢冰霞 陈婷婷 秦毅斌 刘思雨 全琛宇 许心婷 赵硕 陈忠伟 何颖 《安徽农业科学》 CAS 2024年第23期79-84,共6页
[目的]获得嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,AH)Hcp蛋白的多克隆抗体(Polyclonal Antibody)及基本生物学特性。[方法]利用RT-PCR方法扩增Hcp基因,构建重组表达质粒后转化BL21感受态细胞,经IPTG(异丙基硫代半乳糖苷,Isopropylβ-D-Thi... [目的]获得嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,AH)Hcp蛋白的多克隆抗体(Polyclonal Antibody)及基本生物学特性。[方法]利用RT-PCR方法扩增Hcp基因,构建重组表达质粒后转化BL21感受态细胞,经IPTG(异丙基硫代半乳糖苷,Isopropylβ-D-Thiogalactoside)诱导表达获得Hcp重组蛋白,纯化后免疫家兔,制备针对该蛋白的多克隆抗体,进行抗体的效价测定、Western blotting鉴定,利用生物信息学在线工具对其基本理化性质、保守结构域、磷酸化位点、二级与三级结构进行预测。[结果]该蛋白在IPTG终浓度为0.6 mmol/L、37℃下诱导表达6 h可获得最高表达量,蛋白主要以可溶性蛋白的形式存在;Western blotting结果显示,AH的培养物上清与沉淀均能够与制备的兔抗发生特异性结合,具有良好的反应原性,制备的多克隆抗体效价达1.024×10^(6)。生物信息学分析表明,嗜水气单胞菌Hcp蛋白的分子式为C_(846)H_(1304)N_(224)O_(259)S_(8),共编码172个氨基酸,相对分子质量为19013.49 u,等电点(PL)为5.24,属于稳定蛋白;二级结构中无规则卷曲占比为51.74%,延伸链占比为25.00%,α-螺旋占比为19.19%,β-转角占比为4.07%。[结论]成功制备了Hcp蛋白的多克隆抗体,为进一步研究AH的VI型分泌系统(Type VI secretion system,T6SS)提供技术支持。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 hcp基因 原核表达 多克隆抗体制备 生物信息学
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禽致病性大肠杆菌CE129 Ⅵ型分泌系统主要亚单位基因hcp1、hcp2缺失株的构建与验证 被引量:5
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作者 丁雪燕 张琪 +5 位作者 田延 王亨 张伟 石宝兰 张建军 朱国强 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期381-385,共5页
为获得禽致病性大肠杆菌(APEC)CE129 Ⅵ型的hcp1、hcp2基因缺失株,本研究利用Red同源重组系统对APEC野生株CE129的Ⅵ型分泌系统(T6SS)hcp1和hcp2基因进行敲除,获得hcp1、hcp2基因单缺失株CE129△hcp1、CE129△hcp2和双缺失株CE129△hcp1... 为获得禽致病性大肠杆菌(APEC)CE129 Ⅵ型的hcp1、hcp2基因缺失株,本研究利用Red同源重组系统对APEC野生株CE129的Ⅵ型分泌系统(T6SS)hcp1和hcp2基因进行敲除,获得hcp1、hcp2基因单缺失株CE129△hcp1、CE129△hcp2和双缺失株CE129△hcp1△hcp2。将hcp1、hcp2基因分别克隆到表达载体pBR322和pACYC184中,构建相应的基因回补株CE129△hcp1/phcp1、CE129△hcp2/phcp2和CE129△hcp1△hcp22/phcp1phcp2。通过PCR特异性检测和基因测序显示,上述突变株与回补株均成功构建,且均能够稳定遗传。上述基因缺失株和回补株的成功构建,有助于深入了解APEC CE129菌株T6SS的作用机制,为进一步研究APEC的致病机理及其防控奠定了基础。 展开更多
关键词 Red同源重组系统 Ⅵ型分泌系统 hcp1 hcp2
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AZ91镁铝合金中HCP/BCC相界面结构 被引量:26
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作者 肖晓玲 罗承萍 +3 位作者 刘江文 吴东晓 聂建峰 Barry C Muddle 《中国有色金属学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第1期15-20,共6页
采用常规和高分辨电镜研究了时效AZ91镁铝合金中 2种形态γ Mg17Al12 析出相的HCP/BCC相界面结构。发现第一类析出相的惯习面 (0 0 0 2 ) α∥ { 330 } γ 以及与其对接的另外 2组主要晶面的面间错配度都很小 (4%和2 % ) ,因此界面能较... 采用常规和高分辨电镜研究了时效AZ91镁铝合金中 2种形态γ Mg17Al12 析出相的HCP/BCC相界面结构。发现第一类析出相的惯习面 (0 0 0 2 ) α∥ { 330 } γ 以及与其对接的另外 2组主要晶面的面间错配度都很小 (4%和2 % ) ,因此界面能较小 ;而第 2类析出相的惯习面 (0 110 ) α∥ (330 ) γ 以及与其对接的另一组主要晶面的面间错配度都较大 (11%和 15 % ) ,因此界面能较大。从界面能和相变应变两方面讨论了各类析出相析出密度差别的原因 ,提出了改变析出密度。 展开更多
关键词 AZ91镁铝合金 析出相 hcp/BCC相界面 透射电镜分析
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基于人-信息-物理系统(HCPS)的新一代智能制造研究 被引量:41
8
作者 王柏村 臧冀原 +2 位作者 屈贤明 董景辰 周艳红 《中国工程科学》 CSCD 北大核心 2018年第4期29-34,共6页
本文从制造业面临的问题和挑战、新一代人工智能技术带来的重大机遇、新一轮工业革命的核心技术等方面论述了新一代智能制造的发展背景。通过分析智能制造的发展演进过程,指出传统制造向智能制造发展的过程是从原来的"人–物理&qu... 本文从制造业面临的问题和挑战、新一代人工智能技术带来的重大机遇、新一轮工业革命的核心技术等方面论述了新一代智能制造的发展背景。通过分析智能制造的发展演进过程,指出传统制造向智能制造发展的过程是从原来的"人–物理"二元系统(HPS)向新的"人–信息–物理"三元系统(HCPS)发展的过程。HCPS揭示了智能制造发展的基本原理,是支撑新一代智能制造发展的理论基础。基于HCPS和智能制造的系统集成,从给制造业带来的革命性变化、给人类社会带来的革命性变化等方面描述了新一代智能制造的愿景。 展开更多
关键词 新一代智能制造 新一代人工智能 “人–信息–物理”系统(hcpS) 系统集成 愿景
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肠炎沙门菌hcp基因对生物被膜形成的影响分析 被引量:8
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作者 姚丰华 董立伟 +1 位作者 张钰 朱国强 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期534-537,共4页
细菌生物被膜的形成主要受细菌AI-2群体感应和菌体表面黏附素调控和影响,本实验室前期研究表明肠炎沙门菌SPI-19编码的hcp基因缺失能下调SEF14菌毛和鞭毛的表达。为研究hcp基因对肠炎沙门菌生物被膜形成能力的影响和潜在机制,本实验通... 细菌生物被膜的形成主要受细菌AI-2群体感应和菌体表面黏附素调控和影响,本实验室前期研究表明肠炎沙门菌SPI-19编码的hcp基因缺失能下调SEF14菌毛和鞭毛的表达。为研究hcp基因对肠炎沙门菌生物被膜形成能力的影响和潜在机制,本实验通过结晶紫染色法测定肠炎沙门菌两个代表株50336株和SD-2株的hcp突变缺失株及相应回补株的生物被膜形成能力,并与sefA和fliC缺失突变株的生物被膜形成能力对比显示,50336Δhcp和SD-2Δhcp与相应亲本株相比生物被膜形成能力分别降低67%和69%。而50336ΔfliC和SD-2ΔfliC与相应亲本株相比生物被膜形成能力分别降低49%和54%,sefA缺失对生物被膜形成无显著影响。此外,实验还通过对野生株及hcp缺失株AI-2分子活性检测显示,AI-2群体感应系统并未受到显著影响。本研究结果表明,hcp基因缺失显著影响肠炎沙门菌生物被膜的形成。 展开更多
关键词 肠炎沙门菌 生物被膜 SPI-19 hcp 缺失突变株
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hcp结构的Co磁性膜表面和界面的非线性克尔旋转及SHG的研究 被引量:2
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作者 黄志高 蔡晃 +2 位作者 赖恒 卢宇 盖荣权 《光子学报》 EI CAS CSCD 1999年第3期218-222,共5页
本文基于对称性理论、磁性表面的菲涅耳反射和折射定律,研究了hcp(密排六方体)Co结构的χ(2)、SHG(二次谐波振荡)信号强度和非线性磁光克尔旋转角Φ(2)k,α与入射角、偏振角及光子能量的关系.结果表明,Φ(2)... 本文基于对称性理论、磁性表面的菲涅耳反射和折射定律,研究了hcp(密排六方体)Co结构的χ(2)、SHG(二次谐波振荡)信号强度和非线性磁光克尔旋转角Φ(2)k,α与入射角、偏振角及光子能量的关系.结果表明,Φ(2)k,α比线性克尔角有巨大的增强;当接近垂直入射时,Φ(2)k,φ接近90°;Φ(2)k,α灵敏地依赖于M的影响,从而可以通过Φ(2)k,α来决定薄膜中的晶轴方向和磁化强度的取向. 展开更多
关键词 非线性 磁光克尔效应 hcp 磁性 薄膜 钴膜
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fcc,hcp和bcc结构Au的原子状态及物理性质随温度的变化关系 被引量:1
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作者 陶辉锦 谢佑卿 +3 位作者 彭红建 余方新 刘锐锋 李晓波 《中国有色金属学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1778-1786,共9页
结合纯金属单原子(OA)理论和Debye-Grüneisen模型,采用CALPHAD方法确定的晶格稳定参数,研究了SGTE纯单质数据库中fcc,hcp和bcc结构Au的原子状态、原子势能、原子动能、原子体积、体弹性模量和热膨胀系数等物理性质随温度的变化关... 结合纯金属单原子(OA)理论和Debye-Grüneisen模型,采用CALPHAD方法确定的晶格稳定参数,研究了SGTE纯单质数据库中fcc,hcp和bcc结构Au的原子状态、原子势能、原子动能、原子体积、体弹性模量和热膨胀系数等物理性质随温度的变化关系。结果表明:OA理论得到的fcc-Au电子结构中的共价d电子数最少,从而导致fcc-Au具有最大的单键半径以及最大的原子体积;温度上升过程中,3种结构的原子单键半径大小顺序为:fcc>bcc>hcp,导致相应的原子体积大小顺序为:fcc>bcc>hcp;3种晶体结构原子势能大小顺序为:fcc<hcp<bcc,与第一原理VASP程序结果一致;3种结构的原子动能随温度的增加幅度大约是势能的4.2倍,温度上升过程中原子动能的变化远大于势能。 展开更多
关键词 FCC hcp BCC AU 原子状态 Debye-Grueneisen模型 CALPHAD方法
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一种用于HCP金属的多体势模型 被引量:3
12
作者 陈舜麟 徐金城 张宏胜 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期28-32,共5页
提出了一种非球对称结构的嵌入原子势模型 ,以改变常见的只用一组参数的方法 ,使得原子的行为呈现为非球对称性 ,满足了密排六方结构 ( HCP)金属的非球对称条件 ,从而使计算结果有显著改善 .计算了 4种过渡族 HCP金属的结合能、空位形... 提出了一种非球对称结构的嵌入原子势模型 ,以改变常见的只用一组参数的方法 ,使得原子的行为呈现为非球对称性 ,满足了密排六方结构 ( HCP)金属的非球对称条件 ,从而使计算结果有显著改善 .计算了 4种过渡族 HCP金属的结合能、空位形成能、体弹模量和弹性常数 ,并和实验数据做了比较 .参数拟合计算表明 ,这一模型适用于过渡族金属中 HCP金属的力学性能和结合能的理论计算 .该模型并可用于材料中微缺陷性能的计算机模拟研究 . 展开更多
关键词 hcp金属 多体势模型 密排六方结构 电子密度 结合能 力学性能 嵌入原子势模型
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肠炎沙门菌SPI-19编码的hcp基因的克隆、表达及多抗制备 被引量:1
13
作者 姚丰华 张钰 朱国强 《中国家禽》 北大核心 2014年第10期20-24,共5页
利用PCR方法扩增2株肠炎沙门菌参考株CMCC(B)50336和SD-2 SPI-19毒力岛内的hcp基因,将其序列鉴定后克隆入原核表达载体pET-28a(+),构建重组质粒pET28a-hcp,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导重组细菌高效表达;表达产物以包涵体的... 利用PCR方法扩增2株肠炎沙门菌参考株CMCC(B)50336和SD-2 SPI-19毒力岛内的hcp基因,将其序列鉴定后克隆入原核表达载体pET-28a(+),构建重组质粒pET28a-hcp,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导重组细菌高效表达;表达产物以包涵体的形式存在,变性条件下用镍亲和柱纯化得到重组蛋白,以每只50μg剂量免疫小鼠3次,间接ELISA测定抗体效价,用Western blot验证免疫血清的特异性。测序结果显示,2个参考株hcp基因的核苷酸序列与已发表序列的同源性为100%。SDS-PAGE显示20 ku重组蛋白,主要以包涵体形式存在,通过镍亲、层析和尿素变性/复性获得了可溶性的纯化蛋白;免疫小鼠第5周抗体效价达1∶8 000,且能特异性检测出SPI-19 hcp+肠炎沙门菌和鸡伤寒沙门菌中表达的Hcp蛋白。上述结果表明,制备的外源性重组蛋白具有较好的免疫原性和反应原性,为进一步研究Ⅵ型分泌系统Hcp蛋白在肠炎沙门菌中的功能提供了重要的生物素材。 展开更多
关键词 肠炎沙门菌 SPI-19 hcp基因 克隆 表达
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盐穗木HcPS_H基因真核表达载体的构建及转化 被引量:1
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作者 郝晓燕 张毓露 +2 位作者 足木热木 刘小利 黄全生 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2263-2268,共6页
【目的】盐穗木(Halostachys caspica)属藜科盐生植物,是广泛分布于新疆干旱或半干旱荒漠盐碱环境中的一种极端耐盐的多年生稀盐多汁半灌木,对盐分适应性极强。PS_H基因是一个参与光合反应光系统的基因,在植物光合作用中起着重要的作用... 【目的】盐穗木(Halostachys caspica)属藜科盐生植物,是广泛分布于新疆干旱或半干旱荒漠盐碱环境中的一种极端耐盐的多年生稀盐多汁半灌木,对盐分适应性极强。PS_H基因是一个参与光合反应光系统的基因,在植物光合作用中起着重要的作用。构建盐穗木HcPS_H基因真核表达载体对于了解该基因在盐穗木耐盐过程中的作用有着重要意义。【方法】利用PCR技术扩增得到大小为441 bp的盐穗木HcPS_H基因,经限制性内切酶SalI和NotI进行消化,将目的基因与真核表达质粒pREP-5N连接,获得重组真核表达质粒HcPS_H-5N。【结果】通过菌落PCR、双酶切及测序等方法进行鉴定,重组真核表达质粒HcPS_H-5N构建成功。制备酵母感受态,将重组质粒电击转入酵母中,酵母菌落PCR结果显示电击转化成功。【结论】成功构建盐穗木HcPS_H基因真核表达载体,并且能在真核细胞中正常表达。 展开更多
关键词 盐穗木 hcpS_H基因 真核表达载体 重组质粒构建
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盐生植物盐穗木HcPS_H基因大肠杆菌表达载体的构建
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作者 郝晓燕 张毓露 +1 位作者 足木热木 刘小利 《安徽农业科学》 CAS 2012年第10期5758-5759,共2页
[目的]构建盐穗木HcPS_H基因的大肠杆菌表达载体。[方法]以质粒pGEM-T-HcPS_H为模板,HcPS_H-pET28a-F、HcPS_H-pET28a-R为引物进行PCR扩增,获得两端含酶切位点的HcPS_H基因目的片段。将该目的片段与大肠杆菌表达载体pET-28a通过T4DNA连... [目的]构建盐穗木HcPS_H基因的大肠杆菌表达载体。[方法]以质粒pGEM-T-HcPS_H为模板,HcPS_H-pET28a-F、HcPS_H-pET28a-R为引物进行PCR扩增,获得两端含酶切位点的HcPS_H基因目的片段。将该目的片段与大肠杆菌表达载体pET-28a通过T4DNA连接酶连接,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,得到重组子克隆,抽质粒进行测序鉴定。[结果]扩增出HcPS_H基因片段长度为441 bp,将其连接到大肠杆菌表达载体pET-28a上后,得到重组子质粒,经PCR检测、双酶切验证及测序鉴定,表明成功构建原核表达载体。[结论]该研究成功构建了盐穗木HcPS_H基因的大肠杆菌表达载体,为进一步进行该基因功能的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 盐生植物 盐穗木 hcpS_H基因 原核表达载体
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具有σ-HCP-k网的空间和具有σ-WHCP-k网的空间
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作者 田旭 《广西大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1993年第1期19-22,共4页
具有σ-HCP-k网或具有σ-WHCP-k网的空间有以下性质:(1)遗传性;(2)在闭映射下被保持;(3)局部和定理;(4)度量化定理。
关键词 度量空间 σ-hcp-k网 σ-Whcp-k网
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rpoS对鳗弧菌MHK3株Hcp表达和杀菌能力的影响 被引量:5
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作者 王小鹿 李杰 +3 位作者 李贵阳 唐磊 杨慧超 莫照兰 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2021年第6期125-134,共10页
溶血素共调节蛋白(Hcp)的合成和分泌是六型分泌系统(T6SS)行使功能的重要特征。RNA聚合酶的σ亚基RpoS参与调节细菌的生长和应激反应。为了探究RpoS对鳗弧菌(Vibrio anguillarum)T6SS的调控作用,本研究构建了 MHK3ΔrpoS突变株,检测了... 溶血素共调节蛋白(Hcp)的合成和分泌是六型分泌系统(T6SS)行使功能的重要特征。RNA聚合酶的σ亚基RpoS参与调节细菌的生长和应激反应。为了探究RpoS对鳗弧菌(Vibrio anguillarum)T6SS的调控作用,本研究构建了 MHK3ΔrpoS突变株,检测了部分表型特征的变化;利用lacZ半乳糖苷酶报告基因检测了突变株hcpl和hcp2在转录水平的变化;进行Western blot并定量分析突变株Hcp在翻译水平的变化;并通过细菌拮抗实验检测了突变株杀菌能力的变化。结果显示,MHK3ΔrpoS突变株的生长情况、泳动性、明胶酶活性及酪蛋白酶活性与MHK3野生株相比无显著差异(P>0.05),而平台早期的菌膜形成能力有显著上升(P<0.05);在各生长时期,MHK3ΔrpoS的hcpl和hcp2在转录水平的表达量均较MHK3有显著上升(P<0.01),最高时分别为MHK3的1.79倍和1.94倍;在翻译水平上,MHK3ΔrpoS在胞内和胞外Hcp的分泌均有显著升高(P<0.05),最高时分别为MHK3的1.59倍和1.31倍;同时,MHK3ΔrpoS对大肠杆菌(Escherichia coli) E5的杀菌能力约为MHK3的1%。研究表明,rpoS对鳗弧菌MHK3株的生长情况、泳动性、明胶酶活性及酪蛋白酶活性均无显著调控作用,但对平台早期的菌膜形成能力具有一定的负调控作用,在转录和翻译水平上也负调控Hcp的表达。而在杀菌能力上,rpoS发挥一定的正调控作用。说明菌株的杀菌能力强弱并非直接与Hcp的表达和分泌量正相关。本研究为进一步阐明T6SS的调控机制及其介导的杀菌作用机制提供了新思路,并丰富了其理论基础。 展开更多
关键词 鳗弧菌 RPOS hcp T6SS 杀菌
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植物青枯菌Po82菌株Ⅵ型分泌系统中hcp基因的克隆及其功能研究 被引量:5
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作者 宋莎莎 徐进 +4 位作者 许景升 陈匡宇 张丽勍 张昊 冯洁 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期16-21,共6页
Ⅵ型分泌系统(typeⅥsecretion system,T6SS)是新近报道的细菌蛋白分泌系统。基于植物青枯菌致病力分化菌株Po82的全基因组测序结果,发现其大质粒中存在T6SS的同源基因簇。本文通过基因敲除的方法构建了Po82菌株Ⅵ型分泌系统中的核心基... Ⅵ型分泌系统(typeⅥsecretion system,T6SS)是新近报道的细菌蛋白分泌系统。基于植物青枯菌致病力分化菌株Po82的全基因组测序结果,发现其大质粒中存在T6SS的同源基因簇。本文通过基因敲除的方法构建了Po82菌株Ⅵ型分泌系统中的核心基因—hcp基因的缺失突变株,并比对了Po82野生型菌株、突变株及互补菌株在致病性、生长速率、运动性、生物膜形成等方面的变化。结果表明,hcp基因突变株较野生型菌株致病力显著减弱,病程延长;在生长速率、运动性及生物膜形成方面,突变株较野生型无明显差异。说明植物青枯菌Po82菌株T6SS中的hcp基因参与了细菌的致病过程。 展开更多
关键词 植物青枯菌 Po82菌株 hcp基因 突变 致病性
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鮰爱德华菌hcp基因的克隆及重组表达 被引量:4
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作者 魏畅 李华 +1 位作者 叶仕根 李强 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期424-430,共7页
通过克隆获得鮰爱德华菌Edwardsiella ictaluri LH51溶血素共调节蛋白(Hcp)编码基因hcp,该基因全长为489 bp,编码163个氨基酸,hcp编码蛋白的理论相对分子质量为17 800,等电点为5.21。氨基酸序列分析结果表明,鮰爱德华菌hcp基因与迟钝爱... 通过克隆获得鮰爱德华菌Edwardsiella ictaluri LH51溶血素共调节蛋白(Hcp)编码基因hcp,该基因全长为489 bp,编码163个氨基酸,hcp编码蛋白的理论相对分子质量为17 800,等电点为5.21。氨基酸序列分析结果表明,鮰爱德华菌hcp基因与迟钝爱德华菌Edwardsiella tarda毒力蛋白EvpC(Hcp同源物)、发光杆菌Photorhabdus luminescens hcp基因等具有高度同源性。将鮰爱德华菌Hcp氨基酸序列连接至pGS-21a表达载体中,成功构建了pGS-21 a-hcp原核表达质粒;再将表达质粒转化至BL21(DE3)菌株后,经IPTG诱导、镍柱层析纯化获得大量携带GST和组氨酸双标签的融合蛋白。经SDS-PAGE和Western blot分析,确认获得了相对分子质量约为45 000的融合蛋白,并成功制备了具有较高效价的多克隆抗体。 展开更多
关键词 鮰爱德华菌 hcp基因 基因克隆 原核表达
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细菌Ⅵ型分泌系统Hcp与VgrG蛋白的共进化分析 被引量:2
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作者 牛苗静 谢清标 +3 位作者 李婷 李春霞 陈银华 陶均 《热带生物学报》 2018年第1期90-100,共11页
以组成Ⅵ型分泌系统(T6SS)鞘结构蛋白Hcp和VgrG为研究对象,通过蛋白质序列同源性、进化特征及表达相关性的分析,以了解Hcp和VgrG共进化的特征及其在表达上的相互影响。结果表明:Hcp与其他T6SS结构基因共进化,但VgrG却有很大的随机性。1... 以组成Ⅵ型分泌系统(T6SS)鞘结构蛋白Hcp和VgrG为研究对象,通过蛋白质序列同源性、进化特征及表达相关性的分析,以了解Hcp和VgrG共进化的特征及其在表达上的相互影响。结果表明:Hcp与其他T6SS结构基因共进化,但VgrG却有很大的随机性。1个细菌可能有多套T6SS,一般1个hcp基因对应1套系统。vgrG的数目变化很大,有的细菌只有1个vgrG基因,有的细菌却多达30个,且与有多少套T6SS没有多大的关系。进化分析表明:Hcp可分为14个类,种间的差异小于种内差异。VgrG在进化上可分为3大类,种间差异也小于种内差异。VgrG多样性可能与其识别并辅助不同效应因子转运有关。共进化分析显示VgrG与Hcp具有一定的共进化特性,可推测单个细菌中相互配对的VgrG与Hcp。表达分析显示,在水稻细菌性条斑病菌RS105中,几乎所有的vgrG都与hcp基因的表达正相关,说明在表达水平不能分析两者之间的进化关系,但可说明RS105中VgrG与Hcp功能的相关性。因此,VgrG与Hcp在进化和功能上具有显著相关性。 展开更多
关键词 革兰氏阴性菌 水稻细菌性条斑病菌 T6SS hcp VgrG
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