HEV/HAV两联装甲RNA质控样品的研制及应用性能评价

1

作者 杨书仁 朱志梅 +3 位作者 许艺凡 李慧 王术德 高慎阳 《现代畜牧兽医》 2025年第5期1-7,共7页

试验旨在研制一种安全、稳定性强的戊型肝炎(HEV)和甲型肝炎(HAV)两联装甲RNA阳性质控品。利用装甲RNA技术,设计将HEV与HAV标准检测靶基因序列串联合成MS2-HE-AV基因片段,将其克隆到pET-28b载体中构建重组质粒pET-28b-MS2-HE-AV608,转... 试验旨在研制一种安全、稳定性强的戊型肝炎(HEV)和甲型肝炎(HAV)两联装甲RNA阳性质控品。利用装甲RNA技术,设计将HEV与HAV标准检测靶基因序列串联合成MS2-HE-AV基因片段,将其克隆到pET-28b载体中构建重组质粒pET-28b-MS2-HE-AV608,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导原核表达、纯化制备HE-AV二联病毒样颗粒(VLPs),并对其稳定性、回收率进行验证以评价其实际应用性能。结果显示,试验成功构建包含MS2外壳蛋白和外源靶基因的重组载体,目的蛋白高效表达,电镜下可见直径约为27 nm的VLPs。该VLPs可耐受全能核酸酶降解作用。VLPs中HEV和HAV检测靶标定值结果分别为1.88×10^(9)、1.17×10^(9)copies/μL。该VLPs在4℃条件下至少可保存21 d,符合国家标准中对于VLPs保存期的基本规定。实际样品检测结果显示,当人工污染样品的VLPs浓度稀释为1000、10000倍时,4种样品基质中装甲RNA回收率均大于1%。研究表明,HE-AV两联VLPs能够有效抵抗全能核酸酶的降解作用、热稳定性好、适用性强,可作为HEV和HAV核酸检测的阳性质控品全程监控病毒核酸检测过程。 展开更多

关键词 戊型肝炎病毒 甲型肝炎病毒 阳性质控品 装甲RNA

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表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析 被引量：1

2

作者 李嘉琦 吴娟 +1 位作者 孙茂盛 戴长柏 《动物医学进展》 CSCD 2003年第2期68-71,共4页

利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3+vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上。采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞。在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染... 利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3+vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上。采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞。在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定证明HAV的结构基因已插入到腺病毒基因组中;在电子显微镜下观察发现有二十面体的病毒颗粒。以上结果表明获得了重组腺病毒rAdHAV,纯化后的rAdHAV滴度为1×109.0TCID50/mL。 展开更多

关键词 重组腺病毒 hav结构基因 鉴定 细胞病变 甲型肝炎病毒 基因工程病毒疫苗 转移载体

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人源抗-HAVFab真核表达载体的构建及表达 被引量：1

3

作者 于长明 徐静 +4 位作者 刘国奇 童贻刚 宋宏斌 徐志凯 王海涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期193-195,共3页

目的　构建人源抗 HAVFab真核表达载体并进行表达。方法采用DNA重组技术将抗体重轻链基因与信号肽基因连接 ,并分别插入真核表达载体 pCdhfr1和pCDNA3 1;以脂质体介导法转染CHO细胞 ,经G418筛选细胞 ,ELISA检测Fab基因的表达。结果成... 目的　构建人源抗 HAVFab真核表达载体并进行表达。方法采用DNA重组技术将抗体重轻链基因与信号肽基因连接 ,并分别插入真核表达载体 pCdhfr1和pCDNA3 1;以脂质体介导法转染CHO细胞 ,经G418筛选细胞 ,ELISA检测Fab基因的表达。结果成功地构建了Fab表达载体。转染细胞后 ,经ELISA检测 ,细胞培养上清中有抗原结合活性的Fab片段。结论Fab真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达 。 展开更多

关键词 甲型肝炎病毒 基因表达 FAB 真核表达戴 本

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恒河猴猴群中甲型肝炎病毒(HAV)血清学调查 被引量：2

4

作者 孙晓梅 代解杰 +1 位作者 唐东红 仝品芬 《中国实验动物学杂志》 2000年第1期37-39,共3页

用ELISA法对 183份来自不同饲养条件下各年龄阶段的自繁猴血清进行了甲型肝炎病毒抗体 (HAVIgG)的检测 ,阳性率为 6 8.9% ,其中单笼猴抗 -HAV阳性率明显低于大笼猴及群养猴 ,并随年龄的增长而升高。同时对 4 1只野生猴进行检测 ,阳性率... 用ELISA法对 183份来自不同饲养条件下各年龄阶段的自繁猴血清进行了甲型肝炎病毒抗体 (HAVIgG)的检测 ,阳性率为 6 8.9% ,其中单笼猴抗 -HAV阳性率明显低于大笼猴及群养猴 ,并随年龄的增长而升高。同时对 4 1只野生猴进行检测 ,阳性率为 19.5% ,明显低于自繁猴 ,这一结果为恒河猴的饲养管理提供依据。 展开更多

关键词 甲型肝炎病毒 阳性率 恒河猴 抗-hav 升高 血清 抗体 群养 饲养条件 饲养管理

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以RFIL消除慢性乙型肝炎血清RF致的抗HAV-IgM假阳性反应

5

作者 谭德明 任培上 胡国龄 《湖南医科大学学报》 CSCD 1990年第3期274-276,共3页

为了解HAV/HBV双重感染的发生情况,作者检测了121例慢性乙型肝炎患者血清抗HAV-IgM,其中经类风湿因子免疫胶乳(RFIL)处理后抗HAV-IgM仍阳性的7例,未经处理的12例阳性,有5例为假阳性,占41.7％(5/12)。用RFIL能消除因血清中RF所致的抗HAV-... 为了解HAV/HBV双重感染的发生情况,作者检测了121例慢性乙型肝炎患者血清抗HAV-IgM,其中经类风湿因子免疫胶乳(RFIL)处理后抗HAV-IgM仍阳性的7例,未经处理的12例阳性,有5例为假阳性,占41.7％(5/12)。用RFIL能消除因血清中RF所致的抗HAV-IgM假阳性反应,不出现假阴性结果。认为RFIL中和反应是一种简单,经济而有效的排除RF干扰的方法。本组慢性乙型肝炎患者重叠感染甲肝病毒7例,占5.8％,均为慢性活动性肝炎。 展开更多

关键词 乙型肝炎 hav-IGM RFIL 诊断

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辽东湾沿岸海水及贝类中甲肝病毒分布的研究 被引量：10

6

作者 樊景凤 宋立超 +2 位作者 张喜昌 梁玉波 关道明 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期52-54,76,共4页

用RT-PCR方法检测辽东湾几个重点沿岸海域表层海水和几种经济贝类样品中甲肝病毒的分布。结果表明,6个重点沿岸海域表层海水中均检出甲肝病毒(Hepatitis A virus,HAV),6种经济贝类样品中有4个样品检出甲肝病毒。检测结果显示,辽东湾某... 用RT-PCR方法检测辽东湾几个重点沿岸海域表层海水和几种经济贝类样品中甲肝病毒的分布。结果表明,6个重点沿岸海域表层海水中均检出甲肝病毒(Hepatitis A virus,HAV),6种经济贝类样品中有4个样品检出甲肝病毒。检测结果显示,辽东湾某些重点沿岸海域受陆源生活污水影响严重,有关部门应加强海洋环境和海产贝类卫生安全监测和管理,以避免引发甲型肝炎暴发流行。 展开更多

关键词 辽东湾 表层海水 经济贝类 甲肝病毒(Hepatitis A virus hav)

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煤矿井下清洁开采技术 被引量：7

7

作者 王文 桂祥友 王国君 《辽宁工程技术大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2002年第4期514-516,共3页

采矿对环境的破坏和污染与矿井开采技术有直接的关系,对采矿过程中产生的“三废”,即废矸石、废水及粉尘、噪声等采取相应的治理措施;如全煤巷开拓方式、采区巷道全煤化、减少煤炭开采过程中混矸石量;采煤机径向雾屏降尘、溜煤眼粉尘的... 采矿对环境的破坏和污染与矿井开采技术有直接的关系,对采矿过程中产生的“三废”,即废矸石、废水及粉尘、噪声等采取相应的治理措施;如全煤巷开拓方式、采区巷道全煤化、减少煤炭开采过程中混矸石量;采煤机径向雾屏降尘、溜煤眼粉尘的控制、凿岩时粉尘的治理、爆破时粉尘的控制;井下废水的处理;井下废水的净化;噪声控制等采取相应的治理措施,实现清洁开采,保护生态环境和井下生产的安全,以保持能源生产、消费和生态之间的平衡。 展开更多

关键词 煤矿 清洁开采 保护环境 三废治理 矿井开采 全煤巷开拓方式 废矸石 废水 粉尘

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胎盘组织中Human Annexin V的表达及与HBV感染的关系 被引量：2

8

作者 张润驹 岳亚飞 +4 位作者 李淑红 石紫云 叶峰 归巧娣 石磊 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期79-81,共3页

目的观察Human AnnexinV(HAV)在胎盘组织中的表达,并探讨其在乙型肝炎病毒(HBV)感染胎盘中的可能作用。方法用免疫荧光染色法检测早孕绒毛,中孕和足月胎盘绒毛中HAV的表达;用免疫荧光双重染色法观察HBV感染的胎盘组织HBsAg和HAV的分布... 目的观察Human AnnexinV(HAV)在胎盘组织中的表达,并探讨其在乙型肝炎病毒(HBV)感染胎盘中的可能作用。方法用免疫荧光染色法检测早孕绒毛,中孕和足月胎盘绒毛中HAV的表达;用免疫荧光双重染色法观察HBV感染的胎盘组织HBsAg和HAV的分布及相互关系。结果①所有的标本绒毛滋养层细胞、绒毛间质细胞、毛细血管内皮细胞都有HAV的存在。②HBV感染的胎盘绒毛中只要是HBsAg阳性的部位同时一定有HAV的表达,阳性信号存在于滋养层细胞、绒毛间质细胞、绒毛毛细血管内皮细胞中。结论HAV可能作为HBsAg的特异性受体介导了HBV与胎盘组织各层细胞的粘附、内化等过程并最终导致了HBV对胎盘的感染。 展开更多

关键词 胎盘 病毒受体 人膜联蛋白(hav) 乙型肝炎病毒(HBV)

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RT-PCR一步法检测甲型肝炎活病毒方法的建立 被引量：4

9

作者 李淑焱 刘大维 +6 位作者 田旺 刘令九 薛勇 岳丹 顾丹阳 王信鹏 刘景晔 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期28-31,共4页

建立灵敏、特异、快速检测甲型肝炎活病毒(HAV)的方法。提取HAV总RNA,选用HAV高保守区为目标区,设计合成一对引物,通过RT-PCR反应扩增其核酸,用琼脂糖凝胶电泳法检测其扩增产物,紫外灯下观察,约200bp处为目标片段,根据观察结果,计算HAV... 建立灵敏、特异、快速检测甲型肝炎活病毒(HAV)的方法。提取HAV总RNA,选用HAV高保守区为目标区,设计合成一对引物,通过RT-PCR反应扩增其核酸,用琼脂糖凝胶电泳法检测其扩增产物,紫外灯下观察,约200bp处为目标片段,根据观察结果,计算HAV滴度。RT-PCR一步法快速、灵敏、重复性好、特异性强,可用于甲型肝炎活病毒检测。 展开更多

关键词 RT—PCR 引物 高保守区 甲型肝炎病毒

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草莓携带甲肝病毒ELISA检测方法的研究 被引量：2

10

作者 马吉湘 田世民 +3 位作者 邹明强 金涌 陈彦长 薛强 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第10期459-462,共4页

用辣根过氧化物酶通过戊二醛法标记甲肝病毒单克隆抗体,建立了甲肝病毒双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法。在ELISA反应中酶标抗体的工作浓度为1:100稀释,对甲肝病毒的检测灵敏度为2μg/ml。在草莓汁液中添加灭活的甲肝病毒,该ELISA... 用辣根过氧化物酶通过戊二醛法标记甲肝病毒单克隆抗体,建立了甲肝病毒双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法。在ELISA反应中酶标抗体的工作浓度为1:100稀释,对甲肝病毒的检测灵敏度为2μg/ml。在草莓汁液中添加灭活的甲肝病毒,该ELISA的检测下限被推荐为4μg/ml。甲肝病毒ELISA方法便捷、可靠,适用于草莓上携带甲肝病毒的检测。 展开更多

关键词 ELISA 甲肝病毒 草莓 检测

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运用SYBR GreenⅠ荧光实时RT-PCR法检测草莓中甲肝病毒 被引量：5

11

作者 莫雪梅 高东微 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第14期153-157,共5页

针对甲肝病毒的vp3/vp1壳蛋白区域设计引物,建立SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR检测甲肝病毒的反应体系。此方法的病毒检测下限达到101TCID50,标准曲线为Ct=-3.052lg(TCID50)+34.57,线形范围101～105TCID50,相关系数0.9961。该方法对甲肝... 针对甲肝病毒的vp3/vp1壳蛋白区域设计引物,建立SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR检测甲肝病毒的反应体系。此方法的病毒检测下限达到101TCID50,标准曲线为Ct=-3.052lg(TCID50)+34.57,线形范围101～105TCID50,相关系数0.9961。该方法对甲肝病毒检测特异,与轮状病毒、腺病毒、诺如病毒、星状病毒无交叉反应。针对甲肝病毒标准品检测的批内试验变异系数(CV)为0.85%～1.71%(n=5)、批间试验CV为0.76%～1.98%(n=3)。运用此方法随机检测45份草莓样品,检测出3份阳性样品。该检测方法灵敏、特异、重复性好,可应用于水果和蔬菜中甲肝病毒的快速检测。 展开更多

关键词 甲肝病毒 SYBR GreenⅠ荧光实时RT-PCR 检测 草莓

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F_0F_1-ATPase生物传感器快速检测食品中甲肝病毒 被引量：1

12

作者 张捷 王小晋 +7 位作者 许美玲 张惠媛 张雷 刘岩 顾德周 王佩荣 乐加昌 陈广全 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第16期178-182,共5页

建立一种应用F0F1-ATPase生物传感器快速检测甲肝病毒的方法。利用生物素-亲和素系统将甲肝病毒特异性分子探针连接在F0F1-ATPase的ε亚基上构建分子马达检测装置。将甲肝病毒阳性血清和阴性对照RNA分别与生物传感器结合,比较其启动ATP... 建立一种应用F0F1-ATPase生物传感器快速检测甲肝病毒的方法。利用生物素-亲和素系统将甲肝病毒特异性分子探针连接在F0F1-ATPase的ε亚基上构建分子马达检测装置。将甲肝病毒阳性血清和阴性对照RNA分别与生物传感器结合,比较其启动ATP合成10min后的荧光强度的差别,对样品中甲肝病毒进行检测。结果表明,所建立的F0F1-ATPase生物传感器对检测食源性甲肝病毒具有良好的特异性和较高的灵敏度,对甲肝病毒核酸检测灵敏度达到0.01ng/mL,与反转录聚合酶链式反应检测结果作比较,结果具有良好一致性;本方法在1h内即可完成检测,可应用于食品中甲肝病毒的污染状况调查及高效检测。 展开更多

关键词 生物传感器 分子马达 甲肝病毒 快速检测

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甲型肝炎病毒在3株细胞中的增殖和连续传代 被引量：1

13

作者 郑纪山 何亮 +3 位作者 王宏 周宗安 邓小昭 乔仁良 《医学研究生学报》 CAS 2001年第4期294-296,299,共4页

目的 :观察甲型肝炎病毒 (HAV )在 3个不同的细胞株中连续传代时的增殖特点。　方法 :将 HAV NJ- 3株先以常规传代方式适应不同的细胞株 :FRh K4细胞、PL C/ PRF/ 5细胞、2 BS,然后将适应病毒接种于细胞 ,并随细胞传代。用 EIA、IFA和... 目的 :观察甲型肝炎病毒 (HAV )在 3个不同的细胞株中连续传代时的增殖特点。　方法 :将 HAV NJ- 3株先以常规传代方式适应不同的细胞株 :FRh K4细胞、PL C/ PRF/ 5细胞、2 BS,然后将适应病毒接种于细胞 ,并随细胞传代。用 EIA、IFA和激光扫描共聚焦显微镜观察带毒细胞连续传代中的病毒增殖。　结果 :1NJ- 3株 / K4细胞于第 5代 HAAg出现阳性 ,第 17、18代时达到高峰 ,2 4代直至 35代均为阴性。 2 NJ- 3株 / 2 BS细胞仅在第 6代出现一次弱阳性 ,传至 35代均呈阴性。 3NJ- 3株 / PL C则在第 3代即可测得 HAAg,第 7代 A值达 0 .80 2 ,P/ N值13.9,并保持此水平至少 70代以上。病毒产量稳定 ,细胞形态良好。冻存 10年的 HAV/ PL C株复苏后 ,仍保持良好的产毒性能。HAV/ PL C传代或收获的最佳周期为 5天。　结论 :HAV NJ- 3株能适应三种不同的传代细胞株 ,但只能在 PL C/ PRF/ 5细胞中长期随细胞传代 。 展开更多

关键词 甲型肝炎病毒 细胞培养 连续传代 激光扫描共聚焦显微术

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跳帧转换编码中的运动矢量修正

14

作者 李晓辉 金庆学 +1 位作者 董武 贾明华 《安徽大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2005年第4期54-57,共4页

在跳帧转换编码中,利用前向向量法进行运动矢量合成可以得到较好的图像信噪比。本文提出了用HAVS快速搜索算法对合成的运动矢量进行修正的方法,同时给出了一个最佳搜索窗口。实验结果表明,在±2像素内,用HAVS算法对合成的运动矢量修... 在跳帧转换编码中,利用前向向量法进行运动矢量合成可以得到较好的图像信噪比。本文提出了用HAVS快速搜索算法对合成的运动矢量进行修正的方法,同时给出了一个最佳搜索窗口。实验结果表明,在±2像素内,用HAVS算法对合成的运动矢量修正,既能明显提高图像的信噪比,同时又能最大限度的降低计算量。 展开更多

关键词 转换编码 跳帧 运动估值 运动矢量修正 前向向量法 havS

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1173例成人肝穿刺标本病理研究

15

作者 胡锡琪 翟为溶 +4 位作者 李海昆 胡德昌 张希德 张清波 邬祥惠 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期183-186,T003,共5页

从1980年～1989年收集1173例成人肝穿刺标本,经组织病理学确诊了15种肝病共910例,其中慢性活动性肝炎(CAH)为445例,占本文肝病数48.90%为首位。本组肝病发病年龄有2个高峰:急性肝炎(AH),慢性持续性肝炎(CPH),慢性小叶性肝炎(CLH)和CAH... 从1980年～1989年收集1173例成人肝穿刺标本,经组织病理学确诊了15种肝病共910例,其中慢性活动性肝炎(CAH)为445例,占本文肝病数48.90%为首位。本组肝病发病年龄有2个高峰:急性肝炎(AH),慢性持续性肝炎(CPH),慢性小叶性肝炎(CLH)和CAH为20～29岁组;亚急性重症肝炎(SAFH)和肝硬化(Ci),原发性肝细胞肝癌(PHCC)为40～49岁组。乙肝病毒标记物(HBV-M)检测显示CPH,CLH,CAH,Ci和PHCC阳性率均高于80%,而AH和SAFH则低于25%。本文讨论了急性甲型肝炎,CAH和双重感染的病理特点。 展开更多

关键词 感染 病毒性肝炎 肝穿刺

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CpG DNA中ISS数量与免疫刺激效果间的关系初探 被引量：7

16

作者 施海晶 胡云章 +3 位作者 胡凝珠 瞿素 杨净思 何继红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期531-533,共3页

目的 :研究CpG免疫刺激DNA中免疫刺激序列 (ISS)的数量与免疫刺激效果间的关系。方法 :将 3种CpGODN(分别含 2 ,4,8个ISS)与甲型肝炎灭活疫苗混合 ,通过腹腔注射途径免疫小鼠 ,于免疫后 4,6 ,8w采血 ,用全自动微粒子酶联免疫测定分析检... 目的 :研究CpG免疫刺激DNA中免疫刺激序列 (ISS)的数量与免疫刺激效果间的关系。方法 :将 3种CpGODN(分别含 2 ,4,8个ISS)与甲型肝炎灭活疫苗混合 ,通过腹腔注射途径免疫小鼠 ,于免疫后 4,6 ,8w采血 ,用全自动微粒子酶联免疫测定分析检测抗HAVIgG水平。结果 :含 2个ISS的CpGODN具有较好的佐剂效应 ,能增强甲型肝炎灭活疫苗的免疫效果 ,含 4个ISS的CpGODN不具有免疫刺激作用 ,而含 8个ISS的CpGODN则抑制了甲型肝炎灭活疫苗所诱导的免疫反应。结论 :适当长度的CpGODN(含 2个ISS)可作为有效的佐剂来增强疫苗的免疫效果 ,而当其中的ISS含量过多 。 展开更多

关键词 免疫刺激序列 疫苗佐剂 甲型肝炎灭活疫苗

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环状RNAhsa＿circ＿0082626的特征分析及过表达载体构建 被引量：3

17

作者 潘劲辉 姚文霞 +4 位作者 林海 牛秋玲 罗远卫 梁敏 周新科 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第5期495-500,共6页

目的环状RNA是目前非编码RNA的研究热点,文章旨在研究由抗病毒基因ZC3HAV1基因转录而来的环状RNA hsa_circ_0082626的基本特征以及过表达载体的表达效果。方法利用反向剪切位点的验证、RNA酶消化试验和提取细胞质、细胞核RNA进行细胞内... 目的环状RNA是目前非编码RNA的研究热点,文章旨在研究由抗病毒基因ZC3HAV1基因转录而来的环状RNA hsa_circ_0082626的基本特征以及过表达载体的表达效果。方法利用反向剪切位点的验证、RNA酶消化试验和提取细胞质、细胞核RNA进行细胞内分布定位研究了hsa_circ_0082626的基本特征,RNA酶消化试验中将样品分为RNase R处理组与对照组,RNase R处理组加入20 U(2 U/μg)的RNase R,对照组用等量ddH2O替代,以此检测经RNA酶处理后的表达量变化。转染24、48和72 h后分别收集以转染重组质粒的细胞为过表达组、未经转染的细胞作为阴性对照组,RT-qPCR检测环状RNA表达效果。结果与对照组比较,RNase R处理组ZC3HAV1、GAPDH表达均降低(0.144±0.002 vs 1.000±0.016,0.772±0.058 vs 1.000±0.122,0.077±0.009 vs 1.000±0.164,P<0.05)。hsa_circ_0082626可以抵抗RNase R的处理,主要分布于细胞质。过表达组的hsa_circ_0082626表达量明显较阴性对照组明显增高,而且在转染48 h时的表达量最高(表达量约为对照组的1000倍)。结论成功分析了hsa_circ_0082626的反向剪切位点、RNA酶的抵抗性和在细胞中的表达定位等特征,证明了hsa_circ_0082626确实具有环状结构及成功构建了hsa_circ_0082626的过表达载体,为深入研究环状RNA hsa_circ_0082626的生物功能和机制提供了实验基础。 展开更多

关键词 ZC3hav1 环状RNA RNA酶抵抗性 过表达载体

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不同喷涂方法制备马氏体不锈钢涂层组织性能对比 被引量：3

18

作者 金国 徐滨士 +2 位作者 王海斗 李庆芬 魏世丞 《焊接学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第8期39-42,115,共4页

采用电热爆炸定向喷涂和高速电弧喷涂技术,分别制备了3Cr13不锈钢涂层。使用扫描电子显微镜(SEM)、X射线能谱仪(EDAX)、X射线衍射仪(XRD)和纳米压痕仪等分析了两种涂层的组织形貌、元素分布、相结构、纳米硬度和弹性模量等。结果表明,... 采用电热爆炸定向喷涂和高速电弧喷涂技术,分别制备了3Cr13不锈钢涂层。使用扫描电子显微镜(SEM)、X射线能谱仪(EDAX)、X射线衍射仪(XRD)和纳米压痕仪等分析了两种涂层的组织形貌、元素分布、相结构、纳米硬度和弹性模量等。结果表明,电热爆炸定向喷涂层比高速电弧喷涂层更致密;前者氧化现象不明显,而后者较明显;前者与基体主要是冶金结合,而后者主要为机械结合;前者的纳米硬度和弹性模量分别达到了10.3GPa和237.8GPa,高于后者的7.6GPa和183.3GPa。 展开更多

关键词 电热爆炸定向喷涂 高速电弧喷涂 3CR13涂层 组织 性能

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甲/戊型肝炎重组抗原的表达、纯化及与传统甲肝疫苗免疫原性的比较 被引量：1

19

作者 庞媛玉 李鸿钧 +3 位作者 奎翔 谢天宏 张光明 孙茂盛 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第3期381-387,共7页

目的比较基因工程重组抗原与传统疫苗的免疫原性;探讨同一载体表达不同抗原的能力和抗原间的相互作用。方法将编码甲型肝炎病毒Vp1aa24-171和戊型肝炎病毒ORF2aa431-615的重组表达质粒pBV220-EAAg342及pBV220-AEAg342转化入大肠杆菌BL-... 目的比较基因工程重组抗原与传统疫苗的免疫原性;探讨同一载体表达不同抗原的能力和抗原间的相互作用。方法将编码甲型肝炎病毒Vp1aa24-171和戊型肝炎病毒ORF2aa431-615的重组表达质粒pBV220-EAAg342及pBV220-AEAg342转化入大肠杆菌BL-21,筛选出高效表达的菌种进行目的蛋白的表达。用DEAE-sepharose FF和CM-sepharoseFF离子层析交换柱纯化表达重组蛋白,采用SDS-PAGE、Western blotting方法进行分析鉴定。用纯化的重组蛋白及传统甲肝疫苗灭活疫苗与减毒活疫苗免疫小鼠,比较特异性抗体的产生水平。结果表达的重组蛋白相对分子质量约为36000,表达量约占菌体总量的25%;且重组嵌合抗原EAAg342可以形成直径10～20nm的类病毒(virus-like particles,VLP)颗粒。Western blotting证实2种重组蛋白均能分别与甲型肝炎和戊型肝炎患者阳性血清发生特异性反应。免疫小鼠后可诱导产生高滴度的抗戊肝特异性抗体;而抗甲肝特异性抗体水平与传统甲肝疫苗相比较低。结论使用原核系统表达的甲/戊肝重组抗原能够高效表达,2种不同的融合蛋白均分别具有良好的抗原性和免疫原性,具有开发双价疫苗及同时诊断甲型戊型肝炎试剂盒的前景。 展开更多

关键词 甲型肝炎病毒 戊型肝炎病毒 重组蛋白 原核表达 免疫原性

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我国高度自动驾驶汽车侵权责任体系之建构 被引量：9

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作者 牛彬彬 《西北民族大学学报（哲学社会科学版）》 CSSCI 2019年第3期177-188,共12页

高度自动驾驶汽车具有三个特征:程序依赖、不完全的机器信任和系统深度学习功能下人机互动所导致的"行为耦合"。也因此自动驾驶技术的发展对传统责任体系构成了一定冲击。对高度自动驾驶汽车驾驶人的责任认定应采取过错推定原... 高度自动驾驶汽车具有三个特征:程序依赖、不完全的机器信任和系统深度学习功能下人机互动所导致的"行为耦合"。也因此自动驾驶技术的发展对传统责任体系构成了一定冲击。对高度自动驾驶汽车驾驶人的责任认定应采取过错推定原则;针对高度自动驾驶汽车的产品缺陷,可以采取合理机动车标准弥补传统的产品缺陷认定标准的弊端,另外也需要重视专家鉴定结论和事件记录仪的证据辅助功能。最后,针对某些情形下责任主体认定的困境,可以通过自动驾驶汽车产品责任保险对损害进行填补,以转嫁自动驾驶汽车本身的行业风险,以鼓励创新、支持自动驾驶行业的发展。 展开更多

关键词 高度自动驾驶汽车 过错推定 合理机动车标准 产品责任保险 自动驾驶技术 接管义务

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