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鸡柔嫩艾美耳球虫HAP2基因的克隆与生物信息学分析
被引量：
2
1
作者
寇叙
项钰
+3 位作者
张春柳
梁爽
于鹦月
马闯
《中国家禽》
北大核心
2019年第15期52-55,共4页
为研究鸡柔嫩艾美耳球虫HAP2(Hapless2/generative cell-specific)基因的抗原性,根据GenBank发表的HAP2基因的cDNA序列ORF设计一对引物,用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫配子体总RNA中扩增HAP2基因,将扩增产物与pMD18-T载体连接后进行测序...
为研究鸡柔嫩艾美耳球虫HAP2(Hapless2/generative cell-specific)基因的抗原性,根据GenBank发表的HAP2基因的cDNA序列ORF设计一对引物,用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫配子体总RNA中扩增HAP2基因,将扩增产物与pMD18-T载体连接后进行测序和序列分析,同时应用生物信息学软件对HAP2基因表达蛋白的结构域和在柔嫩艾美耳球虫生活史的各阶段表达情况进行预测。结果获得867 bp的目的基因扩增片段,经同源性分析比较柔嫩艾美耳球虫HAP2基因与其他艾美耳球虫种HAP2基因同源性在70%以上,该基因所表达的蛋白主要在球虫配子生殖阶段的配子体和未孢子化的卵囊中表达。说明HAP2基因具有作为传播阻断疫苗的候选抗原的可行性。
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关键词
柔嫩艾美耳球虫
hap2基因
序列分析
生物信息学
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职称材料
鸡柔嫩艾美尔球虫HAP2基因的克隆与原核表达
被引量：
1
2
作者
梁爽
王蓓蕾
+5 位作者
项钰
佟季航
于鹦月
马闯
谭忠亮
寇叙
《现代畜牧兽医》
2019年第2期1-4,共4页
为研究鸡柔嫩艾美尔球虫(E.tenella)HAP2(hapless2/generative cell-specific)蛋白的抗原性,根据Gen?Bank发表的HAP2基因的cDNA序列(Gene ID:25252561)ORF设计1对引物,用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫配子体总RNA中扩增HAP2基因,将扩增产...
为研究鸡柔嫩艾美尔球虫(E.tenella)HAP2(hapless2/generative cell-specific)蛋白的抗原性,根据Gen?Bank发表的HAP2基因的cDNA序列(Gene ID:25252561)ORF设计1对引物,用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫配子体总RNA中扩增HAP2基因,将扩增产物与pMD18-T载体连接后进行测序和序列分析,将测序正确的HAP2基因亚克隆入原核表达载体pET32a,转化宿主菌E.coli RGB,在IPTG诱导下进行原核表达。结果在20℃诱导12 h条件下成功表达了HAP2融合蛋白大小为41 ku,并应用磁珠纯化的方法纯化了重组蛋白,获得了HAP2融合蛋白,为进一步研究HAP2的抗原性奠定基础。
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关键词
柔嫩艾美尔球虫
hap2基因
原核表达
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职称材料
题名
鸡柔嫩艾美耳球虫HAP2基因的克隆与生物信息学分析
被引量：
2
1
作者
寇叙
项钰
张春柳
梁爽
于鹦月
马闯
机构
锦州医科大学畜牧兽医学院
锦州市太和区动物卫生监督所
出处
《中国家禽》
北大核心
2019年第15期52-55,共4页
基金
辽宁省自然科学基金博士启动项目(20180540040)
文摘
为研究鸡柔嫩艾美耳球虫HAP2(Hapless2/generative cell-specific)基因的抗原性,根据GenBank发表的HAP2基因的cDNA序列ORF设计一对引物,用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫配子体总RNA中扩增HAP2基因,将扩增产物与pMD18-T载体连接后进行测序和序列分析,同时应用生物信息学软件对HAP2基因表达蛋白的结构域和在柔嫩艾美耳球虫生活史的各阶段表达情况进行预测。结果获得867 bp的目的基因扩增片段,经同源性分析比较柔嫩艾美耳球虫HAP2基因与其他艾美耳球虫种HAP2基因同源性在70%以上,该基因所表达的蛋白主要在球虫配子生殖阶段的配子体和未孢子化的卵囊中表达。说明HAP2基因具有作为传播阻断疫苗的候选抗原的可行性。
关键词
柔嫩艾美耳球虫
hap2基因
序列分析
生物信息学
分类号
S855.9 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
鸡柔嫩艾美尔球虫HAP2基因的克隆与原核表达
被引量：
1
2
作者
梁爽
王蓓蕾
项钰
佟季航
于鹦月
马闯
谭忠亮
寇叙
机构
锦州医科大学畜牧兽医学院
长春生物制品研究所有限责任公司
吉林省亮宇种业有限公司
出处
《现代畜牧兽医》
2019年第2期1-4,共4页
基金
锦州医科大学大学生创新训练项目(201819)
辽宁省自然科学基因博士启动项目(20180540040)
文摘
为研究鸡柔嫩艾美尔球虫(E.tenella)HAP2(hapless2/generative cell-specific)蛋白的抗原性,根据Gen?Bank发表的HAP2基因的cDNA序列(Gene ID:25252561)ORF设计1对引物,用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫配子体总RNA中扩增HAP2基因,将扩增产物与pMD18-T载体连接后进行测序和序列分析,将测序正确的HAP2基因亚克隆入原核表达载体pET32a,转化宿主菌E.coli RGB,在IPTG诱导下进行原核表达。结果在20℃诱导12 h条件下成功表达了HAP2融合蛋白大小为41 ku,并应用磁珠纯化的方法纯化了重组蛋白,获得了HAP2融合蛋白,为进一步研究HAP2的抗原性奠定基础。
关键词
柔嫩艾美尔球虫
hap2基因
原核表达
Keywords
Eimeria.tenella
hap
2
gene
Prokaryotic Expression
分类号
S852.723 [农业科学—基础兽医学]
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作者
出处
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被引量
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1
鸡柔嫩艾美耳球虫HAP2基因的克隆与生物信息学分析
寇叙
项钰
张春柳
梁爽
于鹦月
马闯
《中国家禽》
北大核心
2019
2
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职称材料
2
鸡柔嫩艾美尔球虫HAP2基因的克隆与原核表达
梁爽
王蓓蕾
项钰
佟季航
于鹦月
马闯
谭忠亮
寇叙
《现代畜牧兽医》
2019
1
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已选择
0
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