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禽流感H5和H9亚型基因探针的制备
被引量：
3
1
作者
方浩
宋念华
+2 位作者
姚志伟
熊元林
王松太
《湖北农业科学》
北大核心
2007年第2期190-193,共4页
参照GeneBank数据库上H5N1和H9N2 AIV的HA基因序列,选取保守区域,设计了两对引物,分别用于扩增HA基因,产物纯化回收得到180bp和285bp cDNA片段,采用随机引物法Digxigenin-11-dUTP标记得到探针H5PR和H9PR,通过斑点杂交检测,结果表明探针...
参照GeneBank数据库上H5N1和H9N2 AIV的HA基因序列,选取保守区域,设计了两对引物,分别用于扩增HA基因,产物纯化回收得到180bp和285bp cDNA片段,采用随机引物法Digxigenin-11-dUTP标记得到探针H5PR和H9PR,通过斑点杂交检测,结果表明探针的灵敏度高和特异性好,可以进行相关性试验。
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关键词
禽流感病毒
斑点杂交
地高辛探针
制备
h
5
亚型
基因
h9亚型基因
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职称材料
表达禽流感H5N1血凝素抗原(HA)和H9N2血凝素抗原(HA)融合基因重组腺病毒二价苗的构建
2
作者
王增利
张哲
+7 位作者
李鹏坤
霍惠玲
李娥
甄理
董维亚
化金津
冯亚文
仇国明
《今日畜牧兽医》
2020年第8期10-13,共4页
为了构建禽流感病毒H5N1亚型禽流感病毒HA和H9N2亚型禽流感HA融合基因表达的重组腺病毒。根据流行病学调查并参考文献研究结果,合成了优势流行H5N1和H9N2的保护性抗原HA基因的融合基因片段,并将该融合基因片段克隆到在pUC57载体,命名为p...
为了构建禽流感病毒H5N1亚型禽流感病毒HA和H9N2亚型禽流感HA融合基因表达的重组腺病毒。根据流行病学调查并参考文献研究结果,合成了优势流行H5N1和H9N2的保护性抗原HA基因的融合基因片段,并将该融合基因片段克隆到在pUC57载体,命名为pUC-57H5H9HA。该融合基因片段经特异酶切后与腺病毒穿梭质粒pDC315连接,获得携带目的融合基因腺病毒穿梭质粒pDC315-H5H9HA;将该重组穿梭质粒与AdMax腺病毒包装系统的骨架质粒(pBHGlox(delta)E1,3Cre)经Cre/loxP酶切重组,构建成重组腺病毒(rAd-H5H9HA);Ad-H5H9HA感染293细胞后,扩增病毒基因,纯化病毒及检测病毒滴度。PCR鉴定及基因测序分析,H5N1HAH9N2HA(H5H9HA)融合基因表达的重组腺病毒载体构建成功;经过重组腺病毒r Ad-H5H9HA免疫SPF鸡后的抗体检测,证实了重组腺病毒r Ad-H5H9HA诱导了H5N1和H9N2的特异抗体,而且抗体水平达到了国家免疫标准。本研究成功构建的重组腺病毒rAd-H5H9HA,可以作为预防H5N1和H9N2两个亚型病毒的二价疫苗使用,为将来禽流感的预防控制提供了一种新的可能。
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关键词
重组腺病毒
AIV
h
5N1
亚型
h
A
h
9
N2
亚型
h
A
基因
融合
基因
疫苗
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职称材料
题名
禽流感H5和H9亚型基因探针的制备
被引量：
3
1
作者
方浩
宋念华
姚志伟
熊元林
王松太
机构
武汉生物工程学院生物工程系
湖北省动物疫病诊断中心
出处
《湖北农业科学》
北大核心
2007年第2期190-193,共4页
基金
湖北省科技攻关项目(2004AA202B04)
文摘
参照GeneBank数据库上H5N1和H9N2 AIV的HA基因序列,选取保守区域,设计了两对引物,分别用于扩增HA基因,产物纯化回收得到180bp和285bp cDNA片段,采用随机引物法Digxigenin-11-dUTP标记得到探针H5PR和H9PR,通过斑点杂交检测,结果表明探针的灵敏度高和特异性好,可以进行相关性试验。
关键词
禽流感病毒
斑点杂交
地高辛探针
制备
h
5
亚型
基因
h9亚型基因
Keywords
avian influenza virus （AIV）
dot blot
DIG probe
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
表达禽流感H5N1血凝素抗原(HA)和H9N2血凝素抗原(HA)融合基因重组腺病毒二价苗的构建
2
作者
王增利
张哲
李鹏坤
霍惠玲
李娥
甄理
董维亚
化金津
冯亚文
仇国明
机构
河北省动物疫病预防控制中心
河北省动物卫生监督所
天津保信立德生物科技有限公司
河北省兽药监察所
天津豪威生物科技有限公司
河北省农业招商中心
出处
《今日畜牧兽医》
2020年第8期10-13,共4页
基金
河北省科技计划项目-农业关键共性技术攻关专项(17222405D)。
文摘
为了构建禽流感病毒H5N1亚型禽流感病毒HA和H9N2亚型禽流感HA融合基因表达的重组腺病毒。根据流行病学调查并参考文献研究结果,合成了优势流行H5N1和H9N2的保护性抗原HA基因的融合基因片段,并将该融合基因片段克隆到在pUC57载体,命名为pUC-57H5H9HA。该融合基因片段经特异酶切后与腺病毒穿梭质粒pDC315连接,获得携带目的融合基因腺病毒穿梭质粒pDC315-H5H9HA;将该重组穿梭质粒与AdMax腺病毒包装系统的骨架质粒(pBHGlox(delta)E1,3Cre)经Cre/loxP酶切重组,构建成重组腺病毒(rAd-H5H9HA);Ad-H5H9HA感染293细胞后,扩增病毒基因,纯化病毒及检测病毒滴度。PCR鉴定及基因测序分析,H5N1HAH9N2HA(H5H9HA)融合基因表达的重组腺病毒载体构建成功;经过重组腺病毒r Ad-H5H9HA免疫SPF鸡后的抗体检测,证实了重组腺病毒r Ad-H5H9HA诱导了H5N1和H9N2的特异抗体,而且抗体水平达到了国家免疫标准。本研究成功构建的重组腺病毒rAd-H5H9HA,可以作为预防H5N1和H9N2两个亚型病毒的二价疫苗使用,为将来禽流感的预防控制提供了一种新的可能。
关键词
重组腺病毒
AIV
h
5N1
亚型
h
A
h
9
N2
亚型
h
A
基因
融合
基因
疫苗
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
禽流感H5和H9亚型基因探针的制备
方浩
宋念华
姚志伟
熊元林
王松太
《湖北农业科学》
北大核心
2007
3
在线阅读
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职称材料
2
表达禽流感H5N1血凝素抗原(HA)和H9N2血凝素抗原(HA)融合基因重组腺病毒二价苗的构建
王增利
张哲
李鹏坤
霍惠玲
李娥
甄理
董维亚
化金津
冯亚文
仇国明
《今日畜牧兽医》
2020
0
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职称材料
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