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H3K4和H3K9三甲基化在猪体外成熟卵母细胞和克隆胚胎中的表达分析
1
作者
沈开元
代小丽
+3 位作者
杨婷
佘春
石德顺
李湘萍
《西南大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期1-6,共6页
该研究主要运用单细胞免疫荧光技术分析猪卵母细胞和克隆胚胎发育过程中,H3K4和H3K9三甲基化(H3K4me3,H3K9me3)的表达情况.收集体外成熟0h,6h,12h,24h,30h,36h,42h的猪卵母细胞;同时通过体细胞核移植操作获得一细胞、四细胞、桑葚胚和...
该研究主要运用单细胞免疫荧光技术分析猪卵母细胞和克隆胚胎发育过程中,H3K4和H3K9三甲基化(H3K4me3,H3K9me3)的表达情况.收集体外成熟0h,6h,12h,24h,30h,36h,42h的猪卵母细胞;同时通过体细胞核移植操作获得一细胞、四细胞、桑葚胚和囊胚期克隆胚胎,经过免疫荧光染色,在激光共聚焦显微镜下观察H3K4me3和H3K9me3修饰在卵母细胞和胚胎中的变化情况.免疫荧光结果显示,在不同减数分裂阶段的猪卵母细胞内均能观察到H3K4me3的表达,并且呈现出逐渐下降的趋势;在生发泡期(GV),生发泡晚期(L-GV)和生发泡破裂(GVBD)阶段的卵母细胞中能发现明显的H3K9me3表达,随着减数分裂的进行,H3K9me3表达消失,在第一次减数分裂中期前阶段(Pre-MI)到第二次减数分裂中期(MⅡ)阶段卵母细胞中未发现H3K9me3荧光信号.H3K4me3和H3K9me3在不同发育阶段的猪克隆胚胎中都有表达,其中H3K4me3在不同阶段胚胎中荧光信号强度相近,H3K9me3在四细胞胚胎中荧光强度降低,在桑葚胚和囊胚中荧光强度出现升高的趋势.以上结果说明,H3K4me3参与调控猪卵母细胞体外成熟的整个过程,H3K4me3和H3K9me3在猪体细胞核移植胚胎早期发育过程中可能具有调控作用.
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关键词
h3k4三甲基化
h
3
k
9
三
甲基
化
猪
卵母细胞
体细胞核移植胚胎
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职称材料
小鼠生发泡期卵母细胞成熟过程中转录沉默机制的探讨
被引量：
2
2
作者
夏梦
刘明兮
+3 位作者
周涛
何辉
万茹
霍然
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第7期956-961,共6页
目的:探讨小鼠生发泡卵母细胞成熟过程中发生大规模转录沉默的机制。方法:选用4～6周龄ICR雌性小鼠,分离生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞,运用RNA聚合酶Ⅱ抗体(anti-RNA PolⅡCTD,clone 4H8)及其羧基末端结构域(CTD)基团第2位丝...
目的:探讨小鼠生发泡卵母细胞成熟过程中发生大规模转录沉默的机制。方法:选用4～6周龄ICR雌性小鼠,分离生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞,运用RNA聚合酶Ⅱ抗体(anti-RNA PolⅡCTD,clone 4H8)及其羧基末端结构域(CTD)基团第2位丝氨酸磷酸化的抗体(anti-RNA PolⅡCTD Ser2-P,clone H5)、组蛋白H3K4/H3K9三甲基化的抗体(anti-H3K4me3、anti-H3K9me3)进行免疫荧光染色。观察伴随GV期小鼠卵母细胞染色质构型由非包围核仁(non-surround nucleolus,NSN)型转变为包围核仁(surround nucleolus,SN)型的过程,这两对标记物的表达及分布变化。结果:在NSN型的GV期卵母细胞中,RNA PolⅡCTD Ser2-P于核浆中呈特征性斑块状分布,同时H3K4me3在核浆中也显示强阳性信号;但在SN型卵母细胞中,RNA PolⅡCTD Ser2-P失去特征性分布,转变为核浆中弥漫性分布,H3K4me3的核浆中阳性信号也消失。结论:RNA聚合酶Ⅱ的活性降低及组蛋白修饰状态的改变在小鼠GV期卵母细胞成熟过程的大规模转录沉默中发挥了重要作用。
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关键词
生发泡卵母细胞
转录沉默
RNA聚合酶Ⅱ
组蛋白
h
3
k
4/
k
9
三
甲基
化
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职称材料
题名
H3K4和H3K9三甲基化在猪体外成熟卵母细胞和克隆胚胎中的表达分析
1
作者
沈开元
代小丽
杨婷
佘春
石德顺
李湘萍
机构
广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室
柳州市人民医院
出处
《西南大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期1-6,共6页
基金
国家自然科学基金(31560632)
广西自然科学基金(2014GXNSFAA118084
+1 种基金
2014GXNSFAA118099
2016GXNSFDA380030)
文摘
该研究主要运用单细胞免疫荧光技术分析猪卵母细胞和克隆胚胎发育过程中,H3K4和H3K9三甲基化(H3K4me3,H3K9me3)的表达情况.收集体外成熟0h,6h,12h,24h,30h,36h,42h的猪卵母细胞;同时通过体细胞核移植操作获得一细胞、四细胞、桑葚胚和囊胚期克隆胚胎,经过免疫荧光染色,在激光共聚焦显微镜下观察H3K4me3和H3K9me3修饰在卵母细胞和胚胎中的变化情况.免疫荧光结果显示,在不同减数分裂阶段的猪卵母细胞内均能观察到H3K4me3的表达,并且呈现出逐渐下降的趋势;在生发泡期(GV),生发泡晚期(L-GV)和生发泡破裂(GVBD)阶段的卵母细胞中能发现明显的H3K9me3表达,随着减数分裂的进行,H3K9me3表达消失,在第一次减数分裂中期前阶段(Pre-MI)到第二次减数分裂中期(MⅡ)阶段卵母细胞中未发现H3K9me3荧光信号.H3K4me3和H3K9me3在不同发育阶段的猪克隆胚胎中都有表达,其中H3K4me3在不同阶段胚胎中荧光信号强度相近,H3K9me3在四细胞胚胎中荧光强度降低,在桑葚胚和囊胚中荧光强度出现升高的趋势.以上结果说明,H3K4me3参与调控猪卵母细胞体外成熟的整个过程,H3K4me3和H3K9me3在猪体细胞核移植胚胎早期发育过程中可能具有调控作用.
关键词
h3k4三甲基化
h
3
k
9
三
甲基
化
猪
卵母细胞
体细胞核移植胚胎
Keywords
h
3
k
4
trimet
h
ylation
h
3
k
9 trimet
h
ylation
porcine
oocyte
somatic cell nuclear transfer embryo
分类号
S828 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
小鼠生发泡期卵母细胞成熟过程中转录沉默机制的探讨
被引量：
2
2
作者
夏梦
刘明兮
周涛
何辉
万茹
霍然
机构
南京医科大学组织胚胎学系
出处
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第7期956-961,共6页
基金
国家自然科学基金(30700275)
文摘
目的:探讨小鼠生发泡卵母细胞成熟过程中发生大规模转录沉默的机制。方法:选用4～6周龄ICR雌性小鼠,分离生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞,运用RNA聚合酶Ⅱ抗体(anti-RNA PolⅡCTD,clone 4H8)及其羧基末端结构域(CTD)基团第2位丝氨酸磷酸化的抗体(anti-RNA PolⅡCTD Ser2-P,clone H5)、组蛋白H3K4/H3K9三甲基化的抗体(anti-H3K4me3、anti-H3K9me3)进行免疫荧光染色。观察伴随GV期小鼠卵母细胞染色质构型由非包围核仁(non-surround nucleolus,NSN)型转变为包围核仁(surround nucleolus,SN)型的过程,这两对标记物的表达及分布变化。结果:在NSN型的GV期卵母细胞中,RNA PolⅡCTD Ser2-P于核浆中呈特征性斑块状分布,同时H3K4me3在核浆中也显示强阳性信号;但在SN型卵母细胞中,RNA PolⅡCTD Ser2-P失去特征性分布,转变为核浆中弥漫性分布,H3K4me3的核浆中阳性信号也消失。结论:RNA聚合酶Ⅱ的活性降低及组蛋白修饰状态的改变在小鼠GV期卵母细胞成熟过程的大规模转录沉默中发挥了重要作用。
关键词
生发泡卵母细胞
转录沉默
RNA聚合酶Ⅱ
组蛋白
h
3
k
4/
k
9
三
甲基
化
Keywords
germinal vesicle oocyte
transcription silencing
RNA PolymeraseⅡ
h
3
k
4
/
h
3
k
9me
3
分类号
R321.1 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
H3K4和H3K9三甲基化在猪体外成熟卵母细胞和克隆胚胎中的表达分析
沈开元
代小丽
杨婷
佘春
石德顺
李湘萍
《西南大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2017
0
在线阅读
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职称材料
2
小鼠生发泡期卵母细胞成熟过程中转录沉默机制的探讨
夏梦
刘明兮
周涛
何辉
万茹
霍然
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
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职称材料
已选择
0
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引证文献
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