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逆转录环介导等温扩增技术检测H3亚型猪流感病毒被引量：8: 1; 作者刘中勇朱道中 +4 位作者李少璃冀君毕英佐谢青梅曹永长《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第7期1-5,共5页; 基于环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立了一种用于快速检测H3亚型猪流感病毒的方法。根据GenBank中收录的H3N2亚型猪流感病毒(SIV)HA基因保守区的序列,设计一组对应HA序列6个区域的4条特异性引物,建立RT-LAMP反应体系;经优化,确定了最佳... 展开更多; 关键词 h3亚型猪流感病毒血凝素逆转录环介导等温扩增; 在线阅读下载PDF 职称材料

H1、H3亚型猪流感病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：4: 2; 作者王博王慧煜 +4 位作者赵宝华罗静王承民何宏轩韩雪清《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第10期3035-3041,共7页; 为建立一种快速、准确地检测H1和H3亚型猪流感病毒(swine influence virus,SIV)的方法,根据H1和H3亚型SIV血凝素(hemagglutinin,HA)基因保守序列,分别设计2对特异性引物和2条Taq Man探针,建立双重实时荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该... 展开更多; 关键词 h1和h3亚型猪流感病毒(SIV) 双重实时荧光定量RT-PCR TAQMAN探针; 在线阅读下载PDF 职称材料

H3N2亚型猪流感病毒血凝素基因的原核表达及间接ELISA诊断方法的建立被引量：5: 3; 作者刘天强于海 +3 位作者张强李国新王斌童光志《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期795-799,823,共6页; 采用RT-PCR扩增H3N2亚型猪流感病毒HA1基因。将该片段插入到原核表达载体pET-30a(+)中,构建原核表达载体pET-HA1。阳性质粒转化宿主菌BL21,经IPTG诱导,HA1基因获得表达,其重组蛋白以包涵体的形式存在。通过改变IPTG的浓度和诱导时间,确... 展开更多; 关键词 h3N2亚型猪流感病毒血凝素基因原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

H3N2亚型猪流感病毒HA1、HA2基因的原核表达及抗原性分析被引量：3: 4; 作者宋玉慧王翔宇 +4 位作者王洁琼潘梦梦张剑刘琳李新生《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第10期2762-2767,共6页; 血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白是猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的一个重要蛋白,在疾病预防和治疗中具有重要作用。本试验旨在克隆和表达H3N2亚型猪流感病毒A/swine/Henan/1/2010(H3N2)的HA1和HA2基因。用含有H3N2亚型SIV的鸡... 展开更多; 关键词 h3N2亚型猪流感病毒 hA1基因 hA2基因原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

H3N2亚型猪流感病毒HA和HA1蛋白的原核表达被引量：1: 5; 作者纪方晓陈济铛 +2 位作者石庆伟王衡张桂红《动物医学进展》北大核心 2016年第6期22-25,共4页; 为原核表达H3N2亚型猪流感病毒(SIV)的HA和HA1蛋白,通过RT-PCR方法获得SIV的HA和HA1基因,克隆至原核表达载体pMAL-c5X,并转化至原核表达菌Rosetta(DE3)中,表达菌经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,成功表达了H... 展开更多; 关键词 h3N2亚型猪流感病毒 hA蛋白 hA1蛋白原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

H3N2亚型猪流感病毒NS1基因的克隆与序列分析被引量：2: 6; 作者高敏薛慧文《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第3期1-4,共4页; 从鸡胚尿囊液中提取H3N2亚型猪流感病毒(SIV)的RNA,根据已发表的A型流感病毒的核苷酸序列,设计了一对特异性引物,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)成功地扩增了SIV的NS1基因．将NS1基因的cDNA克隆后进行了序列测定,测序结果表明,所扩增... 展开更多; 关键词 h3N2亚型猪流感病毒NSI基因克隆序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

2018~2019年安阳市规模猪场猪流感病毒病调查研究被引量：3: 7; 作者王庆云赵琳 +1 位作者郭希萍王会英《畜牧兽医杂志》 2021年第1期48-50,共3页; 猪流感病毒(Swineinfluenza virus,SIV)主要包括H1亚型和H3亚型,是导致猪流感的主要病毒亚型,在中国猪群中广为传播,为养猪业带来重大经济影响。为了解安阳市地区猪流感的情况,我们收集了2018~2019年安阳市各地共1169份猪血清,采用ELIS... 展开更多; 关键词猪流感 h1亚型猪流感病毒 h3亚型猪流感病毒酶联免疫吸附试验(ELISA试验); 在线阅读下载PDF 职称材料

以小鼠为模型评价重组伪狂犬病病毒rPRV-HA的免疫效力被引量：1: 8; 作者郑宝亮周国辉 +5 位作者田志军仇华吉杨焕良尹训南胡守萍童光志《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期361-367,共7页; 以小鼠为动物模型,对此前构建的表达H3N2亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(HA)基因的重组伪狂犬病病毒(rPRV-HA)进行了免疫效力评价。按每只105.0TCID50rPRV-HA的剂量通过滴鼻接种8周龄雌性BALB/c小鼠(n=60),同时设Bartha-K61免疫对照组(n=60... 展开更多; 关键词伪狂犬病病毒 h3N2亚型猪流感病毒重组病毒小鼠模型免疫效力; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名逆转录环介导等温扩增技术检测H3亚型猪流感病毒被引量：8: 1; 作者刘中勇朱道中李少璃冀君毕英佐谢青梅曹永长; 机构广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心华南农业大学动物科学学院; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第7期1-5,共5页; 基金广东省重大科技专项(2005A20901004 2006A20901003); 文摘基于环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立了一种用于快速检测H3亚型猪流感病毒的方法。根据GenBank中收录的H3N2亚型猪流感病毒(SIV)HA基因保守区的序列,设计一组对应HA序列6个区域的4条特异性引物,建立RT-LAMP反应体系;经优化,确定了最佳的LAMP反应条件。扩增后产物形成的焦磷酸离子和溶液中的镁离子结合而形成焦磷酸镁沉淀,结果可视。同时用特异性内切酶HhaⅠ对所获得的产物进行酶切鉴定,所得的酶切产物大小与理论值完全符合。用已建立的RT-LAMP技术检测临床样品,检测结果与RT-PCR方法符合率均达到100%。结果表明,本研究建立的RT-LAMP检测猪流感病毒方法,操作简单,灵敏度高,特异性强,是一种适用于现场诊断的检测技术。; 关键词 h3亚型猪流感病毒血凝素逆转录环介导等温扩增; Keywords h3 subtype Swine influenza virus hA reverse transcription loop-mediated isothermal amplifi cation; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名H1、H3亚型猪流感病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：4: 2; 作者王博王慧煜赵宝华罗静王承民何宏轩韩雪清; 机构中国检验检疫科学研究院中国科学院动物研究所河北师范大学; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第10期3035-3041,共7页; 基金十二五国家科技支撑计划课题(2013BAD12B01) 国家林业局野生动物疫源疫病监测项目中国科学院战略生物资源科技支撑体系运行专项野生动物疫源疫病样品组织库(CZBZX-1); 文摘为建立一种快速、准确地检测H1和H3亚型猪流感病毒(swine influence virus,SIV)的方法,根据H1和H3亚型SIV血凝素(hemagglutinin,HA)基因保守序列,分别设计2对特异性引物和2条Taq Man探针,建立双重实时荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法敏感性高,可检测到最低拷贝数为102拷贝/μL;重复性良好,重复孔Ct值的变异系数均在5%以下;特异性好,除H1和H3亚型SIV外,H4、H5、H7、H9亚型SIV、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒、伪狂犬病病毒检测均为阴性;在田间样品中成功检出1株H1和1株H3亚型SIV,检出率为1.16%。该方法准确、快速、灵敏、特异,可为H1、H3亚型SIV的快速鉴别检测及流行病学调查提供有效的技术手段。; 关键词 h1和h3亚型猪流感病毒(SIV) 双重实时荧光定量RT-PCR TAQMAN探针; Keywords h1 and h3 subtype swine influenza viruses(SIV) duplex Real-time RT-PCR TaqMan probe; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名H3N2亚型猪流感病毒血凝素基因的原核表达及间接ELISA诊断方法的建立被引量：5: 3; 作者刘天强于海张强李国新王斌童光志; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期795-799,823,共6页; 基金国家重点基础研究计划(2005CB523200); 文摘采用RT-PCR扩增H3N2亚型猪流感病毒HA1基因。将该片段插入到原核表达载体pET-30a(+)中,构建原核表达载体pET-HA1。阳性质粒转化宿主菌BL21,经IPTG诱导,HA1基因获得表达,其重组蛋白以包涵体的形式存在。通过改变IPTG的浓度和诱导时间,确定表达HA1基因的最佳诱导条件。Western blot分析表明表达产物具有良好的抗原活性。用纯化的表达产物作为包被抗原建立了检测H3亚型猪流感病毒抗体的间接ELISA方法,确定抗原最佳包被浓度为4μg/mL,血清最佳稀释度为1∶100,阳性标准初步判定为:待检血清OD值>0.4,而且待检血清OD值/阴性血清OD值>2。应用此方法对309份临床血清样品进行了检测,并与HI方法进行了比较,结果表明基于重组HA蛋白的间接ELISA方法可用于H3N2亚型猪流感病毒感染的初步诊断。; 关键词 h3N2亚型猪流感病毒血凝素基因原核表达; Keywords h3N2 subtype swine influenza virus （SIV） hA gene prokaryotic expression; 分类号 S852.659 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名H3N2亚型猪流感病毒HA1、HA2基因的原核表达及抗原性分析被引量：3: 4; 作者宋玉慧王翔宇王洁琼潘梦梦张剑刘琳李新生; 机构河南农业大学牧医工程学院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第10期2762-2767,共6页; 基金河南省科技创新人才计划(144100510009) 郑州市前沿技术研究开发项目(141PQYJS566) 河南省产学研合作项目(15210700096); 文摘血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白是猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的一个重要蛋白,在疾病预防和治疗中具有重要作用。本试验旨在克隆和表达H3N2亚型猪流感病毒A/swine/Henan/1/2010(H3N2)的HA1和HA2基因。用含有H3N2亚型SIV的鸡胚尿囊液提取RNA,RT-PCR扩增后将目的基因定向克隆到pET-28a(+)原核表达载体上,并将其转入宿主菌BL21(DE3)pLyS进行表达,IPTG诱导后经SDS-PAGE检测并用该病毒重组HA蛋白制备的特异性单克隆抗体1C10作为一抗对两种蛋白进行Western blotting分析。SDS-PAGE结果显示,得到HA1和HA2大小分别为34.8、23.2ku的重组蛋白,Western blotting结果表明,HA1蛋白与1C10单克隆抗体具有良好的反应原性,且1C10单克隆抗体表位在HA1蛋白上。本试验结果为进一步研究血凝素蛋白的结构和功能,以及建立快速诊断方法和基因工程疫苗提供材料。; 关键词 h3N2亚型猪流感病毒 hA1基因 hA2基因原核表达; Keywords influenza A virus subtype h3N2 hA1 gene hA2 gene prokaryotic expression; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名H3N2亚型猪流感病毒HA和HA1蛋白的原核表达被引量：1: 5; 作者纪方晓陈济铛石庆伟王衡张桂红; 机构华南农业大学兽医学院; 出处《动物医学进展》北大核心 2016年第6期22-25,共4页; 基金现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-36); 文摘为原核表达H3N2亚型猪流感病毒(SIV)的HA和HA1蛋白,通过RT-PCR方法获得SIV的HA和HA1基因,克隆至原核表达载体pMAL-c5X,并转化至原核表达菌Rosetta(DE3)中,表达菌经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,成功表达了H3亚型SIV的HA和HA1蛋白,目的蛋白均以可溶性蛋白和包涵体两种形式存在,并与H3N2亚型SIV的HA单克隆抗体反应,说明HA和HA1蛋白具有良好的反应原性。; 关键词 h3N2亚型猪流感病毒 hA蛋白 hA1蛋白原核表达; Keywords h3N2 swine influenza virus hA protein hA1 protein prokaryotic expression; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名H3N2亚型猪流感病毒NS1基因的克隆与序列分析被引量：2: 6; 作者高敏薛慧文; 机构甘肃农业大学动物医学院; 出处《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第3期1-4,共4页; 文摘从鸡胚尿囊液中提取H3N2亚型猪流感病毒(SIV)的RNA,根据已发表的A型流感病毒的核苷酸序列,设计了一对特异性引物,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)成功地扩增了SIV的NS1基因．将NS1基因的cDNA克隆后进行了序列测定,测序结果表明,所扩增的778 nt片段包含了完整的NS1基因的开放阅读框．核苷酸序列比较分析结果表明,该毒株与A／Swine／Texas／4199-2／98(H3N2)、A／Swine／Iowa／533／99(H3N2)、A／Swine／HongKong／126／ 82(H3N2)、A／Swine／Pingtung／7-12／99(HIN2)核苷酸序列的同源性为92．7％～98．6％,推导的氨基酸序列同源性为92．6％～96．3％．; 关键词 h3N2亚型猪流感病毒NSI基因克隆序列分析; Keywords swine inftuenza virus（h3N2） NS1 gene clone sequence analysis; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名2018~2019年安阳市规模猪场猪流感病毒病调查研究被引量：3: 7; 作者王庆云赵琳郭希萍王会英; 机构安阳市动物疫病预防控制中心; 出处《畜牧兽医杂志》 2021年第1期48-50,共3页; 文摘猪流感病毒(Swineinfluenza virus,SIV)主要包括H1亚型和H3亚型,是导致猪流感的主要病毒亚型,在中国猪群中广为传播,为养猪业带来重大经济影响。为了解安阳市地区猪流感的情况,我们收集了2018~2019年安阳市各地共1169份猪血清,采用ELISA酶联免疫检测方法,检测了安阳市猪群中猪流感病毒H1亚型和H3亚型的感染情况。结果显示,H1亚型的猪流感病毒最高感染率为70.44%,主要分布在北关区;H3亚型的猪流感病毒最高感染率为36.90%,主要分布在林州区;H1亚型和H3亚型混合感染率最高为34.52%,也位于林州区。本研究结果表明2018~2019年安阳市SIV感染比较普遍,类禽型猪H1亚型的感染率较高,H3亚型的感染率相对较低,同时也存在混合感染的现象。; 关键词猪流感 h1亚型猪流感病毒 h3亚型猪流感病毒酶联免疫吸附试验(ELISA试验); Keywords swine influenza h1 subtypeSIV h3 subtype SIV ELISA; 分类号 S852.651 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名以小鼠为模型评价重组伪狂犬病病毒rPRV-HA的免疫效力被引量：1: 8; 作者郑宝亮周国辉田志军仇华吉杨焕良尹训南胡守萍童光志; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期361-367,共7页; 基金国家科技攻关项目(2004BA519A21) 国家"973"项目(2005CB523200); 文摘以小鼠为动物模型,对此前构建的表达H3N2亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(HA)基因的重组伪狂犬病病毒(rPRV-HA)进行了免疫效力评价。按每只105.0TCID50rPRV-HA的剂量通过滴鼻接种8周龄雌性BALB/c小鼠(n=60),同时设Bartha-K61免疫对照组(n=60)、非免疫攻毒对照组(n=20)和非免疫不攻毒对照组(n=10)。于免疫后不同时间分别从rPRV-HA免疫组和Bartha-K61免疫对照组随机剖杀一定数量的小鼠,其余小鼠于免疫后第28天用105.0TCID50同亚型SIV毒株A/Swine/Heilongjiang/74/2000(H3N2)进行强毒攻击。攻毒后第4、7、14天分别剖杀小鼠,进行间接免疫荧光、病毒分离、血清学和病理组织学检测。结果表明,重组病毒主要分布于肺脏;免疫后14 d起,从rPRV-HA免疫组及Bartha-K61免疫对照组均可检测到针对PRV的荧光抗体;从rPRV-HA免疫组可以检测到针对SIV的荧光抗体和血凝抑制抗体,而各对照组均呈阴性。攻毒后从rPRV-HA免疫组小鼠未分离到攻击病毒,血凝抑制抗体显著升高,病理变化显著轻于对照组,表明rPRV-HA免疫小鼠可以抵抗同亚型SIV的攻击,可以作为rPRV-HA免疫效力评价模型。; 关键词伪狂犬病病毒 h3N2亚型猪流感病毒重组病毒小鼠模型免疫效力; Keywords pseudorabies virus h3N2 subtype swine influenza virus recombinant virus mouse model protective efficacy; 分类号 S858.285.3 [农业科学—临床兽医学] S852.52 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	逆转录环介导等温扩增技术检测H3亚型猪流感病毒	刘中勇朱道中李少璃冀君毕英佐谢青梅曹永长	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2009	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	H1、H3亚型猪流感病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用	王博王慧煜赵宝华罗静王承民何宏轩韩雪清	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2017	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	H3N2亚型猪流感病毒血凝素基因的原核表达及间接ELISA诊断方法的建立	刘天强于海张强李国新王斌童光志	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	H3N2亚型猪流感病毒HA1、HA2基因的原核表达及抗原性分析	宋玉慧王翔宇王洁琼潘梦梦张剑刘琳李新生	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2016	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	H3N2亚型猪流感病毒HA和HA1蛋白的原核表达	纪方晓陈济铛石庆伟王衡张桂红	《动物医学进展》北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	H3N2亚型猪流感病毒NS1基因的克隆与序列分析	高敏薛慧文	《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD	2006	2	在线阅读下载PDF 职称材料
7	2018~2019年安阳市规模猪场猪流感病毒病调查研究	王庆云赵琳郭希萍王会英	《畜牧兽医杂志》	2021	3	在线阅读下载PDF 职称材料
8	以小鼠为模型评价重组伪狂犬病病毒rPRV-HA的免疫效力	郑宝亮周国辉田志军仇华吉杨焕良尹训南胡守萍童光志	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	1	在线阅读下载PDF 职称材料