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Southern杂交方法用于近交系小鼠H-2基因检测被引量：1: 1; 作者马丽颖刘双环 +1 位作者岳秉飞贺争鸣《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2008年第1期62-64,共3页; 目的建立一种简便、快捷、准确的检测方法用于近交系小鼠的遗传检测。方法根据近交系小鼠的H-2基因序列设计相应的探针,并标记生物素,利用微孔板Southern杂交技术,使探针与模板DNA杂交,再加入亲和素标记的辣根过氧化物酶进行酶显色反应... 展开更多; 关键词 SOUTHERN杂交 h-2基因近交系小鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

615小鼠H-2K^k基因cDNA的克隆及序列测定和分析被引量：1: 2; 作者李龙江龚浩 +3 位作者陈俊杰王若菡温玉明王昌美《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期313-315,共3页; 目的 :克隆 6 15小鼠主要组织相容性复合体 (MHC)Ⅰ分子抗原识别基因H_2Kk 并测序分析 ,为转基因治疗提供目的基因。方法 :采用RT_PCR法从 6 15小鼠肝组织总RNA中获得 1 4kb的H_2Kk 基因cDNA ,将其定向连接至PGEM3Zf(+)载体 ,转化E coli... 展开更多; 关键词 h-2K^k基因序列测定主要组织相容性复合体克隆小鼠转基因治疗肿瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

H-2K^b基因导入小鼠造血细胞的研究被引量：2: 3; 作者李蓁李树浓朱振宇《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期593-597,共5页; 本研究应用分子克隆技术，用脂质体（lipofectin）将MHC－Ⅰ类基因（即小鼠H－2kb基因）导入包装细胞PA317。用培养的病毒上清进一步感染BALB／C小鼠的造血细胞，且形成了抗G418的CFU－GM。通过多聚酶链式反应（PCB）和反转录-多聚酶链... 展开更多; 关键词造血细胞 h-2K基因器官移植免疫排斥; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠H-2K^b基因转染人肝癌细胞后激活免疫排斥反应的研究: 4; 作者张智翔袁受力 +2 位作者王小宁张力周殿元《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第2期131-134,共4页; 目的：增强人肝癌细胞的免疫原性以激活宿主免疫细胞识别杀伤相应的肝癌细胞。方法：以脂质体介导小鼠Ｈ－２Ｋｂ基因转染肝癌细胞株，并检测Ｈ－２Ｋｂ抗原表达情况，然后用Ｈ－２Ｋｂ基因转染后的肝癌细胞体外激活效应细胞杀伤活性，... 展开更多; 关键词 h-2K^b基因免疫原性基因转染肝肿瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

H-2K^b cDNA的克隆及其在多种真核细胞中的表达被引量：2: 5; 作者钱书兵钱关祥陈诗书《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第3期193-196,200,共5页; 目的克隆H－2KbcDNA及研究其在多种真核细胞中的表达。方法RT－PCR法扩增H－2KbcDNA，克隆入双顺反子逆转录病毒载体pGCEN，PA317包装出重组病毒后，分别感染NIH3T3、COS7及MM45T．Li，PCR和RT－PCR分析目的基因表达，FACS分析H－2Kb在... 展开更多; 关键词 h-2K^b基因克隆逆转录病毒载体真核表达 CDNA; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Southern杂交方法用于近交系小鼠H-2基因检测被引量：1: 1; 作者马丽颖刘双环岳秉飞贺争鸣; 机构中国药品生物制品检定所; 出处《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2008年第1期62-64,共3页; 文摘目的建立一种简便、快捷、准确的检测方法用于近交系小鼠的遗传检测。方法根据近交系小鼠的H-2基因序列设计相应的探针,并标记生物素,利用微孔板Southern杂交技术,使探针与模板DNA杂交,再加入亲和素标记的辣根过氧化物酶进行酶显色反应,通过酶标仪检测杂交结果,以确定近交系小鼠的基因型。结果57BL/6和C57BL/10为H-2b型;DBA/2和Scid为H-2d型;615和C3H为H-2k型;NCPC/2、TA1、TA2和T739均为H-2b型。结论通过Southern杂交检测可以确定近交系小鼠的基因型。该检测方法简便、易行,检测结果客观,可以应用于近交系小鼠的遗传检测。; 关键词 SOUTHERN杂交 h-2基因近交系小鼠; Keywords Southern blot h-2 gene Inbred Strain of mice; 分类号 Q953 [生物学—动物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名615小鼠H-2K^k基因cDNA的克隆及序列测定和分析被引量：1: 2; 作者李龙江龚浩陈俊杰王若菡温玉明王昌美; 机构四川大学华西口腔医学院四川大学华西基础医学与法医学院分子生物学开放实验室; 出处《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期313-315,共3页; 基金国家自然科学基金资助项目 (编号 3970 0 16 2 ); 文摘目的 :克隆 6 15小鼠主要组织相容性复合体 (MHC)Ⅰ分子抗原识别基因H_2Kk 并测序分析 ,为转基因治疗提供目的基因。方法 :采用RT_PCR法从 6 15小鼠肝组织总RNA中获得 1 4kb的H_2Kk 基因cDNA ,将其定向连接至PGEM3Zf(+)载体 ,转化E coliJM10 9,限制性内切酶筛选出阳性克隆PGEM3Zf(+)_H_2KkcDNA ,末端终止法完成H_2KkcDNA的全序列测定。结果 :测得的H_2KkcDNA序列与文献报道序列同源性高达 99% ,编码MHCⅠ分子抗原识别部位的氨基酸残基的核苷酸序列完全相同。结论 :成功克隆了 6 15小鼠MHCⅠ分子抗原识别基因。; 关键词 h-2K^k基因序列测定主要组织相容性复合体克隆小鼠转基因治疗肿瘤; Keywords h-2K+k gene major histocompatibility complex typeⅠ sequence clone mice; 分类号 R346 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名H-2K^b基因导入小鼠造血细胞的研究被引量：2: 3; 作者李蓁李树浓朱振宇; 机构中山医科大学病理生理学教研室中山医科大学病理化学教研室; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期593-597,共5页; 基金国家自然科学基金; 文摘本研究应用分子克隆技术，用脂质体（lipofectin）将MHC－Ⅰ类基因（即小鼠H－2kb基因）导入包装细胞PA317。用培养的病毒上清进一步感染BALB／C小鼠的造血细胞，且形成了抗G418的CFU－GM。通过多聚酶链式反应（PCB）和反转录-多聚酶链式反应（RT－PCR），表明病毒上清感染后的小鼠造血细胞及其形成的CFU－GM中均整合了MHC-Ⅰ类基因，且已转录为mRNA。流式细胞仪（FACS）测定结果表明，感染后的小鼠造血细胞及其形成的CFU－GM中均有MHC－Ⅰ类抗原的表达。本实验结果表明MHC－Ⅰ类基因已成功地导入小鼠造血细胞中，且不影响其增殖和分化能力。; 关键词造血细胞 h-2K基因器官移植免疫排斥; Keywords Retrovirdae,Gene,Transplantation,Mice,Hematopoiesis; 分类号 R392.4 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠H-2K^b基因转染人肝癌细胞后激活免疫排斥反应的研究: 4; 作者张智翔袁受力王小宁张力周殿元; 机构驻香港部队医院第一军医大学南方医院消化研究所第一军医大学生物技术中心; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第2期131-134,共4页; 文摘目的：增强人肝癌细胞的免疫原性以激活宿主免疫细胞识别杀伤相应的肝癌细胞。方法：以脂质体介导小鼠Ｈ－２Ｋｂ基因转染肝癌细胞株，并检测Ｈ－２Ｋｂ抗原表达情况，然后用Ｈ－２Ｋｂ基因转染后的肝癌细胞体外激活效应细胞杀伤活性，再进行裸鼠动物实验。结果：Ｈ－２Ｋｂ基因转染人肝癌细胞株ＨｅｐＧ２后，Ｓｏｕｔｈｅｍ印迹杂交结果显示，Ｈ－２Ｋｂ基因整合于肿瘤细胞染色体中，ＲＮＡ点杂交结果显示，Ｈ－２ＫｂＤＮＡ已转录成ｍＲＮＡ。免疫组化及流式细胞仪检测显示，Ｈ－２Ｋｂ抗原已在肝癌细胞胞膜上表达。转染后肝癌细胞在体外能强烈诱发效应细胞毒性，这种细胞毒性现象在裸鼠实验中得到进一步验证。结论：异源ＭＨＧ－Ｉ类基因Ｈ－２Ｋｂ转染肝癌细胞后可增强其免疫原性并激活免疫效应细胞杀伤活性。; 关键词 h-2K^b基因免疫原性基因转染肝肿瘤; Keywords h-2Kb gene immunogenicity hepatocarcinoma gene transfer; 分类号 R735.705 [医药卫生—肿瘤] R392.4 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名H-2K^b cDNA的克隆及其在多种真核细胞中的表达被引量：2: 5; 作者钱书兵钱关祥陈诗书; 机构上海第二医科大学生物化学教研室分子生物学实验室人类基因治疗研究中心; 出处《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第3期193-196,200,共5页; 基金国家"八六三"高科技研究项目!BH-03 国家自然科学基金!39800132; 文摘目的克隆H－2KbcDNA及研究其在多种真核细胞中的表达。方法RT－PCR法扩增H－2KbcDNA，克隆入双顺反子逆转录病毒载体pGCEN，PA317包装出重组病毒后，分别感染NIH3T3、COS7及MM45T．Li，PCR和RT－PCR分析目的基因表达，FACS分析H－2Kb在细胞膜上的表达。结果以双顺反子逆转录病毒载体pGCEN介导，分别建立了H－2Kb基因转导细胞：NIH3T3／Kb、COS7／Kb及MM45T．Li／Kb。PCR结果表明目的基因已存在于宿主细胞中，RT－PCR结果表明目的基因已获得正确表达。FACS结果表明H－2Kb分子已稳定表达在细胞膜表面。结论MHC分子基因在多种真核细胞中的表达为研究抗原递呈及抗肿瘤作用提供了基础。; 关键词 h-2K^b基因克隆逆转录病毒载体真核表达 CDNA; Keywords H -2K^b gene clone retroviral vector eukaryotic expression gene therapy; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	Southern杂交方法用于近交系小鼠H-2基因检测	马丽颖刘双环岳秉飞贺争鸣	《中国实验动物学报》 CAS CSCD	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	615小鼠H-2K^k基因cDNA的克隆及序列测定和分析	李龙江龚浩陈俊杰王若菡温玉明王昌美	《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2002	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	H-2K^b基因导入小鼠造血细胞的研究	李蓁李树浓朱振宇	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	1997	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	小鼠H-2K^b基因转染人肝癌细胞后激活免疫排斥反应的研究	张智翔袁受力王小宁张力周殿元	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD	2000	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	H-2K^b cDNA的克隆及其在多种真核细胞中的表达	钱书兵钱关祥陈诗书	《上海第二医科大学学报》 CSCD	1999	2	在线阅读下载PDF 职称材料