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重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶蛋白在改良M9培养基中的诱导表达
被引量:
2
1
作者
刘顺谊
殷志敏
《南京师大学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期74-79,共6页
以重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨连接酶,Glutamine Synthetase,GS EC6.3.1.2)蛋白表达宿主菌株BL21(DE3)(pET3C/谷氨酰胺合成酶)作为研究对象,借助SDS PAGE分析方法,对于用乳糖诱导由T7lac启动子控制的重组目的产物蛋白...
以重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨连接酶,Glutamine Synthetase,GS EC6.3.1.2)蛋白表达宿主菌株BL21(DE3)(pET3C/谷氨酰胺合成酶)作为研究对象,借助SDS PAGE分析方法,对于用乳糖诱导由T7lac启动子控制的重组目的产物蛋白的各种基本参数进行了初步的研究.研究了最佳本底培养基、最佳碳源及其最佳添加比例、碳源与诱导物的最适组合,并探索了适用于改良型培养基的诱导参数.实验结果表明,对于重组目的产物蛋白,改良型M9培养基完全可以替代LB培养基;以甘油为碳源,可以避免葡萄糖对T7lac启动子的屏蔽作用.以乳糖为诱导物,目的蛋白的表达量、可溶性及酶活与以IPTG为诱导物基本接近.研究结果为酶法合成谷氨酰胺的工业化生产提供了一定的参考.
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关键词
谷氨酰胺合成酶
改良
m9
培养基
原核表达
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职称材料
题名
重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶蛋白在改良M9培养基中的诱导表达
被引量:
2
1
作者
刘顺谊
殷志敏
机构
南京师范大学生命科学学院
出处
《南京师大学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期74-79,共6页
基金
国家教委留学回国人员基金(2002SWXSBJBC22)
南京师范大学人才基金(2001SWXXGQB914)资助项目.
文摘
以重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨连接酶,Glutamine Synthetase,GS EC6.3.1.2)蛋白表达宿主菌株BL21(DE3)(pET3C/谷氨酰胺合成酶)作为研究对象,借助SDS PAGE分析方法,对于用乳糖诱导由T7lac启动子控制的重组目的产物蛋白的各种基本参数进行了初步的研究.研究了最佳本底培养基、最佳碳源及其最佳添加比例、碳源与诱导物的最适组合,并探索了适用于改良型培养基的诱导参数.实验结果表明,对于重组目的产物蛋白,改良型M9培养基完全可以替代LB培养基;以甘油为碳源,可以避免葡萄糖对T7lac启动子的屏蔽作用.以乳糖为诱导物,目的蛋白的表达量、可溶性及酶活与以IPTG为诱导物基本接近.研究结果为酶法合成谷氨酰胺的工业化生产提供了一定的参考.
关键词
谷氨酰胺合成酶
改良
m9
培养基
原核表达
Keywords
glutamine synthetase
,
optimized m9 medium
,
prokaryotic expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
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被引量
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1
重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶蛋白在改良M9培养基中的诱导表达
刘顺谊
殷志敏
《南京师大学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
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