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GDNF转染雪旺氏细胞构建神经导管复合体 被引量:2
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作者 杜怀栋 周梁 +1 位作者 田宏斌 田洁 《中华耳科学杂志》 CSCD 2007年第4期427-431,共5页
目的利用GDNF(胶质神经源性神经营养因子)基因转染的雪旺氏细胞和PLGA(聚乳酸/聚乙醇酸共聚物)管共同培养构建神经导管复合体。方法利用乳鼠臂丛神经和坐骨神经培养雪旺氏细胞,再把pcDNA3.1(+)/GDNF质粒通过脂质体转入细胞内。利用PCR... 目的利用GDNF(胶质神经源性神经营养因子)基因转染的雪旺氏细胞和PLGA(聚乳酸/聚乙醇酸共聚物)管共同培养构建神经导管复合体。方法利用乳鼠臂丛神经和坐骨神经培养雪旺氏细胞,再把pcDNA3.1(+)/GDNF质粒通过脂质体转入细胞内。利用PCR检测转染雪旺氏细胞的GDNF表达。将转染雪旺氏细胞扩增达到一定数量后,用微注射和共培养法,与PLGA管构建神经导管。通过光镜和扫描电镜检测雪旺氏细胞的生长情况。结果成功培养出雪旺氏细胞,并转入GDNF基因。转染的雪旺氏细胞可表达GDNF,PCR显示转染的雪旺氏细胞GDNF表达较正常细胞明显提高。转染的雪旺氏细胞可在PLGA管表面贴壁、生长。结论GDNF基因转染的雪旺氏细胞可与PLGA管共同构建神经导管复合体。 展开更多
关键词 雪旺氏细胞 胶质神经源性神经营养因子(gdnf)基因 转染 聚乳酸/聚乙醇酸共聚物(PLGA)
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GDNF基因多态性与精神分裂症临床特征的相关性 被引量:1
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作者 马雪红 高成阁 +4 位作者 王宝安 翟歆明 胡晓刚 李生斌 刘清波 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期307-310,共4页
目的探讨GDNF基因多态性与精神分裂症临床特征的相关性。方法对符合纳入标准的精神分裂症病例组及健康对照组进行临床资料收集及血样的采集,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测GDNF基因多态性。选取GDNF基因2个... 目的探讨GDNF基因多态性与精神分裂症临床特征的相关性。方法对符合纳入标准的精神分裂症病例组及健康对照组进行临床资料收集及血样的采集,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测GDNF基因多态性。选取GDNF基因2个SNP位点:rs2973050,rs2910702。所有数据应用SSPS13.0软件包处理。结果①哈迪温伯格平衡(Hardy-Weinberg s equilibrium)结果显示,GDNF基因rs2910702在病例组中偏离哈迪温伯格平衡(χ2=24.983,P=0.000);②GDNF等位基因频率在病例组与对照组中的分布无统计学差异(P>0.05),但基因型频率分布有统计学差异(P<0.05);③GDNF各基因型与精神分裂症的临床分型、PANSS量表各因子分无明显相关性。结论 rs2973050基因型C/C、rs2910702基因型G/G可能与精神分裂症的发生有关,为精神分裂症的危险基因型。 展开更多
关键词 精神分裂症 胶质细胞源性神经营养因子 基因多态性 关联分析 gdnf基因 哈迪温伯格平衡 PANSS量表
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阳离子脂质体介导GDNF体内转基因对脊髓损伤后运动神经元的保护作用 被引量:1
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作者 鲁凯伍 陈哲宇 +3 位作者 侯铁胜 傅强 曹莉 金大地 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 2002年第2期112-115,共4页
目的 :观察阳离子脂质体介导的胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)体内转基因对大鼠脊髓损伤 (SCI)后伤区脊髓前角运动神经元的影响。方法 :采用改良Nystr m法制备大鼠胸段脊髓后路压迫损伤模型 ,将阳离子脂质体DC Chol和重组质粒 pEGFP G... 目的 :观察阳离子脂质体介导的胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)体内转基因对大鼠脊髓损伤 (SCI)后伤区脊髓前角运动神经元的影响。方法 :采用改良Nystr m法制备大鼠胸段脊髓后路压迫损伤模型 ,将阳离子脂质体DC Chol和重组质粒 pEGFP GDNFcDNA混合后直接注入大鼠损伤脊髓。利用RT PCR技术和荧光显微镜检测GDNF体内转基因的表达。应用尼氏染色、酶组织化学染色方法观察前角运动神经元死亡的数目和胆碱酯酶(CHE)及酸性磷酸酶 (ACP)的变化。结果 :1周后在注射局部GDNFmRNA和GDNF有较高表达。GDNF体内转基因早期 (1~ 4周 )SCI区前角运动神经元死亡的数目减少 ,CHE和ACP变化的幅度降低。结论 :GDNF体内转基因能减少脊髓不完全性损伤后引起的神经元坏死 ,阳离子脂质体介导GDNF体内转基因治疗创伤性SCI的方法是可行的。 展开更多
关键词 胶质细胞源性神经营养因子 脊髓损伤 神经元 阳离子脂质体 基因治疗
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应用bcl-2基因及GDNF治疗大鼠脑缺血的研究
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作者 周铁柱 付霞 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期900-903,共4页
目的观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)与bcl-2基因对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(CIRI)的影响。方法取健康Wistar大鼠40只,采用Longa改良栓线法制成大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,缺血2h后再灌注,随机分4组:对照组、bcl-2组、GDNF组、bcl... 目的观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)与bcl-2基因对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(CIRI)的影响。方法取健康Wistar大鼠40只,采用Longa改良栓线法制成大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,缺血2h后再灌注,随机分4组:对照组、bcl-2组、GDNF组、bcl-2+GDNF组,于再灌注3h后经侧脑室注射GDNF10μl、经颈动脉注射pLXSN-bcl-2质粒10μg,MCAO后3d(n=5),14d(n=5),通过免疫组化染色检测bcl-2蛋白和GDNF的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果bcl-2+GDNF组bcl-2蛋白表达与GDNF表达水平均较其他组表达明显增加(P<0.05),bcl-2组、GDNF组较对照组明显增加(P<0.05);脑内细胞凋亡GDNF+bcl-2组较其他组明显减少(P<0.05),bcl-2组、GDNF组较对照组明显减少(P<0.05)。结论bcl-2基因和GDNF可能通过减少神经细胞凋亡,促进bcl-2与GDNF蛋白表达,增强对局灶性缺血脑组织的保护能力,加速中枢神经损伤的修复;bcl-2基因与GDNF协同作用,促使神经细胞在脑内的凋亡进一步减少,从而避免脑缺血再灌注后脑细胞进一步损伤。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 胶质细胞源性神经营养因子 凋亡 BCL-2基因
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长链非编码RNA母系表达基因3调控miR-34a对糖尿病视网膜病变Müller细胞活化及炎症因子分泌的影响 被引量:6
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作者 王坤 朱曼辉 +3 位作者 陈莉莉 涂园园 万光明 梁申芝 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2021年第1期42-47,共6页
目的探讨母系表达基因3(maternally expressed gene 3,MEG3)对糖尿病视网膜病变(DR)Müller细胞的活化及炎症因子分泌的影响及机制。方法高脂饮食联合链脲佐菌素腹腔注射构建小鼠DR体内模型。高糖刺激人视网膜Müller细胞株MIO... 目的探讨母系表达基因3(maternally expressed gene 3,MEG3)对糖尿病视网膜病变(DR)Müller细胞的活化及炎症因子分泌的影响及机制。方法高脂饮食联合链脲佐菌素腹腔注射构建小鼠DR体内模型。高糖刺激人视网膜Müller细胞株MIO-M1构建DR体外模型。免疫荧光化学染色及Western blot检测小鼠视网膜及Müller细胞中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。Western blot及酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠视网膜及细胞培养基上清中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达。ELISA检测小鼠视网膜及细胞培养基上清中IL-1β蛋白的表达。分别或同时向Müller细胞中转染pcDNA-MEG3及miR-34a mimic对其表达进行干预。qRT-PCR检测MEG3 mRNA及miR-34a表达。结果与正常对照组小鼠比较,DR组小鼠视网膜中GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均增多(均为P<0.05),MEG3 mRNA表达降低(P<0.01)。与对照组比较,高糖组Müller细胞中MEG3 mRNA表达降低(P<0.01),而GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均升高(均为P<0.05)。与高糖组比较,高糖+pcDNA-MEG3组中GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均降低(均为P<0.05)。与正常对照组比较,DR组小鼠视网膜及高糖刺激的Müller细胞中miR-34a表达均升高(均为P<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-MEG3组中miR-34a表达减少(P<0.01)。与pcDNA+NC mimic组比较,pcDNA+miR-34a mimic组中GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均升高(均为P<0.05),而pcDNA-MEG3+NC mimic组中GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均减少(均为P<0.05)。与pcDNA-MEG3+miR-34a mimic组比较,GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达水平均升高(均为P<0.05)。结论MEG3在DR小鼠视网膜及高糖刺激的Müller细胞中表达均降低,其可通过负向调控miR-34a抑制Müller细胞活化及炎症因子的分泌。过表达MEG3可能成为DR治疗的新靶点。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 MÜLLER细胞 胶质纤维酸性蛋白 血管内皮生长因子 母系表达基因3
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Hypersensitivity of aquaporin 4-deficient mice to 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6- tetrah. ydropyrindine and astrocytic modulation 被引量:7
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作者 Fan, Y. 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1689-1689,共1页
关键词 过敏症 水通道蛋白 甲基 调制方法 治疗方法
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