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实时荧光定量PCR检测转基因玉米MON863结构特异基因的测量不确定度 被引量:17
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作者 宋君 雷绍荣 +6 位作者 刘勇 向冰 王东 尹全 张富丽 刘文娟 常丽娟 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第33期20312-20315,共4页
[目的]对实时荧光定量PCR检测转基因玉米MON863结构特异基因的测量不确定度进行评定。[方法]使用转基因玉米MON863结构特异实时定量PCR方法测定含量为1%的转基因玉米MON863样品(CRM)中结构特异片段的含量,并从扩增反应、数据处理以及微... [目的]对实时荧光定量PCR检测转基因玉米MON863结构特异基因的测量不确定度进行评定。[方法]使用转基因玉米MON863结构特异实时定量PCR方法测定含量为1%的转基因玉米MON863样品(CRM)中结构特异片段的含量,并从扩增反应、数据处理以及微量移液器等不确定度来源,评定测量的不确定度。[结果]研究得到uA=1.7×10-2,uB=9.0×10-4,uC=1.7×10-2,U95=0.036,测量结果为1.08%±0.036。[结论]转基因玉米MON863结构特异实时定量PCR方法检测结果的主要不确定度来自检验过程中的随机效应。 展开更多
关键词 转基因玉米mon863 结构特异基因含量 不确定度
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耐除草剂玉米MON87427定性PCR检测方法的建立
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作者 吴博泽 刘璇 +4 位作者 郭俊佩 许冬梅 袁建琴 高建华 史宗勇 《山西农业科学》 2020年第5期654-657,668,共5页
MON87427转化体是美国孟山都公司研发的转基因耐除草剂玉米,已经被包括我国在内的18个国家授权应用。对该转化体的快速检测是实现对其日常监管的基本前提。为了建立MON87427特异性的检测方法,研究针对其特征DNA序列筛选了最佳引物组合,... MON87427转化体是美国孟山都公司研发的转基因耐除草剂玉米,已经被包括我国在内的18个国家授权应用。对该转化体的快速检测是实现对其日常监管的基本前提。为了建立MON87427特异性的检测方法,研究针对其特征DNA序列筛选了最佳引物组合,并对其PCR反应过程进行优化,以初步建立转基因玉米MON87427转化体定性PCR检测方法。结果表明,经特异性测试,引物组合FA/RC能特异性检出MON87427玉米,对其他主要作物或转化体无效;该方法的检测灵敏度可达0.05%。研究建立的新方法可以满足我国现行转基因作物监管检测技术要求,适用于对MON87427转化体特异的定性PCR检测。 展开更多
关键词 转基因玉米 耐除草剂 转化体特异性检测 聚合酶链式反应
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实时荧光定量PCR检测转基因玉米NK603品系特异片段的测量不确定度 被引量:5
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作者 宋君 雷绍荣 +6 位作者 郭灵安 王东 叶先林 刘文娟 尹全 张富丽 常丽娟 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第5期1769-1773,共5页
应用转基因玉米NK603品系特异实时定量PCR方法,测定含量为2%的转基因玉米NK603样品中旁侧片段(品系特异片段)的含量,并从扩增反应、数据处理以及微量移液器等不确定度来源,评定了测量的不确定度。结果表明,u A=0.0008,u B=0.001,u C=0.0... 应用转基因玉米NK603品系特异实时定量PCR方法,测定含量为2%的转基因玉米NK603样品中旁侧片段(品系特异片段)的含量,并从扩增反应、数据处理以及微量移液器等不确定度来源,评定了测量的不确定度。结果表明,u A=0.0008,u B=0.001,u C=0.001,U=0.002,测量结果为1.9%±0.002。NK603品系特异实时定量PCR方法检测结果的主要不确定度来自检验过程中的随机效应。 展开更多
关键词 转基因玉米NK603 旁侧片段含量 不确定度
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实时荧光定量PCR检测转基因玉米NK603结构特异基因的测量不确定度研究 被引量:4
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作者 宋君 雷绍荣 +5 位作者 刘勇 王东 刘文娟 尹全 张富丽 常丽娟 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第4期1147-1151,共5页
应用四川省农业科学院分析测试中心实验室建立的转基因玉米NK603结构特异实时定量PCR方法测定含量为2%的转基因玉米NK603样品中结构特异片段的含量,并从扩增反应、数据处理以及微量移液器等不确定度来源,评定了测量的不确定度。结果表明... 应用四川省农业科学院分析测试中心实验室建立的转基因玉米NK603结构特异实时定量PCR方法测定含量为2%的转基因玉米NK603样品中结构特异片段的含量,并从扩增反应、数据处理以及微量移液器等不确定度来源,评定了测量的不确定度。结果表明,uA=0.0003,uB=0.001,uC=0.001,U95=0.002,测量结果为1.6%±0.002%。NK603结构特异实时定量PCR方法检测结果的主要不确定度来自检验过程中的随机效应。 展开更多
关键词 转基因玉米NK603 结构特异基因含量 不确定度
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标准分子构建及其在转基因玉米59122定量检测中的应用 被引量:3
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作者 陆姣 杨蓉 +4 位作者 黄昆仑 赵薇维 罗云波 元延芳 许文涛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第2期136-140,共5页
根据转基因作物59122的外源基因与玉米基因组之间的左侧侧翼序列设计具品系特异性的荧光探针及引物,以实时荧光PCR技术建立59122的品系特定量检测方法,以重组PCR技术成功获得了标准分子(整合了内标基因序列与左侧翼序列)梯度范围为10^... 根据转基因作物59122的外源基因与玉米基因组之间的左侧侧翼序列设计具品系特异性的荧光探针及引物,以实时荧光PCR技术建立59122的品系特定量检测方法,以重组PCR技术成功获得了标准分子(整合了内标基因序列与左侧翼序列)梯度范围为10^1~10^5,定量范围为0.01%~100%;建立了玉米内源基因与侧翼序列的标准曲线,变异系数CV值、标准偏差SD以及相关系数R2均可接受;检测5个已知转基因含量(0.1%、0.5%、1%、2%、5%)的混合样品中的转基因含量,结果分别为0.12%、0.56%、1.04%、1.61%、4.66%,实验误差小于25%,结果可信。 展开更多
关键词 品系特异性 实时荧光PCR 转基因玉米 标准分子
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玉米转基因成分筛查策略 被引量:6
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作者 温洪涛 李夏莹 +4 位作者 杨洋 陈子言 丁一佳 张秀杰 张瑞英 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期39-47,共9页
本研究通过查阅相关数据库中转基因玉米品系中的常用遗传转化载体中含有的调控元件和标记基因,并结合目前国内外现有转基因检测标准方法,建立了基于P-CaMV 35S、T-NOS、Bar基因、Pat基因、Cp4-epsps基因、NPTⅡ基因、cry1A基因、P-Rice ... 本研究通过查阅相关数据库中转基因玉米品系中的常用遗传转化载体中含有的调控元件和标记基因,并结合目前国内外现有转基因检测标准方法,建立了基于P-CaMV 35S、T-NOS、Bar基因、Pat基因、Cp4-epsps基因、NPTⅡ基因、cry1A基因、P-Rice actin、phy结构特异性片段等9种元件/基因实时荧光PCR方法的玉米转基因筛查策略,并对32种转基因玉米进行筛查实验测试,结果表明本筛查策略可覆盖30种独立性状转化体。同时还构建了包含玉米内标基因及9种目标元件/基因序列的质粒分子,经过验证该质粒分子具有良好的可替代性,可作为阳性对照与本检测方法配套使用。 展开更多
关键词 转基因玉米 筛查 转化体 鉴定
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