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重组人骨形态发生蛋白-2在大肠杆菌中的表达及纯化
被引量：
6
1
作者
熊绍虎
余 磊
+4 位作者
谭海燕
黄 涛
王朝阳
刘大庸
钟世镇
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2002年第5期413-416,共4页
目的用基因工程技术在大肠杆菌中表达人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)。方法hBMP－2原核表达载体pYR(pBV220－hBMP-2)转化 E coli BL21,SDS－PAGE分析工程菌活化状态以及诱导时间与目的蛋白表达率的关系。离子交换层析 DEAE和分子筛 S－300...
目的用基因工程技术在大肠杆菌中表达人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)。方法hBMP－2原核表达载体pYR(pBV220－hBMP-2)转化 E coli BL21,SDS－PAGE分析工程菌活化状态以及诱导时间与目的蛋白表达率的关系。离子交换层析 DEAE和分子筛 S－300纯化重组蛋白,自然缓降复性法对其复性。结果SDS－PAGE显示在相对分子质量约为13000时出现明显外源蛋白表达带,而且当工程菌30℃活化至D600约为0．45时,其表达效率较高;在此状态下,温度诱导衣达4h,目的蛋白表达量最高,以后随着时间的延长,表达量稍下降。重组蛋白经纯化后植人小鼠肌肉,组织学观察到肌肉内大量间允质细胞增生以及软骨与骨形成。结论重组hBMP－2具有良好异位成骨活性。
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关键词
骨形态发生蛋白-2
大肠杆菌
基因工程
蛋白表达
动物实验
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职称材料
人重组骨形态发生蛋白Ⅲ在大肠杆菌中的表达及活性测定
2
作者
党喜同
贾弘
张廼蘅
《海南医学院学报》
CAS
1995年第2期49-51,共3页
本文报道了利用基因工程技术在大肠杆菌中表达人重组骨形态发生蛋白Ⅲ。运用ＰＣＲ技术，从质粒ｐＳＰ６４／ｈＢＭＰ３中扩增出约０．３３ｋｂ的ｈＢＭＰ３ｃＤＮＡ片断，然后亚克隆到表达质粒ｐＭＳ３１ｂ申，在大肠杆菌一成功地高效...
本文报道了利用基因工程技术在大肠杆菌中表达人重组骨形态发生蛋白Ⅲ。运用ＰＣＲ技术，从质粒ｐＳＰ６４／ｈＢＭＰ３中扩增出约０．３３ｋｂ的ｈＢＭＰ３ｃＤＮＡ片断，然后亚克隆到表达质粒ｐＭＳ３１ｂ申，在大肠杆菌一成功地高效表达出人ＢＭＰ３融合蛋白，表达产物具有体内诱导异位化骨的趋势。
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关键词
基因工程
骨形态发生蛋白
大肠杆菌
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职称材料
题名
重组人骨形态发生蛋白-2在大肠杆菌中的表达及纯化
被引量：
6
1
作者
熊绍虎
余 磊
谭海燕
黄 涛
王朝阳
刘大庸
钟世镇
机构
第一军医大学临床解剖学研究所
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2002年第5期413-416,共4页
基金
广东省区学科研联合攻关项目(99B06703G)
文摘
目的用基因工程技术在大肠杆菌中表达人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)。方法hBMP－2原核表达载体pYR(pBV220－hBMP-2)转化 E coli BL21,SDS－PAGE分析工程菌活化状态以及诱导时间与目的蛋白表达率的关系。离子交换层析 DEAE和分子筛 S－300纯化重组蛋白,自然缓降复性法对其复性。结果SDS－PAGE显示在相对分子质量约为13000时出现明显外源蛋白表达带,而且当工程菌30℃活化至D600约为0．45时,其表达效率较高;在此状态下,温度诱导衣达4h,目的蛋白表达量最高,以后随着时间的延长,表达量稍下降。重组蛋白经纯化后植人小鼠肌肉,组织学观察到肌肉内大量间允质细胞增生以及软骨与骨形成。结论重组hBMP－2具有良好异位成骨活性。
关键词
骨形态发生蛋白-2
大肠杆菌
基因工程
蛋白表达
动物实验
Keywords
bone morphogenetic protein
-2
e
sch
e
richia
coli
genetic engineering
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
人重组骨形态发生蛋白Ⅲ在大肠杆菌中的表达及活性测定
2
作者
党喜同
贾弘
张廼蘅
机构
北京医科大学生物化学与分子生物学系
出处
《海南医学院学报》
CAS
1995年第2期49-51,共3页
基金
卫生部科研基金
文摘
本文报道了利用基因工程技术在大肠杆菌中表达人重组骨形态发生蛋白Ⅲ。运用ＰＣＲ技术，从质粒ｐＳＰ６４／ｈＢＭＰ３中扩增出约０．３３ｋｂ的ｈＢＭＰ３ｃＤＮＡ片断，然后亚克隆到表达质粒ｐＭＳ３１ｂ申，在大肠杆菌一成功地高效表达出人ＢＭＰ３融合蛋白，表达产物具有体内诱导异位化骨的趋势。
关键词
基因工程
骨形态发生蛋白
大肠杆菌
Keywords
genetic engineering
,
bone morphogenetic protein
,
e. coli
分类号
R378.21 [医药卫生—病原生物学]
Q75 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
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被引量
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1
重组人骨形态发生蛋白-2在大肠杆菌中的表达及纯化
熊绍虎
余 磊
谭海燕
黄 涛
王朝阳
刘大庸
钟世镇
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2002
6
在线阅读
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职称材料
2
人重组骨形态发生蛋白Ⅲ在大肠杆菌中的表达及活性测定
党喜同
贾弘
张廼蘅
《海南医学院学报》
CAS
1995
0
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