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天麻抗真菌蛋白GAFP基因转化油葵的研究被引量：2: 1; 作者胡文冉黄乐平 +2 位作者孟庆玉危晓薇黄全生《新疆农业科学》 CAS CSCD 2007年第B11期67-70,共4页; 以培养6h的油葵自交系6136的子叶为外植体，利用农杆菌介导法将GAFP基因导入该自交系。通过对其遗传转化主要因素的研究，发现将外植体在OD600=0．7的农杆菌中浸泡10—15min后，在含有AS100／μmol／L、pH5．4的预培养培养基上22±... 展开更多; 关键词油葵农杆菌介导法遗传转化 gafp; 在线阅读下载PDF 职称材料

新疆陆地棉转天麻毒蛋白基因GAFP特性研究被引量：1: 2; 作者沈海涛王爱英 +1 位作者李玉霞祝建波《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-8,共8页; 本研究利用花粉管通道技术将在天麻中克隆的天麻毒蛋白基因(GAFP)转化棉花,经PCR和RTPCR鉴定,证实得到了5个转基因株系672GAFP-1,672GAFP-2,672GAFP-3,672GAFP-4,672GAFP-5。通过两年在无病田和病圃中连续种植分析转基因植株抗病性、农... 展开更多; 关键词天麻抗真菌蛋白转基因抗病陆地棉棉花枯萎病黄萎病; 在线阅读下载PDF 职称材料

双价抗病基因植物表达载体构建及在烟草中表达的初步研究被引量：4: 3; 作者陈英戴咏梅 +2 位作者黄敏仁诸葛强王明庥《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期81-85,共5页; 多基因转化是基因工程研究热点之一。本研究应用DNA重组技术,将两个抗病机制不同,抗菌谱较广的抗病基因(天麻抗真菌蛋白GAFP和兔防御素NP1基因)构建在一个植物表达载体pBin35SGAFP-NP1上,两者具有各自的CaMV35S启动子和Nos终止子。通过... 展开更多; 关键词防御素基因NP1 天麻抗真菌蛋白基因翻肿双价抗病基因植物表达载体转基因烟草抗病性; 在线阅读下载PDF 职称材料

转天麻抗真菌蛋白基因提高棉花对黄萎病抗性被引量：5: 4; 作者肖松华赵君 +5 位作者刘剑光吴巧娟王义琴储成才俞敬忠喻德跃《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期212-221,共10页; 黄萎病是全球植棉业的主要病害,严重缺乏抗黄萎病资源导致棉花抗黄萎病育种至今未取得显著进展。采用农杆菌介导法,以下胚轴为受体,将天麻抗真菌蛋白基因转化陆地棉品系苏研060,通过愈伤组织诱导、胚性愈伤组织分化和植株再生,获得大量... 展开更多; 关键词棉花天麻抗真菌蛋白基因黄萎病抗性; 在线阅读下载PDF 职称材料

不同因素对农杆菌介导的杉木转化效率的影响被引量：6: 5; 作者席梦利施季森《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期46-50,共5页; 以杉木试管苗靠近茎尖的茎段为受体材料，研究6个影响杉木遗传转化效果的因素，初步确定杉木茎段较为合适的转化体系为：预培养1—3d，OD600 nm为0．1-0．4的菌液浸染10-15min，共培养3—5d，共培养基附加乙酰丁香酮（AS）80μmol·... 展开更多; 关键词杉木农杆菌介导天麻抗真菌蛋白基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

天麻抗真菌蛋白cDNA克隆及植物表达载体的构建被引量：1: 6; 作者李长福张守鸿 +1 位作者葛正龙范芳《贵州农业科学》 CAS 2008年第3期10-11,共2页; 采用RT-PCR技术扩增出天麻抗真菌蛋白(Gastrodia antifungal protein,GAFP)的cDNA序列,通过pGM-T载体转入大肠杆菌JM109克隆,在培养基上筛选重组质粒酶切鉴定,阳性克隆经限制性内切酶Xba1和Sac1酶切与同样酶切的植物表达载体pBI121连接... 展开更多; 关键词天麻抗真菌蛋白 CDNA克隆植物表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名天麻抗真菌蛋白GAFP基因转化油葵的研究被引量：2: 1; 作者胡文冉黄乐平孟庆玉危晓薇黄全生; 机构新疆农科院核生所; 出处《新疆农业科学》 CAS CSCD 2007年第B11期67-70,共4页; 基金新疆农作物细胞工程重点实验室课题; 文摘以培养6h的油葵自交系6136的子叶为外植体，利用农杆菌介导法将GAFP基因导入该自交系。通过对其遗传转化主要因素的研究，发现将外植体在OD600=0．7的农杆菌中浸泡10—15min后，在含有AS100／μmol／L、pH5．4的预培养培养基上22±1℃暗培养2d，遗传转化率高。研究建立了油葵遗传转化体系，获得了4株经PCR检测为阳性的转基因植株。研究为通过植物抗病基因工程方法防治油葵菌核病提供了1条新的途径。; 关键词油葵农杆菌介导法遗传转化 gafp; Keywords oil sunflower Agrobacterium - mediated transformation gene transformation gastrodia protein gene （gafp） antifungal; 分类号 S565.035.3 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新疆陆地棉转天麻毒蛋白基因GAFP特性研究被引量：1: 2; 作者沈海涛王爱英李玉霞祝建波; 机构石河子大学生命科学学院石河子大学; 出处《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-8,共8页; 基金国家转基因专项(2011zx08011-002) 新疆生产建设兵团青年科技创新资金专项(2013cb010); 文摘本研究利用花粉管通道技术将在天麻中克隆的天麻毒蛋白基因(GAFP)转化棉花,经PCR和RTPCR鉴定,证实得到了5个转基因株系672GAFP-1,672GAFP-2,672GAFP-3,672GAFP-4,672GAFP-5。通过两年在无病田和病圃中连续种植分析转基因植株抗病性、农艺性状和经济性状的研究,结果表明:外源基因GAFP的导入对棉花农艺性状和经济性状无显著影响;转基因株系672GAFP-1,672GAFP-2,672GAFP-5在病圃中的抗病指数、株高、产量和纤维品质与受体材料672差异显著(P<0.05),产量较对照提高近30%;转基因植株农艺性状和经济性状的各项指标均优于对照,具较强耐枯、黄萎病能力,且能稳定遗传。; 关键词天麻抗真菌蛋白转基因抗病陆地棉棉花枯萎病黄萎病; Keywords gastrodia antifungal protein （gafp） transgenic disease resistant upland cotton Fusarium wilt Verticillium wilt; 分类号 S435.621 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名双价抗病基因植物表达载体构建及在烟草中表达的初步研究被引量：4: 3; 作者陈英戴咏梅黄敏仁诸葛强王明庥; 机构南京林业大学林木遗传和基因工程重点实验室上海市花卉育种中心; 出处《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期81-85,共5页; 基金上海市农业科技攻关项目(第4-4号) 南京林业大学高学历人才基金项目资助。; 文摘多基因转化是基因工程研究热点之一。本研究应用DNA重组技术,将两个抗病机制不同,抗菌谱较广的抗病基因(天麻抗真菌蛋白GAFP和兔防御素NP1基因)构建在一个植物表达载体pBin35SGAFP-NP1上,两者具有各自的CaMV35S启动子和Nos终止子。通过根癌农杆菌介导,采用叶盘法转化烟草,PCR和PCR-Southern分析证明已将NP1和GAFP基因整合到烟草基因组中。离体抑菌实验表明转基因植株对真菌和细菌表现出一定的抗性。以上结果表明通过该表达载体进行遗传转化可获得含双价抗病基因植物,并能有效表达,提高转基因植物抗病能力。; 关键词防御素基因NP1 天麻抗真菌蛋白基因翻肿双价抗病基因植物表达载体转基因烟草抗病性; Keywords NP1 gastrodia antifungal protein （gafp） vector with two anti-disease genes transgenic tobacco diseaseresistance; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转天麻抗真菌蛋白基因提高棉花对黄萎病抗性被引量：5: 4; 作者肖松华赵君刘剑光吴巧娟王义琴储成才俞敬忠喻德跃; 机构南京农业大学/作物遗传改良与种质创新国家重点实验室江苏省农业科学院经济作物研究所中国科学院遗传与发育生物学研究所; 出处《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期212-221,共10页; 基金国家转基因生物新品种培育重大专项(2014ZX08005) 国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA101108) +3 种基金江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(13)2024]资助~~; 文摘黄萎病是全球植棉业的主要病害,严重缺乏抗黄萎病资源导致棉花抗黄萎病育种至今未取得显著进展。采用农杆菌介导法,以下胚轴为受体,将天麻抗真菌蛋白基因转化陆地棉品系苏研060,通过愈伤组织诱导、胚性愈伤组织分化和植株再生,获得大量再生苗。分别以NPT II基因、gafp基因、35S启动子-gafp基因特异引物对再生苗进行PCR检测,将95个阳性再生苗嫁接到海7124幼苗砧木上,获得37个成活植株。RT-PCR检测发现,31个植株出现预期的540 bp扩增片段。盆栽花铃期花粉育性鉴定表明,9个转基因植株雄性败育,22个植株花粉育性正常,通过人工自交得到T1代种子。通过转基因作物隔离区种植、特异引物PCR检测、卡那霉素抗性筛选、自交纯合与选择,培育获得22个T3代转基因纯系。Southern blotting检测发现,转基因植株体内有2个gafp基因拷贝。GAFP蛋白免疫印迹表明,16个转基因纯系出现分子量为14 k D的GAFP蛋白,另6个纯系表现出转录后水平上的基因沉默。黄萎病抗性鉴定结果证实,获得3个抗落叶型黄萎病的棉花株系TG09、TG16和TG23。; 关键词棉花天麻抗真菌蛋白基因黄萎病抗性; Keywords Upland cotton gastrodia elata antifungal protein gene Verticillium wilt Resistance; 分类号 S435.621.2 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名不同因素对农杆菌介导的杉木转化效率的影响被引量：6: 5; 作者席梦利施季森; 机构南京林业大学国家林业局林木遗传和基因工程重点实验室; 出处《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期46-50,共5页; 基金国家自然科学基金项目(30170745) 江苏省高校省级重点实验室开放课题(KJS03035)资助。; 文摘以杉木试管苗靠近茎尖的茎段为受体材料，研究6个影响杉木遗传转化效果的因素，初步确定杉木茎段较为合适的转化体系为：预培养1—3d，OD600 nm为0．1-0．4的菌液浸染10-15min，共培养3—5d，共培养基附加乙酰丁香酮（AS）80μmol·L^-1，共培养后延迟3d筛选。在初次筛选培养基上共得到186个卡那霉素（Km）抗性芽，在二次筛选培养基上获得39个Km抗性芽。PCR检测有2个Km抗性芽呈稳定阳性，初步证明外源天麻抗真菌蛋白（GAFP）基因已整合到这2个Km抗性芽的基因组DNA中。; 关键词杉木农杆菌介导天麻抗真菌蛋白基因; Keywords Cunninghamia lartceolata Agrobacterium tumefaciens mediated transformation gastrodia antifungal protein gene; 分类号 S718.46 [农业科学—林学] Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名天麻抗真菌蛋白cDNA克隆及植物表达载体的构建被引量：1: 6; 作者李长福张守鸿葛正龙范芳; 机构遵义医学院生物化学与分子生物学教研室; 出处《贵州农业科学》 CAS 2008年第3期10-11,共2页; 基金遵义市重点项目"天麻抗真菌蛋白基因对辣椒的转化"[E-027(2006)01-2]; 文摘采用RT-PCR技术扩增出天麻抗真菌蛋白(Gastrodia antifungal protein,GAFP)的cDNA序列,通过pGM-T载体转入大肠杆菌JM109克隆,在培养基上筛选重组质粒酶切鉴定,阳性克隆经限制性内切酶Xba1和Sac1酶切与同样酶切的植物表达载体pBI121连接,构建天麻抗真菌蛋白(GAFP)的植物表达载体pBI121-GAFP。结果,天麻抗真菌蛋白(GAFP)的植物表达载体构建成功。; 关键词天麻抗真菌蛋白 CDNA克隆植物表达载体; Keywords gastrodia antifungal protein gene（gafp） cDNA clone plant expression vector; 分类号 S569 [农业科学—作物学] Q93 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	天麻抗真菌蛋白GAFP基因转化油葵的研究	胡文冉黄乐平孟庆玉危晓薇黄全生	《新疆农业科学》 CAS CSCD	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	新疆陆地棉转天麻毒蛋白基因GAFP特性研究	沈海涛王爱英李玉霞祝建波	《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2015	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	双价抗病基因植物表达载体构建及在烟草中表达的初步研究	陈英戴咏梅黄敏仁诸葛强王明庥	《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2005	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	转天麻抗真菌蛋白基因提高棉花对黄萎病抗性	肖松华赵君刘剑光吴巧娟王义琴储成才俞敬忠喻德跃	《作物学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	5	在线阅读下载PDF 职称材料
5	不同因素对农杆菌介导的杉木转化效率的影响	席梦利施季森	《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2007	6	在线阅读下载PDF 职称材料
6	天麻抗真菌蛋白cDNA克隆及植物表达载体的构建	李长福张守鸿葛正龙范芳	《贵州农业科学》 CAS	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料