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猪GV期卵母细胞玻璃化冷冻后的体外成熟 被引量：6
1
作者 武彩红 戴建军 +1 位作者 芮荣 侯加法 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2006年第2期131-136,共6页
本研究旨在探索建立猪GV（Germinal visiele）期卵母细胞的冷冻保存方法。用抽吸法采集屠宰猪卵巢中直径为2—5mm及〉5mm的卵泡卵母细胞，再用切割法采集直径〈2mm的卵泡卵母细胞。结果表明，切割法所获卵母细胞数及每只卵巢平均采卵数... 本研究旨在探索建立猪GV（Germinal visiele）期卵母细胞的冷冻保存方法。用抽吸法采集屠宰猪卵巢中直径为2—5mm及〉5mm的卵泡卵母细胞，再用切割法采集直径〈2mm的卵泡卵母细胞。结果表明，切割法所获卵母细胞数及每只卵巢平均采卵数均显著高于抽吸法（P〈0．05）；但切割法所获卵母细胞可用率仅为33．8％，显著低于抽吸法67．5％的可用率（P〈0．05）。用抽吸法采集直径为2—5mm的卵泡卵母细胞，进行体外成熟和玻璃化冷冻研究。4组成熟培养结果表明，卵母细胞在添加激素和猪卵泡液（pFF）的成熟培养液中培养24h后转入无激素、无卵泡液的基础培养液中继续培养20h，体外成熟率达78．9％，显著高于另外3组（P〈0．05）。以EFS40作为玻璃化冷冻液，比较细管法和OPS（Open pulled straw）法对猪GV期卵母细胞的冷冻效果，从冻后形态正常率来看，两种方法间无统计学差异（P〉0．05）；但OPS法冷冻猪GV期卵母细胞的冻后存活率和体外成熟率均显著高于细管法（P〈0．05）。 展开更多
关键词 猪 gv期卵母细胞 玻璃化冷冻 体外成熟
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细胞松弛素B对绵羊GV期卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响 被引量：5
2
作者 周佰成 王志刚 +3 位作者 刘丑生 赵有璋 赵俊金 孟飞 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第3期47-49,共3页
本试验通过玻璃化冷冻前细胞松弛素B(CB)预处理来分析CB对绵羊GV期卵母细胞玻璃化冷冻/解冻后发育潜力的影响。分别从细胞毒性检测、冷冻检测和CB不同浓度(6.0、7.5和9.0μg/ml)处理3个方面进行试验。试验结果表明毒性检验中CB处理组和... 本试验通过玻璃化冷冻前细胞松弛素B(CB)预处理来分析CB对绵羊GV期卵母细胞玻璃化冷冻/解冻后发育潜力的影响。分别从细胞毒性检测、冷冻检测和CB不同浓度(6.0、7.5和9.0μg/ml)处理3个方面进行试验。试验结果表明毒性检验中CB处理组和未处理组卵母细胞的成熟率都显著低于对照组(P<0.05),但相互之间差异不显著;玻璃化冷冻后,卵母细胞成熟率显著低于未冷冻组(P<0.05),玻璃化冷冻CB处理组和未处理组卵母细胞体外成熟培养后成熟率之间差异不显著(P>0.05);不同CB浓度处理后9.0μg/ml组卵母细胞的成熟率显著高于对照组(P<0.05)。 展开更多
关键词 玻璃化冷冻 细胞松弛素B 绵羊 gv期卵母细胞
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小鼠GV期卵母细胞的提取及其核质比分析 被引量：1
3
作者 洪灯 符皎荣 +3 位作者 张彦慧 钟南田 郑小桃 周雯 《海南医学院学报》 CAS 2011年第6期726-727,730,共3页
目的:提取小鼠GV(germinal vesicle,GV)期卵母细胞并分析其核质比。方法:用挤压法从卵巢中分离获得GV期卵母细胞,放入DEPC-NS液体快速清除颗粒细胞,获得GV期卵母细胞裸卵,并计算其核质比。结果:用挤压法分离获得的GV期卵母细胞有一完整... 目的:提取小鼠GV(germinal vesicle,GV)期卵母细胞并分析其核质比。方法:用挤压法从卵巢中分离获得GV期卵母细胞,放入DEPC-NS液体快速清除颗粒细胞,获得GV期卵母细胞裸卵,并计算其核质比。结果:用挤压法分离获得的GV期卵母细胞有一完整球形核,核膜明显,含有单个折光的核仁,胞浆中心稍变黑并呈颗粒状,共51枚,测得其卵径为(40.940±3.341)μm,核径为(15.020±2.236)μm,其核质比为0.054±0.019。结论:用挤压法加DEPC-NS液体可快速破坏颗粒细胞之间的连接,便于迅速获得GV期卵母细胞裸卵;小鼠GV期卵母细胞的核质比为0.054±0.019,与其它物种同时相核质比在相同范围内,提示核质比是卵母细胞发育成熟的重要指标。 展开更多
关键词 小鼠 gv期卵母细胞 挤压法 核质比
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奶牛GV期卵母细胞OPS法和GMP法超低温冷冻效果
4
作者 王珂 郭海龙 +1 位作者 桑国俊 赵兴绪 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第3期40-43,共4页
采用OPS管和GMP管对GV期的牛的卵母细胞进行玻璃化冷冻。在不同的前处理液中平衡5min,然后在冷冻液(EFS30,EFS40,EDFS30或EDFS40)中平衡30s,进行OPS法和GMP法玻璃化冷冻保存。结果显示,OPS法用EFS40液和EDFS40液冷冻后形态正常卵率为69... 采用OPS管和GMP管对GV期的牛的卵母细胞进行玻璃化冷冻。在不同的前处理液中平衡5min,然后在冷冻液(EFS30,EFS40,EDFS30或EDFS40)中平衡30s,进行OPS法和GMP法玻璃化冷冻保存。结果显示,OPS法用EFS40液和EDFS40液冷冻后形态正常卵率为69.6%和76.1%,2组差异显著(P<0.05),成熟率最高达19.2%和33.3%,2组差异显著(P<0.05);GMP法用EFS40液和EDFS40液冷冻后形态正常卵率最高达75.6%和80.8%,2组差异显著(P<0.05),成熟率最高达15.6%和34.9%,2组差异显著(P<0.05)。而采用EDFS40液,OPS法和GMP法对GV期卵母细胞体外发育的影响差异均不显著,但GMP法的冷冻效率较高。表明采用EDFS40液GMP法对GV期卵母细胞的冷冻效率优于OPS法。 展开更多
关键词 奶牛 gv期卵母细胞 玻璃化冷冻
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牛GV期卵母细胞冷冻保存后发育潜力的研究 被引量：2
5
作者 包华琼 李跃民 +1 位作者 王新庄 孙岚 《动物医学进展》 CSCD 2006年第7期77-81,共5页
二甲基亚砜(DMSO)、丙二醇(PROH)、乙二醇(EG)和甘油(GL)4种冷冻保护剂程序化冷冻牛GV期卵母细胞的结果表明,EG和PROH的保护效果比GL和DMSO好。4种不同冷冻方法冷冻保存牛GV期卵母细胞,比较解冻后卵母细胞的体外成熟率、受精后卵裂率。... 二甲基亚砜(DMSO)、丙二醇(PROH)、乙二醇(EG)和甘油(GL)4种冷冻保护剂程序化冷冻牛GV期卵母细胞的结果表明,EG和PROH的保护效果比GL和DMSO好。4种不同冷冻方法冷冻保存牛GV期卵母细胞,比较解冻后卵母细胞的体外成熟率、受精后卵裂率。结果表明,在程序化冷冻法与细管玻璃化法(Straw)之间的差异不显著(P>0.05),在开放式拉管法(OPS)与毛细玻管法(GMP)之间的差异不显著(P>0.05);但OPS和GMP与程序化冷冻法和Straw之间的差异极显著(P<0.01)。玻璃化冷冻效果优于程序化冷冻。说明GMP和OPS玻璃化冷冻优于Straw玻璃化冷冻。说明可以采用GMP方法冷冻保存牛GV期卵母细胞。 展开更多
关键词 gv期卵母细胞 程序化 玻璃化 冷冻保护剂 牛
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添加HA纳米颗粒对牛GV期卵母细胞玻璃化冷冻后发育能力的影响 被引量：1
6
作者 王晓静 赵世玉 +5 位作者 刘毅恒 刘家齐 徐志谦 李晓霞 栗颖华 禹学礼 《黑龙江动物繁殖》 2023年第1期7-13,共7页
为了探究羟基磷灰石(HA)纳米颗粒对牛GV期卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响,试验以牛卵巢中GV期卵母细胞作为试验材料,将不同粒径的HA纳米颗粒添加到玻璃化冷冻液中,进行超声分散检测。首先,以卵母细胞存活率和成熟率为指标,将0、0.01%、0.... 为了探究羟基磷灰石(HA)纳米颗粒对牛GV期卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响,试验以牛卵巢中GV期卵母细胞作为试验材料,将不同粒径的HA纳米颗粒添加到玻璃化冷冻液中,进行超声分散检测。首先,以卵母细胞存活率和成熟率为指标,将0、0.01%、0.05%、0.1%HA纳米颗粒分别添加到玻璃化冷冻液Ⅰ(VSⅠ)和玻璃化冷冻液Ⅱ(VSⅡ)中,不经冷冻直接进行毒性测试;然后,以形态正常率、成熟率、卵裂率和囊胚率为指标测定卵母细胞玻璃化冷冻后的发育能力;最后检测含有0.05%HA纳米颗粒的VSⅡ对冷冻后卵母细胞活性氧水平和线粒体膜电位水平的影响。结果表明:不同浓度HA纳米颗粒对牛GV期卵母细胞均无明显毒性;VSⅡ+0.05%HA纳米颗粒组卵母细胞冷冻后的形态正常率、成熟率、卵裂率、囊胚率显著高于VSⅠ+0.05%HA纳米颗粒组(P<0.05);VSⅡ+0.05%HA纳米颗粒组卵母细胞的活性氧水平显著低于VSⅡ组(P<0.05);VSⅡ+0.05%HA纳米颗粒组卵母细胞的线粒体膜电位水平显著高于VSⅡ组(P<0.05)。说明在VSⅡ中加入0.05%HA纳米颗粒能显著降低牛GV期卵母细胞玻璃化冷冻后活性氧水平并提高其线粒体膜电位水平,从而可能降低了玻璃化冷冻对细胞的损伤。 展开更多
关键词 牛 gv期卵母细胞 羟基磷灰石纳米颗粒 玻璃化冷冻 活性氧 线粒体活性
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细胞松弛素B对牛GV期卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响
7
作者 郭娟 王志琴 +2 位作者 赵云程 林嘉鹏 黄俊成 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第9期101-104,共4页
本试验通过玻璃化冷冻前不同浓度细胞松弛素B(cytochalasin-B,CB)预处理来分析CB对牛GV期卵母细胞固体表面玻璃化(SSV)冷冻后发育潜力的影响。试验结果表明,玻璃化冷冻后,CB处理组和未处理组之间卵母细胞成熟率差异不显著(P>0.05),... 本试验通过玻璃化冷冻前不同浓度细胞松弛素B(cytochalasin-B,CB)预处理来分析CB对牛GV期卵母细胞固体表面玻璃化(SSV)冷冻后发育潜力的影响。试验结果表明,玻璃化冷冻后,CB处理组和未处理组之间卵母细胞成熟率差异不显著(P>0.05),但均显著低于体外培养组。说明试验中所用CB浓度(2.5、7.5、15、20和30μg/mL)对牛GV期卵母细胞玻璃化冷冻效果的改善作用不明显。 展开更多
关键词 玻璃化冷冻 细胞松弛素B 牛 gv期卵母细胞
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小鼠GV期卵母细胞体外成熟及受精研究
8
作者 王建华 武建中 +2 位作者 李永强 李跃民 陈凯 《畜牧兽医科技信息》 2008年第12期35-36,共2页
本试验对不同培养液以及添加不同浓度的生殖激素对6～8周龄雌鼠GV期卵母细胞成熟培养效果以及肝素钠对其成熟后体外受精效果的影响进行了研究。结果表明:以TYH为基础培养液的培养方式更适合于体外成熟培养;培养液中单独添加LH或同时添... 本试验对不同培养液以及添加不同浓度的生殖激素对6～8周龄雌鼠GV期卵母细胞成熟培养效果以及肝素钠对其成熟后体外受精效果的影响进行了研究。结果表明:以TYH为基础培养液的培养方式更适合于体外成熟培养;培养液中单独添加LH或同时添加LH和FSH对昆明小鼠卵母细胞体外成熟有促进作用,但只添加FSH对卵母细胞的成熟促进作用不明显;在小鼠受精液中肝素浓度应控制在10μg/mL为宜。 展开更多
关键词 小鼠 gv期卵母细胞 体外成熟 体外受精
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水牛GV期和MⅡ卵母细胞中脂肪含量及分布模式研究
9
作者 许惠艳 张筱芫 +5 位作者 杨小淦 卢晟盛 梁兴伟 陆阳清 张明 卢克焕 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第11期2413-2417,共5页
【目的】探讨水牛GV期未成熟卵和MⅡ期成熟卵母细胞中脂肪的含量及分布状态,为研究脂肪在水牛卵母细胞体外成熟过程中的作用及卵母细胞体外成熟体系的优化提供参考。【方法】从南宁市某屠宰场收集水牛卵巢并采集卵丘卵母细胞复合体,其... 【目的】探讨水牛GV期未成熟卵和MⅡ期成熟卵母细胞中脂肪的含量及分布状态,为研究脂肪在水牛卵母细胞体外成熟过程中的作用及卵母细胞体外成熟体系的优化提供参考。【方法】从南宁市某屠宰场收集水牛卵巢并采集卵丘卵母细胞复合体,其中一部分复合体用于收集GV期未成熟卵母细胞,另一部分经体外成熟22～24 h后,获得MⅡ期成熟卵母细胞。之后把GV期和MⅡ期的卵母细胞放入含有10μg/m L Nile red的染色液中,室温黑暗环境中染色4～5 h后,在荧光显微镜下观察,拍照。根据所得照片观察卵母细胞中脂肪分布模式,同时借助Image J软件计算荧光强度,以荧光强度来计算卵母细胞中脂肪含量。【结果】MⅡ期卵子中脂肪含量显著低于GV期脂肪含量(66. 63±1. 197 vs. 70. 81±1. 328,P <0. 05)。GV期和MⅡ期卵母细胞中脂肪各类分布模式没有统计学上的差异(外围分布:3. 148±2. 298 vs. 5. 342±3. 858;半均匀分布:30. 85±4. 042 vs. 35. 70±4. 265;均匀分布:66. 00±3. 257 vs. 60. 60±3. 933,P> 0. 05)。【结论】从GV期未成熟卵母细胞到成熟MⅡ期卵母细胞成熟过程中,水牛卵子内脂肪含量显著降低,而卵母细胞成熟前后脂肪分布模式没有发生改变,多数以均匀分布模式为主。 展开更多
关键词 水牛 gv期卵母细胞 MⅡ期卵母细胞 脂肪含量 脂肪分市
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不同冷冻方法对GV期绵羊卵母细胞发育效果的影响 被引量：1
10
作者 周佰成 《中国草食动物》 2009年第6期3-4,共2页
卵母细胞冷冻保存具有广泛而潜在的应用价值。文章主要分析了不同冷冻方法对绵羊GV期卵母细胞发育效果的影响。GV期卵母细胞程序化冷冻解冻后形态正常率(54.8%)和体外培养成熟率(14.7%)均显著或极显著低于细管玻璃化冷冻(71.8%,29.5%;P&... 卵母细胞冷冻保存具有广泛而潜在的应用价值。文章主要分析了不同冷冻方法对绵羊GV期卵母细胞发育效果的影响。GV期卵母细胞程序化冷冻解冻后形态正常率(54.8%)和体外培养成熟率(14.7%)均显著或极显著低于细管玻璃化冷冻(71.8%,29.5%;P<0.05)和OPS玻璃化冷冻(78.3%,P<0.01;35.4%,P<0.05);3种不同方法冷冻GV期卵母细胞成熟率与对照组相比均差异极显著(P<0.01)。 展开更多
关键词 gv期卵母细胞 冷冻 发育能力 绵羊
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