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农杆菌介导小麦成熟胚遗传转化的几个影响因素研究
被引量:
3
1
作者
李朝炜
刘颖
+2 位作者
王丹娜
阳秦婧
魏景芳
《江苏农业科学》
北大核心
2017年第12期45-47,共3页
为研究农杆菌介导的小麦成熟胚转化的影响因素,以2个小麦品种石4185、科麦一号的成熟胚为转化受体材料,分别以GV3101、EHA105、LBA4404等3种农杆菌菌株(含有p CAMBIA1380双元载体)为供体材料进行转化,主要检测成熟胚愈伤组织β-葡萄糖...
为研究农杆菌介导的小麦成熟胚转化的影响因素,以2个小麦品种石4185、科麦一号的成熟胚为转化受体材料,分别以GV3101、EHA105、LBA4404等3种农杆菌菌株(含有p CAMBIA1380双元载体)为供体材料进行转化,主要检测成熟胚愈伤组织β-葡萄糖苷酸酶(GUS)报告基因的表达情况。结果表明,不同小麦品种对转化体系的反应各不相同,菌株、受体的基因型以及外植体的继代时间和生理状态等均对转化效率有很大的影响。GV3101的侵染转化效果优于另外2个菌株,石4185成熟胚愈伤对农杆菌侵染的敏感性比科麦一号要高。继代培养时间的延长会不同程度地影响小麦成熟胚愈伤的转化效果。通过对转化体系几个影响因素的研究,有助于提高农杆菌介导成熟胚转化体系的效率。
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关键词
小麦
成熟胚
农杆菌
gus表达率
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职称材料
农杆菌介导的胡麻转化因子的优化
2
作者
李淑洁
罗俊杰
+2 位作者
林玉红
裴怀弟
李闻娟
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期970-976,共7页
农杆菌介导法是植物遗传转化的重要方法之一,为了提高农杆菌介导的胡麻遗传转化效率,以‘陇亚10号’和‘定亚22号’下胚轴为基因转化受体,以pCAMBIA3301为转化质粒,分析草铵膦选择压、下胚轴预处理(剥表皮、预培养)、农杆菌菌株、侵染...
农杆菌介导法是植物遗传转化的重要方法之一,为了提高农杆菌介导的胡麻遗传转化效率,以‘陇亚10号’和‘定亚22号’下胚轴为基因转化受体,以pCAMBIA3301为转化质粒,分析草铵膦选择压、下胚轴预处理(剥表皮、预培养)、农杆菌菌株、侵染时间和乙酰丁香酮对gus表达率/频率和抗性苗率的影响,优化以上转化因子参数,建立高效的胡麻遗传转化体系,为后续的胡麻功能基因组学研究和遗传改良奠定基础。结果表明:下胚轴愈伤组织诱导、分化和再生苗生根阶段的草铵膦选择压分别是10mg/L、5mg/L和2mg/L;下胚轴预处理对gus表达率/频率无显著影响,却显著影响抗性苗分化率,不剥表皮和预培养3d抗性苗率分别提高5倍和9倍;农杆菌菌株和侵染时间都显著影响gus表达率/频率和抗性苗率,C58c1侵染60min时gus表达频率最高,为7.5,抗性苗率为60.3%。乙酰丁香酮能显著提高C58c1和GV3101介导转化时gus表达频率。
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关键词
胡麻
农杆菌介导法
转化因子
抗性苗
率
gus表达率
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职称材料
不同继代培养次数对苹果八棱海棠离体培养和遗传转化的影响
被引量:
9
3
作者
李淑艳
乔玉山
+2 位作者
渠慎春
佟兆国
章镇
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期916-919,共4页
以苹果八棱海棠离体新梢和幼叶为外植体,研究不同继代次数对其离体繁殖、再生和遗传转化的影响。结果表明,随着继代培养次数的增加,继代10次和48次的八棱海棠离体增殖倍数、生根能力、不定芽的再生频率、每外植体再生芽数和GUS基因瞬时...
以苹果八棱海棠离体新梢和幼叶为外植体,研究不同继代次数对其离体繁殖、再生和遗传转化的影响。结果表明,随着继代培养次数的增加,继代10次和48次的八棱海棠离体增殖倍数、生根能力、不定芽的再生频率、每外植体再生芽数和GUS基因瞬时表达率均显著高于继代5次的;继代10次的增殖倍数和GUS阳性率明显多于继代48次的,其它指标相互间差异不显著;说明继代10次的芽苗较适合用于八棱海棠离体培养的外殖体材料,其幼叶较适于遗传转化研究。
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关键词
八棱海棠
继代培养次数
增殖
生根
不定芽再生
gus
瞬时
表达
率
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职称材料
基因枪转化玉米愈伤组织参数的优化
被引量:
9
4
作者
贾炜珑
杨丽莉
+2 位作者
周小梅
王景雪
孙毅
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2001年第4期77-80,共4页
以玉米愈伤组织为受体 ,借助GUS基因的短暂表达 ,优化了PDS 10 0 0 /He型基因枪和自制基因枪的基因枪转化参数。PDS 10 0 0 /He型基因枪转化玉米愈伤组织的最佳轰击参数为 135 0psi压力 ,2 5In·Hg真空度 ,6cm射击距离。自制基因枪...
以玉米愈伤组织为受体 ,借助GUS基因的短暂表达 ,优化了PDS 10 0 0 /He型基因枪和自制基因枪的基因枪转化参数。PDS 10 0 0 /He型基因枪转化玉米愈伤组织的最佳轰击参数为 135 0psi压力 ,2 5In·Hg真空度 ,6cm射击距离。自制基因枪转化玉米愈伤组织的最佳轰击参数为0 6MPa 。
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关键词
玉米
愈伤组织
基因枪
gus
基因短暂
表达
率
gus
基因短暂
表达
单位
轰击参数
优化
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职称材料
农杆菌介导北方粳稻转化体系的研究
5
作者
刘双奇
邹德堂
+2 位作者
孟英
卢泳全
卞景阳
《黑龙江农业科学》
2008年第4期6-8,共3页
通过农杆菌介导的方法将Bar-Bt基因(抗除草剂基因和抗虫基因构建在同一载体上的双基因)整合到北方优质粳稻龙稻6号、松粳9号等品种中;分别以供试品种的幼胚和成熟胚为外植体诱导愈伤组织,携带有Bar-Bt基因双元载体PCAMBIA1301号的根...
通过农杆菌介导的方法将Bar-Bt基因(抗除草剂基因和抗虫基因构建在同一载体上的双基因)整合到北方优质粳稻龙稻6号、松粳9号等品种中;分别以供试品种的幼胚和成熟胚为外植体诱导愈伤组织,携带有Bar-Bt基因双元载体PCAMBIA1301号的根癌农杆菌EHA105为载体,GUS基因的瞬时表达率为衡量指标,对影响农杆菌介导的龙稻6号、松粳9号等品种的转化效率的主要因素进行了研究。结果表明:农杆菌侵染愈伤组织的菌液浓度以D(600nm)=0.8~1.0较为适宜,最佳共培养时间为2~3 d,预培养时间为5 d,共培养培养基中添加100μmol·L^-1乙酰丁香酮的转化效率有明显提高。
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关键词
粳稻
农杆菌
遗传转化
gus
瞬时
表达
率
在线阅读
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职称材料
影响大豆遗传转化主要因素及相关条件优化
被引量:
2
6
作者
马晓丽
冯小锋
+2 位作者
杨清华
郁晓敏
朱丹华
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2013年第6期1183-1188,共6页
以浙春3号,华春6号,0428三个大豆基因型的胚尖、子叶节和下胚轴为受体材料,运用农杆菌介导法转化GUS基因,通过对GUS基因瞬时表达率的比较,探讨大豆遗传转化的主要影响因素(基因型、外植体等),并进一步对遗传转化条件进行优化。结果表明...
以浙春3号,华春6号,0428三个大豆基因型的胚尖、子叶节和下胚轴为受体材料,运用农杆菌介导法转化GUS基因,通过对GUS基因瞬时表达率的比较,探讨大豆遗传转化的主要影响因素(基因型、外植体等),并进一步对遗传转化条件进行优化。结果表明:以胚尖为受体时,3个基因型的GUS基因瞬时表达率都很低,在丛生芽的再生部位没有瞬时表达。以下胚轴为受体时,萌发5 d,共培养3 d后,浙春3号、华春6号、0428在丛生芽再生部位的GUS瞬时表达率达到最高,分别为43.92%,54.45%,58.47%。而以子叶节为受体时,按照常规方法(萌发5 d),浙春3号、华春6号、0428分别在共培养5,4,4 d时,其丛生芽再生部位的GUS瞬时表达率最高,分别为23.05%,13.79%,4.78%;利用浙春3号对子叶节法的萌发时间进行了进一步的优化,发现萌发时间为3 d时在丛生芽再生部位的GUS瞬时表达率、芽诱导率较萌发5 d都有较大幅度的提高。
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关键词
大豆基因型
胚尖
子叶节
下胚轴
gus
瞬时
表达
率
芽诱导
率
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职称材料
‘蜂蜜罐’枣遗传转化条件的优化及Bt基因的导入
被引量:
1
7
作者
张燕征
张梦洋
+5 位作者
李继东
谭彬
王腾飞
郑先波
叶霞
冯建灿
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第1期43-49,共7页
为建立‘蜂蜜罐’枣高效遗传转化体系,以‘蜂蜜罐’枣胚培苗上胚轴和子叶为外植体进行转化,研究了不同菌液浓度、侵染时间、共培养时间、AS(乙酰丁香酮)浓度和侵染方式对gus(β-葡糖醛酸糖苷酶)基因瞬时表达率的影响。结果表明,当菌液OD...
为建立‘蜂蜜罐’枣高效遗传转化体系,以‘蜂蜜罐’枣胚培苗上胚轴和子叶为外植体进行转化,研究了不同菌液浓度、侵染时间、共培养时间、AS(乙酰丁香酮)浓度和侵染方式对gus(β-葡糖醛酸糖苷酶)基因瞬时表达率的影响。结果表明,当菌液OD_(600)值为0.5,真空辅助侵染10 min,共培养3 d,上胚轴和子叶外植体的共培养培养基中分别添加20和10 mg·L^(-1)乙酰丁香酮时,其gus瞬时表达率均最高,为最佳遗传转化体系。利用已优化的遗传转化体系进行Bt基因转化,共获得24个PCR(聚合酶链式反应)检测呈阳性的再生芽;对PCR检测呈阳性的不定芽进行伸长培养和不定根诱导,最终获得完整转基因植株。本研究初步获得了转Bt(苏云金芽孢杆菌)基因的枣植株,为通过转基因手段进行枣抗虫新种质选育提供可能。
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关键词
'蜂蜜罐’枣
上胚轴
子叶
gus
瞬时
表达
率
BT基因
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职称材料
题名
农杆菌介导小麦成熟胚遗传转化的几个影响因素研究
被引量:
3
1
作者
李朝炜
刘颖
王丹娜
阳秦婧
魏景芳
机构
河北科技大学生物科学与工程学院
出处
《江苏农业科学》
北大核心
2017年第12期45-47,共3页
基金
国家转基因生物新品种培育科技重大专项(编号:2014ZX08001-003)
河北科技大学五大平台开放基金(编号:2015PT51)
文摘
为研究农杆菌介导的小麦成熟胚转化的影响因素,以2个小麦品种石4185、科麦一号的成熟胚为转化受体材料,分别以GV3101、EHA105、LBA4404等3种农杆菌菌株(含有p CAMBIA1380双元载体)为供体材料进行转化,主要检测成熟胚愈伤组织β-葡萄糖苷酸酶(GUS)报告基因的表达情况。结果表明,不同小麦品种对转化体系的反应各不相同,菌株、受体的基因型以及外植体的继代时间和生理状态等均对转化效率有很大的影响。GV3101的侵染转化效果优于另外2个菌株,石4185成熟胚愈伤对农杆菌侵染的敏感性比科麦一号要高。继代培养时间的延长会不同程度地影响小麦成熟胚愈伤的转化效果。通过对转化体系几个影响因素的研究,有助于提高农杆菌介导成熟胚转化体系的效率。
关键词
小麦
成熟胚
农杆菌
gus表达率
分类号
S512.101 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
农杆菌介导的胡麻转化因子的优化
2
作者
李淑洁
罗俊杰
林玉红
裴怀弟
李闻娟
机构
甘肃省农业科学院生物技术研究所
甘肃省农业科学院作物研究所
出处
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期970-976,共7页
基金
甘肃省农业科学院科技创新专项(2014GAAS29)
甘肃省农业科学院科技创新工程学科创新团队(2015GAAS02)
+1 种基金
国家特色油料产业体系兰州试验站(CRS-14-2-23)
国家自然科学基金(31460388)~~
文摘
农杆菌介导法是植物遗传转化的重要方法之一,为了提高农杆菌介导的胡麻遗传转化效率,以‘陇亚10号’和‘定亚22号’下胚轴为基因转化受体,以pCAMBIA3301为转化质粒,分析草铵膦选择压、下胚轴预处理(剥表皮、预培养)、农杆菌菌株、侵染时间和乙酰丁香酮对gus表达率/频率和抗性苗率的影响,优化以上转化因子参数,建立高效的胡麻遗传转化体系,为后续的胡麻功能基因组学研究和遗传改良奠定基础。结果表明:下胚轴愈伤组织诱导、分化和再生苗生根阶段的草铵膦选择压分别是10mg/L、5mg/L和2mg/L;下胚轴预处理对gus表达率/频率无显著影响,却显著影响抗性苗分化率,不剥表皮和预培养3d抗性苗率分别提高5倍和9倍;农杆菌菌株和侵染时间都显著影响gus表达率/频率和抗性苗率,C58c1侵染60min时gus表达频率最高,为7.5,抗性苗率为60.3%。乙酰丁香酮能显著提高C58c1和GV3101介导转化时gus表达频率。
关键词
胡麻
农杆菌介导法
转化因子
抗性苗
率
gus表达率
Keywords
Flax(Linum usitatissimum L. )
Agrobacterium tumefaciens -mediated transformation
Transformation factors
Calli regeneration ratio
gus
expression efficiency
分类号
S563.2 [农业科学—作物学]
S182 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
不同继代培养次数对苹果八棱海棠离体培养和遗传转化的影响
被引量:
9
3
作者
李淑艳
乔玉山
渠慎春
佟兆国
章镇
机构
南京农业大学园艺学院
出处
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期916-919,共4页
基金
2008年度国家高技术研究发展计划(863计划)(2008AA108157)
文摘
以苹果八棱海棠离体新梢和幼叶为外植体,研究不同继代次数对其离体繁殖、再生和遗传转化的影响。结果表明,随着继代培养次数的增加,继代10次和48次的八棱海棠离体增殖倍数、生根能力、不定芽的再生频率、每外植体再生芽数和GUS基因瞬时表达率均显著高于继代5次的;继代10次的增殖倍数和GUS阳性率明显多于继代48次的,其它指标相互间差异不显著;说明继代10次的芽苗较适合用于八棱海棠离体培养的外殖体材料,其幼叶较适于遗传转化研究。
关键词
八棱海棠
继代培养次数
增殖
生根
不定芽再生
gus
瞬时
表达
率
Keywords
Malus micromalus
Subculture times
Shoot multiplication
Rooting
Adventitious bud regeneration
gus
transient expression
分类号
S661.1 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
基因枪转化玉米愈伤组织参数的优化
被引量:
9
4
作者
贾炜珑
杨丽莉
周小梅
王景雪
孙毅
机构
山西省农业科学院旱地农业研究中心
山西大学生命科学系
山西省农业科学院生物技术中心
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2001年第4期77-80,共4页
基金
山西省自然科学基金项目 (9810 98)
文摘
以玉米愈伤组织为受体 ,借助GUS基因的短暂表达 ,优化了PDS 10 0 0 /He型基因枪和自制基因枪的基因枪转化参数。PDS 10 0 0 /He型基因枪转化玉米愈伤组织的最佳轰击参数为 135 0psi压力 ,2 5In·Hg真空度 ,6cm射击距离。自制基因枪转化玉米愈伤组织的最佳轰击参数为0 6MPa 。
关键词
玉米
愈伤组织
基因枪
gus
基因短暂
表达
率
gus
基因短暂
表达
单位
轰击参数
优化
Keywords
Maize calli
Gene
gu
n
gus
transient expression rate
gus
transient expression unit
分类号
S513.035.3 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
农杆菌介导北方粳稻转化体系的研究
5
作者
刘双奇
邹德堂
孟英
卢泳全
卞景阳
机构
东北农业大学农学院
黑龙江省农业科学院耕作栽培研究所
黑龙江省农业科学院生物技术研究所
出处
《黑龙江农业科学》
2008年第4期6-8,共3页
文摘
通过农杆菌介导的方法将Bar-Bt基因(抗除草剂基因和抗虫基因构建在同一载体上的双基因)整合到北方优质粳稻龙稻6号、松粳9号等品种中;分别以供试品种的幼胚和成熟胚为外植体诱导愈伤组织,携带有Bar-Bt基因双元载体PCAMBIA1301号的根癌农杆菌EHA105为载体,GUS基因的瞬时表达率为衡量指标,对影响农杆菌介导的龙稻6号、松粳9号等品种的转化效率的主要因素进行了研究。结果表明:农杆菌侵染愈伤组织的菌液浓度以D(600nm)=0.8~1.0较为适宜,最佳共培养时间为2~3 d,预培养时间为5 d,共培养培养基中添加100μmol·L^-1乙酰丁香酮的转化效率有明显提高。
关键词
粳稻
农杆菌
遗传转化
gus
瞬时
表达
率
Keywords
Japonica rice
Agrobacterium tumefaciens
genetic transformation
transient expression of
gus
gene
分类号
S511.22 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
影响大豆遗传转化主要因素及相关条件优化
被引量:
2
6
作者
马晓丽
冯小锋
杨清华
郁晓敏
朱丹华
机构
浙江师范大学化学与生命科学学院
浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所
长江大学园艺园林学院
出处
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2013年第6期1183-1188,共6页
基金
转基因生物新品种培育重大专项(2011ZX08004002
2012ZX08009004003)
文摘
以浙春3号,华春6号,0428三个大豆基因型的胚尖、子叶节和下胚轴为受体材料,运用农杆菌介导法转化GUS基因,通过对GUS基因瞬时表达率的比较,探讨大豆遗传转化的主要影响因素(基因型、外植体等),并进一步对遗传转化条件进行优化。结果表明:以胚尖为受体时,3个基因型的GUS基因瞬时表达率都很低,在丛生芽的再生部位没有瞬时表达。以下胚轴为受体时,萌发5 d,共培养3 d后,浙春3号、华春6号、0428在丛生芽再生部位的GUS瞬时表达率达到最高,分别为43.92%,54.45%,58.47%。而以子叶节为受体时,按照常规方法(萌发5 d),浙春3号、华春6号、0428分别在共培养5,4,4 d时,其丛生芽再生部位的GUS瞬时表达率最高,分别为23.05%,13.79%,4.78%;利用浙春3号对子叶节法的萌发时间进行了进一步的优化,发现萌发时间为3 d时在丛生芽再生部位的GUS瞬时表达率、芽诱导率较萌发5 d都有较大幅度的提高。
关键词
大豆基因型
胚尖
子叶节
下胚轴
gus
瞬时
表达
率
芽诱导
率
Keywords
soybean
embryonic tip
cotyledonary node
hypocotyl
gus
transient expression rate
bud induction rate
分类号
S565.1 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
‘蜂蜜罐’枣遗传转化条件的优化及Bt基因的导入
被引量:
1
7
作者
张燕征
张梦洋
李继东
谭彬
王腾飞
郑先波
叶霞
冯建灿
机构
河南农业大学林学院
河南省果树瓜类生物学重点实验室
河南农业大学园艺学院
出处
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第1期43-49,共7页
基金
河南省重大科技专项项目(151100110900)
河南省现代农业技术体系建设专项资金资助项目(S2014-11-G02)
文摘
为建立‘蜂蜜罐’枣高效遗传转化体系,以‘蜂蜜罐’枣胚培苗上胚轴和子叶为外植体进行转化,研究了不同菌液浓度、侵染时间、共培养时间、AS(乙酰丁香酮)浓度和侵染方式对gus(β-葡糖醛酸糖苷酶)基因瞬时表达率的影响。结果表明,当菌液OD_(600)值为0.5,真空辅助侵染10 min,共培养3 d,上胚轴和子叶外植体的共培养培养基中分别添加20和10 mg·L^(-1)乙酰丁香酮时,其gus瞬时表达率均最高,为最佳遗传转化体系。利用已优化的遗传转化体系进行Bt基因转化,共获得24个PCR(聚合酶链式反应)检测呈阳性的再生芽;对PCR检测呈阳性的不定芽进行伸长培养和不定根诱导,最终获得完整转基因植株。本研究初步获得了转Bt(苏云金芽孢杆菌)基因的枣植株,为通过转基因手段进行枣抗虫新种质选育提供可能。
关键词
'蜂蜜罐’枣
上胚轴
子叶
gus
瞬时
表达
率
BT基因
Keywords
‘Fengmi
gu
an’
epicotyl
cotyledon
the rate of
gus
transient expression
Bt gene
分类号
S665.1 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
农杆菌介导小麦成熟胚遗传转化的几个影响因素研究
李朝炜
刘颖
王丹娜
阳秦婧
魏景芳
《江苏农业科学》
北大核心
2017
3
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职称材料
2
农杆菌介导的胡麻转化因子的优化
李淑洁
罗俊杰
林玉红
裴怀弟
李闻娟
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
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职称材料
3
不同继代培养次数对苹果八棱海棠离体培养和遗传转化的影响
李淑艳
乔玉山
渠慎春
佟兆国
章镇
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
9
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职称材料
4
基因枪转化玉米愈伤组织参数的优化
贾炜珑
杨丽莉
周小梅
王景雪
孙毅
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2001
9
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职称材料
5
农杆菌介导北方粳稻转化体系的研究
刘双奇
邹德堂
孟英
卢泳全
卞景阳
《黑龙江农业科学》
2008
0
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职称材料
6
影响大豆遗传转化主要因素及相关条件优化
马晓丽
冯小锋
杨清华
郁晓敏
朱丹华
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2013
2
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职称材料
7
‘蜂蜜罐’枣遗传转化条件的优化及Bt基因的导入
张燕征
张梦洋
李继东
谭彬
王腾飞
郑先波
叶霞
冯建灿
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
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职称材料
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