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崇仁麻鸡源禽白血病病毒的分离鉴定及其gp85基因遗传进化分析
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作者 何琴 冉盛菊 +4 位作者 陈薄帆 江灵枫 冯海 苏芝乾 温贵兰 《贵州畜牧兽医》 2025年第5期78-80,共3页
为了解贵阳市某养殖场崇仁麻鸡禽白血病病毒(ALV)的感染情况,对疑似感染的100只雏鸡进行ELISA抗原检测、PCR检测及ALV gp85基因测序分析,并构建遗传进化树。结果:100只雏鸡中有3只存在ALV感染,阳性率为3%,分型鉴定属于ALV-J亚群;gp85基... 为了解贵阳市某养殖场崇仁麻鸡禽白血病病毒(ALV)的感染情况,对疑似感染的100只雏鸡进行ELISA抗原检测、PCR检测及ALV gp85基因测序分析,并构建遗传进化树。结果:100只雏鸡中有3只存在ALV感染,阳性率为3%,分型鉴定属于ALV-J亚群;gp85基因序列与ALV-J亚群参考株的同源性为91.6%~94.3%,与其他亚群参考株的同源性<40%;遗传进化分析显示,分离毒株(GZ2024J株)属于ALV-J分支,与国内外ALV-J毒株亲缘关系较近,但与其他亚群(A、B、C、D、E、K)亲缘关系较远。结论:该场存在禽白血病病毒J亚群(ALV-J)感染。 展开更多
关键词 崇仁麻鸡 禽白血病病毒 ALV-J亚群 gp85基因
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山东五大地方鸡禽白血病病毒主要流行亚型鉴定及其分离株gp85基因的分子特征分析 被引量:9
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作者 陈静 王波 +3 位作者 王海明 程合刚 武星辰 孙淑红 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期451-457,共7页
通过对山东五大地方鸡(寿光鸡、芦花鸡、百日鸡、琅琊鸡、鲁西斗鸡)不同亚型禽白血病病毒(ALV)分离株鉴定及gp85基因序列分析,探究山东五大地方鸡ALV的主要流行亚型及gp85基因分子特征。分别将寿光鸡、百日鸡、芦花鸡的无菌抗凝血和琅... 通过对山东五大地方鸡(寿光鸡、芦花鸡、百日鸡、琅琊鸡、鲁西斗鸡)不同亚型禽白血病病毒(ALV)分离株鉴定及gp85基因序列分析,探究山东五大地方鸡ALV的主要流行亚型及gp85基因分子特征。分别将寿光鸡、百日鸡、芦花鸡的无菌抗凝血和琅琊鸡、鲁西斗鸡的卵白接种CEF培养9~10d,常规方法提取感染细胞的cDNA,用针对J亚型ALV(ALV-J)gp85基因(924bp)的引物和A^J(含囊膜蛋白env基因,2 400bp)的群引物进行PCR扩增、克隆、测序并分析其特点。本研究发现,2009—2011年间,山东五大地方鸡均存在ALV-J感染,5个ALV-J分离株gp85基因之间的相似性为98.4%~99.9%,与原型毒株HPRS-103相似性为97.8%~98.3%;均扩出内源性ALV(ALV-E)片段,与不能产生传染性病毒粒子的ev-1、ev-3、ev-6毒株相似性最高,推测为鸡基因组所携带;同时还发现,琅琊鸡、芦花鸡存在A亚型ALV(ALV-A)的感染。研究结果表明,2009—2011年间的山东五大地方鸡已经普遍存在ALV-J,两大品系中存在ALV-A和ALV-J共感染,同时ALV-E的片段广泛存在,这一结论揭示出山东地方鸡的禽白血病净化工作更加具有挑战性。 展开更多
关键词 地方鸡 禽白血病病毒(ALV) gp85基因 分子特征
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不同地区海兰褐蛋鸡中J亚群-禽白血病病毒株gp85基因的分子演化分析 被引量:11
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作者 代阳 杨其峰 +5 位作者 王波 刘绍琼 王秀臻 柴家前 崔治中 孙淑红 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期635-638,共4页
本研究通过对不同地区海兰褐蛋鸡群中分离的5株J亚群-禽白血病病毒(ALV-J)的囊膜糖蛋白基因(gp85)进行同源性分析,阐述了不同海兰褐鸡群中存在的ALV-J的分子演化规律。对2008-2009年分别从北京、陕西、山东泰安、济阳、曲阜等不同地区... 本研究通过对不同地区海兰褐蛋鸡群中分离的5株J亚群-禽白血病病毒(ALV-J)的囊膜糖蛋白基因(gp85)进行同源性分析,阐述了不同海兰褐鸡群中存在的ALV-J的分子演化规律。对2008-2009年分别从北京、陕西、山东泰安、济阳、曲阜等不同地区饲养的海兰褐鸡分离到的5株ALV-J,用PCR方法克隆gp85基因、测序,并与国内外已发表的14株ALV-Jgp85基因进行同源性比较。结果表明,5株ALV-J与来自白羽肉鸡的HPRS-103株的同源性最近,平均为96.6%(96.4%~96.8%);与来自国内海兰灰蛋鸡的SD07LK1株的同源性平均仅为89.6%(89.3%~89.9%);而5株ALV-J间的同源性高达98.1%以上(98.1%~100%)。本研究发现,不同地区的海兰褐蛋鸡中广泛存在的ALV-J可能有一个共同的来源,即国外的白羽肉鸡。 展开更多
关键词 海兰褐蛋鸡 J亚群-禽白血病病毒 gp85基因 同源性
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黄羽鸡J亚群禽白血病病毒的分离及gp85基因分析 被引量:8
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作者 潘孝成 赵瑞宏 +5 位作者 胡晓苗 沈学怀 周学利 戴银 侯宏艳 张丹俊 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第2期51-54,共4页
为了解禽白血病病毒在黄羽鸡中的流行情况,采用DF-1细胞接种、细胞培养上清P27抗原检测、PCR扩增,对送检疑似禽白血病的黄羽鸡病料进行了病毒分离,并对分离病毒gp85基因进行了测序和序列比较.结果表明,自黄羽鸡分离到2株J亚群禽白血病... 为了解禽白血病病毒在黄羽鸡中的流行情况,采用DF-1细胞接种、细胞培养上清P27抗原检测、PCR扩增,对送检疑似禽白血病的黄羽鸡病料进行了病毒分离,并对分离病毒gp85基因进行了测序和序列比较.结果表明,自黄羽鸡分离到2株J亚群禽白血病病毒(ALV-J),分别命名为AHaq01和AHaq02,它们之间的核苷酸序列同源性为93.8%,与ALV-J参考毒株序列同源性为91.1%~99.8%,其中与ALV-J原型毒株HPRS-103的序列同源性分别为93.3%和98.1%,与分离株AHaq01和AHaq02同源性最高的分别是WN100404(95.0%)和SD09TA04 (99.8%).进化分析进一步表明,2个分离株间的亲缘关系较远,为来源不同的ALV-J毒株. 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 gp85基因 分离 黄羽鸡
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J亚群禽白血病病毒gp85基因的原核表达及间接ELISA方法建立 被引量:7
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作者 刘丽娜 邵华斌 +5 位作者 程国富 杨峻 张琳 谢华丽 栗绍文 罗青平 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期38-41,共4页
为建立检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)抗体间接ELISA方法,本实验根据已发表的ALV-J gp85基因序列设计一对特异性引物,以该病毒cDNA为模板进行PCR扩增,将目的基因克隆于pET-28a(+)载体中,原核表达的重组蛋白约为38 ku,经western blot分析... 为建立检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)抗体间接ELISA方法,本实验根据已发表的ALV-J gp85基因序列设计一对特异性引物,以该病毒cDNA为模板进行PCR扩增,将目的基因克隆于pET-28a(+)载体中,原核表达的重组蛋白约为38 ku,经western blot分析表明,重组蛋白gp85具有良好的反应原性。以纯化的重组蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA抗体检测方法,该方法对其它相关的禽类病原无交叉反应,其组内和组间的变异系数均低于13%,具有良好的重复性。对458份临床血清样品进行检测,同时用IDEXX的同类ELISA抗体检测试剂盒进行对比,总符合率达到96.29%。本研究为ALV-J的流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病 gp85基因 蛋白表达 酶联免疫吸附试验
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A亚群禽白血病病毒QC6281株的分离与gp85基因序列分析 被引量:11
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作者 乔彦华 王永强 +2 位作者 庞平 金铮 陈福勇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第12期9-12,共4页
本试验通过病理剖检、接种DF-1细胞、ELISA及RT-PCR检测,从北京某种鸡场的疑似禽白血病的父母代蛋鸡中分离到1株A亚群禽白血病病毒,命名为QC6281。并根据GenBank中已发表序列设计引物,扩增env基因片段并将其克隆到pMD19-T-simple载体中... 本试验通过病理剖检、接种DF-1细胞、ELISA及RT-PCR检测,从北京某种鸡场的疑似禽白血病的父母代蛋鸡中分离到1株A亚群禽白血病病毒,命名为QC6281。并根据GenBank中已发表序列设计引物,扩增env基因片段并将其克隆到pMD19-T-simple载体中,扩增的env基因片段大小为1 239 bp,其中包括完整的gp 85基因,将gp 85基因亚克隆到pMD19-T-si mple载体中并测序,gp 85基因大小为1 032 bp,编码344个氨基酸。将env基因片段和推导的氨基酸序列与GenBank中9株ALV的env基因相应序列做同源性分析并制作进化树图谱。发现QC6281与已发表的A亚群禽白血病病毒株该区域核苷酸同源性在83.8%~98%,氨基酸同源性在86.9%~98.5%。其中与Myeloblastosis-associated virus type 1(L10922.1)同源性最高,核苷酸同源性为98%,氨基酸同源性为98.5%;且与Myeloblastosis-associated virus type 1(L10922.1)亲缘关系最近。本研究为该毒株的生物学特性以及致病性研究打下基础。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 gp85基因 ENV基因 序列比较
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J亚群禽白血病JL-2株gp85基因的克隆与表达 被引量:5
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作者 宋素泉 付朝阳 +7 位作者 高宏雷 王笑梅 曾祥伟 郭艳 王英 张厚双 王晓艳 魏萍 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期356-359,共4页
本实验在分离鉴定J亚群禽白血病JL_2株的基础上,利用PCR方法扩增出包括gp85基因在内的长度为960bp的DNA片段。将其连到PGEX_6p_1载体上,构建了重组表达质粒PGEX_6P-1/gp85,对质粒进行序列分析并在IPTG的诱导下进行表达。SDS_PAGE分析结... 本实验在分离鉴定J亚群禽白血病JL_2株的基础上,利用PCR方法扩增出包括gp85基因在内的长度为960bp的DNA片段。将其连到PGEX_6p_1载体上,构建了重组表达质粒PGEX_6P-1/gp85,对质粒进行序列分析并在IPTG的诱导下进行表达。SDS_PAGE分析结果表明,融合蛋白(54 Ku)在BL21中得到有效表达。表达产物占菌体总蛋白的31.8%。Western Blot结果表明,表达产物可与ALV_J阳性血清发生特异性反应。这些结果为进一步研究gp85蛋白的功能及研制ALV_J ELISA诊断试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 J-亚群禽白血病病毒 gp85基因 克隆 表达
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从芦花鸡分离的J亚群ALV病毒及其gp85基因演化 被引量:7
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作者 秦卓明 徐怀英 +5 位作者 马秀丽 黄兵 李玉峰 李福伟 于可响 崔治中 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期1180-1185,共6页
采用RT-PCR方法直接从芦花鸡肿瘤中进行禽白血病病毒(Avian leucosis virus,ALV)的核酸扩增,经测序证实为ALV。将上述病料接种DF1细胞(C/E)进行盲传,并对其感染细胞上清进行ALV P27抗原检测,结果为阳性,证实获得了一株病毒,命名为SD... 采用RT-PCR方法直接从芦花鸡肿瘤中进行禽白血病病毒(Avian leucosis virus,ALV)的核酸扩增,经测序证实为ALV。将上述病料接种DF1细胞(C/E)进行盲传,并对其感染细胞上清进行ALV P27抗原检测,结果为阳性,证实获得了一株病毒,命名为SDJN2012。用PCR方法扩增其囊膜蛋白gp85基因并测序,与GenBank中的ALV参考毒株进行核苷酸或氨基酸同源性比较。结果表明:SDJN2012与山东较早发现的J亚群ALV代表株SD0001的核苷酸(氨基酸)同源性最高,达93.4%(92.6%),与J亚群不同年代的代表株同源性为88.6%~93.3%(88.2%~90.6%),而与A,C,D,E亚群ALV毒株的同源性仅为19.7%~32.2%(10.2%~32.2%),进一步确证分离到的病毒为J亚群ALV。对种蛋的跟踪监测证实:ALV蛋清P27抗原阳性率为37.6%,而血清学监测则呈现多样性的变化:鸡群发病前J亚群ALV抗体检测为阴性,发病后阳性率仅为9.35%,而A/B亚群阳性率则由发病前的9.8%,攀升到发病后的75.4%,彰显出ALV病原学、血清学和分子流行病学的复杂性。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 gp85基因 J亚群
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我国部分地区蛋鸡ALV-J分离株gp85基因遗传进化分析 被引量:3
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作者 潘伟 高玉龙 +5 位作者 刘超男 秦立廷 王永强 祁小乐 高宏雷 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期399-401,414,共4页
为了解我国蛋鸡J亚型白血病病毒(ALV-J)株来源及其遗传进化关系,本研究对2009年从我国6个省区蛋鸡场分离到的19株ALV-J的gp85基因进行克隆和测序,并与11个ALV-J参考株gp85基因作了比较分析。结果表明:19个ALV-J分离株的gp85基因长度为89... 为了解我国蛋鸡J亚型白血病病毒(ALV-J)株来源及其遗传进化关系,本研究对2009年从我国6个省区蛋鸡场分离到的19株ALV-J的gp85基因进行克隆和测序,并与11个ALV-J参考株gp85基因作了比较分析。结果表明:19个ALV-J分离株的gp85基因长度为894bp~924bp不等,分别编码298~308个氨基酸;各病毒株间gp85推导氨基酸的同源性为71.3%~100%。遗传进化分析表明,目前我国蛋鸡ALV-J分离株来源复杂,其中13个分离株与英国原型株HPRS-103、国内麻黄肉鸡株SCAU-0901亲缘关系较近;3个分离株与美国株ADOL-7501及国内白羽肉鸡株HN0001处在同一大的分支;而另外3个分离株则各自形成独立的分支,表明其gp85基因发生了较大变异。本研究表明,19个分离株与国内早期肉鸡分离株亲缘关系较远,提示我国当前蛋鸡ALV-J株可能并非源自国内早期肉鸡ALV-J株,其来源有待进一步研究。 展开更多
关键词 蛋鸡 J亚群禽白血病病毒 gp85基因 同源性 遗传进化
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J亚群禽白血病病毒安徽分离株的鉴定及其gp85基因序列分析 被引量:6
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作者 安好峰 戴银 +5 位作者 潘孝成 侯宏艳 赵瑞宏 胡晓苗 李福宝 张丹俊 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第12期6-10,共5页
从安徽省的黄羽肉鸡和罗曼蛋鸡中各分离鉴定出1株J亚群禽白血病病毒,克隆获得了2条相应的gp85基因序列,并与参考毒株进行序列比对。结果表明,两分离毒株与J亚群参考毒株同源性为82.1%~99.4%,分离毒株之间同源性为85.4%。其中肉鸡分离... 从安徽省的黄羽肉鸡和罗曼蛋鸡中各分离鉴定出1株J亚群禽白血病病毒,克隆获得了2条相应的gp85基因序列,并与参考毒株进行序列比对。结果表明,两分离毒株与J亚群参考毒株同源性为82.1%~99.4%,分离毒株之间同源性为85.4%。其中肉鸡分离毒株与J亚群原型毒株HPRS-103同源性为97.1%,与J亚群国内毒株SD09TA04、SDYC02J同源性均为99.4%;蛋鸡分离毒株与HPRS-103的同源性为89.0%,与SD09TA04和SDYC02J同源性仅为88.6%。两分离毒株的gp85氨基酸序列出现突变和缺失,在高变区hr1、hr2变异明显。进化分析进一步表明,2个分离毒株亲缘关系较远,可能来源于不同的原始病毒株。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 安徽分离毒株 gp85基因 序列分析
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广西地方禽类品种ALV和REV感染情况的调查及ALV分离株gp85基因序列分析 被引量:4
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作者 钟兴福 王培坤 +5 位作者 杨永立 秦丽莉 毕玉彧 邹广珍 彭昊 韦平 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第7期1647-1653,共7页
为了解广西钦州地区主要地方品种商品禽类中禽白血病病毒(ALV)、禽网状内皮组织增殖症病毒(REV)的感染情况,本试验随机采集了广西钦州地区代表饲养场的麻鸭、狮头鹅、铁脚麻鸡、火鸡、鸽子共5个品种的蛋清、肛拭子及血清样品共953... 为了解广西钦州地区主要地方品种商品禽类中禽白血病病毒(ALV)、禽网状内皮组织增殖症病毒(REV)的感染情况,本试验随机采集了广西钦州地区代表饲养场的麻鸭、狮头鹅、铁脚麻鸡、火鸡、鸽子共5个品种的蛋清、肛拭子及血清样品共953份,使用ELISA商品试剂盒进行检测;然后对部分ALVp27阳性的个体采集其血清样品接种DF-1细胞进行病毒分离并测定其gp85基因的序列。结果发现,除铁脚麻鸡外其他4个非鸡禽类品种的ALV检测均为阴性;除鸽子和狮头鹅外,麻鸭、铁脚麻鸡、火鸡均检测到REV抗体阳性;获得的两株铁脚麻鸡ALV分离株gp85基因之间核苷酸同源性为94.5%,与参考株之间核苷酸同源性为86.9%~94.9%;两株分离株gp85基因之间氨基酸同源性为91.5%,与参考株之间氨基酸同源性为84.0%~91。6%。高变区hrl和hr2区存在较多可变位点,可变区vr2和vr3相对较保守。系统进化树分析结果表明这两个毒株与参考株SCAUll-XG的亲缘关系最近。 展开更多
关键词 禽类 禽白血病 禽网状内皮组织增殖症 流行病学调查 gp85基因 系统进化树分析
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浙江省地方鸡种禽白血病毒抗原检测与部分分离株GP85基因序列分析 被引量:3
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作者 倪征 陈柳 +4 位作者 华炯钢 叶伟成 云涛 朱寅初 张存 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第8期1357-1362,共6页
为了解浙江地区地方品种鸡中J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis vrius,ALV-J)的感染情况与流行毒株的分子特征,对浙江省部分地方品种鸡体内ALV的p27抗原进行了检测,从疑似感染鸡群中检测分离到5株ALV-J,并对其GP85基因进行PC... 为了解浙江地区地方品种鸡中J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis vrius,ALV-J)的感染情况与流行毒株的分子特征,对浙江省部分地方品种鸡体内ALV的p27抗原进行了检测,从疑似感染鸡群中检测分离到5株ALV-J,并对其GP85基因进行PCR分子克隆和序列分析。研究结果显示:在检测的19个地方鸡品系中,所有品系的鸡样本都呈现抗原阳性,其中101系的抗体阳性率最高,母鸡阳性率为40.48%,公鸡阳性率为16.54%;126系次之,母鸡阳性率为28.87%,公鸡阳性率为3.30%;171系抗体阳性率最低,其母鸡阳性率仅为4.08%,公鸡的感染率为0。为了解地方鸡群中ALV-J的遗传变异,对分离到的5株ALV-J的GP85基因进行了分子克隆和序列分析。结果表明,5个分离毒株的GP85基因大小均为924 bp,与预期一致;本研究样品序列之间的核苷酸同源性为90.8%~98.5%,与原型毒株HPRS103核苷酸相似性为90.3%~97.0%,与国内其他分离株的同源性为86.5%~99.0%。分离株与福建(FJ201308株)和广东(WF13株)分离株的同源性最高。结果表明:浙江省大部分地方品种鸡都不同程度感染ALV-J,而且分离毒株已经发生了不同程度的变异,提示我们应加强浙江省地方品种鸡ALV的净化工作。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 P27抗原 gp85基因 序列分析
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禽白血病病毒贵州流行株gp85基因的序列分析 被引量:4
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作者 林汉卿 陈绍品 +8 位作者 温贵兰 汪德生 张升波 徐丽 李昌红 龚新勇 文明 周碧君 程振涛 《中国家禽》 北大核心 2017年第12期25-29,共5页
为了解禽白血病病毒(ALV)gp85基因的特点,采用Primer Premier 5.0设计一对特异性引物,对gp85基因进行扩增、克隆及序列测定,用相关生物学软件对贵州流行株gp85基因进行序列分析,并对其编码蛋白进行二级结构、B细胞表位、保守结构域、跨... 为了解禽白血病病毒(ALV)gp85基因的特点,采用Primer Premier 5.0设计一对特异性引物,对gp85基因进行扩增、克隆及序列测定,用相关生物学软件对贵州流行株gp85基因进行序列分析,并对其编码蛋白进行二级结构、B细胞表位、保守结构域、跨膜结构域和信号肽预测。测序获得921 bp长的序列,将此流行株命名为ALV-GZ-16。分析发现,流行株ALV-GZ-16的gp85基因核苷酸序列与J亚群中国分离毒株的gp85基因序列同源性为97.5%~99.9%,其编码的氨基酸序列与J亚群中国分离毒株的同源性为96.8%~99.7%;系统进化分析显示,该流行株与J亚群原型毒株处于同一分支,与贵州分离株GZN49处于同一小分支;其二级结构中无规则卷曲和β-折叠所占比例较大;预测此蛋白存在4个B细胞优势抗原表位,无跨膜结构和信号肽区域。研究结果进一步完善了贵州省禽白血病病毒流行株的生物学特性,为gp85蛋白特异性抗体的制备提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 gp85基因 序列分析
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安徽两个鸡场ALV-J分离株gp85基因的克隆及序列分析 被引量:3
14
作者 戴银 赵瑞宏 +4 位作者 胡晓苗 侯宏艳 潘孝成 周学利 张丹俊 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第12期38-41,共4页
为研究J-亚群禽白血病病毒(ALV-J)在安徽省鸡群中的遗传变异趋势,对分离到的2株安徽省ALV-J毒株,克隆了其gp85基因序列,并与国内外分离毒株的相应基因序列进行了比较。结果显示,ALVJ gp85基因序列具有高度的易变性,可变氨基酸残基占全... 为研究J-亚群禽白血病病毒(ALV-J)在安徽省鸡群中的遗传变异趋势,对分离到的2株安徽省ALV-J毒株,克隆了其gp85基因序列,并与国内外分离毒株的相应基因序列进行了比较。结果显示,ALVJ gp85基因序列具有高度的易变性,可变氨基酸残基占全长序列的22.8%。其中高变区hr1和hr2具有较多的可变位点,而可变区vr2和vr3相对较为保守。二级结构预测显示ALV-J gp85蛋白含有大量的无规则卷曲结构,尤其是hr2区域。同源性分析表明,毒株AH1103和AH1104的gp85氨基酸序列同源性为95.8%;毒株AH1103与毒株BJ090201J,ev/J的gp85序列同源性最高,毒株AH1104的gp85序列则与国内毒株HuB09JY04的同源性最高。进化分析显示,毒株AH1103和AH1104均与国内毒株NX0101和SD07LK1及美国分离株4817的遗传距离较远。 展开更多
关键词 J-亚群禽白血病病毒 gp85基因 序列分析
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2015~2017年湖北地区禽白血病病毒的分离及gp85基因序列分析 被引量:3
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作者 刘丽娜 唐中文 +6 位作者 赵宗正 汪辉 汪最 郑培培 王桂军 邵华斌 罗青平 《中国家禽》 北大核心 2018年第24期16-19,共4页
为了解2015~2017年湖北地区地方品种鸡中J亚群禽白血病病毒(Subgroup J avi-an leukosis vrius,ALV-J)流行情况及流行株的分子特征,从湖北省地方品种鸡中分离到10株ALV-J,对其gp85基因进行PCR扩增、克隆、序列测定及分析。结果显示:10... 为了解2015~2017年湖北地区地方品种鸡中J亚群禽白血病病毒(Subgroup J avi-an leukosis vrius,ALV-J)流行情况及流行株的分子特征,从湖北省地方品种鸡中分离到10株ALV-J,对其gp85基因进行PCR扩增、克隆、序列测定及分析。结果显示:10个分离毒株的gp85基因片段大小均为924 bp,与预期一致;10个分离毒株之间核苷酸和氨基酸序列相似性分别为91.4%~100%、86.4%~100%,其中9株与原型毒株HPRS103核苷酸相似性为96.8%~98.9%,并且在一个分支上面。结果表明:湖北省部分地方品种鸡不同程度感染ALV-J,分离毒株的变异主要围绕着原型株HPRS103改变,应加强地方品种鸡ALV的净化工作。 展开更多
关键词 ALV-J gp85基因 序列分析
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广西省2013-2015年ALV-J分离株gp85基因序列分析 被引量:1
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作者 杨永立 王培坤 +2 位作者 邹广珍 林璐璐 韦平 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2016年第4期19-25,共7页
为了解J亚群禽白血病病毒(subgroup J Avian leukosis virus,ALV-J)在广西省鸡群中的变异趋势,对2013-2015年现场分离到的8株ALV-J毒株的gp85基因进行PCR扩增、克隆、测序及分析比较。结果表明,8株分离病毒核苷酸及氨基酸序列同源性... 为了解J亚群禽白血病病毒(subgroup J Avian leukosis virus,ALV-J)在广西省鸡群中的变异趋势,对2013-2015年现场分离到的8株ALV-J毒株的gp85基因进行PCR扩增、克隆、测序及分析比较。结果表明,8株分离病毒核苷酸及氨基酸序列同源性依次为92.5%-99.8%和89.2%-100%,与原型株HPRS-103的同源性依次为92.8%-98.1%和88.6%-97.1%,与国内外其他分离株的同源性为92.9%-99.9%和87.6%-99.4%。位点的有义突变和沉默突变的比例显示,除了2014年的1个分离株GX14YY17的高变区(hypervariable region 1,hr1)外,均未发现选择压对连续几年的分离株的gp85基因有明显的作用。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 gp85基因 序列分析 突变 选择压
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K亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆表达及多克隆抗体的制备 被引量:1
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作者 吕璐 胡明月 +7 位作者 邓菁菁 刘勇 李拓凡 谢菁 谢泉 邵红霞 秦爱建 叶建强 《中国家禽》 北大核心 2019年第19期55-58,共4页
研究分别将K亚群禽白血病病毒(ALV-K)的gp85基因以及env基因分别克隆到原核表达载体pColdⅠ以及真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证后分别命名为pCold-K-gp85以及pcDNA3.1-K-env。pCold-K-gp85转化BL21大肠杆菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE... 研究分别将K亚群禽白血病病毒(ALV-K)的gp85基因以及env基因分别克隆到原核表达载体pColdⅠ以及真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证后分别命名为pCold-K-gp85以及pcDNA3.1-K-env。pCold-K-gp85转化BL21大肠杆菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析发现,该Gp85重组蛋白主要表达在包涵体中。利用纯化后Gp85重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了抗ALV-KGp85蛋白的多克隆抗体。间接免疫荧光以及Westernblot试验进一步证明,所获得的抗Gp85蛋白的多克隆抗体能特异性的识别转染pcDNA3.1-K-env质粒以及感染ALV-K的DF-1细胞内表达的Env蛋白。以上研究结果为进一步探究ALV-K宿主范围,细胞受体鉴定及亚群特异性诊断技术研究奠定了基础。 展开更多
关键词 K亚群禽白血病病毒 gp85基因 多克隆抗体
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三株J亚群禽白血病病毒的分离及其gp85基因序列分析 被引量:1
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作者 刘丽娜 罗青平 +4 位作者 胡薛英 杨俊 张琳 邵华斌 栗绍文 《中国家禽》 北大核心 2012年第12期18-21,共4页
本试验从湖北省分离到3株J亚群禽白血病病毒,并通过病理解剖、DF-1细胞培养和RT-PCR进行了鉴定,分别命名为HB1002、HB1003和HB1009。根据J亚群原型毒株HPRS-103序列设计引物,扩增gp85基因并测序。序列分析表明:基因片段大小均为921 bp... 本试验从湖北省分离到3株J亚群禽白血病病毒,并通过病理解剖、DF-1细胞培养和RT-PCR进行了鉴定,分别命名为HB1002、HB1003和HB1009。根据J亚群原型毒株HPRS-103序列设计引物,扩增gp85基因并测序。序列分析表明:基因片段大小均为921 bp,与预期一致;分离到的3株病毒之间核苷酸同源性在97.7%~99.7%,氨基酸同源性在95.1%~99.0%;与原型毒株HPRS-103核苷酸序列同源性在94.1%~94.8%;与其它ALV-J核苷酸同源性在87.6%~97.3%;进化树分析表明,分离到的3个毒株与JS09GY6同源性最近,在95.2%~97.3%。 展开更多
关键词 ALV-J gp85基因 序列分析
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蛋鸡J亚群禽白血病病毒gp85基因遗传进化分析
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作者 林甦 陈珍 +5 位作者 朱春华 江斌 刘斌琼 蔡国彰 胡奇林 黄瑜 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2015年第2期113-116,共4页
为了解福建省蛋鸡J亚型禽白血病病毒(ALV‐J)的遗传进化关系,对来自福建省蛋鸡场发病蛋鸡中分离鉴定的3株ALV‐J的 gp85基因进行克隆与测序,并与国内外18株ALV‐J参考株的基因序列进行分析。结果表明:3株蛋鸡分离株的 gp85基因与亚... 为了解福建省蛋鸡J亚型禽白血病病毒(ALV‐J)的遗传进化关系,对来自福建省蛋鸡场发病蛋鸡中分离鉴定的3株ALV‐J的 gp85基因进行克隆与测序,并与国内外18株ALV‐J参考株的基因序列进行分析。结果表明:3株蛋鸡分离株的 gp85基因与亚群2的国内蛋鸡分离株(CL09DP02、GL09DP01和 HuB09JY03)以及原型株HPRS‐103的亲缘关系较近,达97.8%~99.6%,表明福建省蛋鸡 ALV‐J株很可能与国内部分蛋鸡ALV‐J分离株有着共同的来源。 展开更多
关键词 J亚型禽白血病 蛋鸡 gp85基因 遗传进化
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J亚群禽白血病病毒gp85基因在毕赤酵母中的分泌表达
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作者 徐延伟 高宏雷 +6 位作者 高玉龙 李凯 高立 秦立廷 祁小乐 王永强 王笑梅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第4期42-46,共5页
为获得J亚群禽白血病病毒gp85蛋白,将gp85基因克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K,构建了pPIC9K-gp85表达载体。将鉴定正确的表达载体经SalⅠ酶切线性化后电转化毕赤酵母宿主菌GS115,经MD及G418抗性平板筛选后挑取阳性克隆进行PCR鉴定,获得... 为获得J亚群禽白血病病毒gp85蛋白,将gp85基因克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K,构建了pPIC9K-gp85表达载体。将鉴定正确的表达载体经SalⅠ酶切线性化后电转化毕赤酵母宿主菌GS115,经MD及G418抗性平板筛选后挑取阳性克隆进行PCR鉴定,获得重组酵母菌株GS115/pPIC9K-gp85。对阳性重组菌进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE、Western blotting和Dot-ELISA分析,结果表明,gp85基因在毕赤酵母中获得分泌表达,表达产物与J亚群禽白血病病毒多克隆抗体有良好的反应活性,分泌表达量达40mg/L。本研究为J亚群禽白血病病毒诊断方法的建立及gp85蛋白的深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病 gp85基因 毕赤酵母 分泌表达
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