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杆状病毒GP64表面展示元件与L-天冬酰胺酶Ⅱ融合表达的初步试验被引量：1: 1; 作者孔莉吴岩 +3 位作者刘永乌慧玲朱珊颖王文兵《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期677-681,共5页; GP64是Ⅰ型杆状病毒的主要囊膜糖蛋白,利用基因重组技术在gp64中插入外源蛋白基因,二者在病毒表面融合表达活性肽或蛋白质,可以免去纯化表达产物的繁琐。L-天冬酰胺酶Ⅱ(ASP)是一种临床上广泛使用的蛋白类抗肿瘤药物,利用家蚕杆状病毒(B... 展开更多; 关键词家蚕杆状病毒 gp64表面展示系统 L-天冬酰胺酶Ⅱ 融合表达 BmN细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

GP64表面展示元件与组Ⅱ HaSNPV出芽病毒的融合被引量：1: 2; 作者刘永于峰 +3 位作者曹青徐琳琳陈修文王文兵《生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第6期14-18,共5页; 利用杆状病毒组ⅠAcMNPV(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus)GP64信号肽(GP64SP),C-末端跨膜区(GP64CTD)及报告基因绿色荧光蛋白(eGFP)构成的表面展示系统(gp64sp-egfp-gp64ctd),同源重组到组ⅡHaSNPV的多角体基因... 展开更多; 关键词 gp64 组Ⅱ 表面展示 HASNPV 出芽病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

PRRSV GP5蛋白和CSFV E2蛋白在杆状病毒囊膜表面的共展示及展示蛋白的免疫原性分析被引量：6: 3; 作者许信刚王志昇 +2 位作者李兆才张琪童德文《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期892-898,共7页; 本试验旨在构建以杆状病毒表面展示系统为基础的猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟双价基因工程亚单位疫苗候选株。利用杆状病毒表面展示技术构建展示猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白和猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的重组杆状病毒BacSC-Dual-ORF5... 展开更多; 关键词杆状病毒表面展示系统 PRRSV CSFV gp5蛋白 E2蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

杆状病毒表面展示系统及其应用研究进展被引量：2: 4; 作者许信刚童德文《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2009年第8期36-42,共7页; 杆状病毒表面展示系统是近年来发展起来的一种新的真核生物表面展示系统。通过与杆状病毒囊膜蛋白gp64融合表达或与特异性的锚定部位结合,可以将外源肽或蛋白质展示在杆状病毒表面,形成所谓的杆状病毒"假病毒",从而筛选出目... 展开更多; 关键词杆状病毒表面展示融合表达 gp64; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名杆状病毒GP64表面展示元件与L-天冬酰胺酶Ⅱ融合表达的初步试验被引量：1: 1; 作者孔莉吴岩刘永乌慧玲朱珊颖王文兵; 机构江苏大学生命科学研究院江苏大学基础医学与医学技术学院江苏大学环境与安全工程学院; 出处《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期677-681,共5页; 基金江苏省自然科学基金项目(No.BK2011491); 文摘 GP64是Ⅰ型杆状病毒的主要囊膜糖蛋白,利用基因重组技术在gp64中插入外源蛋白基因,二者在病毒表面融合表达活性肽或蛋白质,可以免去纯化表达产物的繁琐。L-天冬酰胺酶Ⅱ(ASP)是一种临床上广泛使用的蛋白类抗肿瘤药物,利用家蚕杆状病毒(BmNPV)GP64展示系统表面展示ASP,探讨以表面展示有ASP蛋白的出芽型病毒粒子(BV)生产抗肿瘤药物的可行性。构建重组转移载体pFast Bacdual-gp64sp-asp-gp64ctd,并转化E.coli DH10BacTM,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒DNA,将重组杆粒DNA通过脂质体转染至Bm N细胞,获得了重组病毒。重组病毒大量感染Bm N细胞后72 h,收集感染病毒的细胞培养液超速离心纯化BV。采用奈氏试剂法检测接种重组病毒的Bm N细胞内表达融合ASP的酶活力为1 788.4U/mg;Western blot检测纯化后的BV中含融合ASP蛋白,然而BV中的ASP检测不出酶活性。试验结果提示,构建的杆状病毒GP64展示系统可以将ASP转到BV上,但产物的活性保持有待进一步研究。; 关键词家蚕杆状病毒 gp64表面展示系统 L-天冬酰胺酶Ⅱ 融合表达 BmN细胞; Keywords Bombyx mori baculovirus gp64 surface display system L-asparaginase Ⅱ Fusion expression BmN cell; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名GP64表面展示元件与组Ⅱ HaSNPV出芽病毒的融合被引量：1: 2; 作者刘永于峰曹青徐琳琳陈修文王文兵; 机构江苏大学生命科学研究院; 出处《生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第6期14-18,共5页; 基金国家重点基础研究发展计划"973"项目(编号:2005CB121005); 文摘利用杆状病毒组ⅠAcMNPV(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus)GP64信号肽(GP64SP),C-末端跨膜区(GP64CTD)及报告基因绿色荧光蛋白(eGFP)构成的表面展示系统(gp64sp-egfp-gp64ctd),同源重组到组ⅡHaSNPV的多角体基因位置,筛选重组病毒。通过激光共聚焦观察,HaSNPV重组病毒感染Hz-AM1细胞后绿色荧光分布在质膜,表明GP64SP可以引导表达产物趋向于细胞膜。病毒感染后,收集并纯化重组的出芽病毒(BV),经Western blot检测,eGFP存在于重组病毒BV中。结果表明,组ⅠGP64表面展示系统中的重要元件GP64SP和GP64CTD能够装配到组ⅡHaSNPV BV上,可以用于组ⅡNPV表面展示目的蛋白。; 关键词 gp64 组Ⅱ 表面展示 HASNPV 出芽病毒; Keywords gp64 group II surface display HaSNPV budded virus; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PRRSV GP5蛋白和CSFV E2蛋白在杆状病毒囊膜表面的共展示及展示蛋白的免疫原性分析被引量：6: 3; 作者许信刚王志昇李兆才张琪童德文; 机构西北农林科技大学动物医学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期892-898,共7页; 基金西北农林科技大学青年学术骨干项目(E111020901) 教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-07-0701); 文摘本试验旨在构建以杆状病毒表面展示系统为基础的猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟双价基因工程亚单位疫苗候选株。利用杆状病毒表面展示技术构建展示猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白和猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的重组杆状病毒BacSC-Dual-ORF5-E2。该重组病毒带有His6标签,且胞质区域(CTD)和跨膜区域(TM)均来源于杆状病毒囊膜蛋白gp64的CTD和TM。对重组病毒进行Western blot分析、激光共聚焦显微镜观察、免疫金电子显微镜检测、动物免疫试验以及淋巴细胞增殖试验。Western blot分析结果表明,重组杆状病毒中表达了重组GP5和E2蛋白;激光共聚焦显微镜检测表明,重组杆状病毒感染昆虫细胞Sf-9后在细胞膜上展示了重组GP5和E2蛋白;免疫金电子显微镜观察表明,重组GP5和E2蛋白展示在杆状病毒囊膜上;动物免疫试验表明,重组杆状病毒免疫小鼠后产生了抗PRRSV和抗CSFV的特异性抗体;淋巴细胞增殖试验表明,重组杆状病毒能诱发较强的细胞免疫应答。本试验成功构建表面展示PRRSV GP5蛋白和CSFV E2蛋白的重组杆状病毒,为下一步应用该重组杆状病毒作为双价亚单位疫苗预防PRRSV和CSFV的混合感染奠定基础。; 关键词杆状病毒表面展示系统 PRRSV CSFV gp5蛋白 E2蛋白; Keywords baculovirus surface display PRRSV CSFV gp5 protein E2 protein; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名杆状病毒表面展示系统及其应用研究进展被引量：2: 4; 作者许信刚童德文; 机构西北农林科技大学动物医学院; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2009年第8期36-42,共7页; 基金陕西省自然科学基金项目(2006C111) 教育部新世纪优秀人才支特计划(NCET-07-0701); 文摘杆状病毒表面展示系统是近年来发展起来的一种新的真核生物表面展示系统。通过与杆状病毒囊膜蛋白gp64融合表达或与特异性的锚定部位结合,可以将外源肽或蛋白质展示在杆状病毒表面,形成所谓的杆状病毒"假病毒",从而筛选出目的蛋白或活性肽。杆状病毒表面展示系统可用来展示需要磷酸化、糖基化、甲基化、乙酰化、羟基化、二硫键异构化等翻译后修饰,才能表现功能活性的复杂真核蛋白,以及用于构建多肽文库和抗体库、新型疫苗研制、基因治疗等方面。文章对杆状病毒表面展示系统的原理、特点和应用方面进行了综述,并对其发展前景进行了展望。; 关键词杆状病毒表面展示融合表达 gp64; Keywords Baculovirus surface display fused expression gp64; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	杆状病毒GP64表面展示元件与L-天冬酰胺酶Ⅱ融合表达的初步试验	孔莉吴岩刘永乌慧玲朱珊颖王文兵	《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心	2015	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	GP64表面展示元件与组Ⅱ HaSNPV出芽病毒的融合	刘永于峰曹青徐琳琳陈修文王文兵	《生物学杂志》 CAS CSCD	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	PRRSV GP5蛋白和CSFV E2蛋白在杆状病毒囊膜表面的共展示及展示蛋白的免疫原性分析	许信刚王志昇李兆才张琪童德文	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	6	在线阅读下载PDF 职称材料
4	杆状病毒表面展示系统及其应用研究进展	许信刚童德文	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料