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GM-CSF和IL-6的免疫佐剂活性及对小鼠生长性能、血液指标的影响
1
作者 成伟伟 容维中 +5 位作者 杨明 李元新 赵子惠 陈伯祥 王佳 周瑶 《饲料工业》 北大核心 2025年第1期95-102,共8页
为验证粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素6(IL-6)的免疫佐剂活性以及研究其对小鼠生长性能、血液指标的影响,试验扩增了GM-CSF基因和IL-6基因,并将GMCSF基因和IL-6基因分别克隆至载体p CDNA3.1-His-C和p ET-32a(+),且诱... 为验证粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素6(IL-6)的免疫佐剂活性以及研究其对小鼠生长性能、血液指标的影响,试验扩增了GM-CSF基因和IL-6基因,并将GMCSF基因和IL-6基因分别克隆至载体p CDNA3.1-His-C和p ET-32a(+),且诱导表达了IL-6蛋白。将构建的GM-CSF基因的重组载体、诱导表达的IL-6重组蛋白联合畜禽疫病防控技术研发课题组前期构建的TGEV DNA疫苗载体p-N-His分组免疫小鼠(设置p-N-His为对照),运用间接ELISA检测了特异性抗体水平。将构建的重组载体、诱导表达的重组蛋白和PBS分组免疫小鼠,测定了小鼠的生长性能、血清指标和免疫器官指数。结果显示,克隆的GM-CSF和IL-6基因大小分别为579 bp和576 bp,成功构建了真核表达载体p-GM-CSF和原表达载体p ET-IL-6,诱导表达的IL-6重组蛋白大小为38 ku。载体p-GM-CSF、IL-6蛋白联合p-N-His免疫小鼠后,p-N-His+p-GM-CSF、p-N-His+IL-6蛋白和p-N-His均刺激机体产生了特异性抗体,且p-N-His+IL-6蛋白抗体水平高于p-N-His+p-GM-CSF(P<0.05)。IL-6蛋白、p-GM-CSF和PBS分组免疫小鼠后,p-GM-CSF和IL-6蛋白组小鼠的生长性能指标均高于PBS组,且末重、平均日增重、料重比差异显著(P<0.05)。p-GM-CSF、IL-6蛋白、PBS组小鼠的生化指标总蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮的含量差异均不显著(P>0.05),但IL-6蛋白组小鼠的葡萄糖显著升高(P<0.05),p-GM-CSF、IL-6蛋白、PBS组小鼠的免疫器官指数差异均不显著(P>0.05)。文章以p-N-His为靶载体验证出GM-CSF和IL-6具有较强免疫佐剂活性,且IL-6蛋白的效果强于GM-CSF。p-GM-CSF和IL-6蛋白能够提升小鼠的生长性能指标,对血液指标和免疫器官指数影响不大。 展开更多
关键词 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 白细胞介素6 免疫佐剂活性 生长性能 血液指标
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表达猪源GM-CSF蛋白的重组PRRSV构建及鉴定 被引量：3
2
作者 虞凌雪 周艳君 +8 位作者 姜一峰 童武 高飞 夏天奇 王康 杨莘 李丽薇 程群 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期260-264,共5页
为提高猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)弱毒疫苗的免疫效果,本研究以高致病性PRRS弱毒疫苗株HuN4-F112感染性分子克隆为基础,在NSP2区域删除了110个氨基酸,将猪源GM-CSF基因和PRRSV ORF6转录引导序列(TRS6)通过融合PCR方法插入HuN4-F112... 为提高猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)弱毒疫苗的免疫效果,本研究以高致病性PRRS弱毒疫苗株HuN4-F112感染性分子克隆为基础,在NSP2区域删除了110个氨基酸,将猪源GM-CSF基因和PRRSV ORF6转录引导序列(TRS6)通过融合PCR方法插入HuN4-F112疫苗株的ORF1b和ORF2a之间,构建了全长重组质粒pHN4-△110-GM-CSF。将该重组质粒采用SwaⅠ酶切线性化,经体外转录病毒基因组RNA后转染BHK-21细胞,然后在Marc-145细胞中进行病毒拯救及传代。结果显示重组病毒感染Marc-145细胞可以引起明显的细胞病变;经RT-PCR、DNA测序、MluⅠ酶切鉴定和免疫荧光鉴定结果显示,救获的重组PRRSV含有GM-CSF基因并能够有效表达,将其命名为rHN4-△110-GM-CSF。生物学特性分析表明重组病毒与亲本病毒在Marc-145细胞中具有相似的生长特性,插入的外源基因具有良好的遗传稳定性。由于GM-CSF能够活化树突状细胞,是一种良好的免疫佐剂。该重组病毒的构建为动物体内免疫保护攻毒试验评价奠定了基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 gm-csf rHN4-△ 110-gm-csf
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GM-CSF/GM-CSFR系统介导靶向杀伤治疗白血病的新策略 被引量：2
3
作者 奚永志 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期154-156,共3页
关键词 gm-csf gm-csfR 白血病 介入治疗 靶向杀伤治疗
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GM-CSF重组腺病毒扩增的骨髓树突状细胞体外经肿瘤抗原刺激后诱导抗肿瘤免疫应答 被引量：14
4
作者 章卫平 曹雪涛 +3 位作者 张明徽 黄欣 朱学军 叶天星 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期29-33,共5页
用ＧＭ－ＣＳＦ重组腺病毒感染小鼠骨髓细胞，观察扩增到的骨髓树突状细胞的生物学功能。结果表明，ＧＭ－ＣＳＦ重组腺病毒一次性感染骨髓细胞，１ｗ后能从一只小鼠股骨中扩增到２．４×１０６～３．３×１０６树突状细胞，扩... 用ＧＭ－ＣＳＦ重组腺病毒感染小鼠骨髓细胞，观察扩增到的骨髓树突状细胞的生物学功能。结果表明，ＧＭ－ＣＳＦ重组腺病毒一次性感染骨髓细胞，１ｗ后能从一只小鼠股骨中扩增到２．４×１０６～３．３×１０６树突状细胞，扩增到的骨髓树突状细胞表达ＭＨＣ－Ⅱ、ＭＨＣ－Ⅰ、Ｂ７－１、Ｂ７－２和Ｉ－ＣＡＭ－１等免疫分子，分泌一定水平的ＧＭ－ＣＳＦ，对同种异体Ｔ细胞具有很强的刺激活性，体外经Ｂ１６肿瘤瘤苗刺激后免疫同系小鼠，能诱导出抗原特异性的ＣＴＬ活性，使免疫动物产生更强的保护性免疫反应，抵抗Ｂ１６细胞的攻击。提示可用ＧＭ－ＣＳＦ重组腺病毒从骨髓中扩增足够数量的树突状细胞，用于肿瘤的免疫治疗和基因治疗。 展开更多
关键词 骨髓细胞 树突状细胞 gm-csf 肿瘤免疫学
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辐射诱导性启动子调控GM-CSF基因的表达 被引量：7
5
作者 杜楠 裴雪涛 +3 位作者 罗成基 冯凯 李梁 白慈贤 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期336-338,共3页
构建携带早期生长反应基因 (Egr 1)启动子的GM CSF和增强绿色荧光蛋白 (EGFP)双顺反子基因表达载体 (Egr EG)。通过脂质体转染骨髓基质细胞系HFCL(称为HFCL/EG) ,采用FACS分析EGFP表达的阳性细胞 ,用RT PCR、ELISA及集落增殖法分析GM CS... 构建携带早期生长反应基因 (Egr 1)启动子的GM CSF和增强绿色荧光蛋白 (EGFP)双顺反子基因表达载体 (Egr EG)。通过脂质体转染骨髓基质细胞系HFCL(称为HFCL/EG) ,采用FACS分析EGFP表达的阳性细胞 ,用RT PCR、ELISA及集落增殖法分析GM CSFmRNA、GM CSF含量的表达及对CFU GM的增殖作用。结果显示 :HFCL/EG细胞证实有外源性基因EGFP和GM CSF的整合和表达及对CFU GM的增殖作用。提示Egr 1调控序列启动的GM CSF基因修饰的基质细胞经辐射造血因子表达明显增高 ,并对造血细胞具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 辐射效应 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 基因表达 基因调控 造血细胞 gm-csf
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GM-CSF对MUC1基因疫苗抑制乳腺癌生长的增强作用 被引量：7
6
作者 袁时芳 李开宗 +3 位作者 王岭 颜真 韩苇 张英起 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期737-740,共4页
目的 :观察GM CSF有无增强MUC1基因疫苗对EMT6乳腺癌生长的特异性抑制作用。方法 :采用股四头肌肌肉注射法 ,将构建的MUC1基因疫苗pcDNA3.1 MUC1免疫雌性BALB/c小鼠 ,每 3wk 1次 ,共 3次。每次基因免疫后 1、3、5d ,皮下注射GM CSF 10 0... 目的 :观察GM CSF有无增强MUC1基因疫苗对EMT6乳腺癌生长的特异性抑制作用。方法 :采用股四头肌肌肉注射法 ,将构建的MUC1基因疫苗pcDNA3.1 MUC1免疫雌性BALB/c小鼠 ,每 3wk 1次 ,共 3次。每次基因免疫后 1、3、5d ,皮下注射GM CSF 10 0 μL(1μg/ 10 0 μL)。最后 1次基因免疫后第 3周 ,接种表达MUC1的EMT6小鼠乳腺癌细胞。两周后观察、记录肿瘤的生长情况。于肿瘤细胞接种后第 4 3天 ,处死全部动物 ,称量肿瘤的质量。用 4h51Cr释放法检测小鼠脾特异性CTL的杀伤活性。结果 :接种肿瘤细胞后 4 3d ,MUC1基因疫苗加GM CSF组、MUC1基因疫苗组、pcDNA3.1加GM CSF组及pcDNA3.1组 ,EMT6肿瘤的大小依次为 (135± 33.8)mm3 、(2 5 0± 34.3)mm3 、(5 6 8± 4 3.6 )mm3 和 (5 96± 4 8.2 )mm3 ;平均瘤质量 (g)依次为 (0 .81± 0 .4 2 )g、(1.2 3± 0 .4 1)g、(2 .30± 0 .4 8)g及 (2 .2 8± 0 .5 8)g。与对照组相比较 ,MUC1基因疫苗组EMT6肿瘤的生长受到明显抑制 (P <0 .0 5 ) ;与单独MUC1基因疫苗组相比较 ,MUC1基因疫苗加GM CSF组抗肿瘤生长的作用有显著差异 (P <0 .0 5 )。在效靶比为 10 0∶1、5 0∶1、2 5∶1和 12 .5∶1时 ,MUC1基因疫苗加GM CSF组特异性CTL对EMT6靶细胞的杀伤率 ,依次为 6 8.5 %、 5 3.4 %? 展开更多
关键词 MUC1 基因疫苗 gm-csf 乳腺肿瘤 免疫治疗
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小鼠GM-CSF基因真核表达载体的构建及其表达活性的鉴定 被引量：6
7
作者 张叔人 周春霞 +4 位作者 马文波 王东梅 张友会 高全立 张书岭 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期457-460,共4页
目的:构建小鼠GM-CSF基因的高效真核表达载体,筛选导入该载体后高水平表达GM-CSF的小鼠淋巴瘤细胞系RMA,并探讨转GM-CSF基因瘤苗治疗小鼠T淋巴细胞瘤的方法。方法:PCR扩增小鼠CM-CSF cDNA3’端770bp的片段,将其插入真核表达载体pcDNA3;... 目的:构建小鼠GM-CSF基因的高效真核表达载体,筛选导入该载体后高水平表达GM-CSF的小鼠淋巴瘤细胞系RMA,并探讨转GM-CSF基因瘤苗治疗小鼠T淋巴细胞瘤的方法。方法:PCR扩增小鼠CM-CSF cDNA3’端770bp的片段,将其插入真核表达载体pcDNA3;用电穿孔法将构建的载体导入小鼠淋巴瘤细胞系RMA,有限稀释法制备单个细胞克隆,经RT-PCR、骨髓祖细胞增殖实验和集落形成实验筛选相对高表达GM-CSF的RMA克隆,该克隆细胞经丝裂霉素灭活后免疫小鼠以诱导其产生抵抗RMA肿瘤细胞再攻击的能力。结果:构建的重组质粒含有预期片段,插入方向正确,核酸序列无误;且获得了高表达GM-CSF的RMA克隆,将其用丝裂霉素灭活免疫小鼠后使它们产生了抗肿瘤免疫保护力。结论:转GM-CSF基因瘤苗可能作为有效的抗T淋巴细胞瘤瘤苗。 展开更多
关键词 gm-csf基因 基因表达 免疫治疗 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 T淋巴细胞瘤 免疫治疗
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猪GM-CSF基因对猪圆环病毒2型DNA疫苗诱导仔猪免疫反应的调节作用 被引量：7
8
作者 宋勤叶 温立斌 +2 位作者 杨汉春 郭鑫 陈艳红 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期120-125,共6页
粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)能够诱导树突状细胞的成熟和存活,并提高其抗原递呈功能,是非常有潜力的分子佐剂之一。为了探讨猪GM-CSF对猪圆环病毒2型(PCV2)DNA疫苗诱导免疫反应的调节作用,本研究将表达猪GM-CSF和PCV2衣壳蛋白... 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)能够诱导树突状细胞的成熟和存活,并提高其抗原递呈功能,是非常有潜力的分子佐剂之一。为了探讨猪GM-CSF对猪圆环病毒2型(PCV2)DNA疫苗诱导免疫反应的调节作用,本研究将表达猪GM-CSF和PCV2衣壳蛋白的重组质粒混合物(pcDNA3.1-gm-csf和pcDNA3.1-orf2)及在同一载体上表达PCV2衣壳蛋白与猪GM-CSF的双表达重组质粒(pIRES-orf2/gm-csf),分别接种于7日龄健康仔猪,共肌肉注射3次,每次间隔2周。结果表明猪GM-CSF基因能够明显增强PCV2DNA疫苗诱导的特异性体液免疫反应,提高外周血淋巴细胞(PBLC)对ConA刺激的增殖活性,增强NK细胞的杀伤功能,影响细胞因子IL-12、IFN-γ、IL-4和IL-10的表达水平。但GM-CSF基因单独表达和与PCV2衣壳蛋白基因在同一载体上表达,对上述4个细胞因子表达的影响有一定差异。 展开更多
关键词 猪gm-csf 猪圆环病毒2型 DNA疫苗 免疫调节
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细菌DNA和gm-csf基因对抑制素基因免疫的作用 被引量：5
9
作者 茆达干 吴结革 +3 位作者 舒邓群 薛春林 王锋 杨利国 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期139-142,共4页
40只小鼠分为4组,分别注射pC ISI(抑制素质粒)、pC ISI+细菌DNA、pC ISI+pGM-CSF和生理盐水(8.5 g.L-1)。pC ISI剂量为20μg,与佐剂等量混合,2周后加强免疫1次。试验结果表明,细菌DNA佐剂组诱导77.8%(7/9)的个体产生了抑制素阳性抗体,... 40只小鼠分为4组,分别注射pC ISI(抑制素质粒)、pC ISI+细菌DNA、pC ISI+pGM-CSF和生理盐水(8.5 g.L-1)。pC ISI剂量为20μg,与佐剂等量混合,2周后加强免疫1次。试验结果表明,细菌DNA佐剂组诱导77.8%(7/9)的个体产生了抑制素阳性抗体,抗体以IgG2α型为主,gm-csf佐剂组产生的抗体以IgG1型为主;基因佐剂联合抑制素基因免疫激发的淋巴细胞增殖能力显著高于抑制素基因单独免疫组(P<0.05);细菌DNA佐剂组阳性鼠的动情期血浆雌二醇高于阴性鼠(P<0.05),免疫对动情期孕酮水平无显著影响(P>0.05)。上述结果表明,细菌DNA和gm-csf能增强抑制素基因的免疫效果。 展开更多
关键词 抑制素 基因免疫 细菌DNA gm-csf
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GM-CSF对脐血CD34^+巨核祖细胞体外扩增及分化的影响 被引量：5
10
作者 陈舒 朱发明 +3 位作者 何吉 刘晋辉 秦斐 严力行 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期1041-1043,共3页
本实验旨在研究GMCSF对脐血CD34+细胞诱导分化为巨核细胞的影响。采用免疫磁珠法分选CD34+细胞,在含有TPO+IL3+SCF并添加了不同浓度(5、20、100ng/ml)的GMCSF的无血清培养基中进行培养。培养6、10、14天后计数单个核细胞(MNC),检测CD41... 本实验旨在研究GMCSF对脐血CD34+细胞诱导分化为巨核细胞的影响。采用免疫磁珠法分选CD34+细胞,在含有TPO+IL3+SCF并添加了不同浓度(5、20、100ng/ml)的GMCSF的无血清培养基中进行培养。培养6、10、14天后计数单个核细胞(MNC),检测CD41+细胞比例和CFUMK。结果表明,培养14天后3种不同浓度GMCSF对MNC均有明显的扩增作用,其中以20和100ng/mlGMCSF的扩增效果较好。3种不同浓度的GMCSF均使CD41+细胞比例增加,20和100ng/ml与5ng/mlGMCSF相比更能提高CD41+细胞的比例。5和20ng/ml的GMCSF能促进CFUMK的形成,但100ng/ml的GMCSF却抑制CFUMK的形成。结论:在TPO+IL3+SCF细胞因子组合中添加GMCSF有利于促进脐血CD34+细胞诱导分化为巨核细胞。 展开更多
关键词 gm-csf 脐血 CD34^+细胞 巨核细胞 体外扩增
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GM-CSF修饰肿瘤细胞疫苗治疗前后肺癌患者Treg的变化及其临床意义 被引量：4
11
作者 杜春娟 于津浦 +6 位作者 李慧 张乃宁 滕艳华 李蓁 安阳 曹水 任秀宝 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期473-479,共7页
目的:观察GM-CSF基因修饰的肿瘤细胞疫苗(GM-CSF modified tumor cell vaccine,GVAX)治疗前后肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)比例的变化,探讨其与肺癌临床病理特征的关系及对患者生存的影响。方法:选择2... 目的:观察GM-CSF基因修饰的肿瘤细胞疫苗(GM-CSF modified tumor cell vaccine,GVAX)治疗前后肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)比例的变化,探讨其与肺癌临床病理特征的关系及对患者生存的影响。方法:选择2007年3月至2010年7月天津医科大学附属肿瘤医院接受GVAX治疗的85例肺癌患者,其中鳞癌28例、腺癌47例、小细胞癌10例,早期(Ⅰ～ⅢA期)23例、晚期(ⅢB～Ⅳ期)62例。流式细胞术检测患者GVAX治疗前后外周血Treg的比例,分析治疗前后Treg比例变化与肺癌临床病理特征和患者生存期的关系。结果:接受GVAX治疗的85例肺癌患者1、3年的生存率分别为69.3%、48.2%,治疗后外周血Treg比例明显下降[(4.86±2.52)%vs(5.52±2.68)%,P<0.05]。患者血清LDH水平正常组治疗后Treg比例明显下降[(4.50±2.23)%vs(5.59±2.76)%,P<0.05],而LDH增高组治疗后Treg比例上升[(6.04±3.07)%vs(5.31±2.48)%,P<0.05];GVAX治疗超过1个疗程者较治疗1个疗程者治疗后Treg比例下降更明显[(-0.39±2.39)%vs(-2.11±1.62)%,P<0.05]。治疗前后外周血Treg比例的变化与患者预后相关,治疗后Treg比例下降组患者中位总生存期(overall survival,OS)明显长于升高组(21个月vs 10个月,P<0.05),晚期肺癌患者中Treg比例下降者的OS延长更明显(18个月vs 8个月,P<0.05)。结论:肺癌患者GVAX治疗前后外周血Treg比例变化可能成为评价GVAX疗效及判断患者预后的免疫指标,GVAX治疗后患者Treg比例的下降提示其疗效和预后都较好。 展开更多
关键词 肺癌 gm-csf修饰肿瘤细胞疫苗 调节性T细胞 乳酸脱氢酶 疗效 预后 疗效评价指标
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MTT比色法在检测重组人GM-CSF生物活性中的应用 被引量：6
12
作者 张冬梅 施晓青 +1 位作者 朱洁 秦浚川 《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1997年第2期253-258,共6页
探索了ＭＴＴ比色法的一系列实验条件，并利用ＧＭ－ＣＳＦ依赖细胞株ＴＦ－１，测定了家蚕基因工程生产的重组人ＧＭ－ＣＳＦ（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ－ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ）的生... 探索了ＭＴＴ比色法的一系列实验条件，并利用ＧＭ－ＣＳＦ依赖细胞株ＴＦ－１，测定了家蚕基因工程生产的重组人ＧＭ－ＣＳＦ（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ－ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ）的生物活性，并与半固体培养集落刺激法进行了比较。 展开更多
关键词 MTT 生物活性 基因工程 光度法 重线人gm-csf
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当归补血汤煎剂对骨髓抑制小鼠EPO、TPO、GM-CSF表达的影响研究 被引量：12
13
作者 许卓 初杰 崔运浩 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2021年第6期229-231,共3页
目的探讨当归补血汤煎剂对骨髓抑制小鼠EPO、TPO、GM-CSF表达的影响研究。方法选取BALB/C纯系雄性小鼠100例,将其分为正常组、模型组、低剂量组、中剂量组以及高剂量组各20例。结果模型组骨髓抑制小鼠的层粘连蛋白(LN)以及纤维连接蛋白(... 目的探讨当归补血汤煎剂对骨髓抑制小鼠EPO、TPO、GM-CSF表达的影响研究。方法选取BALB/C纯系雄性小鼠100例,将其分为正常组、模型组、低剂量组、中剂量组以及高剂量组各20例。结果模型组骨髓抑制小鼠的层粘连蛋白(LN)以及纤维连接蛋白(FN)表达水平明显低于正常组(P<0.05),且中、高剂量组的LN以及FN表达水平明显高于低剂量组(P<0.05);模型组骨髓基质中的EPO、TPO以及GM-CSF等细胞因子表达水平明显高于正常组(P<0.05),且中、高剂量组的EPO、TPO以及GM-CSF等细胞因子表达水平改善情况明显优于低剂量组(P<0.05);中、高剂量组WBC、RBC、Hb、PLT以及BMC数量改善情况明显优于低剂量组(P<0.05);模型组骨髓基质中的MMP-2以及MMP-7蛋白表达水平明显高于正常组(P<0.05),IL-10水平低于正常组(P<0.05),且中、高剂量组MMP-2以及MMP-7蛋白表达水平明显低于低剂量组(P<0.05)。结论当归补血汤煎剂的在临床中的使用可有效促进骨髓抑制小鼠造血功能改善,有利于骨髓造血细胞实现快速增值,可推广使用。 展开更多
关键词 当归补血汤煎剂 骨髓抑制 小鼠 EPO TPO gm-csf表达
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人IL-2/GM-CSF融合基因的克隆及序列测定 被引量：4
14
作者 黄树其 林来兴妹 +3 位作者 方向东 高基民 王小宁 刘新垣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期83-85,共3页
通过ＰＣＲ技术，对人ＩＬ２和ＧＭＣＳＦ基因分别改构，克隆了通过Ｐｒｏ（ＣＣＣ）连接臂相连的ＩＬ２／ＧＭＣＳＦ融合基因。经酶切鉴定和序列测定证实后，将上述融合基因克隆至原核表达载体ｐＬＹ４，为表达具有ＩＬ２，... 通过ＰＣＲ技术，对人ＩＬ２和ＧＭＣＳＦ基因分别改构，克隆了通过Ｐｒｏ（ＣＣＣ）连接臂相连的ＩＬ２／ＧＭＣＳＦ融合基因。经酶切鉴定和序列测定证实后，将上述融合基因克隆至原核表达载体ｐＬＹ４，为表达具有ＩＬ２，ＧＭＣＳＦ双功能活性的新型融合蛋白。 展开更多
关键词 白细胞介素2 gm-csf 融合基因 克隆 序列测定
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雷公藤对哮喘豚鼠嗜酸性细胞凋亡及IL-5和GM-CSF mRNA表达的研究 被引量：10
15
作者 郭晓明 王长征 +2 位作者 赖克方 郭先健 钱桂生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第9期627-629,共3页
目的：探讨雷公藤对哮喘豚鼠嗜酸性细胞（ Ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌ， Ｅｏｓ）凋亡及与白介素５（ Ｉ Ｌ５）、粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ）ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达的作用。方法：实验豚鼠分为哮喘组、雷公藤治疗组... 目的：探讨雷公藤对哮喘豚鼠嗜酸性细胞（ Ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌ， Ｅｏｓ）凋亡及与白介素５（ Ｉ Ｌ５）、粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ）ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达的作用。方法：实验豚鼠分为哮喘组、雷公藤治疗组（处理组）和正常对照组。采用原位细胞凋亡（ Ｔ Ｕ Ｎ Ｅ Ｌ）和原位杂交技术分别检测豚鼠支气管肺泡灌洗液（ Ｂ Ａ Ｌ Ｆ）中的 Ｅｏｓ 的凋亡率和肺组织 Ｉ Ｌ５、 Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆｍ Ｒ Ｎ Ａ 的表达。结果：哮喘组 Ｅｏｓ 凋亡率显著低于处理组和对照组（ Ｐ＜ ０．０５）。哮喘组肺组织 Ｉ Ｌ５ 和 Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆｍ Ｒ Ｎ Ａ 的表达强度均显著高于处理组和对照组（ Ｐ＜ ０．０１）。哮喘组 Ｂ Ａ Ｌ Ｆ中 Ｅｏｓ凋亡率与肺组织 Ｉ Ｌ５、 Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达强度呈显著负相关（ｒ＝ － ０．６２ 和－ ０．５６， Ｐ＜０．０５）。结论：哮喘豚鼠肺组织 Ｉ Ｌ５、 Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆｍ Ｒ Ｎ Ａ表达增强，可能是 Ｅｏｓ 凋亡异常的重要原因。雷公藤甲素能抑制哮喘豚鼠 Ｉ Ｌ５、 Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ表达，诱导 Ｅｏｓ 凋亡，在抗哮喘气道炎症中具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 哮喘 嗜酸性细胞 雷公藤 凋亡 IL-5 gm-csf 豚鼠
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IL-21 gpi和sGM-CSF共同修饰的瘤苗构建及其抗肿瘤效应 被引量：4
16
作者 赵枫姝 胡卫华 +5 位作者 窦骏 褚莉莉 何向锋 余方流 吴昀 刘春生 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期508-512,共5页
目的:构建膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF(sGM-CSF)双表达瘤苗,并对其抗肿瘤效应及其机制作初步探讨。方法:用分子生物学方法构建双表达IL-21 gpi和sGM-CSF重组质粒,将鉴定过的重组质粒以脂质体转染B16F10细胞制成瘤苗,用流式细胞仪检测转... 目的:构建膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF(sGM-CSF)双表达瘤苗,并对其抗肿瘤效应及其机制作初步探讨。方法:用分子生物学方法构建双表达IL-21 gpi和sGM-CSF重组质粒,将鉴定过的重组质粒以脂质体转染B16F10细胞制成瘤苗,用流式细胞仪检测转染瘤苗IL-21 gpi和sGM-CSF的表达。以瘤苗治疗荷瘤鼠,经观察小鼠肿瘤体积、生存率来分析瘤苗的抗瘤性,并检测了瘤苗治疗鼠的细胞免疫活性。结果:正确构建了pRSC/IL-21 gpi-sGM-CSF重组质粒,转染细胞可很好地表达膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF,制备的瘤苗能有效地发挥抗肿瘤效应,其机制与瘤苗治疗鼠的脾细胞增殖活性、NK细胞及CD8+细胞细胞毒活性增强有关。结论:成功构建了具有抗肿瘤活性的膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF双表达瘤苗,为进一步抗肿瘤免疫治疗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 瘤苗 IL-21 GPI gm-csf
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益气温阳、活血化瘀法治疗湿热瘀结证盆腔炎性疾病后遗症疗效观察及对血液流变学、血清GM-CSF的影响 被引量：37
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作者 李灵巧 沈丹 钱雁 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第1期189-191,共3页
目的:探讨益气温阳、活血化瘀法治疗湿热瘀结证盆腔炎性疾病后遗症的临床疗效及作用机制。方法:将80例患者按随机数字表法分为观察组和对照组,每组40例。观察组予益气温阳、活血化瘀中药汤剂,对照组予妇科千金片。两组疗程均为2个月。... 目的:探讨益气温阳、活血化瘀法治疗湿热瘀结证盆腔炎性疾病后遗症的临床疗效及作用机制。方法:将80例患者按随机数字表法分为观察组和对照组,每组40例。观察组予益气温阳、活血化瘀中药汤剂,对照组予妇科千金片。两组疗程均为2个月。观察两组的临床疗效及中医证候评分、血液流变学指标、血清GMCSF含量的变化,进行比较分析。结果:观察组的总有效率为92.50%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后两组的中医证候评分、血液流变学指标及血清GM-CSF含量均下降(P<0.05),组间比较,观察组改善更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:益气温阳、活血化瘀法治疗湿热瘀结证盆腔炎性疾病后遗症疗效确切,其作用机制可能与患者血液流变学指标改善及血清GM-CSF含量降低有关。 展开更多
关键词 盆腔炎性疾病后遗症 中医药疗法/益气温阳/活血化瘀 妇科千金片 疗效观察 血液流变学 血清gm-csf
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HBV preS2S-rhGM-CSF融合基因表达质粒的构建和表达 被引量：3
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作者 郭晓兰 邓健康 +1 位作者 朱道银 唐恩洁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期548-551,共4页
目的 :研究GM CSF和preS2对乙肝DNA疫苗的免疫增强作用。方法 :采用PCR方法 ,扩增HBVpreS2 +S基因约 84 6bp的片段和rhGM CSF(包括甘氨酸接头 )基因 4 5 0bp的片段。通过T A克隆技术和基因定向克隆 ,构建融合基因的真核表达质粒pcDNA3.1... 目的 :研究GM CSF和preS2对乙肝DNA疫苗的免疫增强作用。方法 :采用PCR方法 ,扩增HBVpreS2 +S基因约 84 6bp的片段和rhGM CSF(包括甘氨酸接头 )基因 4 5 0bp的片段。通过T A克隆技术和基因定向克隆 ,构建融合基因的真核表达质粒pcDNA3.1 S2S rhGM CSF ,并在HepG2细胞中表达。结果 :经酶切、PCR及DNA测序鉴定 ,融合基因表达质粒HB VpreS2S rhGM CSF成功地构建。将其转染HepG2细胞后 ,目的基因的转录通过RT PCR得到证实 ,而且表达的融合蛋白能与抗 HBs、抗 preS2和抗 GM CSF单克隆抗体 (mAb)均产生特异性反应。结论 :融合基因表达载体pcDNA3.1 S2S rhGM CSF的成功构建并表达 。 展开更多
关键词 HBV PRES2 gm-csf 融合基因
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视黄酸诱导小鼠骨髓基质细胞c-fos,c-jun和GM-CSF mRNA表达 被引量：3
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作者 杨莉 李廷玉 +1 位作者 王亚平 王勇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期257-259,共3页
为了探讨维生素A(VA)对造血微环境调节的机理,采用体外培养和原位杂交技术动态检测全反式视黄酸(ATRA)诱导小鼠骨髓基质细胞(BMSC)30,60和120分钟后c-fos,c-jun及GM-CSF mRNA的表达。结果表明:①ATRA处理30分钟后c-fos和c-jun的表达即... 为了探讨维生素A(VA)对造血微环境调节的机理,采用体外培养和原位杂交技术动态检测全反式视黄酸(ATRA)诱导小鼠骨髓基质细胞(BMSC)30,60和120分钟后c-fos,c-jun及GM-CSF mRNA的表达。结果表明:①ATRA处理30分钟后c-fos和c-jun的表达即有增强,与对照组相比有显著差异(P<0.01),并持续表达至60分钟和120分钟时降至对照组水平;②GM-CSFmRNA的表达在30分钟和60分钟时与对照组水平相比无显著性差别,直至120分钟才表现出显著性差异(P<0.01)。实验结果提示:VA对造血微环境调节的机理可能是通过诱导BMSC中c-fos和c-jun mRNA的表达进而调控造血生长因子GM-CSF的分泌。 展开更多
关键词 视黄酸 骨髓基质细胞 原癌基因 C-FOS C-JUN gm-csf 基因表达
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雷公藤对哮喘豚鼠IL-5、GM-CSF基因转录的影响及作用机制 被引量：12
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作者 林科雄 王长征 钱桂生 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期325-328,共4页
目的 :探讨雷公藤对哮喘IL 5、GM CSF基因转录的影响及其机制。方法 :采用卵蛋白 (OA)致敏复制哮喘豚鼠模型 ,用原位杂交 (ISH)就雷公藤甲素 (TP)对其肺组织和外周血单个核细胞 (PBMC)IL 5、GM CSFmRNA表达的影响进行检测。并通过凝胶... 目的 :探讨雷公藤对哮喘IL 5、GM CSF基因转录的影响及其机制。方法 :采用卵蛋白 (OA)致敏复制哮喘豚鼠模型 ,用原位杂交 (ISH)就雷公藤甲素 (TP)对其肺组织和外周血单个核细胞 (PBMC)IL 5、GM CSFmRNA表达的影响进行检测。并通过凝胶电泳迁移试验 (EMSA)检测TP对伴刀豆蛋白 (ConA)或佛波脂 (PMA)刺激的人T细胞活化蛋白 1(AP 1)的DNA结合活性的影响。结果 :①哮喘豚鼠肺组织和PBMCIL 5、GM CSFmRNA表达显著高于正常组 (P <0 .0 1)和TP处理组 (P <0 .0 5或0 .0 1)。②ConA或PMA刺激可使T细胞AP 1的DNA结合活性增强 ,TP可以降低该AP 1的DNA结合活性。结论 :雷公藤通过抑制AP 1的DNA结合活性 ,进而抑制IL 5、GM CSFmRNA的转录 。 展开更多
关键词 雷公藤 哮喘 中医药疗法 IL-5 gm-csf
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