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薄荷UV-B受体基因McUVR8的克隆与表达分析
1
作者 康琴 汪霞 +6 位作者 谌明洋 徐静天 陈诗兰 廖平杨 许文志 吴卫 徐东北 《生物技术通报》 北大核心 2025年第8期255-266,共12页
【目的】紫外(UV-B)受体UVR8在调控植物生长发育、响应逆境胁迫等过程中发挥关键作用。探究薄荷(Mentha canadensis L.)UV-B受体基因McUVR8的蛋白特性和表达特征,预测其互作蛋白,为后续探究McUVR8功能提供理论参考。【方法】通过RT-PCR... 【目的】紫外(UV-B)受体UVR8在调控植物生长发育、响应逆境胁迫等过程中发挥关键作用。探究薄荷(Mentha canadensis L.)UV-B受体基因McUVR8的蛋白特性和表达特征,预测其互作蛋白,为后续探究McUVR8功能提供理论参考。【方法】通过RT-PCR技术获得McUVR8基因,利用多种生物信息学工具对其理化性质、蛋白结构和亚细胞定位、互作蛋白进行分析预测。利用RT-qPCR分析McUVR8的组织、叶序表达模式及其在不同激素、胁迫下的表达变化。【结果】McUVR8全长1353 bp,编码450个氨基酸,在细胞核和细胞质中均有分布,具有保守的呈螺旋环状的RCC1核心结构域和C17、C27结构域,与同为唇形科的一串红(Salvia splendens)SsUVR8、迷幻鼠尾草(Salvia divinorum)SdBUR8和西班牙鼠尾草(Salvia hispanica)ShUVR8同源性较高。McUVR8在薄荷不同组织和叶序中均表达,并具有一定差异,其中在根中表达量最低,花中表达量最高,不同叶序中其表达在第一片叶中最高。此外,McUVR8基因在叶片和根中均响应MeJA、ABA以及干旱、NaCl和2种重金属和铝胁迫处理。最后,筛选并验证到McUVR8与McCOP1互作。【结论】McUVR8可能在调节薄荷的生长发育、响应激素或逆境信号中具有重要作用,并且其可能通过与COP1、WRKY等蛋白互作,参与调控薄荷次生代谢、逆境响应等过程。 展开更多
关键词 薄荷 UV-B受体McUVR8 蛋白特征 蛋白互作 表达模式 生信分析 基因克隆
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莲草直胸跳甲短神经肽F受体基因sNPFR的克隆及表达分析 被引量：1
2
作者 王康 赵雪莹 +4 位作者 霍楠 胡军 王苑馨 杨军 贾栋 《山西农业科学》 2024年第1期137-144,共8页
为明确莲草直胸跳甲(Agasicles hygrophila)短神经肽F受体AhsNPFR功能及其表达特点,为探索莲草直胸跳甲生防作用奠定理论基础,利用PCR技术克隆鉴定莲草直胸跳甲AhsNPFR基因并进行生物信息学分析,通过实时荧光定量PCR技术分析其在莲草直... 为明确莲草直胸跳甲(Agasicles hygrophila)短神经肽F受体AhsNPFR功能及其表达特点,为探索莲草直胸跳甲生防作用奠定理论基础,利用PCR技术克隆鉴定莲草直胸跳甲AhsNPFR基因并进行生物信息学分析,通过实时荧光定量PCR技术分析其在莲草直胸跳甲不同发育时期和组织中的时空表达谱。结果表明,克隆获得基因AhsNPFR全长1 669 bp,开放阅读框1 257 bp,编码418个氨基酸;预测其蛋白质分子质量为48.11 ku,理论等电点为8.21,AhsNPFR具有7个典型保守跨膜结构域,属于GPCRs家族,系统进化树分析表明,其与玉米根萤叶甲Diabrotica virgifera virgifera sNPFR亲缘关系最近。AhsNPFR基因在不同发育阶段均有表达,在1龄幼虫中的表达量最高,是卵中表达量的9.06倍;在卵中表达量最低;雌成虫的表达量显著高于雄成虫。AhsNPFR基因在不同组织中均有表达,在3龄幼虫后肠中显著高表达,是脂肪体表达量的12.21倍;在雌雄成虫后肠显著高表达,并在所有组织中均没有雌雄表达差异。 展开更多
关键词 莲草直胸跳甲 短神经肽F受体基因sNPFR 基因克隆 发育时期表达 组织表达
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团头鲂嗅觉受体基因β亚型的进化与表达模式分析
3
作者 关素华 黄欣 +2 位作者 刘宁 王卫民 刘寒 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期194-202,共9页
为探索鱼类嗅觉受体基因β亚型(OR-β)与食性的关系,对不同食性的12种鱼类,包括植食性的团头鲂(Megalobrama amblycephala)和草鱼(Ctenopharyngodon idellus),肉食性的半滑舌鳎(Cynoglossus semilae⁃vis)、大西洋鳕(Gadus morhua)、三刺... 为探索鱼类嗅觉受体基因β亚型(OR-β)与食性的关系,对不同食性的12种鱼类,包括植食性的团头鲂(Megalobrama amblycephala)和草鱼(Ctenopharyngodon idellus),肉食性的半滑舌鳎(Cynoglossus semilae⁃vis)、大西洋鳕(Gadus morhua)、三刺鱼(Gasterosteus aculeatus)、大黄鱼(Larimichthys crocea)和褐牙鲆(Parali⁃chthys olivaceus),杂食性的斑马鱼(Danio rerio)、罗非鱼(Oreochromis niloticus)、青鳉(Oryzias latipes)、金线鲃(Sinocyclocheilus grahami)和花斑剑尾鱼(Xiphophorus maculatus)的OR-β在其基因组中的拷贝数和分子进化进行系统分析,并对植食性团头鲂的OR-β在12月龄和24月龄鱼不同组织中的表达模式进行qPCR检测。进化分析结果显示,不同食性鱼类OR-β拷贝数差异较大,植食性团头鲂和草鱼分别有20和14个拷贝,而5种肉食性鱼类基因组中平均仅有1个,杂食性的5种鱼类平均有4个;选择压力分析结果显示,共有19个分支受到正选择,包括9个OR-β基因和10个分支位点,其中团头鲂的OR-β-4和OR-β-14(P<0.01)受到强烈的正选择。此外,团头鲂、草鱼、斑马鱼和金线鲃4种鲤科鱼类的OR-β聚为一支,这一支受到正选择,其中包括团头鲂的9个OR-β基因;qPCR结果显示,在12月龄和24月龄团头鲂的肌肉、嗅囊、脑及嗅球组织中,10个OR-β均在嗅囊中高表达;除OR-β-9和OR-β-10外,其他OR-β在嗅球和脑组织均不表达。以上结果表明,植食性团头鲂的OR-β基因与其他食性鱼类相比发生明显的特异性扩张,且在嗅囊组织中高表达,推测OR-β在团头鲂植食性适应性进化中可能起重要作用。 展开更多
关键词 团头鲂 嗅觉受体β亚型 食性 基因表达
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大蜡螟性肽受体基因GmelSPR克隆及表达分析
4
作者 朱雅楠 赵必安 +4 位作者 张洋逸 李雨时 梁铖 宗德琴 杨爽 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期910-918,共9页
交配是昆虫繁衍的重要方式,雌性交配后会显现出一系列保护后代而产生的行为,SPR则是重要的交配行为调控受体基因。本研究根据前期转录组SPR基因数据信息,利用RT-PCR扩增出大蜡螟SPR基因的完整CDS序列,命名为GmelSPR(GenBank登录号:OR347... 交配是昆虫繁衍的重要方式,雌性交配后会显现出一系列保护后代而产生的行为,SPR则是重要的交配行为调控受体基因。本研究根据前期转录组SPR基因数据信息,利用RT-PCR扩增出大蜡螟SPR基因的完整CDS序列,命名为GmelSPR(GenBank登录号:OR347698)。生物信息学分析显示该基因编码区全长1263 bp,编码420个氨基酸,预测分子量48.70718 kDa,理论等电点8.70,有7个跨膜螺旋区,具有典型G蛋白偶联受体蛋白特征。系统进化树比对结果显示大蜡螟GmelSPR与螟蛾科昆虫脐橙螟Amyelois transitella、印度谷螟Plodia interpunctella置信度较高。大蜡螟不同状态、不同组织中表达分析表明,未交尾雌蛾、雄蛾和已交尾雌蛾、雄蛾GmelSPR均在头部较高表达,且在未交尾雌蛾、雄蛾中表达量均高于已交尾雌蛾、雄蛾。本研究克隆了大蜡螟SPR基因,克隆结果表明GmelSPR与螟蛾科昆虫亲缘较近;表达谱分析则显示GmelSPR可能参与大蜡螟交配行为,为进一步研究大蜡螟中SPR基因功能奠定基础。 展开更多
关键词 大蜡螟 性肽受体基因 GmelSPR 基因克隆 表达谱
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中华按蚊保幼激素受体基因AsMet分子特性、表达模式及在生殖中的作用分析
5
作者 幸晓清 陈斌 司风玲 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1475-1483,共9页
【目的】为明确保幼激素受体Methoprene-tolerant基因AsMet在中华按蚊Anopheles sinensis体内的时空表达模式,并探究其对中华按蚊生殖调控和发育的影响。【方法】基于中华按蚊转录组数据,采用RACE克隆AsMet全长cDNA序列并进行分子特征分... 【目的】为明确保幼激素受体Methoprene-tolerant基因AsMet在中华按蚊Anopheles sinensis体内的时空表达模式,并探究其对中华按蚊生殖调控和发育的影响。【方法】基于中华按蚊转录组数据,采用RACE克隆AsMet全长cDNA序列并进行分子特征分析;利用qPCR分析AsMet在不同发育阶段(蛹和雌成蚊)、3日龄雌成蚊不同组织[头、胸、腹部前端(腹部前3节)、腹部后端(腹部剩余部分)、中肠、马氏管、脂肪体、卵巢和体壁]中的表达量;通过向中华按蚊末期雌蛹显微注射ds AsMet进行RNAi后,测定AsMet,AsKr-h1和AsVg的表达量,并观测雌成蚊卵巢发育情况、羽化率、产卵量和卵孵化率。【结果】中华按蚊AsMet(GenBank登录号:OR783325)的cDNA序列全长6841 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)长3159 bp,编码1052个氨基酸,预测其分子质量为114.46 kD,等电点为6.63。AsMet有4个保守结构域,包括1个螺旋-环-螺旋结构域、2个PAS结合域和1个C末端保守基序。AsMet与冈比亚按蚊An.gambiae、埃及伊蚊Aedes aegypti和尖音库蚊Culex pipiens的Met聚为一支。AsMet在化蛹后30 h和成蚊大部分阶段显著高表达,且在雌成蚊头和胸部中显著高表达,在中肠、马氏管和卵巢中呈现低表达。显微注射ds AsMet到末期雌蛹后24,48和72 h时,AsMet的表达量较显微注射ds EGFP的对照组分别下调70.05%,41.05%和68.64%,羽化率低于显微注射ds EGFP且在雌蚊交配吸血后卵巢发育不良,产卵量比正常注射ds EGFP的低67.58%,卵孵化率比正常注射ds EGFP的下降93.10%。【结论】AsMet表达被降低后影响中华按蚊卵巢的正常发育且使产卵量和孵化率显著降低。研究结果为深入研究JH调控中华按蚊生殖发育机理奠定基础,对保幼激素信号通路和昆虫生殖调控的分子机制的认识提供理论依据。 展开更多
关键词 中华按蚊 保幼激素受体基因 分子特性 表达模式 生殖调控
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卡马西平对青霉素点燃惊厥大鼠脑内GABAA受体mRNA表达的作用 被引量：6
6
作者 牛晓军 马永刚 +4 位作者 王明正 杨李华 陈靖京 张琴琴 王华坤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期128-132,共5页
目的研究两种剂量卡马西平对青霉素慢性点燃大鼠的抗惊厥作用及对脑内GABAA受体mRNA表达的影响,从基因水平探讨卡马西平抗惊厥的作用机制。方法采用腹腔注射(ip)青霉素(3×106U.kg-1.d-1)慢性点燃大鼠惊厥模型,两种剂量卡马西平(50,... 目的研究两种剂量卡马西平对青霉素慢性点燃大鼠的抗惊厥作用及对脑内GABAA受体mRNA表达的影响,从基因水平探讨卡马西平抗惊厥的作用机制。方法采用腹腔注射(ip)青霉素(3×106U.kg-1.d-1)慢性点燃大鼠惊厥模型,两种剂量卡马西平(50,100mg.kg-1×13d)ig给药,以痫性发作潜伏期和Racine惊厥行为分级标准为判定药效指标,观察卡马西平的抗惊厥作用。运用RT-PCR技术测定大鼠脑内GABAA受体mRNA表达量,分析卡马西平抗惊厥作用的新机制。结果两种剂量卡马西平ig给药后,均可使青霉素慢性点燃大鼠痫性发作的潜伏期延长,与模型对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),同时使惊厥大鼠的发作程度均较模型对照组减轻。青霉素慢性点燃大鼠脑内GABAA受体mRNA表达减少,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);两种剂量卡马西平预防性干预组的GABAA受体mRNA表达量分别与模型对照组相比,差异均无显著性。结论两种剂量卡马西平对青霉素慢性点燃的惊厥发作均有明显的对抗作用,但抗惊厥机制与GABAA受体的基因表达无关。 展开更多
关键词 卡马西平 青霉素慢性点燃惊厥模型 逆转录聚合酶 链反应 gabaa受体基因表达 大鼠
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韭菜迟眼蕈蚊气味受体BodoOR71和BodoOR72基因时空表达分析
7
作者 王覃丽 王福 +1 位作者 华登科 杨玉婷 《中国蔬菜》 北大核心 2024年第6期55-64,共10页
以韭菜迟眼蕈蚊的转录组数据为基础,通过RT-PCR克隆并获得韭菜迟眼蕈蚊的两个气味受体基因BodoOR71和BodoOR72的cDNA全长序列,对其序列及结构特征进行生物信息学分析,比较二者在韭菜迟眼蕈蚊不同发育时期及成虫不同组织中的表达量差异... 以韭菜迟眼蕈蚊的转录组数据为基础,通过RT-PCR克隆并获得韭菜迟眼蕈蚊的两个气味受体基因BodoOR71和BodoOR72的cDNA全长序列,对其序列及结构特征进行生物信息学分析,比较二者在韭菜迟眼蕈蚊不同发育时期及成虫不同组织中的表达量差异。序列分析发现,BodoOR71的开放阅读框(open reading frame,ORF)为759 bp,编码253个氨基酸,具有4个跨膜结构域;BodoOR72的ORF为954 bp,编码318个氨基酸,具有6个跨膜结构域。系统进化树结果表明,BodoOR71和BodoOR72与其他双翅目昆虫亲源关系较近,能够聚在一支。时空表达模式结果表明,BodoOR71在除雄成虫之外的不同虫态均有表达,且在雌成虫中的表达量最高,在雌成虫触角中的表达量显著高于其他组织,在雄成虫各组织中均不表达;BodoOR72在不同虫态均有表达,且在雄成虫中的表达量最高,在雄成虫触角中的表达量显著高于其他组织,在雌成虫各组织中微量表达。推测BodoOR71和BodoOR72可能参与韭菜迟眼蕈蚊嗅觉识别过程。 展开更多
关键词 韭菜迟眼蕈蚊 气味受体 基因克隆 QRT-PCR 时空表达
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建鲤生长激素受体基因分离、转录子多态性以及组织表达特性 被引量：13
8
作者 俞菊华 李红霞 +2 位作者 唐永凯 李建林 董在杰 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期218-228,共11页
使用PCR、RT-PCR和RACE方法分离克隆了建鲤基因组内的4个jlGHRs基因,同源性分析和系统树表明它们两两分属于鱼类GHR1和GHR2,命名为jlGHR1a、jlGHR1b;jlGHR2a、jlGHR2b。jlGHR1s和jlGHR2s的两个旁系同源基因间氨基酸差异分别为5%和11%,... 使用PCR、RT-PCR和RACE方法分离克隆了建鲤基因组内的4个jlGHRs基因,同源性分析和系统树表明它们两两分属于鱼类GHR1和GHR2,命名为jlGHR1a、jlGHR1b;jlGHR2a、jlGHR2b。jlGHR1s和jlGHR2s的两个旁系同源基因间氨基酸差异分别为5%和11%,但功能保守区FGVFS基序、Box1、Box2基本一致,jlGHR1s和jlGHR2s氨基酸差异为41%。jlGHRs和斑马鱼GHRs基因结构相同,在阅读框内存在7个内含子,两旁系同源基因间内含子长度或序列存在差异。jlGHR1s、jlGHR2s与不同鱼类GHR1、GHR2同源性高低与传统分类地位一致。实验过程中发现建鲤肝脏存在jlGHRs的多种转录子,包括丢失了外显子4的jlGHR1b'、保留了内含子3的jlGHR2a'、丢失了部分外显子8的jlGHR2as。实时定量RT-PCR组织表达结果显示4个jlGHRs在脑、肝、心、头肾、肾、肠、脾、肌肉各组织中均有表达,但表达量差异明显,其中肌肉组织中4个基因表达量均最高,脑中4个基因的表达水平相当,其余各组织中jlGHR2b的表达量均最高。从多转录子和较低表达量推测jlGHR2a所受的选择压力低于jlGHR2b。鲤鱼基因组内分离到GHR1、GHR2的两个旁系同源基因在功能基因方面证实了鲤鱼体内存在两套基因,表明鲤鱼是研究同源基因变异分化的好材料,也为今后正确查找jlGHRs基因上的SNP位点奠定了基础。 展开更多
关键词 建鲤 生长激素受体基因 旁系同源基因 组织表达
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桃蛀螟成虫Orco嗅觉受体基因的克隆及组织表达谱分析 被引量：12
9
作者 葛星 张天涛 +3 位作者 何康来 王勤英 李云龙 王振营 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期243-250,共8页
【目的】克隆桃蛀螟Conogethes punctiferalis(Guenée)的Orco嗅觉受体基因,并研究其在不同组织的表达谱。【方法】利用PCR技术克隆桃蛀螟触角Orco基因,对该基因编码的氨基酸序列进行生物信息学分析,并利用荧光定量PCR技术分析该基... 【目的】克隆桃蛀螟Conogethes punctiferalis(Guenée)的Orco嗅觉受体基因,并研究其在不同组织的表达谱。【方法】利用PCR技术克隆桃蛀螟触角Orco基因,对该基因编码的氨基酸序列进行生物信息学分析,并利用荧光定量PCR技术分析该基因在的表达量。【结果】获得桃蛀螟成虫Orco的cDNA全长序列,并命名为CpunOrco(GenBank登录号:JX101681)。该基因的开放阅读框全长1425bp,编码475个氨基酸,序列中有7个跨膜区。对桃蛀螟成虫不同组织中CpunOrco的荧光定量PCR结果表明,CpunOrco主要在触角和下颚须中表达,雄虫触角中的表达量高于雌虫,并且该基因在其他组织中也有一定的表达。【结论】本研究明确了该嗅觉受体基因在桃蛀螟成虫不同组织内的表达水平,为进一步研究其功能提供了理论依据。 展开更多
关键词 桃蛀螟 嗅觉受体蛋白 基因克隆 荧光定量PCR 组织表达谱
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棉铃虫嗅觉受体基因的克隆及组织特异性表达 被引量：16
10
作者 王桂荣 吴孔明 +1 位作者 苏宏华 郭予元 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期823-828,共6页
昆虫嗅觉受体是一个高度变异的蛋白家族,但是其中一类嗅觉受体很特殊,它们在不同昆虫体内高度保守。该文作者从棉铃虫Helicoverpa armigera体内克隆得到了这类受体基因,命名为ORHarm。ORHarm编码473个氨基酸残基,序列中有7个跨膜区,是... 昆虫嗅觉受体是一个高度变异的蛋白家族,但是其中一类嗅觉受体很特殊,它们在不同昆虫体内高度保守。该文作者从棉铃虫Helicoverpa armigera体内克隆得到了这类受体基因,命名为ORHarm。ORHarm编码473个氨基酸残基,序列中有7个跨膜区,是典型的G蛋白偶联的受体。ORHarm与已经报道的昆虫同类嗅觉受体的同源性在60%以上,与近缘种烟芽夜蛾Heliothis virescens嗅觉受体的同源性高达99.4%。半定量RT_PCR研究表明,ORHarm主要在棉铃虫成虫触角中表达,在喙中也有表达,但表达量较低,在成虫其他的部位不表达;在棉铃虫发育的各个时期,如卵、幼虫、蛹和成虫体内,也都有表达。ORHarm不仅在感受挥发性气味物质的过程中起着重要的作用,而且也参与液态化学刺激的识别过程。 展开更多
关键词 棉铃虫 嗅觉受体蛋白 基因克隆 表达谱 半定量RT-PCR
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NMDA受体对烫伤应激大鼠海马糖皮质激素受体基因表达的影响 被引量：6
11
作者 陆建华 党健 +2 位作者 黎海蒂 高京生 熊加祥 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期138-140,共3页
目的　观察烫伤应激后海马糖皮质激素受体 (GR)基因表达的变化 ,探讨N 甲基 D 天冬氨酸 (N methyl D as partate ,NMDA)受体在这种变化中的作用。方法　利用RT PCR技术 ,检测烫伤前腹腔注射NMDA受体拮抗剂MK 80 1及激动剂NMDA对烫伤应... 目的　观察烫伤应激后海马糖皮质激素受体 (GR)基因表达的变化 ,探讨N 甲基 D 天冬氨酸 (N methyl D as partate ,NMDA)受体在这种变化中的作用。方法　利用RT PCR技术 ,检测烫伤前腹腔注射NMDA受体拮抗剂MK 80 1及激动剂NMDA对烫伤应激后 2hGRmRNA水平的影响。结果　烫伤应激后 2h海马GRmRNA水平明显降低 (P <0 0 1) ;应激前腹腔注射MK 80 1使烫伤后降低的GRmRNA水平明显恢复 (P <0 0 1) ,注射NMDA使其进一步降低 (P <0 0 5 ) ,注射生理盐水无明显变化。 展开更多
关键词 NMDA受体 烫伤 大鼠 海马 糖皮质激素受体 基因表达 RT-PCR
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蓝塘猪和长白猪leptin和leptin受体基因表达的变化 被引量：6
12
作者 陈赞谋 戚晓鸿 +2 位作者 张豪 吴珍芳 刘德武 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期67-70,共4页
用实时荧光定量PCR方法研究了蓝塘猪和长白猪1、27、90、150和180日龄阶段脂肪组织中leptin基因mRNA和下丘脑中leptin受体基因mRNA的变化,并对2个品种不同生长阶段血液中leptin含量的变化规律进行了探讨。结果表明:(1)蓝塘猪180日龄时... 用实时荧光定量PCR方法研究了蓝塘猪和长白猪1、27、90、150和180日龄阶段脂肪组织中leptin基因mRNA和下丘脑中leptin受体基因mRNA的变化,并对2个品种不同生长阶段血液中leptin含量的变化规律进行了探讨。结果表明:(1)蓝塘猪180日龄时皮下脂肪中leptin基因表达量显著高于其它各阶段,而与长白猪相比,蓝塘猪除1日龄低于长白猪外,其它各个阶段均高于长白猪,180日龄两者差异极显著;长白猪各阶段间差异不显著;(2)蓝塘猪180日龄时下丘脑中leptin受体基因的表达量显著高于其它各阶段,长白猪180日龄时最高,且显著高于1日龄和27日龄,蓝塘猪与长白猪1日龄时差异显著;(3)蓝塘猪血清中leptin浓度各阶段均高于长白猪,两品种均是150日龄时最高,蓝塘猪150日龄显著高于27日龄和180日龄,长白猪各阶段差异不显著。 展开更多
关键词 猪 LEPTIN LEPTIN受体 基因表达
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瓜实蝇嗅觉受体基因的克隆及表达谱分析 被引量：22
13
作者 申建梅 胡黎明 +1 位作者 宾淑英 林进添 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期265-271,共7页
昆虫的嗅觉受体是一个高度变异的蛋白家族,其中一类Or83b嗅觉受体在不同昆虫体内高度保守,在昆虫的行为调控过程中起到十分重要的作用。为进一步探讨Or83b受体的功能,本研究利用RT-PCR和RACE方法克隆获得瓜实蝇Bactrocera cucurbitae(Co... 昆虫的嗅觉受体是一个高度变异的蛋白家族,其中一类Or83b嗅觉受体在不同昆虫体内高度保守,在昆虫的行为调控过程中起到十分重要的作用。为进一步探讨Or83b受体的功能,本研究利用RT-PCR和RACE方法克隆获得瓜实蝇Bactrocera cucurbitae(Coquillett)Or83b-like受体的全长cDNA序列,命名为BcucOr83b-like(GenBank登录号:HM745934)。测序结果表明,BcucOr83b-like开放阅读框全长1422bp,编码473个氨基酸残基。氨基酸序列比对表明,此序列具有Or83b受体的典型特征,序列中具有7个跨膜区和高度保守的C端区域。BcucOr83b-like与其他昆虫的Or83b具有较高的氨基酸序列一致性,其中与桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)Or83b的序列一致性高达99.6%。对该基因在瓜实蝇成虫不同组织和发育时期表达量的荧光定量PCR分析表明,BcucOr83b-like主要在瓜实蝇成虫触角中表达,头部(去除触角)、雌虫前足和翅中也有较高的表达;瓜实蝇在各个发育时期的表达水平不同,在刚羽化雌成虫中的表达量最高。本研究为深入研究瓜实蝇Or83b受体的功能提供了理论依据。 展开更多
关键词 瓜实蝇 嗅觉受体蛋白 Or83b 基因克隆 表达谱分析 荧光定量PCR
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半滑舌鳎膜孕激素受体基因克隆与组织表达分析 被引量：8
14
作者 史宝 李晓晓 +4 位作者 柳学周 徐永江 王珊珊 刘芝亮 王妍妍 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2013年第3期61-67,共7页
采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)方法,首次获得全长为1319bp的半滑舌鳎膜孕激素受体(mPRα)的cDNA序列;将推断的氨基酸序列与其他物种mPRα氨基酸序列进行多重比较分析,发现存在7个跨膜区域。使用MEGA4.0临位相联法和ClustalX方法对mP... 采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)方法,首次获得全长为1319bp的半滑舌鳎膜孕激素受体(mPRα)的cDNA序列;将推断的氨基酸序列与其他物种mPRα氨基酸序列进行多重比较分析,发现存在7个跨膜区域。使用MEGA4.0临位相联法和ClustalX方法对mPRα的氨基酸序列进行聚类分析和序列相似度分析。结果表明,半滑舌鳎mPRα与漠斑牙鲆、大西洋绒须石首鱼以及青鳉等鱼类的mPRα聚为一支,亲缘关系较近,相似度较高,分别为94%、93%和90%;而与高等哺乳动物人和牛相似性均为53%,亲缘关系较远。应用半定量RT-PCR技术分析了mPRαmRNA在性成熟雌性半滑舌鳎不同组织的表达,结果表明,mPRαmRNA组织表达具有广泛性,但表达量存在差异,在脑、肾、脾和卵巢等组织表达丰富,在肝、胃和肌肉组织表达较弱。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 膜孕激素受体基因 基因克隆 组织表达
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鸡促卵泡素及其受体基因在多个非繁殖组织中的表达研究 被引量：6
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作者 崔焕先 赵桂苹 +3 位作者 刘冉冉 郑麦青 陈继兰 文杰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1519-1525,共7页
本研究利用PCR和免疫组化等方法,对FSHR和FSH基因在鸡多个非繁殖系统的组织器官中的mRNA和蛋白水平的表达以及相关性进行了分析。结果显示:在心脏、肝脏、肾脏、肺和十二指肠中FSHR mRNA和蛋白以及FSH蛋白水平具有相同的表达趋势,表达... 本研究利用PCR和免疫组化等方法,对FSHR和FSH基因在鸡多个非繁殖系统的组织器官中的mRNA和蛋白水平的表达以及相关性进行了分析。结果显示:在心脏、肝脏、肾脏、肺和十二指肠中FSHR mRNA和蛋白以及FSH蛋白水平具有相同的表达趋势,表达丰度从大到小依次为肝脏、心脏、肾脏、肺和十二指肠。而在脾脏、胃、腿肌和胸肌中未检测到FSHR mRNA和蛋白以及FSH蛋白水平的表达;在检测的9个组织中,均无FSHmRNA的表达。相关性分析结果表明,在肝脏、心脏、肾脏、肺和十二指肠中各组织器官质量与组织中的FSH蛋白水平具有显著或极显著的正相关(P<0.05或P<0.01);各组织中的FSHR mRNA和蛋白水平均与FSH蛋白水平存在显著或极显著正相关(P<0.05或P<0.01)。本研究初步证明,机体其他部位表达分泌的促卵泡素,在多个非繁殖组织器官(肝脏、心脏、肾脏、肺和十二指肠)中通过调控促卵泡素受体基因的表达来影响北京油鸡不同组织的发育。 展开更多
关键词 促卵泡素受体基因 表达 受体 促卵泡素 非繁殖组织 北京油鸡
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生长激素受体基因表达的研究进展 被引量：11
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作者 陈宝定 贾俊静 +5 位作者 刘丽 柴艳 余红心 鲁琼芬 张文杰 李琦华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第12期127-130,共4页
生长激素(growth hormone,GH)在促进动物生长、发育等代谢过程中起着重要作用。长期以来人们在研究动物生长发育机制及其调控时,主要着眼于提高生长激素水平。然而GH必须与靶器官上生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)结合,由GH... 生长激素(growth hormone,GH)在促进动物生长、发育等代谢过程中起着重要作用。长期以来人们在研究动物生长发育机制及其调控时,主要着眼于提高生长激素水平。然而GH必须与靶器官上生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)结合,由GHR介导将信号传入细胞内才能发挥作用。大量研究结果显示,动物生长速度与GH水平并不完全平行,但与肝脏GHR呈明显正相关。生长快的肉鸡血液中GH和垂体GH mRNA水平比生长慢的蛋鸡低,而肝脏GHR水平比蛋鸡高;患侏儒症动物血液中GH浓度却比正常动物高,而GHR胞外部分缺失或功能不全。可见GHR基因表达对动物生长发育调控起着至关重要的作用。 展开更多
关键词 生长激素受体基因 表达 调节
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运动性肥大心脏心肌血管紧张素Ⅱ AT_1受体基因表达降低 被引量：9
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作者 李昭波 高云秋 +1 位作者 崔志澄 唐朝枢 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期208-210,共3页
我们的前期研究发现运动性肥大心脏心肌血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）受体数目减少，但对这种变化的调控是否可发生在基因转录水平上目前尚不清楚。本实验采用反转录-聚合酶链式反应（ReverseTranscription－PolymeraseChainRea... 我们的前期研究发现运动性肥大心脏心肌血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）受体数目减少，但对这种变化的调控是否可发生在基因转录水平上目前尚不清楚。本实验采用反转录-聚合酶链式反应（ReverseTranscription－PolymeraseChainReaction，RT－NR）方法对运动性肥大心脏心肌AngⅡAT1受体工型mRNA表达进行研究。结果表明大鼠游泳运动8周后，心系数比对照组大鼠提高24％（p＜0．05）。琼脂糖电泳结果表明心肌AbgⅡAT1受体亚型RT－PCR产物条带密度比对照组降低30％，面积降低61％（p＜0．05）。说明运动性肥大心脏心肌AngⅡAT1受体基因表达降低。提示运动性肥大心脏心肌AngⅡ受体数目减少的调控机制可发生在基因转录水平上。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ受体 基因表达 心肌肥大 运动
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氯虫苯甲酰胺对小菜蛾鱼尼丁受体基因mRNA表达量的影响 被引量：11
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作者 孙丽娜 杨代斌 +2 位作者 芮昌辉 崔丽 袁会珠 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期136-142,共7页
采用实时荧光定量PCR研究比较了氯虫苯甲酰胺、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和溴虫腈对小菜蛾鱼尼丁受体基因mRNA表达量的影响,研究分析了低剂量氯虫苯甲酰胺连续处理和间断处理对小菜蛾鱼尼丁受体基因表达量的影响,以及对氯虫苯甲酰胺产生... 采用实时荧光定量PCR研究比较了氯虫苯甲酰胺、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和溴虫腈对小菜蛾鱼尼丁受体基因mRNA表达量的影响,研究分析了低剂量氯虫苯甲酰胺连续处理和间断处理对小菜蛾鱼尼丁受体基因表达量的影响,以及对氯虫苯甲酰胺产生抗性的小菜蛾与敏感小菜蛾鱼尼丁受体基因表达量的差异。结果表明:氯虫苯甲酰胺可提高小菜蛾鱼尼丁受体基因表达量,而甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和溴虫腈对其表达量均无影响;0.05和0.01 mg/L的氯虫苯甲酰胺均可使小菜蛾鱼尼丁受体基因表达量增加;对氯虫苯甲酰胺产生抗性的小菜蛾鱼尼丁受体基因表达量是敏感小菜蛾的5.79倍。研究结果有助于阐明氯虫苯甲酰胺的作用机理,并可能为筛选作用于鱼尼丁受体的新化合物提供参考。 展开更多
关键词 氯虫苯甲酰胺 小菜蛾 鱼尼丁受体基因 表达量
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桔小实蝇非典型气味受体Orco基因的克隆与表达谱分析 被引量：5
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作者 赵海明 易欣 +3 位作者 胡美英 安国栋 王会冬 黄林 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期40-47,共8页
为探讨非典型气味受体基因Orco的功能,采用RT-PCR和RACE方法克隆获得桔小实蝇Bacto-cera dorsalis(Hendel)Orco受体的全长cDNA序列,命名为Bdor/Orco(GenBank登录号为EU621792)。测序结果表明Bdor/Orco开放阅读框全长1 422bp,编码473个... 为探讨非典型气味受体基因Orco的功能,采用RT-PCR和RACE方法克隆获得桔小实蝇Bacto-cera dorsalis(Hendel)Orco受体的全长cDNA序列,命名为Bdor/Orco(GenBank登录号为EU621792)。测序结果表明Bdor/Orco开放阅读框全长1 422bp,编码473个氨基酸残基。对其组成成分、疏水/亲水区域、信号肽、蛋白质二级结构,以及分子进化关系等进行了预测与推断,分析结果表明Bdor/Orco与其他昆虫的Orco具有较高的氨基酸序列一致性,特别是C末端。对该基因在桔小实蝇成虫不同组织和发育时期表达量的荧光定量PCR分析,结果表明Bdor/Orco主要是在桔小实蝇成虫触角中表达,头部(去除触角)、雌虫前足和翅中也有较高的表达;桔小实蝇在各个发育时期的表达水平不同,在刚羽化雌成虫中的表达量最高。 展开更多
关键词 桔小实蝇 气味受体 Orco基因 克隆 表达谱
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马氏珠母贝B型清道夫受体PmSR-B基因克隆与表达性分析 被引量：8
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作者 雷超 贝伟烈 +3 位作者 郑哲 罗少杰 王庆恒 邓岳文 《广东海洋大学学报》 CAS 2017年第1期7-14,共8页
采用c DNA末端快速扩增技术克隆获得马氏珠母贝清道夫受体基因c DNA全长序列(Pm SR-B);利用荧光定量技术检测Pm SR-B基因在各个组织中的表达量。结果表明,Pm SR-B基因c DNA序列全长1 857 bp,开放阅读框(ORF)长1 443 bp,编码480个氨基酸,... 采用c DNA末端快速扩增技术克隆获得马氏珠母贝清道夫受体基因c DNA全长序列(Pm SR-B);利用荧光定量技术检测Pm SR-B基因在各个组织中的表达量。结果表明,Pm SR-B基因c DNA序列全长1 857 bp,开放阅读框(ORF)长1 443 bp,编码480个氨基酸,5′非翻译区(5′UTR)长89 bp,3′UTR长325 bp。预测其分子质量为54.77 ku,等电点为7.94,脂溶性系数92.94,总平均亲水性-0.120,属于疏水性蛋白;不稳定指数26.37,属于稳定蛋白。氨基酸序列同源比对结果,Pm SR-B氨基酸序列与其他物种具有一定的保守性,与华贵类栉孔扇贝(Mimachlamys nobilis)SR-B的序列的相似度高达47%。荧光定量PCR检测结果,Pm SR-B在肝胰腺中表达量最高,其后依次是鳃、闭壳肌、中央膜,各组织的表达量差异具统计学意义(P<0.05)。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 清道夫受体B 基因克隆 基因表达
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