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鸡G蛋白α亚基基因可变剪接体的克隆和组织表达
1
作者 章学东 王欢欢 +4 位作者 葛莹 宋丹丹 张雷 李庆海 楼立峰 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期603-610,共8页
为深入研究鸡G蛋白α亚基(G-protein alpha subunit,GNAS)基因的转录剪接情况,采用5’和3’cDNA末端快速扩增(rapid-amplification cDNA ends,RACE)技术,对鸡GNAS基因进行克隆测序;并采用定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,... 为深入研究鸡G蛋白α亚基(G-protein alpha subunit,GNAS)基因的转录剪接情况,采用5’和3’cDNA末端快速扩增(rapid-amplification cDNA ends,RACE)技术,对鸡GNAS基因进行克隆测序;并采用定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,检测鸡皮肤、胸肌、心、脑、肝、肺和腹脂等7种组织中GNAS基因剪接体的表达量。结果表明:鸡GNAS基因存在1554和1796 bp 2种转录剪接体,均含12个外显子,二者仅第1外显子的长度和位置不同,其余第2-12外显子相同。克隆子1(1554 bp)编码417个氨基酸,克隆子2(1796 bp)编码379个氨基酸。在NCBI数据库中进行蛋白比对发现,克隆子2的氨基酸序列与已知的人和小鼠的GNAS基因Gαs亚基同源相似度达93%,而克隆子1的氨基酸序列与XLαs亚基的同源性较高(相似度87%)。表达量检测表明,2种转录剪接体在7种组织中均有不同程度的表达,其中:在脑组织中的表达量最高,与其他组织间差异极显著(P<0.01),在皮肤组织中的表达量(P<0.01或P<0.05)次之;而在肺、胸肌、肝、心、腹脂等组织中的表达量较低。 展开更多
关键词 鸡 g蛋白α亚基基因 剪接体 克隆 表达
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家蚕G蛋白α亚基基因BmGα73B原核表达及其表达条件优化
2
作者 汤强 方玲 章玉萍 《中国蚕业》 2012年第3期19-22,共4页
通过RT-PCR技术从家蚕中扩增出G蛋白α亚基基因BmGα73B的cDNA,克隆至原核表达载体pET-41b(+)中,所获得的重组质粒经酶切鉴定后,将其转化至E coli BL21诱导表达,用SDS-PAGE与Western blot对表达产物进行鉴定。结果表明,通过RT-PCR扩增... 通过RT-PCR技术从家蚕中扩增出G蛋白α亚基基因BmGα73B的cDNA,克隆至原核表达载体pET-41b(+)中,所获得的重组质粒经酶切鉴定后,将其转化至E coli BL21诱导表达,用SDS-PAGE与Western blot对表达产物进行鉴定。结果表明,通过RT-PCR扩增获得长度为1 158 bp的蛋白基因,诱导表达重组质粒pET-41b(+)-Gα73B,经SDS-PAGE检测,IPTGr的终浓度为1 mmol/L时,诱导4 h时蛋白表达量最高,出现分子质量约为73 kD的目的蛋白带,与蛋白的理论值相符。经Western blot检测,表达产物可与GST发生特异性反应。 展开更多
关键词 g蛋白α亚基 Bmgα73B RT-PCR 克隆 原核表达
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2型糖尿病合并不同分级高血压患者血清Giα-2、NGAL水平变化及意义 被引量：7
3
作者 马爽 李宝新 +4 位作者 张云良 常文龙 王翯 张鑫 郭淑芹 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第33期5-8,共4页
目的探讨血清抑制性G蛋白α亚基-2(Giα-2)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平在2型糖尿病合并不同分级高血压患者中的改变及临床意义。方法选取197例2型糖尿病患者,分为单纯2型糖尿病(DS组)45例、2型糖尿病合并高血压1级(DH... 目的探讨血清抑制性G蛋白α亚基-2(Giα-2)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平在2型糖尿病合并不同分级高血压患者中的改变及临床意义。方法选取197例2型糖尿病患者,分为单纯2型糖尿病(DS组)45例、2型糖尿病合并高血压1级(DH1组)47例、2型糖尿病合并高血压2级(DH2组)51例、2型糖尿病合并高血压3级(DH3组)54例;另选取40例查体无糖尿病和高血压者作为对照组。应用酶联免疫吸附法测定各组血清Giα-2和NGAL水平。多元线性回归法分析Giα-2和NGAL的影响因素。结果 DS组Giα-2水平较对照组降低,DH1、DH2、DH3组Giα-2水平均高于DS组,其中DH3组最高(P均<0.05);DS组NGAL水平较对照组升高,在DH1、DH2、DH3组中,随着高血压分级增加,NGAL水平逐渐增加(P均<0.05)。多元线性回归分析结果显示:Giα-2与收缩压呈正相关(r=0.54,P<0.05),NGAL水平与收缩压、空腹血糖呈正相关(r=0.55、0.14,P均<0.05)。进一步多元回归分析提示收缩压是血清Giα-2水平的独立影响因素,收缩压、空腹血糖是血清NGAL水平的独立影响因素。结论 2型糖尿病合并高血压患者血清Giα-2和NGAL水平均升高,Giα-2和NGAL水平变化对2型糖尿病合并高血压的发生均有一定影响。 展开更多
关键词 2型糖尿病 高血压 抑制性g蛋白α亚基-2 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白
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