FITC标记重组灵芝免疫调节蛋白(rLz-8)在NB4细胞中的动态定位 被引量：7

1

作者 梁重阳 徐蔚青 +6 位作者 曹焱鑫 刘立侠 张淑芹 刘志屹 李泓睿 李柏志 孙非 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第3期489-492,共4页

实验发现,重组灵芝免疫调节蛋白(rLz-8)可直接杀伤人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4.利用异硫氰酸荧光素(FITC)标记rLz-8,其相关的活性实验结果和晶体结构分析都表明,FITC没有影响rLz-8已知生物学功能.通过激光共聚焦显微镜观察FITC-rL... 实验发现,重组灵芝免疫调节蛋白(rLz-8)可直接杀伤人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4.利用异硫氰酸荧光素(FITC)标记rLz-8,其相关的活性实验结果和晶体结构分析都表明,FITC没有影响rLz-8已知生物学功能.通过激光共聚焦显微镜观察FITC-rLz-8在NB4细胞内的动态过程发现,FITC-rLz-8可识别细胞膜上的受体,并可进入细胞质,并最终富集在细胞核区域内.Annexin V-FITC双染检测结果显示,rLz-8对NB4细胞杀伤作用的可能机制是对NB4细胞凋亡的诱导作用,在一定浓度范围内,剂量与凋亡诱导率成正相关.因此rLz-8能够诱导肿瘤细胞NB4发生凋亡的亚细胞学机制可定位在细胞核上. 展开更多

关键词 异硫氰酸荧光素(fitc) 亚细胞定位 细胞核 凋亡 NB4细胞

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FITC标记脂肪酶的稳定性和荧光光谱 被引量：8

2

作者 张驰 宋锡瑾 +1 位作者 王杰 闻静 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1381-1384,共4页

以FITC(异硫氰基荧光素)为荧光探针,研究了标记后的脂肪酶的活性、构象、荧光光谱的变化及三者之间的联系。在不同变性条件下,比较了标记与未标记的脂肪酶活性变化及相对应的荧光光谱。结果表明,荧光标记的脂肪酶耐热性能比未标记的酶... 以FITC(异硫氰基荧光素)为荧光探针,研究了标记后的脂肪酶的活性、构象、荧光光谱的变化及三者之间的联系。在不同变性条件下,比较了标记与未标记的脂肪酶活性变化及相对应的荧光光谱。结果表明,荧光标记的脂肪酶耐热性能比未标记的酶有所提高,70℃时完全失活。荧光标记的脂肪酶耐酸碱性能增强。在盐酸胍变性剂的条件下,荧光标记的脂肪酶活性下降趋势渐缓,荧光光谱能较好的反映脂肪酶的活性变化。 展开更多

关键词 脂肪酶 异硫氰基荧光素(fitc) 荧光光谱 稳定性

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应用FITC系统建立非均衡竞争游离三碘甲腺原氨酸(FT_3)化学发光法 被引量：6

3

作者 孔海霞 刘萍 +3 位作者 田云霞 宋启超 王世鑫 翁亚光 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期201-205,共5页

目的制备抗人T3多克隆抗体,应用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanat,FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立一种能广泛应用于临床检测游离三碘甲腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)的方法。方法以T3-牛血清白蛋白(bovin serum ... 目的制备抗人T3多克隆抗体,应用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanat,FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立一种能广泛应用于临床检测游离三碘甲腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)的方法。方法以T3-牛血清白蛋白(bovin serum albumin,BSA)为抗原免疫新西兰大白兔,制备抗人T3多克隆抗体,亲和层析法纯化并联接辣根过氧化物酶(horse radish peroxidase,HRP)。用FITC标记T3-类似物。采用抗FITC抗体包被发光板,FITC-T3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,通过非均衡竞争法原理,固相抗原与血清中FT3竞争结合抗T3抗体-HRP,通过标准曲线计算FT3浓度,建立方法学评价并与直接用T3-牛血清γ球蛋白(Bovine serum gamma globulin,BGG)包被(非FITC系统)的检测系统相比较。将本方法应用于临床120份血清标本的检测,定量结果与德国罗氏2010电化学发光全自动免疫分析系统(Elec-sys 2010)定量结果进行比较。结果抗体经酶联免疫吸附实验证明对T3、具有高度特异性。应用FITC系统建立的非均衡竞争化学发光免疫分析标准曲线的线性R>0.99,线性范围0.25～50 pg/ml,分析灵敏度为0.25 pg/ml,精密度测试批内、批间变异系数CV<5%,检测结果优于非FITC系统的检测。对于临床血清标本的检测,其定量结果与德国Elecsys2010定量试剂盒的定量结果具有很好的相关性,相关系数r=0.962 2,两者的测定值无显著性差异。结论制备的抗人T3多克隆抗体特异性强,以FITC系统为平台建立的非均衡竞争FT3检测化学发光法具有精密性好、灵敏度高、稳定性强,有良好的准确性,达到临床测定的需求,可代替进口化学发光产品用于临床样本的检测。 展开更多

关键词 异硫氰酸荧光素 非均衡竞争 游离三碘甲腺原氨酸 类似物 多克隆抗体 化学发光分析法

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CE法测定CD45-FITC荧光抗体溶液中的游离FITC

4

作者 薛洪宝 张晖 +2 位作者 李柏青 梁丽丽 陶兆林 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1666-1670,共5页

建立了测定CD45-FITC荧光抗体样品溶液中游离FITC浓度的毛细管电泳(CE)方法。熔融石英毛细管45 cm(有效长度30 cm)×75μm i.d.;0.05 mol·L-1磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(含5g·L-1PEG4000,p H=7.14);分离电压+12 k V;进... 建立了测定CD45-FITC荧光抗体样品溶液中游离FITC浓度的毛细管电泳(CE)方法。熔融石英毛细管45 cm(有效长度30 cm)×75μm i.d.;0.05 mol·L-1磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(含5g·L-1PEG4000,p H=7.14);分离电压+12 k V;进样压力0.5 psi(3.45 k Pa),进样时间3.0 s;分离温度25℃;UV-Vis检测器检测波长200 nm。该方法能有效测定CD45-FITC荧光抗体样品溶液中游离的FITC含量,线性回归方程相关系数r=0.9900,检测限LOQ=0.20μg·m L-1。样品加标回收率为105.49%,相对标准偏差小于5.36%。该方法快速、灵敏、重现性好,能用于CD45-FITC荧光抗体样品溶液中游离FITC的快速测定。 展开更多

关键词 毛细管电泳法(CE) CD45-fitc荧光抗体 游离fitc

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表面连接与核-壳型键合FITC荧光纳米硅球的制备及性能比较

5

作者 蔡少凡 金秋 +1 位作者 魏海英 吕运开 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2017年第3期248-253,261,共7页

以异硫氰酸荧光素(FITC)为荧光分子,二氧化硅为生物相容性载体制备荧光纳米硅球.为增强硅球的稳定性,引入γ-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)做桥梁分子,由于FITC、SiO_2与APTES连接顺序的非单一性,分别制备了表面连接型和核-壳型键合FITC的... 以异硫氰酸荧光素(FITC)为荧光分子,二氧化硅为生物相容性载体制备荧光纳米硅球.为增强硅球的稳定性,引入γ-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)做桥梁分子,由于FITC、SiO_2与APTES连接顺序的非单一性,分别制备了表面连接型和核-壳型键合FITC的荧光硅球,并对其形貌和光漂白性进行了比较.实验结果表明,核-壳型和表面连接型荧光硅球形貌相似粒径接近,但表面连接型光漂白性严重.进而,对核-壳型中典型的包硅方法——St9ber法和反相微乳液法进行比较,结果表明,反相微乳液法制备的核-壳型键合FITC的荧光硅球荧光信号更强、粒径更小且分散性良好,同时在7h内荧光染料泄漏程度小于8%,30min内荧光强度仅降低2.2%,具备低染料泄露、光稳定性好等优点. 展开更多

关键词 异硫氰酸荧光素(fitc) 荧光纳米硅球 光漂白 染料泄漏 光稳定

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大鼠血浆中枸杞多糖荧光标记物定量分析方法的建立 被引量：9

6

作者 陈忱 唐华丽 +4 位作者 马月 王少康 杨立刚 彭景 孙桂菊 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第2期90-95,共6页

建立大鼠血浆中异硫氰酸荧光素标记的枸杞多糖(fluorescein isothiocyanate labeled Lycium barbarumpolysaccharides,LBP-FITC)的荧光定量分析方法,线性方程为y=1 378.7x-14.98(R2=0.998 9),血浆中LBP-FITC质量浓度在0.05~10μg/m L范... 建立大鼠血浆中异硫氰酸荧光素标记的枸杞多糖(fluorescein isothiocyanate labeled Lycium barbarumpolysaccharides,LBP-FITC)的荧光定量分析方法,线性方程为y=1 378.7x-14.98(R2=0.998 9),血浆中LBP-FITC质量浓度在0.05~10μg/m L范围内与荧光强度呈良好的线性关系。方法的精密度、回收率以及稳定性考察分析证明该方法符合生物样品体内定量分析的要求。单次灌胃给予大鼠LBP-FITC后,以药代动力学Win Nonlin软件采用非房室模型拟合大鼠单次口服LBP-FITC的经时血药质量浓度数据,计算主要的药代动力学参数为最大峰质量浓度(Cmax)(2.39±0.71)μg/m L、达峰时间(tmax)(1.17±0.41)h;药时曲线下面积AUC0-t为(45.85±7.12)(μg?h)/m L,AUC0-∞为(127.31±39.00)(μg?h)/m L;半衰期(t1/2)为(80.32±32.70)h;清除率为(1 693.96±492.47)m L/kg;平均滞留时间为(20.64±1.36)h。 展开更多

关键词 异硫氰酸荧光素标记的枸杞多糖 药代动力学 稳定性 回收率

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新型有机荧光染料嵌合的核壳荧光纳米材料的研制 被引量：22

7

作者 段菁华 王柯敏 +7 位作者 谭蔚泓 何晓晓 何春梅 刘斌 李杜 黄杉生 羊小海 莫远尧 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第2期255-259,共5页

采用油包水的反相微乳液方法 ,首次以羊抗人免疫球蛋白 ( Ig G)标记的异硫氰酸荧光素 ( FITC)为核材料 ,成功地制备了 FITC的核壳荧光纳米颗粒 ,克服了采用传统方法制备核壳荧光纳米颗粒中存在的荧光染料泄露的问题 .制备的这种核壳荧... 采用油包水的反相微乳液方法 ,首次以羊抗人免疫球蛋白 ( Ig G)标记的异硫氰酸荧光素 ( FITC)为核材料 ,成功地制备了 FITC的核壳荧光纳米颗粒 ,克服了采用传统方法制备核壳荧光纳米颗粒中存在的荧光染料泄露的问题 .制备的这种核壳荧光纳米颗粒比细胞小很多 ,且具有生物亲和性 ,可为纳米生物传感器件提供新型材料 .基于该核壳荧光纳米颗粒的标记方法也为生物医学提供了一种新型的非同位素分析方法 . 展开更多

关键词 有机荧光染料 荧光纳米材料 油包水微乳液 异硫氰酸荧光素 羊抗人免疫球蛋白 核壳结构 纳米生物传感器 标记 临床诊断

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荧光标记的叶酸修饰壳聚糖纳米载体研制 被引量：9

8

作者 金鑫 张阳德 +5 位作者 王吉伟 张丽华 杨璞 张旭 胡玉 于丽 《中南大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第1期161-165,共5页

制备荧光标记的叶酸偶联壳聚糖纳米粒,为抗肿瘤药物给药系统提供载体材料。通过叶酸活性酯与壳聚糖上的氨基反应,使叶酸与壳聚糖偶联。将异硫氰基荧光素与叶酸偶联壳聚糖进行化学嫁接,以离子交联法制成具有荧光的叶酸偶联壳聚糖纳米粒,... 制备荧光标记的叶酸偶联壳聚糖纳米粒,为抗肿瘤药物给药系统提供载体材料。通过叶酸活性酯与壳聚糖上的氨基反应,使叶酸与壳聚糖偶联。将异硫氰基荧光素与叶酸偶联壳聚糖进行化学嫁接,以离子交联法制成具有荧光的叶酸偶联壳聚糖纳米粒,并与肝癌HepG2细胞进行体外细胞实验。实验结果表明:叶酸活性酯用量和反应温度及试剂滴加速度是影响偶联比的主要因素;在叶酸活性酯与壳聚糖用量质量比为1:1,反应温度为30℃,滴加速度为2mL/min,反应时间为12h的条件下可得到偶联稳定的叶酸偶联壳聚糖;所制得的纳米粒粒径为290nm,形态规则,细胞荧光效果明显;此方法能用于制备荧光标记的叶酸修饰壳聚糖纳米粒载体。 展开更多

关键词 叶酸 壳聚糖 纳米粒 异硫氰基荧光素

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反相流动注射化学发光法测定牛血红蛋白的研究及应用 被引量：11

9

作者 莫小曼 黄春保 +2 位作者 刘巧玲 慈云祥 常文保 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期528-530,共3页

系统地研究了在碱性介质和阳离子表面活性剂CTMAB存在下,NaClO氧化异硫氰酸荧光素 牛血红蛋白标记物的化学发光行为和化学发光反应的条件,提出了反相流动注射化学发光测定牛血红蛋白的新方法。该方法测定牛血红蛋白的线性范围为0.26～1... 系统地研究了在碱性介质和阳离子表面活性剂CTMAB存在下,NaClO氧化异硫氰酸荧光素 牛血红蛋白标记物的化学发光行为和化学发光反应的条件,提出了反相流动注射化学发光测定牛血红蛋白的新方法。该方法测定牛血红蛋白的线性范围为0.26～12.8μg/mL,检出限为0.128μg/mL。 展开更多

关键词 异硫氰酸荧光素 牛血红蛋白 化学发光反应 流动注射法

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甲基睾酮的控温相分离荧光免疫分析 被引量：4

10

作者 高军 李元宗 +2 位作者 郭振泉 常文保 慈云祥 《分析科学学报》 CAS CSCD 2000年第1期1-4,共4页

本文报道一种新的甲基睾酮 ( MT)测定的免疫分析法。通过将 MT与牛血清白蛋白 ( BSA)偶联制得了 MT全抗原 MT-3 -BSA( Ag MT)。将 Ag MT经兔子免疫获得了针对MT的多克隆抗体 ( Ab MT)。与温度敏感性水凝胶偶联的抗原 ( PNIP-Ag M T)和... 本文报道一种新的甲基睾酮 ( MT)测定的免疫分析法。通过将 MT与牛血清白蛋白 ( BSA)偶联制得了 MT全抗原 MT-3 -BSA( Ag MT)。将 Ag MT经兔子免疫获得了针对MT的多克隆抗体 ( Ab MT)。与温度敏感性水凝胶偶联的抗原 ( PNIP-Ag M T)和游离半抗原 MT竞争性地与有限量的异硫氰基荧光素标记抗体 ( Ab MT-FITC)反应。根据临界析相温度以上免疫复合物沉淀的特性进行分离 ,降低背景干扰。该法对 MT测定的线性范围在 2 7.5ng/m L～ 1 .1μg/m L ,检出限为 2 7.5ng/m L。MT在人血清中的回收率比较满意。 展开更多

关键词 甲基睾酮 相分离免疫分析 荧光免疫分析

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异硫氰酸荧光素标记抗体的固体基质室温磷光性质研究 被引量：6

11

作者 刘佳铭 付艳 +1 位作者 余冰宾 李隆弟 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第3期423-426,共4页

研究了异硫氰酸荧光素 (FITC)标记的羊抗人抗体 (GAHAb FITC)和兔抗羊抗体 (RAGAb FITC) ,及其以三种免疫方式与人免疫球蛋白 (IgG)反应所得免疫复合物在多种固体薄膜基质上发射室温磷光 (RTP)的适宜条件及其光谱、强度和寿命等性质。... 研究了异硫氰酸荧光素 (FITC)标记的羊抗人抗体 (GAHAb FITC)和兔抗羊抗体 (RAGAb FITC) ,及其以三种免疫方式与人免疫球蛋白 (IgG)反应所得免疫复合物在多种固体薄膜基质上发射室温磷光 (RTP)的适宜条件及其光谱、强度和寿命等性质。研究发现 ,标记抗体及其免疫复合物保留了FITC优良的固体基质室温磷光性质 ,λ(max)ex λ(max)em =5 2 5 6 5 0nm ,其RTP强度与其浓度线性相关 ,并有很高的灵敏度。更为重要的是 ,免疫反应及其RTP检测能结合于同一基质 ,方便地相继完成。在聚酰胺膜 (PM )上 ,以Pb(Ac) 2 为重原子微扰剂 ,稀释比为 1∶10 (φ)的GAHAb FITC ,RAGAb FITC及其与人IgG形成的免疫复合物均能发射较强的RTP信号并有较长的RTP寿命。本结果为建立相应的固体基质室温磷光免疫分析 (SS RTP IA)新方法奠定了相应的实验基础。 展开更多

关键词 异硫氰酸荧光素标记抗体 固体室温磷光 免疫分析 人IGG 羊抗人抗体 兔抗羊抗体

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增强型电荷耦合器件用于毛细管电泳激光诱导荧光的检测 被引量：3

12

作者 马明生 吴晓军 刘国诠 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1996年第12期1862-1864,共3页

增强型电荷耦合器件用于毛细管电泳激光诱导荧光的检测马明生，吴晓军，刘国诠（中国科学院化学研究所，北京，１０００８０）关键词增强型电荷耦合器件，激光诱导荧光，毛细管电泳，异硫氰酸荧光黄近年来，毛细管电泳技术在生化分离、... 增强型电荷耦合器件用于毛细管电泳激光诱导荧光的检测马明生，吴晓军，刘国诠（中国科学院化学研究所，北京，１０００８０）关键词增强型电荷耦合器件，激光诱导荧光，毛细管电泳，异硫氰酸荧光黄近年来，毛细管电泳技术在生化分离、分析中得到广泛的应用。目前，毛细管... 展开更多

关键词 电荷耦合器件 激光诱导荧光 毛细管电泳

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新型可用于荧光标记的α-氰基丙烯酸酯单体的合成及在小鼠活体成像中的应用 被引量：2

13

作者 张涛 汤永嘉 +1 位作者 徐亮 刘克良 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1168-1174,共7页

设计合成了新型含有荧光基团的α-氰基丙烯酸酯单体,并与其它α-氰基丙烯酸酯单体共聚,得到产生荧光的聚氰基丙烯酸酯材料.将其包埋在小鼠背部肌肉层,可获得良好的荧光成像效果.通过对荧光强度的监测,初步研究了聚氰基丙烯酸酯材料中的... 设计合成了新型含有荧光基团的α-氰基丙烯酸酯单体,并与其它α-氰基丙烯酸酯单体共聚,得到产生荧光的聚氰基丙烯酸酯材料.将其包埋在小鼠背部肌肉层,可获得良好的荧光成像效果.通过对荧光强度的监测,初步研究了聚氰基丙烯酸酯材料中的侧链酯基在小鼠体内的降解情况.单体合成是以蒽合氰基丙烯酸和4,4'-二甲氧基三苯基-氨基己醇为原料,得到蒽合氰基丙烯酸(4,4'-二甲氧基三苯基-氨基己醇)酯,脱保护后再将异硫氰酸荧光素以化学键合的方式标记在末端氨基上,脱蒽还原烯双键后,得到可用于荧光标记的α-氰基丙烯酸(异硫氰酸荧光素-氨基己醇)酯单体.反应中间体及单体结构采用核磁共振氢谱和质谱进行表征.该单体及其高聚物均可在激发光(488 nm)和发射光(525 nm)条件下观察到明显荧光. 展开更多

关键词 Α-氰基丙烯酸酯 异硫氰酸荧光素 活体荧光成像

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小鼠变应性接触性皮炎模型各时期IL-33水平探索 被引量：5

14

作者 于曦 刘海亮 +6 位作者 王燕 王晓钰 陶羽 包凯帆 季律 王璨 洪敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1331-1332,共2页

IL-33通过与二型固有淋巴细胞（group 2 innate lymphoid cells，ILC2s）。上的ST2和IL-1受体辅助蛋白（IL-1 RAcP）结合，参与多种过敏性疾病发病机制，是引发过敏性疾病的关键因素。上皮细胞可经刺激产生IL-33，作用于ILC2s并使其产生... IL-33通过与二型固有淋巴细胞（group 2 innate lymphoid cells，ILC2s）。上的ST2和IL-1受体辅助蛋白（IL-1 RAcP）结合，参与多种过敏性疾病发病机制，是引发过敏性疾病的关键因素。上皮细胞可经刺激产生IL-33，作用于ILC2s并使其产生Th2型细胞因子，促进Th2型过敏性疾病的发生，如过敏性皮炎吲、哮喘㈨、过敏性鼻炎等。 展开更多

关键词 变应性接触性皮炎 IL-33 诱导初期 异硫氰酸荧光素 ILC2s 小鼠

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异硫氰酸荧光素-人血清白蛋白标记物化学发光反应的研究 被引量：4

15

作者 黄春保 慈云祥 常文保 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期186-189,共4页

采用反相流动注射分析方法 ,研究了异硫氰酸荧光素 ( FITC) -人血清白蛋白( HSA)标记物的化学发光性能和反应的最佳条件 ,建立了化学发光测定人血清白蛋白的新方法。体系的化学发光强度与人血清白蛋白的含量在 0 .0 8～ 1 6μg/m L内呈... 采用反相流动注射分析方法 ,研究了异硫氰酸荧光素 ( FITC) -人血清白蛋白( HSA)标记物的化学发光性能和反应的最佳条件 ,建立了化学发光测定人血清白蛋白的新方法。体系的化学发光强度与人血清白蛋白的含量在 0 .0 8～ 1 6μg/m L内呈线性关系 ,方法的检出限为 0 .0 4μg/m L。 展开更多

关键词 人血清白蛋白 异硫氰酸荧光素 标记物 化学发光反应 流动注射法 测定 荧光光度法

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异硫氰酸荧光素标记壳聚糖的研究 被引量：10

16

作者 贺继东 夏文水 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第34期10939-10940,共2页

[目的]探究FITC和壳聚糖不同物料比对反应产物标记率和特性粘数的影响,并研究2种不同pH值下FITC-Chitosan吸收光谱和荧光光谱的变化。[方法]采用异硫氰酸荧光素对壳聚糖进行荧光标记,考查不同物料比时荧光素与壳聚糖的结合情况、产物的... [目的]探究FITC和壳聚糖不同物料比对反应产物标记率和特性粘数的影响,并研究2种不同pH值下FITC-Chitosan吸收光谱和荧光光谱的变化。[方法]采用异硫氰酸荧光素对壳聚糖进行荧光标记,考查不同物料比时荧光素与壳聚糖的结合情况、产物的特性粘数以及标记物在pH值1.0、6.0的吸收光谱和荧光光谱。[结果]结果表明,物料比在小于0.5%时,标记物的特性粘数变化较小,适合用于标记壳聚糖;FITC-Chitosan在pH值1.0时可见吸收波长为438 nm,荧光激发波长440 nm,发射波长520 nm;在pH值6.0时可见吸收波长为488 nm,荧光激发波长493 nm,发射波长515 nm。[结论]该研究为FITC-Chitosan获得更深入的关注和更广泛的应用提供了试验依据。 展开更多

关键词 壳聚糖 异硫氰酸荧光素 荧光标记

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季铵盐壳聚糖纳米荧光探针的制备及细胞渗入研究 被引量：5

17

作者 刘璠娜 饶华新 张子勇 《功能材料》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期857-860,863,共5页

将异硫氰酸荧光素（FITC）接枝到N，N，N-三甲基壳聚糖盐酸盐（TMC）的侧基上，制备了荧光标记的壳聚糖衍生物TMC-g-FITC。其水溶液与羧甲基壳聚糖（CMC）水溶液经凝聚复合，制备了TMC-g-FITC／CMC纳米粒子荧光探针。用激光散射仪和透... 将异硫氰酸荧光素（FITC）接枝到N，N，N-三甲基壳聚糖盐酸盐（TMC）的侧基上，制备了荧光标记的壳聚糖衍生物TMC-g-FITC。其水溶液与羧甲基壳聚糖（CMC）水溶液经凝聚复合，制备了TMC-g-FITC／CMC纳米粒子荧光探针。用激光散射仪和透射电镜表征了该纳米荧光探针的粒径、粒径分布、Zeta电位值和形态结构。结果表明，纳米粒子的粒径在150-360nm范围，粒径分布约为0．10，Zeta电荷值为正值。用MTT法检测了其细胞毒性，发现纳米粒子对细胞的抑制作用较弱，在实验浓度下细胞的抑制率均低于7％。通过激光共聚焦显微镜研究了TMC-g-FITC／CMC纳米粒子荧光探针对HepG2细胞的渗透和迁移过程：纳米粒子先是在细胞周围富集，然后逐渐渗入细胞的内部，最后直至进入细胞核。 展开更多

关键词 N N N-三甲基壳聚糖盐酸盐 羧甲基壳聚糖 异硫氰酸荧光素 纳米粒子 荧光探针

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抗内毒素IgY体外拮抗内毒素效应的实验研究 被引量：5

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作者 李强 张雅萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期608-610,共3页

目的　观察抗内毒素鸡卵黄抗体 (IgY)在体外拮抗内毒素 (LPS)的作用。方法　①用不同浓度IgY与LPS直接体外中和作用 ,检测剩余LPS的量 ,观察二者的量效关系 ;②以培养的原代人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)为模型 ,加入一定浓度的FITC LPS及Ig... 目的　观察抗内毒素鸡卵黄抗体 (IgY)在体外拮抗内毒素 (LPS)的作用。方法　①用不同浓度IgY与LPS直接体外中和作用 ,检测剩余LPS的量 ,观察二者的量效关系 ;②以培养的原代人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)为模型 ,加入一定浓度的FITC LPS及IgY ,观察各时相点细胞的荧光强弱变化 ;③加入一定浓度的LPS及IgY ,观察各时相点培养上清液中乳酸脱氢酶 (LDH)的活性变化。结果　①当二者浓度比为 16∶1时 ,有较好的量效关系 ;②在 4、8、12h 3个时相点 ,单纯FITC LPS结合组细胞均显示较亮的荧光 ,且强弱没有明显的区别 ,在IgY拮抗组的 3个时相点 ,荧光均有减弱 ,以 8、12h较明显 ;③LDH的活性在LPS攻击 8h后明显升高 (P <0 0 1) ,IgY拮抗组LDH的活性在 8h后明显降低 (P <0 0 1)。结论　在体外 ,特异性IgY有较强的拮抗LPS的作用。 展开更多

关键词 鸡卵黄抗体 内毒素 人脐静脉内皮细胞 乳酸脱氢酶 异硫氰荧光素-内毒素

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不同聚合度壳寡糖单体在小鼠体内的吸收分布 被引量：1

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作者 王斌 汪玲 +3 位作者 闫华 姜启兴 于沛沛 夏文水 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第1期115-123,共9页

荧光探针标记操作简单且荧光的检测灵敏度比紫外-可见光谱等传统方法高3~4个数量级,故本实验借助荧光探针测定并分析不同聚合度壳寡糖单体在小鼠体内的吸收分布。制备异硫氰酸荧光素标记的壳寡糖单体并灌胃小鼠,借助小动物活体光学成像... 荧光探针标记操作简单且荧光的检测灵敏度比紫外-可见光谱等传统方法高3~4个数量级,故本实验借助荧光探针测定并分析不同聚合度壳寡糖单体在小鼠体内的吸收分布。制备异硫氰酸荧光素标记的壳寡糖单体并灌胃小鼠,借助小动物活体光学成像系统和荧光定量检测,分析聚合度2~5的壳寡糖单体在小鼠体内吸收分布的差异性。结果显示,荧光标记的壳寡糖单体灌胃小鼠1 h后,在小鼠体内的荧光信号达到最大分布,壳寡糖能吸收入血,并跨过血脑屏障分布到脑组织中,主要分布在肾和肝脏中,其次分布在心和脾,少量分布在肺和脑;不同聚合度壳寡糖单体在肾和肝的分布量与聚合度呈正相关,而在血清、心、脾、肺和脑中的峰值分布量为壳二糖最多,壳四糖其次,壳五糖最少。明确不同聚合度壳寡糖单体的体内吸收分布的差异性,对于壳寡糖功能活性的构效关系研究具有一定的指导意义,能为壳寡糖的功能活性机制研究以及加快壳寡糖在食品功能性食品的开发和应用提供参考。 展开更多

关键词 壳寡糖 聚合度 异硫氰酸荧光素 吸收分布 活体成像

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诊断超声对HEK-293细胞凋亡的影响及其机制 被引量：1

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作者 徐晓红 罗毅 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2008年第11期1678-1680,共3页

目的探讨诊断超声照射对体外培养的HEK-293细胞凋亡的影响。方法采用HEK-293细胞,构建超声照射模型,采用4个超声照射剂量浓度(0min、10min、20min和30min),每个浓度设3个平行瓶,重复三次。处理后行An-nexin V-FITC/PI双染,流式细胞仪行... 目的探讨诊断超声照射对体外培养的HEK-293细胞凋亡的影响。方法采用HEK-293细胞,构建超声照射模型,采用4个超声照射剂量浓度(0min、10min、20min和30min),每个浓度设3个平行瓶,重复三次。处理后行An-nexin V-FITC/PI双染,流式细胞仪行凋亡细胞计数;免疫细胞化学检测Caspase-3凋亡蛋白表达水平的变化。结果An-nexin V-FITC/PI双染色显示,随着超声照射剂量的增加,流式计数的细胞凋亡率增加,20min组具有统计学意义(P<0.05),30min组具有显著统计学意义(P<0.01);同时可使凋亡蛋白酶Caspase-3表达水平增加。结论特定剂量的超声聚焦照射可引起部分细胞凋亡改变,并具有一定量效关系。 展开更多

关键词 超声检查 凋亡 钙磷酯结合蛋白 荧光素-5-异硫氰酸盐 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3

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