应用Ca^(2+)荧光探针fluo-3和fluo-4测定H_2O_2诱导的A549细胞凋亡过程中的[Ca^(2+)]_i变化 被引量：7

1

作者 张四洋 李春艳 +2 位作者 高建 邱雪杉 崔泽实 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期197-202,共6页

背景与目的肺癌是世界范围内常见的恶性肿瘤,Ca2+对于肿瘤细胞凋亡有重要的调控作用。实时监测肺癌细胞内Ca2+水平,有助于深入研究Ca2+介导肺癌细胞凋亡的分子机制。本研究旨在观察Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4在H2O2诱导的A549细胞凋亡... 背景与目的肺癌是世界范围内常见的恶性肿瘤,Ca2+对于肿瘤细胞凋亡有重要的调控作用。实时监测肺癌细胞内Ca2+水平,有助于深入研究Ca2+介导肺癌细胞凋亡的分子机制。本研究旨在观察Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4在H2O2诱导的A549细胞凋亡过程中的应用,实时测定胞浆Ca2+浓度([Ca2+]i),探讨[Ca2+]i与细胞凋亡的关系,并比较两种Ca2+探针在荧光强度及[Ca2+]i测定值方面的差异。方法采用Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4负载细胞,1 h后用不同浓度的H2O2刺激细胞,激光扫描共聚焦显微镜实时测定选取细胞的[Ca2+]i变化。采用DAPI染色试剂盒观察H2O2刺激后细胞凋亡情况。结果在相同的探针浓度、负载时间和相同的图像采集参数的条件下,选定细胞内fluo-4平均荧光强度高于fluo-3。50 mM H2O2刺激后,A549细胞胞浆内[Ca2+]i迅速升高,通过公式计算发现采用fluo-3探针负载的选定细胞中[Ca2+]i变化范围是112.2 nM-1,069.6 nM,采用fluo-4探针负载的选定细胞中[Ca2+]i变化范围是7.6nM-505.4 nM。同时发现经H2O2刺激后,凋亡细胞百分比明显增加(P<0.01)。结论 H2O2促进A549细胞内Ca2+释放,诱导细胞凋亡。Ca2+探针fluo-4可能更适合于监测含量较低的细胞中[Ca2+]i变化。 展开更多

关键词 fluo-3 fluo-4 CA^2+ H2O2 细胞凋亡

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采用Fluo-3 AM-ester探针研究桃不同组织的Ca^2＋信号分布 被引量：2

2

作者 鲁振华 王志强 +3 位作者 彭斌 牛良 崔国朝 刘淑娥 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期915-917,I0001,共4页

钙作为植物最重要的矿质元素之一,在植物生理和生化活动中起重要作用。采用激光扫描共聚焦显微镜,以Fluo-3 AM-ester为荧光探针研究了桃果肉和叶柄组织中Ca2+的分布,结果表明Fluo-3 AM-ester可作为荧光探针对桃不同组织中游离的Ca2+信... 钙作为植物最重要的矿质元素之一,在植物生理和生化活动中起重要作用。采用激光扫描共聚焦显微镜,以Fluo-3 AM-ester为荧光探针研究了桃果肉和叶柄组织中Ca2+的分布,结果表明Fluo-3 AM-ester可作为荧光探针对桃不同组织中游离的Ca2+信号强度和分布特征进行分析。不同的物镜观察(10×和20×)下,Ca2+荧光信号相对强度差异不大;在叶柄中Ca2+荧光信号主要分布于维管束,在果实中多分布于细胞壁;但叶柄中荧光信号分布明显高于果肉组织,这与钙在不同组织中的功能有关。 展开更多

关键词 桃 Ca2+信号 激光扫描共聚焦显微镜 fluo-3AM-ester

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激光扫描共聚焦显微镜和Fluo-3/AM检测细胞内游离钙 被引量：3

3

作者 霍霞 鲍永耀 +2 位作者 黄辉 黄行许 朴英杰 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期35-37,共3页

利用细胞培养技术，Ｃａ２＋敏感荧光探针Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ标记细胞，激光扫描共聚焦显微镜检测鸡胚胎巨噬细胞内游离钙浓度（〔Ｃａ２＋〕ｉ）的变化。结果显示细菌脂多糖（ＬＰＳ）可引起培养的鸡胚胎巨噬细胞内〔Ｃａ２＋〕ｉ升高... 利用细胞培养技术，Ｃａ２＋敏感荧光探针Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ标记细胞，激光扫描共聚焦显微镜检测鸡胚胎巨噬细胞内游离钙浓度（〔Ｃａ２＋〕ｉ）的变化。结果显示细菌脂多糖（ＬＰＳ）可引起培养的鸡胚胎巨噬细胞内〔Ｃａ２＋〕ｉ升高，ＬＰＳ的作用可被维拉帕米部分抑制。本实验表明激光扫描共聚焦显微镜结合Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ能准确迅速地检测单个或多个贴壁粘附细胞胞内〔Ｃａ２＋〕ｉ的动态变化，并同步观察细胞的形态及其荧光分布情况。 展开更多

关键词 激光扫描 共聚焦显微镜 钙 巨噬细胞 显微镜

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2,3,7,8-TCDD对培养乳鼠心肌细胞内游离钙离子浓度影响的研究 被引量：3

4

作者 孙黎黎 常青 +2 位作者 梁志清 余资江 糜建红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第20期2048-2050,共3页

目的测定培养SD大鼠乳鼠心肌细胞内游离钙离子浓度[Ca2+]i,观察2,3,7,8四氯二苯并二噁英(2,3,7,8tetrachlorodibenzopdioxin,以下略为TCDD)对心肌细胞[Ca2+]i的影响。方法将实验动物分为0.05、0.5、5、10μg/kg4个染毒组,采用Fluo3/AM... 目的测定培养SD大鼠乳鼠心肌细胞内游离钙离子浓度[Ca2+]i,观察2,3,7,8四氯二苯并二噁英(2,3,7,8tetrachlorodibenzopdioxin,以下略为TCDD)对心肌细胞[Ca2+]i的影响。方法将实验动物分为0.05、0.5、5、10μg/kg4个染毒组,采用Fluo3/AM同时加入PluronicF127作为细胞内游离钙离子的荧光探针,负载培养的心肌细胞,应用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)技术检测空白组及染毒组乳鼠心肌细胞[Ca2+]i。结果静息时,心肌细胞[Ca2+]i为(77.68±12.00)nmol/L。染毒组心肌细胞的[Ca2+]i显示不同程度的升高,且呈剂量依赖性。结论应用Fluo3/AM和PluronicF127结合CLSM技术可以精确的反映细胞内游离钙离子浓度,TCDD可能通过某种机制增加心肌细胞[Ca2+]i,从而对乳鼠心脏功能产生一定损伤。 展开更多

关键词 TCDD 心肌细胞 钙离子 fluo-3/AM

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多非替利衍生物CPU228(V03)对大鼠心室肌细胞钙瞬变的调节

5

作者 黄志江 林生 +4 位作者 戴德哉 纳涛 吉民 赵小辰 孙立 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第2期121-127,共7页

目的 :在β 受体激动情况下 ,研究多非替利衍生物CPU 2 2 8对电刺激触发心肌细胞的胞浆Ca2 + 浓度([Ca2 + ]i)变化及钙瞬变动力学参数的影响。方法 :游离单个大鼠心室肌细胞 ,Fluo 3 AM负载 ,电刺激诱发心室肌细胞钙瞬变 ,定量测定心室... 目的 :在β 受体激动情况下 ,研究多非替利衍生物CPU 2 2 8对电刺激触发心肌细胞的胞浆Ca2 + 浓度([Ca2 + ]i)变化及钙瞬变动力学参数的影响。方法 :游离单个大鼠心室肌细胞 ,Fluo 3 AM负载 ,电刺激诱发心室肌细胞钙瞬变 ,定量测定心室肌细胞内Ca2 +浓度变化 ,异丙肾上腺素 (isoproterenol,ISO) 10 0nmol·L-1激动β 受体 ,观察CPU 2 2 81μmol·L-1对钙瞬变动力学参数、[Ca2 + ]i 及钙负荷水平的影响。结果 :CPU2 2 81μmol·L-1对大鼠心室肌细胞 [Ca2 + ]i 的影响不明显 (P >0 .0 5 ) ;ISO 10 0nmol·L-1显著升高大鼠心室肌细胞 [Ca2 + ]i 和细胞内钙负荷水平 ,缩短钙瞬变时程 ,并且增加钙瞬变的消除速率。CPU 2 2 81μmol·L-1显著抑制ISO的上述作用。结论 :在β 受体激动情况下 ,CPU 2 2 8可以降低心肌细胞 [Ca2 + ]i,使ISO改变的钙瞬变动力学参数恢复到正常水平。 展开更多

关键词 CPU 228 心室肌细胞 异丙肾上腺素 钙瞬变 fluo-3

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用Fluo3-AM测定2型糖尿病患者淋巴细胞内Ca^(2+)浓度及药物对患者胞内Ca^(2+)浓度的影响 被引量：6

6

作者 章立 李新荣 +1 位作者 徐蘅 张鉴棠 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期451-455,共5页

用 Fluo 3- AM为荧光探针 ,测定 2型糖尿病患者淋巴细胞内 Ca2 +浓度 ,观察了肾上腺素、多巴酚丁胺、Bay K 864 4、胰岛素等药物对胞内 Ca2 +的作用机制。实验表明患者胞浆内 Ca2 +浓度与正常人相比显著升高 ;药物对胞内 Ca2 +的刺激表... 用 Fluo 3- AM为荧光探针 ,测定 2型糖尿病患者淋巴细胞内 Ca2 +浓度 ,观察了肾上腺素、多巴酚丁胺、Bay K 864 4、胰岛素等药物对胞内 Ca2 +的作用机制。实验表明患者胞浆内 Ca2 +浓度与正常人相比显著升高 ;药物对胞内 Ca2 +的刺激表明 ,病人对外界钙激动剂更敏感。胰岛素能刺激胞内 Ca2 +浓度升高 ,其作用机制是激活钙离子通道。肾上腺素不仅能激活钙离子通道 ,也能促使钙从钙池中释放。上述研究也表明 Fluo- 3是有效的研究胞内 Ca2 +变化的荧光探针。 2型糖尿病的发生可能与 Ca2 +浓度升高有关 。 展开更多

关键词 细胞内游离钙 糖尿病 淋巴细胞 NIDDM

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九节龙皂甙对Hela细胞生长的抑制作用 被引量：16

7

作者 梁克明 谢艳华 +2 位作者 石梅 王四旺 王晓娟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期725-728,共4页

目的　观察九节龙皂甙 (Ardiusilloside)对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用。方法　九节龙皂甙 6 2 5mg·L-1处理Hela细胞 0～ 72h ,在不同时间点采用光镜观察Hela细胞形态 ,以琼脂糖凝胶电泳检测Hela细胞凋亡DNA的梯形带 ;应用特异性Ca... 目的　观察九节龙皂甙 (Ardiusilloside)对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用。方法　九节龙皂甙 6 2 5mg·L-1处理Hela细胞 0～ 72h ,在不同时间点采用光镜观察Hela细胞形态 ,以琼脂糖凝胶电泳检测Hela细胞凋亡DNA的梯形带 ;应用特异性Ca2 + 荧光探测剂Fluo 3 /AM在LSCM条件下检测不同时期细胞内Ca2 + 分布情况。结果　光镜下体外培养的Hela细胞在九节龙皂甙作用 2 4h开始出现细胞质皱缩和细胞核凝缩等凋亡的形态学特征。 60、72h均检测出DNA梯形带等凋亡的生物化学特征。诱导Hela细胞48、60、72h内Ca2 + 严重超载且维持在较高浓度水平。结论　九节龙皂甙对体外培养的Hela细胞具有明显的抑制作用且诱导Hela细胞凋亡发生 ;细胞凋亡时细胞内 [Ca2 + 展开更多

关键词 细胞凋亡 胞内钙 fluo-3 中药 植物药 子宫颈癌 九节龙皂甙 HELA细胞生长 抑制作用

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黄芪甲苷对心肌细胞L型钙电流及细胞内钙的影响 被引量：6

8

作者 赵美眯 孙雪菲 +7 位作者 连雯雯 胡慧媛 王燕 曾本清 封瑞 高青华 赵金生 郝丽英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1373-1377,共5页

目的研究黄芪甲苷(astragaloside IV,AS-IV)对豚鼠心室肌细胞L型钙电流和细胞内钙的影响。方法分离单个豚鼠心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术测定钙电流,并采用荧光显微镜CCD成像系统动态观察细胞内钙(intracellular calcium concentrat... 目的研究黄芪甲苷(astragaloside IV,AS-IV)对豚鼠心室肌细胞L型钙电流和细胞内钙的影响。方法分离单个豚鼠心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术测定钙电流,并采用荧光显微镜CCD成像系统动态观察细胞内钙(intracellular calcium concentration,[Ca2+]i)变化。结果 1×10-6mol·L-1AS-IV可明显抑制I Ca-L,使最大电流峰值降低32.6%。AS-IV对60 mmol·L-1KCl诱导的[Ca2+]i升高有抑制作用,最大荧光密度变化值从1.17±0.30(n=6)降低到0.26±0.16(n=5,P<0.05)。AS-IV可直接促进钙池内钙释放,使[Ca2+]i从0.08±0.02(n=10)升高到0.23±0.07(n=8,P<0.05)。结论 AS-IV抑制L型钙通道,可减少细胞外钙内流;同时它促进内钙释放,对心肌细胞内钙稳态表现为双向调节作用。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 膜片钳技术 钙电流 细胞内钙 心肌细胞 fluo-3

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西红花苷对培养的牛内皮细胞内钙的调节作用 被引量：12

9

作者 绪广林 钱之玉 任萱 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期445-447,共3页

目的 观察西红花苷对不同刺激因子5-羟色胺（5-HT）、组胺（His）、过氧化氢（H2O2）所致内皮细胞内钙升高的影响。方法 采用Fluo-3/AM荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦扫描显微镜上测定培养的单个牛内皮细胞内游离钙的浓度。结果 在含... 目的 观察西红花苷对不同刺激因子5-羟色胺（5-HT）、组胺（His）、过氧化氢（H2O2）所致内皮细胞内钙升高的影响。方法 采用Fluo-3/AM荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦扫描显微镜上测定培养的单个牛内皮细胞内游离钙的浓度。结果 在含钙的Hank’s液中,5-经色胺、组胺、过氧化氢能明显升高静息状态的细胞内钙,增幅分别为280％、320％、285％。西红花苷1、10μmol/L对5-羟色胺、组胺、过氧化氢引起的钙增高有显著的抑制作用,并呈一定的剂量依赖性。0.1μmol/L西红花苷对细胞内钙升高无显著影响。结论 西红花苷抗动脉粥样硬化、高血压及炎症作用可能与其内皮细胞保护作用有关。 展开更多

关键词 西红花苷 fluo-3/AM 激光共聚焦扫描显微镜 内皮细胞 细胞内钙 心血管病

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丹酚酸B镁抑制ATP和KCl诱导大鼠主动脉平滑肌细胞内钙的升高 被引量：18

10

作者 田霞 王逸平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期311-316,共6页

目的 研究丹酚酸B镁（Magnesium lithospermate B，MLB）对去内皮离体血管舒缩反应以及对血管平滑肌细胞内游离钙浓度[Ca^2＋]i的影响。方法 去内皮大鼠胸主动脉血管环等张收缩实验和采用钙离子荧光指示剂Fluo-3，运用F-4500阳离子测定... 目的 研究丹酚酸B镁（Magnesium lithospermate B，MLB）对去内皮离体血管舒缩反应以及对血管平滑肌细胞内游离钙浓度[Ca^2＋]i的影响。方法 去内皮大鼠胸主动脉血管环等张收缩实验和采用钙离子荧光指示剂Fluo-3，运用F-4500阳离子测定系统动态检测胸主动脉平滑肌细胞[Ca^2＋]i。结果 血管舒缩实验显示，无钙或常钙条件下MLB对血管基础张力均无作用。MLB 50～200μmol·L^-1预给药组抑制无钙条件下苯肾上腺素（PE）μmol·L^-1诱导的血管收缩以及常钙条件下KCl60mmol·L^-1诱导的血管收缩，并呈浓度相关性。而钙离子通道阻滞剂维拉帕米（Ver）10μnol·L^-1则完全阻断KCl诱导的血管收缩。在复钙实验中观察到，MLB50～200μmol·L^-1不仅抑制PE1μmol·L^-1“诱导的内钙依赖性血管收缩，而且对复钙后外钙依赖性的血管收缩也有抑制作用。细胞内钙测定实验表明。MLB预孵育的AVSMCs静息态[Ca^2＋]i没有变化。无钙条件下，MLB50、100和200μmol·L^-1抑制ATP20μmol·L^-1诱导内钙释放引起的[Ca^2＋]i升高，抑制率分别为17．4％、32．4％和61．1％，显示较好的浓度相关性。AVSMCs于常钙条件下用Thapsigargin耗竭钙库后，KCl60mmol·L^-1诱发外钙内流，引起[Ca^2＋]i升高，10μmol·L^-1的Ver则能完全阻断这种外钙内流。在MLB预给药组，KCl诱导的[Ca^2＋]；升高降低，抑制率分别为20．0％、32．8％和52．6％。结论 MLB能够抑制PE、高K^＋和复Ca^2＋诱导的血管收缩，并能抑制ATP和KCl诱导的血管平滑肌细胞内钙的升高，提示MLB对血管平滑肌细胞内钙的影响可能与抑制细胞内钙释放和电压依赖性钙通道有关。 展开更多

关键词 丹酚酸B镁 血管收缩 血管平滑肌细胞 细胞内钙 fluo-3

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共聚焦激光扫描显微镜技术在研究大鼠海马神经元胞内钙超载中的应用 被引量：4

11

作者 黄娅林 赵鹏 程介士 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期98-100,104,F003,共5页

目的 观察抑制性氨基酸牛磺酸对兴奋性氨基酸谷氨酸所致胞内钙超载的影响。方法 选择Fluo-3／ AM对培养的海马神经元进行着色后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)实时 扫描,动态显示海马神经元二维图像... 目的 观察抑制性氨基酸牛磺酸对兴奋性氨基酸谷氨酸所致胞内钙超载的影响。方法 选择Fluo-3／ AM对培养的海马神经元进行着色后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)实时 扫描,动态显示海马神经元二维图像,以计算机相应软件对胞内钙的荧光强度变化进行分析统计。结果 在 0.5 mmol／L谷氨酸作用下,胞内钙荧光强度迅速升高(P<0.001);0.5 mmol／L谷氨酸与3 mmol／L牛磺酸共同 作用于海马神经元时,胞内钙荧光强度明显降低(P<0.001);灌流液中去除牛磺酸后,胞内钙荧光强度上升(P <0.001)。结论 抑制性氨基酸牛磺酸可抑制由兴奋性氨基酸谷氨酸所致神经元的胞内钙超载;CLSM以其独 特的优势,在高清晰度地显示海马神经元形态的同时,也可动态地观察活细胞在不同环境下胞内钙的快速变化 以及定量分析。该技术在动态观察和二维图像的高分辨率上比传统测钙方法有更大的优越性。 展开更多

关键词 钙超载 海马神经元 共聚焦激光扫描显微镜 牛磺酸 谷氨酸 CLSM 大鼠海马 荧光强度 活细胞 fluo-3/AM

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荧光指示剂孵育法测定小麦叶肉细胞原生质体胞质游离Ca^(2+)的变化 被引量：5

12

作者 刘刚 刘娜 +4 位作者 侯春燕 韩胜芳 张洁 赵军峰 王冬梅 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期25-28,共4页

研究以孵育法将Ca2+荧光探针Fluo-3AM载入小麦叶肉细胞原生质体胞质中,并结合激光共聚焦扫描显微技术,建立了测定原生质体胞质游离Ca2+动态变化的试验方法。

关键词 fluo-3AM 胞质游离Ca^2+ 原生质体 激光共聚焦扫描显微镜

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拟南芥叶细胞游离钙离子的测定 被引量：11

13

作者 孙清鹏 王小菁 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期79-82,共4页

低温(4℃)条件下将钙离子荧光探针Fluo-3/AM导入拟南芥叶细胞,利用激光共聚焦显微技术检测了胞内钙离子荧光强度的分布。实验证明,低温导入Fluo-3/AM法测定拟南芥叶细胞中钙离子荧光强度的变化切实可行。茉莉酸(JA)处理能够诱导胞内游... 低温(4℃)条件下将钙离子荧光探针Fluo-3/AM导入拟南芥叶细胞,利用激光共聚焦显微技术检测了胞内钙离子荧光强度的分布。实验证明,低温导入Fluo-3/AM法测定拟南芥叶细胞中钙离子荧光强度的变化切实可行。茉莉酸(JA)处理能够诱导胞内游离钙离子浓度的升高。 展开更多

关键词 拟南芥 fluo-3/AM 钙离子 茉莉酸

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赛拉嗪麻醉对大鼠大脑皮质神经细胞游离钙离子浓度的影响 被引量：2

14

作者 李志强 李小波 +3 位作者 石星星 尹柏双 范宏刚 王洪斌 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第4期3-4,8,共3页

为了研究赛拉嗪麻醉对大鼠大脑皮质神经细胞游离钙离子浓度的影响,将15只SD大鼠在无菌条件下处死,分离脑组织、制备脑神经细胞悬液,分为对照组、KCl组、赛拉嗪低剂量组和赛拉嗪高剂量组。用Fluo-3/AM负载,除对照组外其他组使用50mmol/L... 为了研究赛拉嗪麻醉对大鼠大脑皮质神经细胞游离钙离子浓度的影响,将15只SD大鼠在无菌条件下处死,分离脑组织、制备脑神经细胞悬液,分为对照组、KCl组、赛拉嗪低剂量组和赛拉嗪高剂量组。用Fluo-3/AM负载,除对照组外其他组使用50mmol/L的KCl刺激,药物组加入药物,然后用流式细胞仪检测钙离子荧光强度。结果显示,对照组荧光强度最低,赛拉嗪低剂量组较KCl组显著增加(P<0.05),赛拉嗪高剂量组较KCl组极显著增加(P<0.01)。结果表明,Ca2+是赛拉嗪全麻作用的主要靶位之一,而且其中枢抑制效应与增加神经细胞内[Ca2+]i有关。 展开更多

关键词 赛拉嗪 神经细胞 CA2+ fluo-3/AM 流式细胞仪

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脑热清对小鼠的腹腔巨噬细胞内游离钙及活性氧的作用

15

作者 岳晓莉 王芳 +2 位作者 李萍 张颖 蒋玉凤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1642-1642,共1页

目的:实时监测脑热清口服液(NRQ)对小鼠腹腔巨噬细胞内活性氧(ROS)及游离钙([Ca2+]i)的作用.方法:取小鼠腹腔巨噬细胞,原代培养24小时,分别以荧光探针二氯荧光素二酯(H2 DCFDA)和Fluo-3-AM标记细胞内ROS及[Ca2+]i,并用EDTA和维拉帕米螯... 目的:实时监测脑热清口服液(NRQ)对小鼠腹腔巨噬细胞内活性氧(ROS)及游离钙([Ca2+]i)的作用.方法:取小鼠腹腔巨噬细胞,原代培养24小时,分别以荧光探针二氯荧光素二酯(H2 DCFDA)和Fluo-3-AM标记细胞内ROS及[Ca2+]i,并用EDTA和维拉帕米螯合细胞外钙,阻断细胞膜钙离子通道,通过激光共聚焦显微系统动态观察NRQ的作用. 展开更多

关键词 小鼠腹腔巨噬细胞 细胞内游离钙 细胞内活性氧 脑热清口服液 fluo-3-AM [CA^2+]I 细胞内ROS 二氯荧光素 钙离子通道

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清开灵对小鼠腹腔巨噬细胞内游离钙及活性氧的作用

16

作者 王芳 岳晓莉 +2 位作者 李萍 张颖 蒋玉凤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1637-1637,共1页

目的:动态观察清开灵(QKL)对小鼠腹腔巨噬细胞内活性氧及游离钙的作用.方法:原代培养小鼠腹腔巨噬细胞,分别以荧光探针二氯荧光素二酯(H2 DCFDA)和Fluo-3-AM标记细胞内活性氧及游离钙,通过激光共聚焦系统动态观察QKL的作用.

关键词 小鼠腹腔巨噬细胞 细胞内游离钙 细胞内活性氧 清开灵 fluo-3-AM 动态观察 二氯荧光素 激光共聚焦 原代培养

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布比卡因对大鼠心室肌细胞内钙的影响 被引量：4

17

作者 祝袆 徐龙河 张宏 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第8期865-868,共4页

目的:运用激光扫描共聚焦显微镜观察不同浓度的布比卡因对KCl诱导的大鼠心室肌细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,进而探讨布比卡因心肌抑制作用的可能机制。方法:培养新生SD大鼠心室肌细胞,将培养的心室肌细胞随机分为4组,分别为对... 目的:运用激光扫描共聚焦显微镜观察不同浓度的布比卡因对KCl诱导的大鼠心室肌细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,进而探讨布比卡因心肌抑制作用的可能机制。方法:培养新生SD大鼠心室肌细胞,将培养的心室肌细胞随机分为4组,分别为对照组(C组)、10μmol/L布比卡因组(B1组)、50μmol/L布比卡因组(B2组)、100μmol/L布比卡因组(B3组)。各组细胞均用钙荧光指示剂Fluo-3/AM染色,运用激光扫描共聚焦显微镜动态观察单个心室肌细胞内钙荧光强度(fluorescent intensity,FI)的变化。结果:与对照组比较10μmol/L的布比卡因对KCl诱导的大鼠心室肌细胞内钙FI变化无明显影响(P>0.05),50μmol/L和100μmol/L的布比卡因则明显抑制KCl诱导的钙离子跨膜内流(P<0.05);抑制程度B3组>B2组(P<0.05)。结论:低浓度的布比卡因对KCl诱导的大鼠心室肌细胞内[Ca2+]i的变化无明显影响,高浓度则明显抑制钙离子跨膜内流。布比卡因呈浓度依赖性抑制兴奋收缩耦联时心室肌细胞内游离钙离子内流,可能是其心肌抑制作用的原因之一。 展开更多

关键词 布比卡因 心室肌细胞 激光扫描共聚焦显微镜 细胞内钙离子 fluo-3

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增强UV-B辐射对小麦根尖细胞游离钙离子分布的影响 被引量：2

18

作者 王亚妮 韩榕 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1622-1626,共5页

以小麦根尖为材料,利用低温装载法在根尖细胞中成功地装载了酯化形式的钙离子荧光指示剂fluo-3/AM,利用激光共聚焦显微技术检测了增强UV-B辐射后小麦根尖细胞内游离钙离子荧光强度的分布,并对胞质内游离钙离子浓度进行了测定.结果表明：... 以小麦根尖为材料,利用低温装载法在根尖细胞中成功地装载了酯化形式的钙离子荧光指示剂fluo-3/AM,利用激光共聚焦显微技术检测了增强UV-B辐射后小麦根尖细胞内游离钙离子荧光强度的分布,并对胞质内游离钙离子浓度进行了测定.结果表明：（1）对照组小麦根尖细胞内钙离子荧光主要分布于细胞胞质周缘;而经UV-B辐射处理后,细胞内钙离子荧光不仅分布在胞质周缘,且在细胞壁与胞间隙可观察到大量钙离子荧光.（2）对单个细胞内钙离子荧光强度进行测定,发现UV-B处理使细胞胞质内游离钙离子浓度明显升高. 展开更多

关键词 小麦 增强UV-B辐射 游离钙离子 fluo-3/AM

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小檗碱对豚鼠心室肌细胞胞浆内游离钙离子浓度的影响 被引量：21

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作者 董德利 孙建平 +4 位作者 罗大力 陈庆文 王枫 何树庄 杨宝峰 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期128-130,共3页

研究小檗碱对豚鼠心肌细胞胞浆 [Ca2 + ]i 的影响 .用酶解法分离单个豚鼠心肌细胞 ,Fluo- 3/AM标记胞浆内游离钙离子 ,激光扫描共聚焦显微镜实时测定胞浆 [Ca2 + ]i变化 .结果 ,小檗碱 1 -1 0 0 μmol· L-1对正常台氏液中静息状态... 研究小檗碱对豚鼠心肌细胞胞浆 [Ca2 + ]i 的影响 .用酶解法分离单个豚鼠心肌细胞 ,Fluo- 3/AM标记胞浆内游离钙离子 ,激光扫描共聚焦显微镜实时测定胞浆 [Ca2 + ]i变化 .结果 ,小檗碱 1 -1 0 0 μmol· L-1对正常台氏液中静息状态细胞胞浆[Ca2 + ]i 无明显影响 ;小檗碱 1 μmol·L-1对 KCl30mmol·L-1引起的细胞外钙内流有抑制作用 ( P<0 .0 1 ) ,而小檗碱 1 0 0 μmol·L-1对细胞内钙库释放有强烈激动作用 ( P<0 .0 1 ) .结果提示在豚鼠心肌细胞上低浓度小檗碱即能抑制电压依赖性钙通道 ,而高浓度时又能激动细胞内钙库释放 . 展开更多

关键词 小檗碱 心肌细胞胞浆 钙离子

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小檗胺对ROCC介导的血管平滑肌细胞内游离钙的影响 被引量：14

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作者 赵艳玲 李柏岩 +2 位作者 乔国芬 周虹 李文汉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期450-452,共3页

目的　研究小檗胺 (BA)对受体调控性Ca2 +通道介导的家兔胸主动脉血管平滑肌细胞内游离钙 ([Ca2 +]i)的影响。方法　家兔主动脉血管平滑肌以Fluo 3/AM负载 ,通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM )测定 [Ca2 +]i。结果　在细胞外Ca2 +存在的... 目的　研究小檗胺 (BA)对受体调控性Ca2 +通道介导的家兔胸主动脉血管平滑肌细胞内游离钙 ([Ca2 +]i)的影响。方法　家兔主动脉血管平滑肌以Fluo 3/AM负载 ,通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM )测定 [Ca2 +]i。结果　在细胞外Ca2 +存在的条件下 ,BA 30 μmol·L-1不影响静息[Ca2 +]i;但对去甲肾上腺素 (NE) 30mmol·L-1、5 羟色胺 (5 HT) 1μmol·L-1诱导的 [Ca2 +]i 升高有明显的抑制作用。在无胞外钙时 ,对咖啡因 40mmol·L-1诱导的 [Ca2 +]i 升高没有作用。结论　BA对ROCC激活后的外钙内流有明显的抑制作用 ,对内钙释放没有影响。 展开更多

关键词 小檗胺 血管平滑肌细胞 钙 ROCC

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