为利用原核表达系统表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,并评估其免疫原性。从禽腺病毒血清4型病毒中提取fiber-2基因,经密码子优化后构建重组表达载体pET-30a-fiber-2;将所获得的质粒转入原核表达系统,经诱导表达获得fiber-2蛋白;利用获得...为利用原核表达系统表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,并评估其免疫原性。从禽腺病毒血清4型病毒中提取fiber-2基因,经密码子优化后构建重组表达载体pET-30a-fiber-2;将所获得的质粒转入原核表达系统,经诱导表达获得fiber-2蛋白;利用获得的fiber-2蛋白制备疫苗,并以7日龄无特定病原(specific pathogen free,SPF)鸡为免疫对象,采用琼脂凝胶免疫扩散试验(agar gel precipitation,AGP)测定抗体效价,并开展攻毒保护试验。结果显示:重组表达载体pET-30a-fiber-2构建成功,fiber-2蛋白为部分可溶性表达;免疫后,SPF鸡体内产生的抗体效价为1∶2~1∶16,且保护效率达到100%。结果表明,该研究成功利用原核表达系统高效表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,且该蛋白具有良好的免疫原性,为禽腺病毒相关亚单位疫苗的研发提供新的思路。展开更多
为评价Ⅰ群禽腺病毒(4型)Fiber-2重组蛋白亚单位疫苗的免疫保护效果,本研究利用FAV-HN株Fiber-2基因构建pET-30a-Fiber-2重组质粒,转化至BL21感受态诱导表达Fiber-2重组蛋白;Fiber-2蛋白纯化后制备不同抗原含量的亚单位疫苗,免疫SPF鸡...为评价Ⅰ群禽腺病毒(4型)Fiber-2重组蛋白亚单位疫苗的免疫保护效果,本研究利用FAV-HN株Fiber-2基因构建pET-30a-Fiber-2重组质粒,转化至BL21感受态诱导表达Fiber-2重组蛋白;Fiber-2蛋白纯化后制备不同抗原含量的亚单位疫苗,免疫SPF鸡进行免疫效力评价。结果表明,Fiber-2蛋白部分为可溶性表达,纯化后纯度约90%,AGP效价达1∶64。亚单位疫苗抗原含量AGP效价不低于1∶2时,SPF鸡免疫后第21 d AGP抗体10/10阳性,可抵抗Ⅰ群禽腺病毒(4型)强毒株的攻击,提供100%的免疫攻毒保护。展开更多
文摘为利用原核表达系统表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,并评估其免疫原性。从禽腺病毒血清4型病毒中提取fiber-2基因,经密码子优化后构建重组表达载体pET-30a-fiber-2;将所获得的质粒转入原核表达系统,经诱导表达获得fiber-2蛋白;利用获得的fiber-2蛋白制备疫苗,并以7日龄无特定病原(specific pathogen free,SPF)鸡为免疫对象,采用琼脂凝胶免疫扩散试验(agar gel precipitation,AGP)测定抗体效价,并开展攻毒保护试验。结果显示:重组表达载体pET-30a-fiber-2构建成功,fiber-2蛋白为部分可溶性表达;免疫后,SPF鸡体内产生的抗体效价为1∶2~1∶16,且保护效率达到100%。结果表明,该研究成功利用原核表达系统高效表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,且该蛋白具有良好的免疫原性,为禽腺病毒相关亚单位疫苗的研发提供新的思路。
文摘为评价Ⅰ群禽腺病毒(4型)Fiber-2重组蛋白亚单位疫苗的免疫保护效果,本研究利用FAV-HN株Fiber-2基因构建pET-30a-Fiber-2重组质粒,转化至BL21感受态诱导表达Fiber-2重组蛋白;Fiber-2蛋白纯化后制备不同抗原含量的亚单位疫苗,免疫SPF鸡进行免疫效力评价。结果表明,Fiber-2蛋白部分为可溶性表达,纯化后纯度约90%,AGP效价达1∶64。亚单位疫苗抗原含量AGP效价不低于1∶2时,SPF鸡免疫后第21 d AGP抗体10/10阳性,可抵抗Ⅰ群禽腺病毒(4型)强毒株的攻击,提供100%的免疫攻毒保护。
