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组织特异性启动子介导的反义FGF8b RNA对前列腺癌细胞生长增殖能力的影响 被引量:5
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作者 吕英谦 毛泽斌 +3 位作者 周艳艳 韩宽怀 张志文 薛兆英 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期755-761,共7页
利用启动子的组织特异性和治疗基因组织特异表达的特点 ,设计出前列腺癌靶向基因治疗的新方案 .利用DNA重组技术将前列腺组织特异性启动子 (probasin基因启动子 )和在前列腺癌细胞中高表达成纤维细胞生长因子 (FGF) 8b反义cDNA克隆到逆... 利用启动子的组织特异性和治疗基因组织特异表达的特点 ,设计出前列腺癌靶向基因治疗的新方案 .利用DNA重组技术将前列腺组织特异性启动子 (probasin基因启动子 )和在前列腺癌细胞中高表达成纤维细胞生长因子 (FGF) 8b反义cDNA克隆到逆转录病毒载体pSIR中构建成重组体PB 反义FGF8b pSIR .经转染包装细胞PT 6 7后将产生的复制缺陷型逆转录病毒体外感染前列腺癌细胞系PC 3M ,体外检测其生长增殖和侵袭转移能力的变化 .结果表明 ,与对照组相比 ,前列腺癌细胞感染产生反义FGF8bRNA的逆转录病毒后生长速度减慢 ,集落形成能力下降 ,体外侵袭转移能力降低 (P <0 0 1) .体外试验表明 ,前列腺组织特异性启动子介导的反义FGF8bRNA可有效降低前列腺癌细胞的体外生长增殖和转移能力 ,这为体内靶向前列腺癌基因治疗奠定了可靠的基础 . 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子8b 靶向基因治疗 组织特异性启动子 介导 反义fgf8bRNA 前列腺癌细胞 生长增殖能力
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FGF8在神经胚形成和NTD中的表达变化及其与STAT3的关系研究 被引量:1
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作者 纪华 李泽桂 +6 位作者 丁震宇 马路 李红丽 蔡文琴 常智杰 刘力 傅新元 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第14期1436-1439,共4页
目的探讨FGF8在神经胚形成和神经管缺陷(NTD)发生过程中的作用及其可能的分子调控机制。方法采用全胚胎原位杂交技术观察FGF8在胚胎神经胚形成中的表达;通过喂服过量的维甲酸(retinoicacid,RA)诱导NTD模型,观察NTD鼠胚FGF8和STAT3的表... 目的探讨FGF8在神经胚形成和神经管缺陷(NTD)发生过程中的作用及其可能的分子调控机制。方法采用全胚胎原位杂交技术观察FGF8在胚胎神经胚形成中的表达;通过喂服过量的维甲酸(retinoicacid,RA)诱导NTD模型,观察NTD鼠胚FGF8和STAT3的表达变化。结果①在E8·75d整个鼠胚几乎没有FGF8的表达;到E9·5d、E10·5d,在前脑泡的前缘、脑峡部位和神经管的末端观察到较局限的紫蓝色阳性区域,但到E10·5d时,上述3个部位的染色较E9·5d减弱;E11·5d时阳性信号主要集中在中脑部位。②FGF8在NTD鼠胚的表达,E9·5d时脑峡部位的染色减弱,前脑泡的前缘和神经管的尾端染色略有减弱;E10·5d,脑峡部位染色加深,且范围扩大,前脑泡的前缘和神经管的尾端染色较正常减弱。③STAT3在NTD鼠胚的表达,E9·5d和E10·5d时,STAT3的表达较正常鼠胚明显减少,在前脑泡和中脑泡均无明显的STAT3mRNA表达的阳性信号。结论FGF8可能作为STAT3的上游分子,二者共同参与了神经管的关闭。 展开更多
关键词 fgf8 STAT3 神经胚形成 神经管缺陷
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FGF8在脊椎动物早期胚胎发育中的调控作用 被引量:1
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作者 孙翰昌 《四川动物》 CSCD 北大核心 2009年第5期797-799,共3页
成纤维细胞生长因子8(fibroblast growth factor 8,FGF8)是成纤维细胞生长因子家族的成员之一,是一种组织发育过程中的重要分泌性调控信号分子,参与脊椎动物的多种组织器官的发生与发育。早期胚胎细胞通过表达FGF8在组织和器官发育、血... 成纤维细胞生长因子8(fibroblast growth factor 8,FGF8)是成纤维细胞生长因子家族的成员之一,是一种组织发育过程中的重要分泌性调控信号分子,参与脊椎动物的多种组织器官的发生与发育。早期胚胎细胞通过表达FGF8在组织和器官发育、血管发生、血细胞生成、附肢发生和伤口愈合等方面发挥着重要作用。FGF8不但可以在细胞外通过胞内信号通路,而且也可以进入细胞内部发挥生物学功能。本文就FGF8在脊椎动物神经系统、内脏器官、肢体发育及不对称发育等组织、器官发育中的调控作用予以阐述。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子8(fgf8) 脊椎动物 胚胎发育
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草鱼FGF8蛋白的理化特性分析
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作者 孙翰昌 《水生态学杂志》 北大核心 2009年第6期80-84,共5页
运用生物信息学手段对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)FGF8蛋白理化特性进行分析,了解其FGF8蛋白结构及氨基酸组分。结果显示,草鱼FGF8编码的氨基酸多肽链全长210个氨基酸,包含40个碱性氨基酸、16个酸性氨基酸。蛋白质的N端区域包含1个... 运用生物信息学手段对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)FGF8蛋白理化特性进行分析,了解其FGF8蛋白结构及氨基酸组分。结果显示,草鱼FGF8编码的氨基酸多肽链全长210个氨基酸,包含40个碱性氨基酸、16个酸性氨基酸。蛋白质的N端区域包含1个氨基酸序列为MRLIPSRLSYLFLHLFAFCYYA的信号肽,蛋白质N-末端的信号肽被认为是分泌蛋白的明显特征,提示草鱼FGF8蛋白可能是分泌蛋白。氨基酸的一级结构中,在Asn37和Asn136氨基酸位点出现N-糖基化结构,分别为Asn-Phe-Thr和Asn-Tyr-Thr。草鱼FGF8推导蛋白的分子量Mw=24.68kDa,等电点pI=10.93。其二级结构包含α-螺旋、β-转角、β-折叠、随机卷曲等结构形式。 展开更多
关键词 草鱼 fgf8蛋白 理化特性
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FGF8、SHH、FOXL2基因在鸡胚成纤维细胞中的调控作用研究 被引量:1
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作者 张虎军 赵宗胜 +2 位作者 翟曼君 郑炜 李青峰 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2017年第5期625-631,共7页
为了研究SHH、FGF8和FOXL2三个基因在鸡和鹌鹑杂交禽胚胎早期发育中的作用,分别构建鸡SHH、FGF8和FOXL2三个基因共9个RNA干扰载体,构建FGF8基因和SHH基因的过表达载体;将干扰载体和过表达载体分别转染鸡胚成纤维细胞。结果表明:FGF8基... 为了研究SHH、FGF8和FOXL2三个基因在鸡和鹌鹑杂交禽胚胎早期发育中的作用,分别构建鸡SHH、FGF8和FOXL2三个基因共9个RNA干扰载体,构建FGF8基因和SHH基因的过表达载体;将干扰载体和过表达载体分别转染鸡胚成纤维细胞。结果表明:FGF8基因通过MAPK信号通路影响杂交种胚胎早期发育;SHH基因通过Hedgehog信号通路影响杂交种胚胎早期发育;FOXL2基因通过调节DMRT1、SOX9和CYP19等基因的表达变化来影响杂交种胚胎早期发育。本研究可为进一步研究雌性杂交种胚胎早期死亡的原因奠定理论基础。 展开更多
关键词 鸡与鹌鹑杂交 RNA干扰 fgf8基因 SHH基因 FOXL2基因
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改造稀有密码子对rhFGF8a原核表达的影响 被引量:2
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作者 黄明 蒋寅 +2 位作者 周飞燕 付灿 雷文瑾 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期637-638,641,共3页
目的:构建重组人成纤维细胞生长因子8a(rhFGF8a)高效表达载体,提高该蛋白的表达量。方法:采用PCR技术设计引物替换rhFGF8a基因N端的稀有密码子以及稀有终止子,构建原核表达载体pET22b-mrhFGF8a,转化大肠杆菌,用异丙基β硫代半乳糖(IPTG... 目的:构建重组人成纤维细胞生长因子8a(rhFGF8a)高效表达载体,提高该蛋白的表达量。方法:采用PCR技术设计引物替换rhFGF8a基因N端的稀有密码子以及稀有终止子,构建原核表达载体pET22b-mrhFGF8a,转化大肠杆菌,用异丙基β硫代半乳糖(IPTG)诱导表达,Sephacryl S-200纯化表达蛋白,MTT法检测其生物学活性。结果:表达产物经SDS-PAGE、Western blot鉴定,目的蛋白量占全菌蛋白的31%,Sephacryl S-200纯化后蛋白纯度可达97.28%,且具促进NIH3T3细胞增殖活性。结论:通过改造稀有密码子的方法有效地提高了真核基因在原核表达体系中的表达量。 展开更多
关键词 fgf8a 稀有密码子 基因表达
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邻苯二甲酸二丁酯干预Fgfs信号通路致雄性仔鼠尿道下裂发生的分子机制研究 被引量:5
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作者 朱英坚 蒋君涛 +4 位作者 马隆 张捷 洪艳 廖凯 刘国华 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期949-952,共4页
目的:通过验证邻苯二甲酸二丁酯(DBP)孕期染毒所致尿道下裂雄性仔鼠生殖结节内成纤维细胞生长因子(Fgfs)及其受体(Fgfr)信号通路中关键基因的表达异常,探讨其在DBP生殖毒性过程中的作用机制。方法:孕鼠20只,随机分2组,在怀孕(GD)14~18... 目的:通过验证邻苯二甲酸二丁酯(DBP)孕期染毒所致尿道下裂雄性仔鼠生殖结节内成纤维细胞生长因子(Fgfs)及其受体(Fgfr)信号通路中关键基因的表达异常,探讨其在DBP生殖毒性过程中的作用机制。方法:孕鼠20只,随机分2组,在怀孕(GD)14~18天期间,每天分别灌胃给予大豆油、DBP750mg/kg,出生后第1天(PND1),统计仔鼠出生数、尿道下裂发生率,称量雄性仔鼠体重,肛门至生殖器距离(AGD);PND7,取尿道下裂雄性仔鼠生殖结节,用实时定量(real-time quantitative)RT-PCR方法检测生殖结节中Fgf8、Fgf10、Fgfr2的mRNA表达水平。结果:DBP染毒后导致新生仔鼠与正常组相比数量明显减少,雄性仔鼠体重明显下降、AGD明显缩短,雄性仔鼠尿道下裂的发生率为48.83%。同时,与对照组相比,DBP致尿道下裂雄性仔鼠生殖结节中Fgf8、Fgf10、Fgfr2的mRNA的表达水平明显下降。结论:DBP对母体有着明显的毒性作用,DBP干预了Fgfs信号通路中关键基因的表达,这可能是DBP导致生殖结节发育异常,引起尿道下裂的重要原因。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸二丁酯 尿道下裂 生殖结节 fgf8 Fgf10 FGFR2
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Kallmann综合征新进展 被引量:2
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作者 蔡大勇 邵加庆 《医学研究生学报》 CAS 2010年第12期1306-1308,共3页
Kallmann综合征(Kallmann syndrome,KS)是一种少见的遗传疾病,其临床表现以性腺功能减退为主要特征,同时伴有嗅觉丧失或减退。目前已发现3种遗传方式和5个致病相关基因。文中就Kallmann综合征的诊治和遗传学研究进展作一综述。
关键词 KALLMANN综合征 fgf8基因 PROK2基因 PROKR2基因
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