为给猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的流行和地理分布提供有价值的检测手段,以FIPV S蛋白为包被抗原,利用FIPV的特异性单克隆抗体(FIPV MAb 3D8)为竞争抗体,经条件优化,建立一种快速检测FIPV抗体的竞争ELISA法。优化结果表明最佳条件为:包被...为给猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的流行和地理分布提供有价值的检测手段,以FIPV S蛋白为包被抗原,利用FIPV的特异性单克隆抗体(FIPV MAb 3D8)为竞争抗体,经条件优化,建立一种快速检测FIPV抗体的竞争ELISA法。优化结果表明最佳条件为:包被抗原质量浓度10μg/mL,血清稀释度1∶4;FIPV MAb 3D8稀释倍数1∶100,酶标二抗稀释倍数1∶5000;CBS在37℃包被1 h,5%BSA在37℃封闭2 h,FIPV MAb 3D8在37℃孵育1 h,TMD底物显色液37℃避光5 min。临界值PI≥25.76%时为阳性,PI<20.22%为阴性。该方法特异性较强,重复性较好。利用该方法和已发表的其他方法同时对来自宠物医院的62份临床血清样本进行检测,总体符合率为85.5%,表明该方法准确性较高。本研究建立了快速准确测定FIPV抗体的竞争ELISA方法,适用于临床样本检测,为猫传染性腹膜炎的鉴定、防控和流行病学调查提供支持。展开更多
文摘为给猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的流行和地理分布提供有价值的检测手段,以FIPV S蛋白为包被抗原,利用FIPV的特异性单克隆抗体(FIPV MAb 3D8)为竞争抗体,经条件优化,建立一种快速检测FIPV抗体的竞争ELISA法。优化结果表明最佳条件为:包被抗原质量浓度10μg/mL,血清稀释度1∶4;FIPV MAb 3D8稀释倍数1∶100,酶标二抗稀释倍数1∶5000;CBS在37℃包被1 h,5%BSA在37℃封闭2 h,FIPV MAb 3D8在37℃孵育1 h,TMD底物显色液37℃避光5 min。临界值PI≥25.76%时为阳性,PI<20.22%为阴性。该方法特异性较强,重复性较好。利用该方法和已发表的其他方法同时对来自宠物医院的62份临床血清样本进行检测,总体符合率为85.5%,表明该方法准确性较高。本研究建立了快速准确测定FIPV抗体的竞争ELISA方法,适用于临床样本检测,为猫传染性腹膜炎的鉴定、防控和流行病学调查提供支持。
