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猪FcγRⅠ真核表达载体的构建及稳定表达细胞系的建立
1
作者
史平玲
邬成业
+5 位作者
乔松林
张改平
王爱萍
肖治军
祁艳华
卜丹
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第7期909-914,共6页
本研究旨在建立稳定表达猪FcγRⅠ的Marc-145细胞系。从猪肺泡巨噬细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅠ和γ链cDNA,并分别构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅠ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300μg.mL-1)...
本研究旨在建立稳定表达猪FcγRⅠ的Marc-145细胞系。从猪肺泡巨噬细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅠ和γ链cDNA,并分别构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅠ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300μg.mL-1)和G418(400μg.mL-1)共筛选获得稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环和流式细胞术对细胞系进行鉴定。结果表明成功构建了猪FcγRⅠ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系,且表达于转染细胞表面的poFcγRⅠ受体分子能与猪IgG特异结合。本研究为进一步研究奠定了基础。
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关键词
猪
fcγ
r
ⅰ
受体
共转染
MA
r
C-145细胞
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职称材料
复方中药水提物对腹水综合征肉鸡肝脏TGF-β1/Smad通路的影响
被引量：
4
2
作者
李佩岐
康杰
+7 位作者
王珂瑶
王慧敏
韩宇峰
王婷慧
崔亮
张剑
邓瑞强
段智变
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2022年第5期1860-1869,共10页
【目的】研究转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smad通路在肉鸡腹水综合征肝纤维化中的作用及复方中药水提物的防治机理。【方法】选取健康Ross肉鸡258只,常规饲养至7日龄后,随机分为5组:空白组(C);模型组(M),...
【目的】研究转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smad通路在肉鸡腹水综合征肝纤维化中的作用及复方中药水提物的防治机理。【方法】选取健康Ross肉鸡258只,常规饲养至7日龄后,随机分为5组:空白组(C);模型组(M),低温、高脂和高蛋白饲料、高钠饮水的多因素法造模;复方中药水提物高、中、低剂量组(T1、T2、T3),在模型组基础上,每天饮水中分别添加2.0、1.0、0.5 g/kg复方中药水提物。观察临床症状和剖检变化,通过HE染色和Masson染色分别观察肉鸡肝脏组织结构变化与胶原纤维沉积,计算15、25、35、45日龄体重变化。利用实时荧光定量PCR检测各日龄肝脏中TGF-β1、转化生长因子β受体Ⅰ(transforming growth factorβreceptorⅠ,TβRⅠ)、Smad2、Smad3和Smad7基因相对表达量;利用ELISA法检测各日龄肝脏中TGF-β1、TβRⅠ蛋白含量。【结果】与空白组相比,模型组肉鸡腹部膨大、触压有波动感;腹腔内有大量淡黄色液体,肝脏充血肿胀、质脆,表面有瘀血点;肝脏组织结构紊乱,炎性细胞浸润,胶原纤维大量沉积,肝脏发生纤维化;体重极显著降低(P<0.01);除15日龄TβRⅠ蛋白外,肝脏中TGF-β1、TβRⅠ基因mRNA相对表达量与蛋白含量均极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),Smad2、Smad3基因mRNA相对表达量极显著升高(P<0.01),Smad7基因mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01)。与模型组相比,复方中药水提物组的肉鸡上述结果均有不同程度改善,且高剂量组作用效果最显著。【结论】肝纤维化参与了肉鸡腹水综合征的发生发展,机制与TGF-β1/Smad通路相关;由黄芪、当归、丹参、茯苓等制成的复方中药水提物可以调控TGF-β1/Smad通路,抑制肝纤维化的发生,可有效防治肉鸡腹水综合征。
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关键词
复方中药水提物
肉鸡腹水综合征
转化生长因子β1(TGF-β1)
转化生长因子
ⅰ
型
受体
(Tβ
r
ⅰ
)
SMADS
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职称材料
题名
猪FcγRⅠ真核表达载体的构建及稳定表达细胞系的建立
1
作者
史平玲
邬成业
乔松林
张改平
王爱萍
肖治军
祁艳华
卜丹
机构
河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室
郑州大学生物工程系
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第7期909-914,共6页
基金
国家自然科学基金重点项目(30730068)
国家973计划(2005CB522800)
文摘
本研究旨在建立稳定表达猪FcγRⅠ的Marc-145细胞系。从猪肺泡巨噬细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅠ和γ链cDNA,并分别构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅠ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300μg.mL-1)和G418(400μg.mL-1)共筛选获得稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环和流式细胞术对细胞系进行鉴定。结果表明成功构建了猪FcγRⅠ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系,且表达于转染细胞表面的poFcγRⅠ受体分子能与猪IgG特异结合。本研究为进一步研究奠定了基础。
关键词
猪
fcγ
r
ⅰ
受体
共转染
MA
r
C-145细胞
Keywords
po
fcγ
r
ⅰ
r
ecepto
r
co-t
r
ansfection
Ma
r
c-145 cell line
分类号
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
复方中药水提物对腹水综合征肉鸡肝脏TGF-β1/Smad通路的影响
被引量：
4
2
作者
李佩岐
康杰
王珂瑶
王慧敏
韩宇峰
王婷慧
崔亮
张剑
邓瑞强
段智变
机构
山西农业大学动物医学学院
山西医科大学汾阳学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2022年第5期1860-1869,共10页
基金
山西省自然科学基金(201901D111235)
山西省重点研发计划重点项目(201703D211001-05-02)。
文摘
【目的】研究转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smad通路在肉鸡腹水综合征肝纤维化中的作用及复方中药水提物的防治机理。【方法】选取健康Ross肉鸡258只,常规饲养至7日龄后,随机分为5组:空白组(C);模型组(M),低温、高脂和高蛋白饲料、高钠饮水的多因素法造模;复方中药水提物高、中、低剂量组(T1、T2、T3),在模型组基础上,每天饮水中分别添加2.0、1.0、0.5 g/kg复方中药水提物。观察临床症状和剖检变化,通过HE染色和Masson染色分别观察肉鸡肝脏组织结构变化与胶原纤维沉积,计算15、25、35、45日龄体重变化。利用实时荧光定量PCR检测各日龄肝脏中TGF-β1、转化生长因子β受体Ⅰ(transforming growth factorβreceptorⅠ,TβRⅠ)、Smad2、Smad3和Smad7基因相对表达量;利用ELISA法检测各日龄肝脏中TGF-β1、TβRⅠ蛋白含量。【结果】与空白组相比,模型组肉鸡腹部膨大、触压有波动感;腹腔内有大量淡黄色液体,肝脏充血肿胀、质脆,表面有瘀血点;肝脏组织结构紊乱,炎性细胞浸润,胶原纤维大量沉积,肝脏发生纤维化;体重极显著降低(P<0.01);除15日龄TβRⅠ蛋白外,肝脏中TGF-β1、TβRⅠ基因mRNA相对表达量与蛋白含量均极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),Smad2、Smad3基因mRNA相对表达量极显著升高(P<0.01),Smad7基因mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01)。与模型组相比,复方中药水提物组的肉鸡上述结果均有不同程度改善,且高剂量组作用效果最显著。【结论】肝纤维化参与了肉鸡腹水综合征的发生发展,机制与TGF-β1/Smad通路相关;由黄芪、当归、丹参、茯苓等制成的复方中药水提物可以调控TGF-β1/Smad通路,抑制肝纤维化的发生,可有效防治肉鸡腹水综合征。
关键词
复方中药水提物
肉鸡腹水综合征
转化生长因子β1(TGF-β1)
转化生长因子
ⅰ
型
受体
(Tβ
r
ⅰ
)
SMADS
Keywords
compound t
r
aditional Chinese medicine wate
r
ext
r
act
ascites synd
r
ome in b
r
oile
r
s
t
r
ansfo
r
ming g
r
owth facto
r
β1(TGF-β1)
t
r
ansfo
r
ming g
r
owth facto
r
β
r
ecepto
r
ⅰ
(Tβ
r
ⅰ
)
Smads
分类号
S853 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪FcγRⅠ真核表达载体的构建及稳定表达细胞系的建立
史平玲
邬成业
乔松林
张改平
王爱萍
肖治军
祁艳华
卜丹
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
复方中药水提物对腹水综合征肉鸡肝脏TGF-β1/Smad通路的影响
李佩岐
康杰
王珂瑶
王慧敏
韩宇峰
王婷慧
崔亮
张剑
邓瑞强
段智变
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2022
4
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