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蛋白G IgG Fc段结合域的克隆表达及功能研究
被引量：
1
1
作者
房国梁
刘志国
+4 位作者
宗义强
张大川
曾丽娟
付云洁
屈伸
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第9期111-116,共6页
旨在研究蛋白G IgG Fc段结合域(PGFB)的克隆、表达及其抗体结合功能,用于抗体的纯化。根据PGFB的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成了4个寡核苷酸片段。通过重叠延伸PCR方法合成了PGFB DNA片段,测序鉴定后克隆至原核表达...
旨在研究蛋白G IgG Fc段结合域(PGFB)的克隆、表达及其抗体结合功能,用于抗体的纯化。根据PGFB的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成了4个寡核苷酸片段。通过重叠延伸PCR方法合成了PGFB DNA片段,测序鉴定后克隆至原核表达系统pET-28a-c(+)上,转化大肠杆菌,获得表达菌株;IPTG诱导表达PGFB,经Ni+-NTA琼脂糖凝胶层析纯化后偶联到琼脂糖凝胶6B上,用其纯化多克隆抗体。结果显示,PGFB在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,纯化后纯度达到90%以上,相对分子量为12.25 kD,与预期值相符。此外,偶联产物纯化多克隆抗体达到了良好的效果,每毫升基质可结合20 mg抗体。本研究克隆构建并高效表达了具有较好抗体亲和能力的PGFB,为多克隆抗体的快速纯化提供了方便。
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关键词
蛋白G
IGG
fc段结合域
多克隆抗体
原核表达
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职称材料
题名
蛋白G IgG Fc段结合域的克隆表达及功能研究
被引量：
1
1
作者
房国梁
刘志国
宗义强
张大川
曾丽娟
付云洁
屈伸
机构
武汉工业学院生物与制药工程学院
华中科技大学同济医学院生化与分子生物学系
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第9期111-116,共6页
文摘
旨在研究蛋白G IgG Fc段结合域(PGFB)的克隆、表达及其抗体结合功能,用于抗体的纯化。根据PGFB的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成了4个寡核苷酸片段。通过重叠延伸PCR方法合成了PGFB DNA片段,测序鉴定后克隆至原核表达系统pET-28a-c(+)上,转化大肠杆菌,获得表达菌株;IPTG诱导表达PGFB,经Ni+-NTA琼脂糖凝胶层析纯化后偶联到琼脂糖凝胶6B上,用其纯化多克隆抗体。结果显示,PGFB在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,纯化后纯度达到90%以上,相对分子量为12.25 kD,与预期值相符。此外,偶联产物纯化多克隆抗体达到了良好的效果,每毫升基质可结合20 mg抗体。本研究克隆构建并高效表达了具有较好抗体亲和能力的PGFB,为多克隆抗体的快速纯化提供了方便。
关键词
蛋白G
IGG
fc段结合域
多克隆抗体
原核表达
Keywords
Protein G IgG
fc
binding domain Polyclonal antibody Prokaryotic expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
S852.43 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
蛋白G IgG Fc段结合域的克隆表达及功能研究
房国梁
刘志国
宗义强
张大川
曾丽娟
付云洁
屈伸
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
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