过继转移FTY720-DC对自然流产模型孕鼠胚胎丢失率的影响 被引量：7

1

作者 熊苗 朱洁萍 +3 位作者 李莉 刘阳 季玉琴 王军 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期793-798,共6页

目的观察过继转移FTY720-树突状细胞（FTY720-DC）对自然流产模型孕鼠胚胎丢失率的影响,并初步探讨其在诱导母胎免疫耐受中的作用机制。方法建立自然流产小鼠模型（CBA/J×DBA/2）及正常妊娠小鼠模型（CBA/J×BALB/c）,分为6组... 目的观察过继转移FTY720-树突状细胞（FTY720-DC）对自然流产模型孕鼠胚胎丢失率的影响,并初步探讨其在诱导母胎免疫耐受中的作用机制。方法建立自然流产小鼠模型（CBA/J×DBA/2）及正常妊娠小鼠模型（CBA/J×BALB/c）,分为6组：正常妊娠模型组（CBA/J×BALB/c）、未干预自然流产模型组（CBA/J×DBA/2）、注射DC培养基（DCCM）的流产模型组、过继转移DC的流产模型组、注射FTY720的流产模型组、过继转移FTY720-DC的流产模型组。于妊娠第12~14日观察孕鼠胚胎丢失情况,同时采用流式细胞仪检测各组孕鼠外周血Treg、Th17细胞占单个核细胞的比例。结果过继转移FTY720-DC后孕鼠胚胎丢失率明显低于未干预或注射DCCM的流产模型组（P=0.00）,与过继转移DC的流产模型组和注射FTY-720的流产模型组相比,其胚胎丢失率也明显下降（P=0.01）;它与正常妊娠组胚胎丢失率的差异无统计学意义（P〉0.05）。过继转移FTY720-DC后孕鼠外周血Treg细胞比例明显增高,Th17细胞比例明显降低,与未干预或注射DCCM的流产模型组的差异有统计学意义（P=0.00）,与正常妊娠组的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论过继转移FTY720-DC能诱导妊娠免疫耐受,降低自然流产模型孕鼠的胚胎丢失率,其机制可能是通过逆转了自然流产模型孕鼠Treg/Th17的失平衡状态。 展开更多

关键词 fty720 树突状细胞 过继转移 自然流产 免疫耐受

在线阅读 下载PDF 职称材料

FTY720对体外混合培养淋巴细胞增殖和凋亡的影响 被引量：6

2

作者 施国海 周佩军 +3 位作者 王祥慧 徐达 施敏敏 陈皓 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期380-383,共4页

目的观察FTY720对体外混合培养小鼠脾脏淋巴细胞的增殖、分化和凋亡的影响。方法将C57BL/6J小鼠与BALB/c小鼠的脾脏淋巴细胞体外混合培养5 d,培养液中加入不同浓度的FTY720。分别运用MTT法和流式细胞仪检测在不同浓度FTY720作用下,混合... 目的观察FTY720对体外混合培养小鼠脾脏淋巴细胞的增殖、分化和凋亡的影响。方法将C57BL/6J小鼠与BALB/c小鼠的脾脏淋巴细胞体外混合培养5 d,培养液中加入不同浓度的FTY720。分别运用MTT法和流式细胞仪检测在不同浓度FTY720作用下,混合培养淋巴细胞的增殖状况、细胞表型和凋亡率。结果当FTY720为400 ng/mL时,体外混合培养淋巴细胞的增殖即受到明显抑制,抑制率为47.6%(P<0.05);当FTY720为3 200 ng/mL时,其抑制率达到为51.6%,呈剂量依赖性。FTY720为1 600 ng/mL时,混合培养淋巴细胞中的CD4+CD25+T细胞比例显著增加(P<0.05)。FTY720在200 ng/mL时,混合培养淋巴细胞的细胞凋亡率即显著增加(P<0.05)。结论在小鼠混合淋巴细胞培养体系中加入高浓度的FTY720,能显著抑制淋巴细胞增殖能力,增加调节性细胞的比例并促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 fty720 增殖 调节性T细胞 凋亡 混合淋巴细胞培养

在线阅读 下载PDF 职称材料

FTY720对免疫性肝损伤保护作用的研究 被引量：10

3

作者 何景华 张慧娜 林志彬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期101-104,共4页

目的　应用免疫性肝损伤模型研究FTY72 0对肝脏的保护作用并对其作用机制进行初步探讨。方法　分别以BCG +LPS和ConA诱导两种免疫性肝损伤模型并通过测定血清中ALT和AST水平的变化检测FTY72 0对两种肝损伤的保护作用。以ELISA方法测定... 目的　应用免疫性肝损伤模型研究FTY72 0对肝脏的保护作用并对其作用机制进行初步探讨。方法　分别以BCG +LPS和ConA诱导两种免疫性肝损伤模型并通过测定血清中ALT和AST水平的变化检测FTY72 0对两种肝损伤的保护作用。以ELISA方法测定血清中细胞因子IFN γ及IL 4水平的变化并应用淋巴细胞增殖实验检测FTY72 0对淋巴细胞增殖能力的影响。结果　FTY72 0可以使两种肝损伤模型中升高的血清ALT和AST水平下降 ,并可以降低肝损伤时血清中IFN γ及IL 4的水平 ,实验还证明FTY72 0可以抑制淋巴细胞的增殖。结论　FTY72 0预防应用对免疫性肝损伤有保护作用 ,其保肝作用机制可能和抑制淋巴细胞的增殖 。 展开更多

关键词 fty720 肝损伤 IFN-Γ IL-4

在线阅读 下载PDF 职称材料

FTY720对实验性肝纤维化小鼠肝损伤的保护作用 被引量：4

4

作者 张宸豪 李瑶 +2 位作者 陈为 赵良中 李妍 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1154-1157,I0013,共5页

目的:观察FTY720对刀豆蛋白A(Con A)所致肝纤维化小鼠的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法:采用刀豆蛋白A(Con A)建立小鼠肝纤维化动物模型,取40只BALB/C小鼠随机分为空白对照组、模型组、FTY720低剂量(1mg·kg-1)组和FTY720高剂... 目的:观察FTY720对刀豆蛋白A(Con A)所致肝纤维化小鼠的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法:采用刀豆蛋白A(Con A)建立小鼠肝纤维化动物模型,取40只BALB/C小鼠随机分为空白对照组、模型组、FTY720低剂量(1mg·kg-1)组和FTY720高剂量(4mg·kg-1)组,每组10只。测定各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和肝脏指数,观察肝脏组织学病理变化。结果:FTY720低剂量组和高剂量组ALT、AST活性明显低于模型组(P<0.05或P<0.01)。光学显微镜观察,模型组有炎性细胞浸润,肝细胞坏死。Masson染色,模型组血管周围有明显纤维条束,肝小叶发生融合;与模型组比较,FTY720低剂量组和高剂量组损伤程度较轻,且随FTY720剂量增加肝组织损伤程度逐渐减轻。结论:FTY720对实验性肝纤维化小鼠的保护作用可能是通过降低ALT和AST活性,进而减轻肝脏损伤程度而延缓纤维化进程。 展开更多

关键词 fty720 刀豆蛋白A 肝纤维化 肝损伤 动物模型

在线阅读 下载PDF 职称材料

FTY720与他克莫司对脊髓损伤有显著疗效 被引量：6

5

作者 孙思鑫 曹晓建 +3 位作者 汪雷 孙钰 张洁 刘波 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期20-23,36,共5页

目的:探讨FTY720与他克莫司(FK506)对脊髓损伤后神经功能保护作用的差别。方法:雄性SD大鼠48只随机分为4组,FTY720治疗组,FK506治疗组,损伤(不给药)组和正常对照。参照Allen’s法建立T10脊髓损伤动物模型,分别予FTY720与FK506治疗。伤后... 目的:探讨FTY720与他克莫司(FK506)对脊髓损伤后神经功能保护作用的差别。方法:雄性SD大鼠48只随机分为4组,FTY720治疗组,FK506治疗组,损伤(不给药)组和正常对照。参照Allen’s法建立T10脊髓损伤动物模型,分别予FTY720与FK506治疗。伤后1、3、7、14、21天行BBB评分及斜板试验,伤后3周行体感诱发电位(SEP)检查及T10段脊髓切片HE染色。结果:神经功能BBB评分、斜板最大角度及体感诱发电位检测,FTY720治疗组均优于FK506治疗组,差异有显著性(P<0.05);HE染色可见损伤组脊髓内大量神经元坏死,用药治疗各组神经元坏死较轻,其中以FTY720组最轻。结论:脊髓损伤后早期应用FTY720与FK506治疗均有显著疗效,两者相比又以FTY720效果更优。 展开更多

关键词 脊髓损伤 fty720 FK506

在线阅读 下载PDF 职称材料

新型免疫抑制剂FTY720诱导K562细胞凋亡及其机制 被引量：3

6

作者 张宸豪 李妍 +3 位作者 陈为 陈爽 方芳 赵良中 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1161-1165,共5页

目的:探讨新型免疫抑制剂FTY720诱导K562细胞凋亡的效应及其机制,为临床白血病的治疗提供实验依据。方法:体外培养人白血病K562细胞,分为空白对照组和FTY720处理组,FTY720处理组细胞分别采用6μmol·L-1 FTY720诱导3、6和12h,或采用... 目的:探讨新型免疫抑制剂FTY720诱导K562细胞凋亡的效应及其机制,为临床白血病的治疗提供实验依据。方法:体外培养人白血病K562细胞,分为空白对照组和FTY720处理组,FTY720处理组细胞分别采用6μmol·L-1 FTY720诱导3、6和12h,或采用2、4、6和8μmol·L-1 FTY720处理24h。采用流式细胞术分析细胞凋亡百分率、活性氧(ROS)水平、线粒体膜电位(MMP)和细胞周期。采用WST-1还原法检测FTY720作用下K562细胞增殖抑制率。结果:流式细胞术检测,与空白对照组比较,6μmol·L-1 FTY720诱导细胞3、6和12h后,细胞凋亡率随时间延长而升高(P<0.01);与空白对照组比较,2、4、6和8μmol·L-1FTY720诱导细胞24h后,细胞凋亡率随药物浓度增加而升高(P<0.01)。与空白对照组比较,随FTY720浓度增加,K562细胞内ROS水平增加(P<0.01),同时其MMP下降(P<0.01)。细胞周期分析,与空白对照组比较,随FTY720浓度增加,G0/G1期细胞百分率增加(P<0.05),而S期和G2/M期细胞百分率减少(P<0.05)。WST-1还原法分析,与空白对照组比较,FTY720处理72h后,2、4、6和8μmol·L-1 FTY720处理组K562细胞增殖抑制率[(24.0±4.1)%、(46.4±3.9)%、(67.0±4.8)%和(88.2±5.6)%]明显升高(P<0.01),FTY720对K562细胞的半数抑制浓度(IC50)为5.5μmol·L-1。结论:FTY720可通过导致细胞周期阻滞和激发ROS而诱导细胞凋亡来发挥抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 fty720 细胞凋亡 活性氧 细胞周期 fty720

在线阅读 下载PDF 职称材料

FTY720预防小鼠同种异体胰岛移植的排斥反应 被引量：3

7

作者 刘龙山 王长希 +4 位作者 张泳华 何晓顺 尚文俊 毕颖 王东 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期644-648,共5页

【目的】探讨FTY720在小鼠同种异体胰岛移植中的抗排斥作用及其机制。【方法】36只链脲霉素诱导的糖尿病小鼠(C57BL/6)随机分为3组,移植供体(Balb/c小鼠)胰岛后分别连续口服不同剂量的FTY720或双蒸水(对照组),FTY720剂量分别为0.5mg/(kg... 【目的】探讨FTY720在小鼠同种异体胰岛移植中的抗排斥作用及其机制。【方法】36只链脲霉素诱导的糖尿病小鼠(C57BL/6)随机分为3组,移植供体(Balb/c小鼠)胰岛后分别连续口服不同剂量的FTY720或双蒸水(对照组),FTY720剂量分别为0.5mg/(kg·d)(F0.5组)和1.0mg/(kg·d)(F1.0组)。术后连续测定血糖,行组织学检查对比淋巴细胞浸润程度,比较各组移植物中位存活时间(MST)。观察各组用药后不同时间外周血和肠系膜淋巴结(MLN)、腋窝淋巴结(ALN)中淋巴细胞数量的变化。【结果】F0.5组(84.5d)、F1.0组(>100d)MST明显长于对照组(10d)(P<0.01),F1.0组MST长于F0.5组(P<0.01)。用药组移植物中淋巴细胞浸润减轻并与剂量相关。F0.5组、F1.0组PBL变化趋势略有不同,分别在用药后8h、10h降至对照组的23.81%和12.59%(P<0.01),之后略有回升并趋于稳定。用药组连续口服FTY7205d后MLN、ALN中淋巴细胞数量明显高于对照组(P<0.05),连用14d后其淋巴细胞数量减少并低于对照组,尤以MLN明显。【结论】连续口服FTY720可有效延长小鼠同种异体胰岛移植物存活时间并呈一定的剂量相关性。FTY720可促进外周血淋巴细胞归巢至肠系膜和外周淋巴结,并诱导组织中淋巴细胞的凋亡,来减轻移植物中淋巴细胞浸润。 展开更多

关键词 同种异体胰岛移植 小鼠 免疫抑制剂 fty720 淋巴细胞归巢

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同剂量FTY720对大鼠急性脊髓损伤后Caspase-3表达及细胞凋亡的影响 被引量：3

8

作者 杨梁 吕德成 +3 位作者 郑连杰 王朝晖 张伟 李晓天 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2012年第6期530-534,共5页

目的比较不同剂量FTY720对大鼠急性脊髓损伤后Caspase-3的表达及神经细胞凋亡的影响。方法雌性SD大鼠200只,随机分为5组,每组40只。A组大鼠不打击脊髓,缝合切口后立即以0.3 ml生理盐水灌胃。B、C、D、E组大鼠制作Al-len's T9脊髓损... 目的比较不同剂量FTY720对大鼠急性脊髓损伤后Caspase-3的表达及神经细胞凋亡的影响。方法雌性SD大鼠200只,随机分为5组,每组40只。A组大鼠不打击脊髓,缝合切口后立即以0.3 ml生理盐水灌胃。B、C、D、E组大鼠制作Al-len's T9脊髓损伤模型。B组造模后立即以0.3 ml生理盐水灌胃,C、D、E组分别以FTY720按1 mg/kg、3 mg/kg、5 mg/kg生理盐水稀释至0.3 ml灌胃。分别于术后6 h、12 h、24 h、48 h和72 h取损伤段脊髓超薄切片,行SP免疫组化染色观察Caspase-3表达及TUNEL染色观察细胞凋亡情况,并计算相应时间点免疫组化学染色阳性细胞比值。结果 A组各时间点几乎见不到Caspase-3和细胞凋亡阳性表达。B、C、D、E组均在伤后6 h开始出现凋亡细胞表达,伤后24 h达高峰,伤后48 h开始减弱,伤后72 h进一步减少。伤后各时间点细胞凋亡表达均为B组>C组>D组=E组(P>0.05)>A组(P<0.05)。Caspase-3表达与细胞凋亡同步。相关性检验显示B、C、D组中,FTY720的剂量与Caspase-3表达、细胞凋亡表达呈负相关(P<0.05)。D组和E组中,FTY720剂量与上述指标不相关(P>0.05)。结论 FTY720可以显著减少大鼠急性脊髓损伤后Caspase-3的表达及神经细胞凋亡。FTY720的剂量与其减轻Cas-pase-3表达和细胞凋亡效果之间存在一定量效关系。3 mg/kg是FTY720治疗大鼠急性脊髓损伤的最适剂量。 展开更多

关键词 fty720 CASPASE-3 凋亡 脊髓损伤 神经再生 剂量 量效关系

在线阅读 下载PDF 职称材料

新型免疫抑制剂FTY720对大鼠胶原诱导性关节炎的抑制作用 被引量：3

9

作者 郭敦明 谈文峰 +1 位作者 张缪佳 王芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1280-1285,共6页

目的观察新型免疫抑制剂FTY720对大鼠胶原诱导性关节炎发生和发展的影响。方法以胶原诱导大鼠关节炎模型,从第1次免疫造模开始,大鼠分别予以FTY720(0.1、0.6mg·kg-1)和雷公藤多苷(6、12mg·kg-1)灌胃治疗,连续4周。观察记录大... 目的观察新型免疫抑制剂FTY720对大鼠胶原诱导性关节炎发生和发展的影响。方法以胶原诱导大鼠关节炎模型,从第1次免疫造模开始,大鼠分别予以FTY720(0.1、0.6mg·kg-1)和雷公藤多苷(6、12mg·kg-1)灌胃治疗,连续4周。观察记录大鼠活动和关节炎指数、体重、足底厚度和足爪肿胀;血常规分析大鼠外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞变化;流式分析外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞变化;组织学及免疫组织化学分析炎性关节病理改变和滑膜组织中CD4+和CD8+T淋巴细胞的变化。结果 FTY720给药后能抑制大鼠关节炎的发生和发展,明显降低大鼠外周血淋巴细胞特别是CD4+T淋巴细胞数量和滑膜组织中CD4+T淋巴细胞数量。结论 FTY720可有效控制大鼠胶原诱导性关节炎的发生和发展,其作用机制可能是通过抑制外周血CD4+T淋巴细胞浸润到滑膜组织。 展开更多

关键词 类风湿关节炎 fty720 免疫抑制剂 胶原诱导性关节炎 WISTAR大鼠 雷公藤

在线阅读 下载PDF 职称材料

FTY720诱导1型1-磷酸鞘氨醇受体内化与其保守基序的关系研究 被引量：4

10

作者 胡为民 唐恩洁 +1 位作者 敬保迁 任碧轩 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期613-616,共4页

目的:研究FTY720诱导1型1-磷酸鞘氨醇受体(S1P1)内化与后者保守基序之间的关系。方法:以HA-S1P1(WT)-Myc-EGFP-N1融合表达载体为模板,应用重叠PCR的方法,将S1P1保守基序ERY突变为ENY,构建HA-S1P1(R142N)-Myc-EGFP-N1融合表达载体。测序... 目的:研究FTY720诱导1型1-磷酸鞘氨醇受体(S1P1)内化与后者保守基序之间的关系。方法:以HA-S1P1(WT)-Myc-EGFP-N1融合表达载体为模板,应用重叠PCR的方法,将S1P1保守基序ERY突变为ENY,构建HA-S1P1(R142N)-Myc-EGFP-N1融合表达载体。测序鉴定后,经Polyfect转染入HEK293细胞。G418筛选出稳定细胞株。100 nmol/LFTY720处理3、6、12小时后,荧光显微镜下观察S1P1在HEK293细胞上的表达情况。结果:HA-S1P1(R142N)-Myc-EGFP-N1载体被成功构建,S1P1(WT)和S1P1(R142N)蛋白表达在HEK293稳定细胞株的表面,FTY720能诱导S1P1(WT)内化,但不能诱导S1P1(R142N)内化。结论:FTY720诱导S1P1内化与ERY保守基序有关。 展开更多

关键词 fty720 1型1-磷酸鞘氨醇受体 内化 荧光显微镜

在线阅读 下载PDF 职称材料

ROS在FTY720诱导U266细胞死亡中的作用机制研究 被引量：2

11

作者 李迎春 刘卓刚 +4 位作者 姚鲲 王慧涵 胡荣 杨威 廖爱军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期643-646,共4页

本研究探讨活性氧(ROS)在FTY720诱导多发性骨髓瘤U266细胞株凋亡及自噬中的作用。不同浓度FTY720处理U266细胞24 h后,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,应用Western blot检测LC3B的表达。结果显示:应用FTY720可引起U266细胞发生凋亡及自噬,... 本研究探讨活性氧(ROS)在FTY720诱导多发性骨髓瘤U266细胞株凋亡及自噬中的作用。不同浓度FTY720处理U266细胞24 h后,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,应用Western blot检测LC3B的表达。结果显示:应用FTY720可引起U266细胞发生凋亡及自噬,自噬的发生可促进细胞死亡。自噬抑制剂Bafilomycin A1可降低FTY720导致的细胞生存率下降。应用ROS抑制剂NAC或Tiron后,FTY720引起的细胞凋亡减轻,联合应用NAC或Tiron和FTY720后LC3B-Ⅱ表达较单用FTY720明显下降。结论:FTY720可诱导U266细胞发生凋亡及自噬,ROS是FTY720引起的多发性骨髓瘤细胞凋亡及自噬的共同调节剂。 展开更多

关键词 fty720 多发性骨髓瘤 细胞凋亡 自噬 活性氧

在线阅读 下载PDF 职称材料

FTY720在大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用 被引量：2

12

作者 王长希 赵亮 +1 位作者 陈立中 陈规划 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期250-252,256,共4页

【目的】研究新型免疫抑制剂FTY720对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)的作用。【方法】制备大鼠肾脏IRI模型,从下腔静脉注入不同剂量的FTY720,观察术后第1、2、3、5、7天血清肌酐(SCr)和术后第2、7天外周血淋巴细胞数(PLC)的变化,并在术后... 【目的】研究新型免疫抑制剂FTY720对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)的作用。【方法】制备大鼠肾脏IRI模型,从下腔静脉注入不同剂量的FTY720,观察术后第1、2、3、5、7天血清肌酐(SCr)和术后第2、7天外周血淋巴细胞数(PLC)的变化,并在术后第2天取肾脏作组织学检查观察急性肾小管坏死的情况。【结果】FTY720处理组动物术后SCr水平显著低于对照组并呈剂量依赖性;FTY720处理组术后第2天的PLC显著低于对照组;组织学检查显示FTY720处理组肾脏的缺血性损伤轻于对照组。【结论】FTY720可以减少PLC,可有效减轻大鼠肾脏IRI。 展开更多

关键词 肾 缺血再灌注损伤 fty720 临床应用 免疫抑制剂

在线阅读 下载PDF 职称材料

S1P受体激动剂FTY720在大鼠非梗死区心肌组织中的作用 被引量：2

13

作者 刘晔弘 范骎 +3 位作者 张凤如 陆林 沈卫峰 陶蓉 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1271-1277,1296,共8页

目的·分析S1P受体激动剂FTY720对大鼠心肌不同亚型S1P受体表达的影响,以及梗死后的心肌中主要与FTY720结合的S1P受体亚型,并探讨这一过程对于心肌梗死后非梗死区存活心肌的保护作用。方法·建立SD大鼠心肌梗死模型,并设置对应... 目的·分析S1P受体激动剂FTY720对大鼠心肌不同亚型S1P受体表达的影响,以及梗死后的心肌中主要与FTY720结合的S1P受体亚型,并探讨这一过程对于心肌梗死后非梗死区存活心肌的保护作用。方法·建立SD大鼠心肌梗死模型,并设置对应假手术组,分别进行生理盐水、低剂量(0.04 mg/kg)FTY720和高剂量(0.4 mg/kg)FTY720处理,处理4周后进行测定,比较各组间心功能的差异;应用实时定量PCR检测心肌梗死发生前和发生后心肌组织中不同亚型S1P受体的表达情况,分析高剂量FTY720对其表达的影响;应用组织化学染色分析高剂量FTY720处理对非梗死区心肌组织的一般结构、纤维化程度以及细胞凋亡的影响;应用Western blotting检测高剂量FTY720处理对非梗死区心肌磷酸化AKT和磷酸化ERK的表达水平。结果·正常大鼠心肌组织中主要表达S1P1受体,其次是S1P3受体。心肌梗死4周后非梗死区中S1P受体的表达水平明显下降,而经高剂量FTY720处理后能显著提高S1P1和S1P3受体的表达水平。同样,经FTY720处理后,心肌梗死后存活心肌的病理改变及重构减弱,纤维化程度减轻,心肌细胞凋亡减少。此外,FTY720处理能使非梗死区中AKT和ERK蛋白的磷酸化水平显著上升。结论·作为S1P受体激动剂,FTY720可能作用于心肌细胞上的S1P1和S1P3受体,激活AKT和ERK通路,从而对心肌梗死后非梗死区的存活心肌发挥保护作用。 展开更多

关键词 1-磷酸鞘氨醇 fty720 心肌梗死

在线阅读 下载PDF 职称材料

FTY720联合共刺激信号阻断剂体外诱导免疫调节细胞 被引量：1

14

作者 王慧 周佩军 +4 位作者 施国海 王祥慧 徐达 陈皓 施敏敏 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期273-276,共4页

目的大剂量FTY720联合应用共刺激信号阻断剂(抗-CD154单抗+抗-CD80单抗,简称Cos.Blockades),在小鼠混合淋巴细胞反应体系(MLR)中诱导免疫调节细胞。方法将FTY720与Cos.Blockades同时加入由BALB/c和C57BL/6J小鼠脾细胞组成的MLR中,培养5... 目的大剂量FTY720联合应用共刺激信号阻断剂(抗-CD154单抗+抗-CD80单抗,简称Cos.Blockades),在小鼠混合淋巴细胞反应体系(MLR)中诱导免疫调节细胞。方法将FTY720与Cos.Blockades同时加入由BALB/c和C57BL/6J小鼠脾细胞组成的MLR中,培养5 d,分别采用MTT法和流式细胞仪,检测在不同终浓度FTY720(0、100、200、400、800和1 600 ng/mL)联合Cos.Blockades(均为10μg/mL)作用下,MLR中淋巴细胞的增殖情况和细胞表型。通过以上方法诱导产生的细胞,与相同数量的C57BL/6J脾细胞再培养4 d,比较其在有或无外源性IL-2参与时的细胞增殖差异;同时采用615小鼠脾淋巴细胞作为第三方刺激抗原,检测这些细胞对再次MLR抑制作用的抗原特异性。结果联合用药组(FTY720+Cos.Blockades)对初次MLR的抑制作用和上调CD4+CD25+调节性T细胞比例的作用均呈剂量依赖性。当FTY720终浓度为1 600 ng/mL时,联合用药组与Cos.Blockades组(FTY720为0 ng/mL)相比,初次MLR中淋巴细胞的增殖受到显著抑制(0.299vs0.391,P<0.05);当FTY720终浓度为800和1 600 ng/mL时,联合用药组与Cos.Blockades组相比,诱导的细胞中CD4+CD25+调节性T细胞的比例显著增高(分别为5.44%vs3.47%和6.91%vs3.47%,P<0.05);当FTY720的终浓度为1 600 ng/mL时,联合用药组和Cos.Blockades组诱导的免疫细胞具有免疫无能细胞的特性,而单独FTY720组诱导的细胞却无此特性;各组诱导的免疫调节细胞均对再次MLR具有抗原特异性的抑制作用。结论FTY720与Cos.Blockades具有协同作用,可在体外诱导和扩增免疫调节细胞;这些调节细胞具有抗原特异性的下调免疫应答的功能。 展开更多

关键词 fty720 调节性T细胞 免疫抑制 免疫应答

在线阅读 下载PDF 职称材料

FTY720诱导多发性骨髓瘤细胞株U266凋亡的机制研究 被引量：1

15

作者 廖爱军 李淑晨 +5 位作者 吴斌 胡荣 李迎春 姚鲲 杨威 刘卓刚 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1623-1627,共5页

目的:探讨FTY720对多发性骨髓瘤U266细胞凋亡的影响及相关作用机制。方法:FTY720 2.5、5、10及20μmol/L处理U266细胞24 h后,流式细胞术Annexin-V-FITC/PI染色检测细胞凋亡。应用FTY720 20μmol/L分别处理U266细胞0、6、16及24 h,检测... 目的:探讨FTY720对多发性骨髓瘤U266细胞凋亡的影响及相关作用机制。方法:FTY720 2.5、5、10及20μmol/L处理U266细胞24 h后,流式细胞术Annexin-V-FITC/PI染色检测细胞凋亡。应用FTY720 20μmol/L分别处理U266细胞0、6、16及24 h,检测细胞凋亡率。二甲基亚砜(DMSO)及FTY720 20μmol/L分别处理U266细胞24 h,DAPI染色5 min,将细胞滴于载玻片上,在荧光显微镜下观察细胞核形态。FTY720 5μmol/L单用或/和泛Caspase抑制剂Z-VAD-fmk 12.5、25、50μmol/L合用处理U266细胞,CCK-8方法检测细胞生存率。FTY720 0、2.5、5、10及20μmol/L处理U266细胞24 h后,使用Western bolt方法检测Cleaved Caspase-3的表达。FTY720 0、5、10及20μmol/L处理U266细胞24 h后,应用Western blot检测M CL-1、survivin、BCL-2、BID、BAX、BAK和P-ERK的表达。结果:FTY720明显增加U266细胞凋亡,呈浓度及时间依赖性(r=0.98,r=0.97,P<0.05),在荧光显微镜下可观察到,FTY720处理的细胞的细胞核出现核固缩及碎裂,发生凋亡的改变,而在DM SO组未观察到此现象。Z-VAD-fmk可逆转FTY720引起的细胞凋亡,呈浓度依赖性(r=0.97,P<0.05)。FTY720可引起U266细胞M CL-1、Survivin、BCL-2表达下降,同时引起BID裂解,而对BAX,BAK,P-ERK的表达没有影响。结论:FTY720可引起U266细胞凋亡,该凋亡为Caspase-3依赖性死亡。FTY720诱导产生的凋亡是通过下调抗凋亡蛋白MCL-1、survivin、BCL-2及激活促凋亡蛋白BID实现的。 展开更多

关键词 fty720 多发性骨髓瘤 细胞凋亡 U266细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

FTY720抑制小鼠植骨气囊模型中聚乙烯磨损颗粒诱导的骨溶解效应 被引量：1

16

作者 李平 万睿 +3 位作者 周园东 汪洋 王信 张健 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期76-78,共3页

目的:在小鼠植骨气囊动物模型中,观察外源性FTY720(Fingolimod,芬戈莫德)对骨溶解的抑制作用。方法:构建小鼠植骨气囊模型,将构建好气囊模型的小鼠分成4组:空白组(气囊内注入生理盐水、腹腔注射DMSO),FTY720组(气囊内注入生理盐水、腹... 目的:在小鼠植骨气囊动物模型中,观察外源性FTY720(Fingolimod,芬戈莫德)对骨溶解的抑制作用。方法:构建小鼠植骨气囊模型,将构建好气囊模型的小鼠分成4组:空白组(气囊内注入生理盐水、腹腔注射DMSO),FTY720组(气囊内注入生理盐水、腹腔注射FTY720),聚乙烯颗粒组(气囊内注入聚乙烯颗粒、腹腔注射DMSO),聚乙烯颗粒+FTY720组(气囊内注入聚乙烯颗粒、腹腔注射FTY720)。4周后处死小鼠后取气囊组织进行HE染色观察炎症反应和炎症细胞渗出情况,取组织匀浆行Elisa法检测气囊组织中IL-6和TNF-α浓度、取骨组织行电镜扫描观察骨片吸收情况,取组织匀浆行RT-PCR检测破骨细胞相关基因抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)mRNA表达水平。结果:①HE染色后炎症细胞渗出量,聚乙烯颗粒+FTY720组(4892±457)与聚乙烯颗粒组(4931±572)比较无统计学差异(P>0.05),FTY720组(2013±375)与空白组(2151±310)比较无统计学差异(P>0.05);含有聚乙烯颗粒组高于无聚乙烯颗粒组(P<0.05)。②Elisa法检测炎症因子(IL-6、TNF-α)浓度,聚乙烯颗粒+FTY720组〔(130.13±3.22)(、129.22±5.02)〕与聚乙烯颗粒组〔(149.22±6.09)(、140.52±2.68)〕比较无统计学差异(P>0.05);FTY720组〔(68.24±2.83)、(82.88±5.34)〕与空白组〔(69.51±2.31)(、74.15±4.64)〕比较没有统计学差异(P>0.05);含有聚乙烯颗粒组高于无聚乙烯颗粒组(P<0.05)。③扫描电镜检测骨片吸收面积与视野面积百分比,聚乙烯颗粒+FTY720组〔(10.21±1.78)%〕低于聚乙烯颗粒组〔(17.79±2.56)%〕,FTY720组〔(1.82±1.37)%〕低于空白组〔(6.27±2.11)%〕;并且含有聚乙烯颗粒组高于无聚乙烯颗粒组(P<0.05)。④破骨细胞相关基因TRAP mRNA表达量,聚乙烯颗粒+FTY720组(0.53±0.04)低于聚乙烯颗粒组(0.74±0.05),FTY720组(0.22±0.03)低于空白组(0.38±0.04);而含有聚乙烯颗粒组高于无聚乙烯颗粒组(P<0.05)。结论:在小鼠植骨气囊动物模型中,FTY720能有效抑制聚乙烯颗粒诱导的局部骨溶解作用。 展开更多

关键词 fty720 SIP 骨溶解 植骨气囊 聚乙烯颗粒

在线阅读 下载PDF 职称材料

FTY720与ICAM-1单抗对小鼠-大鼠异种心脏移植抗排斥的作用 被引量：1

17

作者 熊海波 黄祖发 +1 位作者 叶启发 夏穗生 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期41-46,共6页

目的:研究FTY720与ICAM-1单抗(mAb)对小鼠-大鼠异种心脏移植的抗排斥作用。方法:采用小鼠-大鼠腹部心脏移植,观察移植心存活时间、病理检查、CD4和CD8细胞的浸润程度及检测血中IL-2,IFN-γ,IL-4以及IgM抗体水平。结果:对照组移植心平均... 目的:研究FTY720与ICAM-1单抗(mAb)对小鼠-大鼠异种心脏移植的抗排斥作用。方法:采用小鼠-大鼠腹部心脏移植,观察移植心存活时间、病理检查、CD4和CD8细胞的浸润程度及检测血中IL-2,IFN-γ,IL-4以及IgM抗体水平。结果:对照组移植心平均存活时间为(2.75±0.43)d。单用ICAM-1mAb组移植心存活时间无明显延长,单用FTY720大剂量组移植心平均存活(4.25±0.71)d(P<0.01);FTY720与ICAM-1mAb大剂量联合用药组移植心存活时间平均(10.25±2.12)d(P<0.01)。联合用药组的病理反应、T细胞浸润及IL-2,IFN-γ,IgM水平明显减轻或降低;IgM水平与移植物存活时间呈负相关(R=-0.754,P<0.01)。结论:FTY720与ICAM-1mAb单一用药对异种移植的抗排斥作用不明显,联合用药可有效延长异种心脏移植的存活时间并能抑制异种抗体的产生。 展开更多

关键词 fty720 ICAM-1 mAb 异种移植 急性血管性排斥反应 小鼠 大鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

FTY720对大鼠急性脊髓损伤后神经功能恢复的影响及相关机制 被引量：1

18

作者 杨梁 吕德成 +3 位作者 郑连杰 王朝晖 张伟 李晓天 《中国脊柱脊髓杂志》 CSCD 北大核心 2012年第4期339-345,共7页

目的:观察FTY720对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)后神经功能的影响,并探讨其相关机制。方法:168只雌性SD大鼠,随机分成A、B、C三组,每组56只,A组(假手术组)大鼠麻醉后仅切除T9椎板,不打击脊髓,缝合后立即以0.3ml生理盐水灌胃。B、C组采用Allen... 目的:观察FTY720对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)后神经功能的影响,并探讨其相关机制。方法:168只雌性SD大鼠,随机分成A、B、C三组,每组56只,A组(假手术组)大鼠麻醉后仅切除T9椎板,不打击脊髓,缝合后立即以0.3ml生理盐水灌胃。B、C组采用Allen′s法制作T9脊髓损伤模型,B组(对照组)以0.3ml生理盐水灌胃,C组(治疗组)以FTY720按3mg/kg生理盐水稀释至0.3ml灌胃。每组取8只大鼠分别于术后1d、3d、7d、14d、21d行斜板试验及BBB评分。分别于术后6h、12h、24h、48h、72h、7d、21d处死大鼠,每个时间点每组8只,取损伤段(A组取相应部位)脊髓行超薄切片,HE染色观察各组脊髓坏死情况、炎细胞浸润情况、胶质瘢痕形成情况及脊髓空洞大小,并计数各组术后12h淋巴细胞数、术后12h与72h炎性细胞、术后7d胶质瘢痕区细胞,计算伤后21d脊髓空洞面积与脊髓面积比值;取术后6h、12h、24h、72h的切片行SP免疫组化染色观察caspase-3表达及Tunel染色观察细胞凋亡情况,计算相应时间点免疫组化染色阳性细胞比值和凋亡指数。所有数据以SPSS 13.0进行统计学分析。结果:B、C两组各时间点斜板实验及BBB评分均较A组同时间点差(P<0.05),在术后1d时B、C组之间无显著性差异(P>0.05),术后3d、7d、14d、21d时C组优于B组(P<0.05)。HE染色结果显示A组各时间点脊髓形态正常;B、C组脊髓术后6h可见脊髓内出血、血肿形成,术后12h^48h脊髓进行性水肿、损伤中心区出现液化坏死,伴有炎细胞浸润,以中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞为主,至术后72h,损伤中心区形成无组织结构空洞,空洞周围有大量炎细胞浸润,以小胶质细胞/单核细胞为主;术后12h及72h,B组炎细胞浸润程度明显重于C组(P<0.05),术后12h C组淋巴细胞浸润程度相对B组明显减少(P<0.05),术后7d,脊髓水肿减轻,空洞周围形成胶质瘢痕,胶质瘢痕细胞计数B组明显大于C组(P<0.05),术后21d脊髓空洞形成,脊髓空洞比值B组明显大于C组(P<0.05)。SP免疫组化染色和Tunel染色结果显示A组各时间点几乎见不到caspase-3和细胞凋亡表达阳性细胞,B、C组脊髓损术后6h即可见凋亡细胞,到术后24h达高峰,而后随术后时间延长而逐渐减弱,但是仍然保持在较高水平;caspase-3表达与细胞凋亡同步,各时间点C组caspase-3表达阳性细胞比值和细胞凋亡指数均显著低于B组(P<0.05)。结论:FTY720可以显著改善大鼠ASCI后神经功能,其可能是通过抑制脊髓损伤后的炎症反应,减少caspase-3的表达及神经细胞凋亡,从而减轻脊髓继发性损伤。 展开更多

关键词 急性脊髓损伤 fty720 半胱氨酸蛋白酶-3 凋亡 大鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

基质细胞衍生因子1在IgA肾病小鼠肾脏的表达及FTY720对其的影响 被引量：1

19

作者 罗军 王紫 周建华 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期895-897,911,共4页

目的探讨基质细胞衍生因子1(SDF-1)在IgA肾病小鼠的表达以及FTY720对SDF-1表达的影响。方法 30只BALB/c小鼠,随机分为3组,每组10只。IgA肾病模型组及FTY720治疗组均采用黏膜免疫复合物法造模,第9周起对FTY720组给予FTY720干预,另设正常... 目的探讨基质细胞衍生因子1(SDF-1)在IgA肾病小鼠的表达以及FTY720对SDF-1表达的影响。方法 30只BALB/c小鼠,随机分为3组,每组10只。IgA肾病模型组及FTY720治疗组均采用黏膜免疫复合物法造模,第9周起对FTY720组给予FTY720干预,另设正常对照组。收集实验第4、8、12周时尿液,检测尿红细胞及尿蛋白定量;第12周末处死动物留取肾脏,普通光镜及免疫荧光法检测肾脏病理改变,SABC法检测肾脏SDF-1蛋白的表达,实时定量PCR技术分析肾脏SDF-1 mRNA的表达差异。结果模型组小鼠自8周后开始出现蛋白尿,肾脏呈现典型的系膜增殖性改变,FTY720干预组蛋白尿及肾小球病变较轻。SDF-1蛋白在正常小鼠及经FTY720干预小鼠肾脏组织均呈低表达,但在模型鼠肾脏组织中呈强阳性表达。SDF-1mRNA在模型组小鼠肾脏组织中的表达较正常组有所增加,而在经FTY720干预的小鼠肾脏组织中的表达则较模型组明显减少。结论 SDF-1可能作为IgA肾病肾脏损伤及肾间质纤维化的一项指标存在。FTY720对IgA肾病具有良好的治疗效果,它可能通过影响SDF-1在肾脏的表达发挥治疗作用。 展开更多

关键词 基质细胞衍生因子1 IGA肾病 fty720 小鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

新型免疫抑制剂FTY720通过阻断S1P信号通路诱导母胎免疫耐受的实验研究 被引量：1

20

作者 熊苗 徐亮 +4 位作者 李莉 刘阳 周芳芳 王军 朱洁萍 《上海交通大学学报（医学版）》 CSCD 北大核心 2017年第10期1332-1336,共5页

目的·探讨新型免疫抑制剂FTY720诱导母胎免疫耐受的效应及机制,为临床治疗不明原因复发性自然流产提供实验依据。方法·以自然流产模型孕鼠为实验对象,观察腹腔注射FTY720对自然流产模型孕鼠胚胎丢失率及蜕膜组织1-磷酸鞘氨醇(... 目的·探讨新型免疫抑制剂FTY720诱导母胎免疫耐受的效应及机制,为临床治疗不明原因复发性自然流产提供实验依据。方法·以自然流产模型孕鼠为实验对象,观察腹腔注射FTY720对自然流产模型孕鼠胚胎丢失率及蜕膜组织1-磷酸鞘氨醇(S1P)表达的影响。构建S1P基因siRNA慢病毒载体及过表达S1P基因慢病毒载体,并转染小鼠骨髓来源树突状细胞(DCs);观察过继转移2种慢病毒载体后FTY720对自然流产模型孕鼠胚胎丢失率的影响。结果·FTY720对正常妊娠模型孕鼠的胚胎丢失率无明显影响,腹腔注射FTY720能明显降低自然流产模型孕鼠的胚胎丢失率。自然流产模型孕鼠局部蜕膜组织存在S1P的低表达。过继转移S1PsiRNA慢病毒转染的DCs后,FTY720在一定程度上能降低自然流产模型孕鼠的胚胎丢失率,但效果不及过继转移S1P-siRNA慢病毒转染的DCs前;过继转移过表达S1P基因慢病毒转染DCs后,FTY720能显著降低自然流产模型孕鼠的胚胎丢失率,其效果较过继转移过表达S1P基因慢病毒转染DCs前更为明显。结论·FTY720安全性良好,其诱导妊娠免疫耐受可能与阻断S1P信号通路有关。 展开更多

关键词 1-磷酸鞘氨醇信号通路 妊娠免疫耐受 母胎界面 fty720

在线阅读 下载PDF 职称材料