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纸纤维固定木瓜蛋白酶的研究及应用 被引量:2
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作者 易喻 李慧娟 +3 位作者 陈建澍 梅建凤 朱克寅 应国清 《浙江工业大学学报》 CAS 2013年第2期147-151,共5页
利用纸纤维为载体,制备高活性的固定化木瓜蛋白酶并应用于抗HCG抗体的水解.利用戊二醛交联法,制备固定化木瓜蛋白酶,并通过一系列优化,得到最佳固定化条件,包括pH﹑给酶量﹑温度﹑戊二醛体积分数,将制备的固定化木瓜蛋白酶应用于抗HCG... 利用纸纤维为载体,制备高活性的固定化木瓜蛋白酶并应用于抗HCG抗体的水解.利用戊二醛交联法,制备固定化木瓜蛋白酶,并通过一系列优化,得到最佳固定化条件,包括pH﹑给酶量﹑温度﹑戊二醛体积分数,将制备的固定化木瓜蛋白酶应用于抗HCG抗体水解并制备F(ab′)2片段.研究表明:反应温度为40℃时,固定化酶在pH 5.0,0.01mol/L的醋酸缓冲液条件下,给酶量为46mg/g载体,戊二醛体积分数为0.01%时,固定化酶的酶活达到最高19 250U/g,相对于优化前1 940U/g提高了近10倍,成功应用于抗HCG抗体水解制备F(ab′)2片段:经SDS-PAGE电泳检测,F(ab′)2片段达到电泳纯.ELISA反应检测表明:片段仍保留较高的活性,效价为1∶12 000. 展开更多
关键词 抗HCG抗体 固定化酶 木瓜蛋白酶 f(ab’)2片段 ELISA 纸纤维
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绿色无毒黄曲霉毒素B_1免疫检测方法 被引量:6
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作者 张勋 匡华 +3 位作者 徐丽广 马伟 刘丽强 胥传来 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1293-1297,共5页
建立了一种基于抗独特型抗体的绿色无毒的ELISA方法,并用于检测面粉中黄曲霉毒素B1。通过酶解2种抗黄曲霉毒素小鼠单克隆抗体(11A9和1G3)制备F(db’)2片段,并将其免疫新西兰大白兔制备抗独特型抗体。最终得到两种抗独特型抗体,... 建立了一种基于抗独特型抗体的绿色无毒的ELISA方法,并用于检测面粉中黄曲霉毒素B1。通过酶解2种抗黄曲霉毒素小鼠单克隆抗体(11A9和1G3)制备F(db’)2片段,并将其免疫新西兰大白兔制备抗独特型抗体。最终得到两种抗独特型抗体,并对抗独特型抗体和AFB。进行相关性分析。通过实际样品添加回收,其批内回收率为115.60%~121.88%,变异系数在5%以内;而批间回收率为111.89%~126.98%,变异系数低于8%。分析结果准确可靠,表明此无毒绿色ELISA是一种安全可靠的AFB1分析方法。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 f(ab’)2片段 抗独特型抗体 无毒ELISA
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抗大田软海绵酸单抗独特型抗体的制备及鉴定 被引量:4
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作者 林超 王东旭 +6 位作者 任洪林 柳增善 周玉 李岩松 闫东明 王里奇 卢士英 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第11期110-113,共4页
目的:研制大田软海绵酸(okadaic acid,OA)单抗的独特型抗体并鉴定其模拟抗原特性,为建立无毒检测提供借鉴。方法:利用小鼠腹水法大量制备抗OA单抗,经辛酸饱和硫酸铵法纯化后用胃蛋白酶酶切制备F(ab’)2片段,免疫日本大耳白兔,取其血清,... 目的:研制大田软海绵酸(okadaic acid,OA)单抗的独特型抗体并鉴定其模拟抗原特性,为建立无毒检测提供借鉴。方法:利用小鼠腹水法大量制备抗OA单抗,经辛酸饱和硫酸铵法纯化后用胃蛋白酶酶切制备F(ab’)2片段,免疫日本大耳白兔,取其血清,琼脂扩散法检测血清抗体与抗OA单抗反应活性,ELISA方法鉴定血清抗体与抗OA单抗反应活性及与OA竞争活性。结果:该抗独特型抗体与抗OA单抗呈阳性反应,且可抑制抗OA单抗与固相抗原OA-OVA的结合。结论:制备的抗OA单抗的独特型抗体与OA抗原存在内影像的关系,可替代毒素用于检测。 展开更多
关键词 大田软海绵酸 f(ab’)2片段 抗独特型抗体 内影像
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