期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
2
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
大肠杆菌菌株ATCC 25922碱性磷酸酶的原核表达、纯化及其活性研究
被引量：
5
1
作者
高明春
李雪萌
+1 位作者
张润祥
王君伟
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第8期48-53,共6页
使用常规PCR法以大肠杆菌菌株ATCC 25922基因组为模板,克隆到该菌株的碱性磷酸酶成熟肽基因,并将其构建到原核表达载体pET-30a（＋）的Bam HⅠ、XhoⅠ之间,获得重组表达载体pET-30a-EAP。并且我们将pET-30a-EAP转化到大肠杆菌RosettaTM...
使用常规PCR法以大肠杆菌菌株ATCC 25922基因组为模板,克隆到该菌株的碱性磷酸酶成熟肽基因,并将其构建到原核表达载体pET-30a（＋）的Bam HⅠ、XhoⅠ之间,获得重组表达载体pET-30a-EAP。并且我们将pET-30a-EAP转化到大肠杆菌RosettaTM（DE3）pLysS中,经IPTG诱导表达后,获得大小为52ku的目的蛋白EAP。经试验证明该蛋白以可溶形式为主。进而,高效表达的重组碱性磷酸酶经亲和层析法纯化后被用于活性鉴定。pNPP的显色反应与去磷酸化试验证实来自ATCC 25922的重组碱性磷酸酶具有催化磷酸单酯水解活性,而且酶热稳定性高、有效工作温度范围大,与其他蛋白融合表达时仍保持酶活性。以上研究结果为大肠杆菌菌株ATCC 25922碱性磷酸酶的规模化生产及在免疫酶技术领域中的应用提供了重要的参考依据。
展开更多
关键词
大肠杆菌碱性磷酸酶
ATCC25922
表达纯化
活性鉴定
在线阅读
下载PDF
职称材料
乙醇对大肠杆菌碱性磷酸酶活性与构象的影响
被引量：
1
2
作者
戴伟龙
井健
《北京师范大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期34-37,共4页
常用有机试剂乙醇作为效应物对大肠杆菌碱性磷酸酶(EAP)活性影响状态作用机制进行了研究.结果表明,EAP酶活性随着乙醇浓度增大而迅速下降,说明乙醇对EAP有明显的失活作用,IC50为13%.关于乙醇对EAP失活作用机制的研究表明,乙醇对EAP的失...
常用有机试剂乙醇作为效应物对大肠杆菌碱性磷酸酶(EAP)活性影响状态作用机制进行了研究.结果表明,EAP酶活性随着乙醇浓度增大而迅速下降,说明乙醇对EAP有明显的失活作用,IC50为13%.关于乙醇对EAP失活作用机制的研究表明,乙醇对EAP的失活作用是以非竞争性机制模式进行的.应用荧光光谱研究EAP经乙醇微扰后的分子构象变化,发现EAP的内源荧光强度随乙醇浓度增大而增强,说明酶蛋白分子中的荧光发色基团所处微环境已经发生变化,乙醇对EAP分子构象存在显著影响.
展开更多
关键词
大肠杆菌碱性磷酸酶
乙醇
酶促活性
构象
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
大肠杆菌菌株ATCC 25922碱性磷酸酶的原核表达、纯化及其活性研究
被引量：
5
1
作者
高明春
李雪萌
张润祥
王君伟
机构
东北农业大学动物医学学院
出处
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第8期48-53,共6页
基金
国家科技支撑计划(2007BAD60B02)
黑龙江省科技计划(GAO06B202)
文摘
使用常规PCR法以大肠杆菌菌株ATCC 25922基因组为模板,克隆到该菌株的碱性磷酸酶成熟肽基因,并将其构建到原核表达载体pET-30a（＋）的Bam HⅠ、XhoⅠ之间,获得重组表达载体pET-30a-EAP。并且我们将pET-30a-EAP转化到大肠杆菌RosettaTM（DE3）pLysS中,经IPTG诱导表达后,获得大小为52ku的目的蛋白EAP。经试验证明该蛋白以可溶形式为主。进而,高效表达的重组碱性磷酸酶经亲和层析法纯化后被用于活性鉴定。pNPP的显色反应与去磷酸化试验证实来自ATCC 25922的重组碱性磷酸酶具有催化磷酸单酯水解活性,而且酶热稳定性高、有效工作温度范围大,与其他蛋白融合表达时仍保持酶活性。以上研究结果为大肠杆菌菌株ATCC 25922碱性磷酸酶的规模化生产及在免疫酶技术领域中的应用提供了重要的参考依据。
关键词
大肠杆菌碱性磷酸酶
ATCC25922
表达纯化
活性鉴定
Keywords
escherichia
coli
alkaline
phosphatase
（eap
）
ATCC 25922
prokaryotic expression and purification
enzymatic
activity
analysis
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
乙醇对大肠杆菌碱性磷酸酶活性与构象的影响
被引量：
1
2
作者
戴伟龙
井健
机构
北京师范大学生命科学学院
出处
《北京师范大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期34-37,共4页
基金
中央高校基本科研业务费专项资金资助项目
文摘
常用有机试剂乙醇作为效应物对大肠杆菌碱性磷酸酶(EAP)活性影响状态作用机制进行了研究.结果表明,EAP酶活性随着乙醇浓度增大而迅速下降,说明乙醇对EAP有明显的失活作用,IC50为13%.关于乙醇对EAP失活作用机制的研究表明,乙醇对EAP的失活作用是以非竞争性机制模式进行的.应用荧光光谱研究EAP经乙醇微扰后的分子构象变化,发现EAP的内源荧光强度随乙醇浓度增大而增强,说明酶蛋白分子中的荧光发色基团所处微环境已经发生变化,乙醇对EAP分子构象存在显著影响.
关键词
大肠杆菌碱性磷酸酶
乙醇
酶促活性
构象
Keywords
escherichia coli alkaline phosphatase（eap） ethanol enzymatic activity conformation
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大肠杆菌菌株ATCC 25922碱性磷酸酶的原核表达、纯化及其活性研究
高明春
李雪萌
张润祥
王君伟
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
乙醇对大肠杆菌碱性磷酸酶活性与构象的影响
戴伟龙
井健
《北京师范大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
