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EphB2配体结合域基因片段的高效表达
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作者 张晓光 刘新平 +4 位作者 李福洋 茹晓荣 季少平 药立波 苏成芝 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期181-183,共3页
目的 :对酪氨酸蛋白激酶受体EphB2胞外的配体结合区基因进行表达研究。方法 :编码EphB2胞外的配体结合区基因片段克隆于pBluescriptSK(- )质粒中 ,经全自动序列分析仪测序正确后 ,再克隆重组入表达载体pGEX4T 1,构建高效表达克隆pHT ,... 目的 :对酪氨酸蛋白激酶受体EphB2胞外的配体结合区基因进行表达研究。方法 :编码EphB2胞外的配体结合区基因片段克隆于pBluescriptSK(- )质粒中 ,经全自动序列分析仪测序正确后 ,再克隆重组入表达载体pGEX4T 1,构建高效表达克隆pHT ,转化大肠杆菌DH5α表达。结果 :经IPTG诱导 5h ,蛋白表达即达高峰 ,SDS PAGE及凝胶密度扫描分析 ,表达出约41kD大小的蛋白 ,占菌体总蛋白的 35 %。结论 :该区基因片段的高效表达为进一步制备其抗体 ,研究其配体 展开更多
关键词 ephb2配体 酪氨酸蛋白激酶受体 基因表达 胃肿瘤
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成人与儿童急性髓系白血病患者肿瘤免疫相关的差异表达基因分析 被引量:1
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作者 李玲玲 李倩 +2 位作者 李明玉 刘峥 沈倩诚 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期579-587,共9页
目的·分析成人与儿童急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者骨髓中肿瘤免疫相关的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。方法·从GEO(Gene Expression Omnibus)数据库下载GSE134589数据集,选取初次确... 目的·分析成人与儿童急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者骨髓中肿瘤免疫相关的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。方法·从GEO(Gene Expression Omnibus)数据库下载GSE134589数据集,选取初次确诊/复发状态的患者,按年龄分为儿童组(0~16岁,34例)、中青年组(17~59岁,62例)和老年组(60~80岁,62例),用R语言程序包筛选不同组患者骨髓样本中肿瘤免疫相关的DEGs。选取中青年组与儿童组,老年组与儿童组共同的DEGs,与完全缓解状态的成人与儿童患者的DEGs进行比对,并进行功能富集分析。利用Kaplan-Meier法筛选与预后显著相关的基因,通过构建蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络筛选核心调控基因,将以上2种方法筛选出的基因视为关键基因。用GEPIA服务器对比关键基因在AML、弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)和胸腺癌的肿瘤样本与正常人样本的表达量,在GEXC网站分析关键基因在AML患者肿瘤干细胞和健康人的原始造血细胞中mRNA的表达情况。结果·GSE134589数据集中,中青年组与儿童组比,上调的DEGs有51个,下调的有21个;老年组与儿童组比,上调的DEGs有47个,下调的有20个;而中青年组与老年组比,没有发现DEG。筛选了中青年组和老年组共同的肿瘤免疫相关DEGs 57个,其中上调有39个,下调有18个,仅有3个基因的表达水平差异在疾病完全缓解时仍有统计学意义。57个共同DEGs主要富集在白细胞迁移和细胞因子介导的信号通路,其中白细胞介素2受体α亚基(interleukin-2 receptor subunit alpha,IL2RA)、FMS-样酪氨酸激酶3(FMS-like tyrosine kinase 3,FLT3)高表达的患者与低表达的患者相比总体生存期显著缩短(均P<0.05),补体成分3a受体1(complement component 3a receptor 1,C3AR1)是PPI网络的核心调控基因。这3个基因作为关键基因,均在AML肿瘤样本特异性高表达(均P<0.05),IL2RA还在DLBCL患者样本中显著高表达(P<0.05)。IL2RA在AML肿瘤干细胞和健康人的原始造血细胞中均低表达,FLT3均高表达,而C3AR1的表达在AML肿瘤干细胞特异性升高。结论·成人与儿童AML患者预后的差异可能与骨髓中肿瘤免疫相关基因表达的差异有关,其中IL2RA、FLT3和C3AR1可能是发挥重要作用的关键基因。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 肿瘤免疫 差异表达基因 白细胞介素2受体α亚基 FMS-样酪氨酸激酶3 补体成分3a受体1
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