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siRNA沉默EPAS1基因对低氧条件下大鼠PASMCs增殖的影响
被引量:
1
1
作者
孙莉
杨全余
+1 位作者
嘎琴
靳国恩
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第4期320-325,共6页
目的探讨应用siRNA技术沉默EPAS1(HIF-2α)基因表达对低氧条件下培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响。方法原代培养大鼠PASMCs共采用免疫荧光法进行鉴定。构建特异性EPAS1 siRNA脂质体,转染PASMCs,从3个干扰靶点中选取效果...
目的探讨应用siRNA技术沉默EPAS1(HIF-2α)基因表达对低氧条件下培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响。方法原代培养大鼠PASMCs共采用免疫荧光法进行鉴定。构建特异性EPAS1 siRNA脂质体,转染PASMCs,从3个干扰靶点中选取效果最好的靶点进行干扰;在常氧(37℃、5%CO_2、20%O_2)和低氧(37℃、5%CO_2、2%O_2)条件下分别培养24、48、72h,采用Western blotting检测PASMCs中EPAS1、VEGF蛋白的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖情况。结果成功分离培养原代大鼠PASMCs并经免疫荧光鉴定证实。将特异性的EPAS1 siRNA脂质体转染到PASMCs,选择干扰效果最好的靶点2进行干扰。与常氧条件比较,低氧条件下PASMCs中VEGF蛋白的表达及细胞增殖水平均明显升高;沉默EPAS1后,无论低氧还是常氧条件下,PASMCs中VEGF蛋白的表达及细胞增殖水平均明显降低。结论 EPAS1基因参与了低氧条件下大鼠PASMCs增殖的调控,其调节可能是通过VEGF介导完成的。
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关键词
epas1基因沉默
低氧
肺动脉平滑肌细胞
增殖
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题名
siRNA沉默EPAS1基因对低氧条件下大鼠PASMCs增殖的影响
被引量:
1
1
作者
孙莉
杨全余
嘎琴
靳国恩
机构
青海大学附属医院科研管理部
青海大学医学院高原医学研究中心
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第4期320-325,共6页
基金
国家自然科学基金(81160243)
青海省留学回国人员科技活动项目(青人社厅函[2011]518号)~~
文摘
目的探讨应用siRNA技术沉默EPAS1(HIF-2α)基因表达对低氧条件下培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响。方法原代培养大鼠PASMCs共采用免疫荧光法进行鉴定。构建特异性EPAS1 siRNA脂质体,转染PASMCs,从3个干扰靶点中选取效果最好的靶点进行干扰;在常氧(37℃、5%CO_2、20%O_2)和低氧(37℃、5%CO_2、2%O_2)条件下分别培养24、48、72h,采用Western blotting检测PASMCs中EPAS1、VEGF蛋白的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖情况。结果成功分离培养原代大鼠PASMCs并经免疫荧光鉴定证实。将特异性的EPAS1 siRNA脂质体转染到PASMCs,选择干扰效果最好的靶点2进行干扰。与常氧条件比较,低氧条件下PASMCs中VEGF蛋白的表达及细胞增殖水平均明显升高;沉默EPAS1后,无论低氧还是常氧条件下,PASMCs中VEGF蛋白的表达及细胞增殖水平均明显降低。结论 EPAS1基因参与了低氧条件下大鼠PASMCs增殖的调控,其调节可能是通过VEGF介导完成的。
关键词
epas1基因沉默
低氧
肺动脉平滑肌细胞
增殖
Keywords
epas
1
gene
hypoxia
pulmonary arterial smooth muscle cells
proliferation
分类号
R332 [医药卫生—人体生理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
siRNA沉默EPAS1基因对低氧条件下大鼠PASMCs增殖的影响
孙莉
杨全余
嘎琴
靳国恩
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
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