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基于IG-EMA-U2Net的黄铁矿浮选泡沫图像分割算法 被引量：2
1
作者 杜荣谦 刘琼 刘光举 《金属矿山》 北大核心 2025年第3期202-209,共8页
浮选泡沫的表面视觉特征是浮选工况和相关工艺指标的指示器,传统的浮选泡沫图像分割方法存在特征提取能力弱、边缘分割不准确、容易造成漏分割等问题。为解决这一现实问题,以便更科学、客观地实现对浮选作业的智能化控制,研究以黄铁矿... 浮选泡沫的表面视觉特征是浮选工况和相关工艺指标的指示器,传统的浮选泡沫图像分割方法存在特征提取能力弱、边缘分割不准确、容易造成漏分割等问题。为解决这一现实问题,以便更科学、客观地实现对浮选作业的智能化控制,研究以黄铁矿浮选泡沫为对象,提出了改进的IG-EMA-U2Net泡沫分割算法。该算法以U2Net为主干网络,首先在U2Net外部的下采样处引入EMA注意力机制,提升网络对泡沫的关注度,减少下采样和跳跃连接造成的空间信息损失;再将改进的InceptionV1+BN模块替换RSU7残差块的第一层卷积池化模块,得到IRU模块,增强对泡沫图像特征信息的提取能力;最后提出GRU模块,使用GhostConv替代RSU5、RSU4和RSU4F中的传统卷积,在分割精度不变的情况下,减小算法的计算成本和参数量。研究表明,IG-EMA-U2Net算法的Dice系数、召回率R和F1-score分别达93.98%、94.07%和94.00%,较常用分割算法UNet、DeepLabV3+和U2Net的分割精度更高、分割效果更好,有效减少了漏分割。 展开更多
关键词 泡沫浮选 图像分割 U2Net ema模块 GhostConv
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芦苇化感物质EMA对铜绿微囊藻生理特性的影响 被引量：55
2
作者 李锋民 胡洪营 +2 位作者 种云霄 门玉洁 郭美婷 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期377-381,共5页
研究了芦苇产生的化感物质2-甲基乙酰乙酸乙酯(EMA)对铜绿微囊藻呼吸作用、光合作用和抗氧化酶体系的影响.结果表明,在实验条件下,EMA能提高铜绿微囊藻的呼吸速率,使培养瓶中的CO2浓度升高;降低铜绿微囊藻的光合作用速率,促进了铜绿微... 研究了芦苇产生的化感物质2-甲基乙酰乙酸乙酯(EMA)对铜绿微囊藻呼吸作用、光合作用和抗氧化酶体系的影响.结果表明,在实验条件下,EMA能提高铜绿微囊藻的呼吸速率,使培养瓶中的CO2浓度升高;降低铜绿微囊藻的光合作用速率,促进了铜绿微囊藻叶绿素a的降解,使其含量降低;较低浓度的EMA提高了铜绿微囊藻的过氧化物酶、超氧化物歧化酶和脱氢酶的活性,而更高浓度的EMA则显著降低了这些酶活性(α=0.05).高浓度EMA抑制铜绿微囊藻的抗氧化酶体系并促进藻类叶绿素的降解可能是其抑藻机理之一. 展开更多
关键词 化感作用 2-甲基乙酰乙酸乙酯(ema) 铜绿微囊藻 叶绿素A 呼吸速率 抗氧化酶活性
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EMA实时荧光PCR技术检测食品中单核增生李斯特活菌方法研究 被引量：8
3
作者 张俊彦 梅玲玲 +6 位作者 徐昌平 占利 陈鸿鹄 张云怡 陈建才 张政 杨勇 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1007-1012,共6页
目的利用叠氮溴化乙錠(EMA)实时荧光PCR技术,建立直接检测食品中单增李斯特活菌的方法。方法根据单核李斯特菌inlA基因设计特异性引物和探针。用不同EMA浓度、不同光照次数优化样品前处理条件。用平板计数法验证该方法的检出限及对死菌... 目的利用叠氮溴化乙錠(EMA)实时荧光PCR技术,建立直接检测食品中单增李斯特活菌的方法。方法根据单核李斯特菌inlA基因设计特异性引物和探针。用不同EMA浓度、不同光照次数优化样品前处理条件。用平板计数法验证该方法的检出限及对死菌的抑制率。用35株单增李斯特菌、25株非单核李斯特菌、92株非李斯特菌验证该方法特异性。用添加了不同剂量的单增李斯特死菌、活菌及金黄色葡萄球菌的15件饮料,15件熟肉制品进行模拟实样检测。结果单增李斯特活菌EMA实时荧光PCR方法的Ct=(38.46-3.30)×log(菌量)(R2=0.999)。最低检测的活菌浓度为55cfu/反应。对死菌DNA抑制效率≥99.98%。35株单增李斯特菌Ct值最低16.21,最高29.38,而25株非单单增李斯特菌、92株非单增李斯特菌的Ct值均大于35或无Ct值。重复试验Ct值变异系数小于5%。30件模拟实样单增李斯特菌的检测结果与常规方法完全一致。且EMA实时荧光PCR方法检出时间仅需10h左右,而常规分离培养方法需要5~7d。结论 EMA实时荧光PCR检测技术是一种快速、简便、特异性强、灵敏度高、仅检测单增李斯特菌活菌的有效方法,可作为食品中检测单增李斯特活菌的方法推广使用。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 活菌 叠氮溴化乙锭(ema) 实时荧光PCR技术
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基于DNA染料EMA的RT-PCR技术定量检测海产品中病原性副溶血弧菌活细胞 被引量：11
4
作者 祝儒刚 吕淑霞 +1 位作者 刘月萍 张良 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第8期219-225,共7页
将一种DNA染料叠氮溴化乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术相结合,建立一种能选择性定量检测牡蛎中trh阳性副溶血弧菌活细胞的新方法。结果表明:使EMA成功插入死细胞DNA并且光解溶液中游离EMA... 将一种DNA染料叠氮溴化乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术相结合,建立一种能选择性定量检测牡蛎中trh阳性副溶血弧菌活细胞的新方法。结果表明:使EMA成功插入死细胞DNA并且光解溶液中游离EMA的最佳曝光时间为20min;不抑制副溶血弧菌活细胞DNA扩增的最大EMA质量浓度为2.0μg/mL;完全抑制热致死细胞DNA扩增的最小EMA质量浓度为1.0μg/mL;人工污染牡蛎样品,不经过富集,在2.0×103～2.0×107CFU范围内细胞数的常用对数值与Ct值之间呈严格的负相关性,并且纯培养与人工污染牡蛎样品的RT-PCR检测限均为2×103CFU,即人工污染牡蛎样品的RT-PCR检测灵敏度为每克牡蛎样品400个活细胞;冻融实验表明,在温度低于55℃的水浴中对冷冻海产品进行解冻时,冻融过程对副溶血弧菌活细胞几乎没有影响。该方法是一种快速、灵敏且能有效鉴别并定量检测病原活细胞的新方法。 展开更多
关键词 叠氮溴化乙锭(ema) 实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR) 海产品 副溶血弧菌 活细胞
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EMA结合PCR技术有效鉴别副溶血弧菌死活细胞 被引量：11
5
作者 李青 钟青萍 王丽 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期108-111,共4页
将EMA（Ethidium monoazide）选择渗透性和PCR技术相结合,建立检验副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus死活细胞的EMA-PCR新方法.研究表明,25μg/mL或更高质量浓度的EMA可以抑制2.0×107CFU/mL的副溶血弧菌死细胞DNA的扩增,未经EMA... 将EMA（Ethidium monoazide）选择渗透性和PCR技术相结合,建立检验副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus死活细胞的EMA-PCR新方法.研究表明,25μg/mL或更高质量浓度的EMA可以抑制2.0×107CFU/mL的副溶血弧菌死细胞DNA的扩增,未经EMA处理的对应样品PCR反应呈阳性;而用相同浓度EMA处理2.0×107CFU/mL的活细胞菌悬液能扩增出目的产物.同时,对EMA处理中卤素灯的曝光时间进行优化,确定EMA处理的最佳曝光时间为5~10 min.结果证明,该方法是一种快速有效的检测死活细胞的新方法,能有效避免PCR检测假阳性结果的出现. 展开更多
关键词 ema PCR 副溶血弧菌 死活细胞
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EMA-LAMP方法快速检测死/活的食源性沙门氏菌 被引量：19
6
作者 鲁玉侠 郭祀远 +1 位作者 石磊 李琳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第22期324-327,共4页
建立应用叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide,EMA)与环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)相结合检测沙门氏死/活菌的方法。该方法具有快速、方便和灵敏度高等优点,以SYBRGreenI为显色剂、恒温65℃、反应1h便可... 建立应用叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide,EMA)与环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)相结合检测沙门氏死/活菌的方法。该方法具有快速、方便和灵敏度高等优点,以SYBRGreenI为显色剂、恒温65℃、反应1h便可得出检测结果。该检测系统中,得到241bp的目标片段和类似于梯子状的系列条带。该方法的检测限为10-10gDNA/管,是EMA-PCR方法的1%。本方法实用性强,具有普遍的应用意义。 展开更多
关键词 沙门氏菌 快速检测 ema-LAMP
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感染HCMV的腮腺导管上皮细胞CK和EMA丢失 被引量：9
7
作者 杨国嵘 黄高昇 +7 位作者 王恩华 宋继谒 郭英 王娟红 梁蓉 王哲 闫庆国 冯骥良 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期465-467,共3页
目的　研究人类巨细胞病毒 (HCMV)感染对腮腺导管上皮细胞表型产生的影响。方法　用免疫组化方法检测腮腺巨细胞包涵体病石蜡包埋组织中巨细胞病毒以及早期抗原、CK、EMA等的表达。结果　腮腺导管上皮细胞感染人巨细胞病毒后 ,作为上皮... 目的　研究人类巨细胞病毒 (HCMV)感染对腮腺导管上皮细胞表型产生的影响。方法　用免疫组化方法检测腮腺巨细胞包涵体病石蜡包埋组织中巨细胞病毒以及早期抗原、CK、EMA等的表达。结果　腮腺导管上皮细胞感染人巨细胞病毒后 ,作为上皮性标志物的CK和EMA表达呈阴性。结论　人巨细胞病毒感染腮腺导管上皮细胞使其CK和EMA丢失。 展开更多
关键词 感染HCMV 腮腺导管 上皮细胞 CK ema丢失 人巨细胞病毒 细胞角蛋白
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基于数据融合滤波算法的EMA故障自修复策略 被引量：3
8
作者 周勇 王嫚 +2 位作者 刘奇 张超 张举中 《西北工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第2期204-208,共5页
为了提高双余度机电作动器(EMA)伺服系统的可靠性和容错能力,分析了EMA系统中永磁无刷直流电机用线性可变差动变压器(LVDT)和旋转可变差动变压器(RVDT)及其辅助电路的故障在线自修复技术,提出了一种基于数据融合滤波算法的故障自修复控... 为了提高双余度机电作动器(EMA)伺服系统的可靠性和容错能力,分析了EMA系统中永磁无刷直流电机用线性可变差动变压器(LVDT)和旋转可变差动变压器(RVDT)及其辅助电路的故障在线自修复技术,提出了一种基于数据融合滤波算法的故障自修复控制策略。该方法可快速定位故障点,实现EMA伺服系统的故障检测与隔离(FDI),并对故障数据进行重组。该方法可有效提高EMA的可靠性、寿命和可维护性,满足EMA伺服系统的发展要求,推动其故障预测与健康管理的理论研究及技术应用进程。 展开更多
关键词 数据融合 滤波 ema 故障检测 故障自修复
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EMA-PCR检测金黄色葡萄球菌活菌的方法 被引量：4
9
作者 赵素君 李江凌 +6 位作者 谢晶 曹冶 王秋实 叶勇刚 罗丹丹 叶健强 廖党金 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第3期18-20,共3页
根据金黄色葡萄球菌(SA)耐热核酸酶编码基因(nuc基因)设计特异性引物,对试验菌株进行PCR检测,结果显示,金黄色葡萄球菌扩增出大小为480bp的特异性条带,而其他对照菌株未扩增出条带。由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,从... 根据金黄色葡萄球菌(SA)耐热核酸酶编码基因(nuc基因)设计特异性引物,对试验菌株进行PCR检测,结果显示,金黄色葡萄球菌扩增出大小为480bp的特异性条带,而其他对照菌株未扩增出条带。由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,从而使检测结果往往出现很高的假阳性。本试验利用EMA能穿过死细菌的细胞膜并在光激活的作用下能与基因组DNA共价结合,从而能抑制死菌DNA进行PCR扩增的特性,建立了一种快速、有效的检测金黄色葡萄球菌活菌的EMA-PCR方法,较传统PCR大大提高了检测的准确性和可靠性,该方法检测灵敏度可达15CFU/mL。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 flue基因 ema—PCR法 死细菌 活细菌
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EMA在ABS/PMMA合金中的作用 被引量：10
10
作者 许家友 林凯勉 +1 位作者 黄鹄斌 梁以峰 《塑料》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期84-86,共3页
通过DSC、SEM和力学性能测试研究了EMA在ABS/PMMA中的作用,结果表明:EMA对ABS/PMMA合金具有增容和增韧作用。因为EMA含有与ABS中丁二烯结构相似的乙烯基,又含有与PMMA中相同的甲基丙烯酸甲酯,可以提高ABS/PMMA的界面相容性,但同时EMA在A... 通过DSC、SEM和力学性能测试研究了EMA在ABS/PMMA中的作用,结果表明:EMA对ABS/PMMA合金具有增容和增韧作用。因为EMA含有与ABS中丁二烯结构相似的乙烯基,又含有与PMMA中相同的甲基丙烯酸甲酯,可以提高ABS/PMMA的界面相容性,但同时EMA在ABS/PMMA中呈球形分散,起应力集中物作用,能提高ABS/PMMA的韧性;EMA对ABS/PMMA增容程度影响着ABS/PMMA合金的表面光泽度,当EMA质量含量为6%时,ABS/PMMA合金的表面光泽度达到最大值。 展开更多
关键词 ema 相容性 ABS PMMA 光泽度
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柑橘溃疡病菌EMA-PCR快速活体检测技术的建立 被引量：6
11
作者 熊书 王中康 +1 位作者 卢小林 殷幼平 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期78-84,共7页
传统PCR方法不能诊断柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp.citri Gabriel)的死活状态,往往导致假阳性检测结果。本研究将特异性核酸染料叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)与PCR技术结合,旨在建立柑橘溃疡病活菌的快速检... 传统PCR方法不能诊断柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp.citri Gabriel)的死活状态,往往导致假阳性检测结果。本研究将特异性核酸染料叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)与PCR技术结合,旨在建立柑橘溃疡病活菌的快速检测技术。根据柑橘溃疡病菌独有的保守蛋白基因设计特异性引物扩增出278bp的靶带,PCR反应的检测下限为25个细胞/25μL或2.75pg/25μL。EMA-PCR结果表明:当卤钨灯曝光时间1min,EMA终浓度为1.0mg/L时,能有效抑制1.0×108 cfu/mL死菌的扩增;当EMA的浓度小于30mg/L时,EMA对上述相同浓度活菌靶基因的扩增没有明显的抑制。EMA-PCR对死活混合菌的扩增表明,活菌数在6.875×101～6.875×105 cfu/PCR范围时,荧光强度与混合体系中活菌的对数值有线性关系。基于以上建立的EMA-PCR活体检测技术,对疑似带病柑橘材料进行检测,结果发现能降低柑橘溃疡病菌检测过程中的假阳性,有望为柑橘溃疡病的检疫检验提供更科学的技术手段。 展开更多
关键词 柑橘溃疡病菌 ema-PCR 死菌与活菌 检疫
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用EMA-1基因重组蛋白对马巴贝斯虫病的血清学调查 被引量：7
12
作者 许应天 梁晚枫 +2 位作者 宋建臣 张守发 李春英 《动物医学进展》 CSCD 2003年第6期108-109,共2页
在寄生虫病的血清学诊断中 ,常用的虫体抗原有纯化难、制备有限和部分交叉反应等缺点。以重组蛋白作为诊断抗原具有特异性强、敏感性高、制备简单和易纯化等优点。本试验以EMA-1基因重组蛋白为诊断抗原 ,用 EL ISA方法对延边地区马巴贝... 在寄生虫病的血清学诊断中 ,常用的虫体抗原有纯化难、制备有限和部分交叉反应等缺点。以重组蛋白作为诊断抗原具有特异性强、敏感性高、制备简单和易纯化等优点。本试验以EMA-1基因重组蛋白为诊断抗原 ,用 EL ISA方法对延边地区马巴贝斯虫病进行了血清学调查。结果表明 ,该地区马巴贝斯虫病的血清阳性率为 3 4.2 % ( 3 8/ 1 1 1 ) ,而血涂片染色镜检法的阳性率为 1 3 .5% ( 1 5/ 1 1 1 ) ,两者之间差异极显著 ( P <0 .0 1 )。不同牧地和不同年龄被检血清阳性率之间未见显著差异。 展开更多
关键词 ema-1基因 基因重组 重组蛋白 马巴贝斯虫病 血清学 寄生虫病
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癌细胞DNA和EMA双标记微波染色技术 被引量：3
13
作者 熊正文 李春光 +2 位作者 胡海霞 苏红 高磊岩 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期360-361,共2页
癌细胞ＤＮＡ和ＥＭＡ双标记微波染色技术熊正文，李春光，胡海霞，苏红，高磊岩癌细胞核内ＤＮＡ含量测定和倍体分析，对于肿瘤的早期诊断、组织学分级、预后判定及治疗方案选择等均有重要的临床实用意义。ＥＭＡ是主要分布于细胞膜上... 癌细胞ＤＮＡ和ＥＭＡ双标记微波染色技术熊正文，李春光，胡海霞，苏红，高磊岩癌细胞核内ＤＮＡ含量测定和倍体分析，对于肿瘤的早期诊断、组织学分级、预后判定及治疗方案选择等均有重要的临床实用意义。ＥＭＡ是主要分布于细胞膜上和胞浆内的一种糖蛋白，在肿瘤病理诊... 展开更多
关键词 癌细胞 DNA ema 微波标记
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EMA-LAMP方法快速鉴别检测单增李斯特菌 被引量：4
14
作者 吕淑霞 徐彬 +2 位作者 于晓丹 金雪花 林英 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期951-956,共6页
作者建立一种将叠氮溴化乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)结合环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的新分析方法(EMA-LAMP),快速鉴别检测单增李斯特菌。通过对单增李斯特菌hly基因的六个区域设计4条LAMP... 作者建立一种将叠氮溴化乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)结合环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的新分析方法(EMA-LAMP),快速鉴别检测单增李斯特菌。通过对单增李斯特菌hly基因的六个区域设计4条LAMP特异性引物,EMA-LAMP在63℃下反应1 h,检测单增李斯特菌的死活细胞。结果表明,在浓度为2.0×108CFU/mL的单增李斯特死菌悬液中,使EMA激活光解进入死细胞中且与DNA结合的最佳曝光时间至少为20 min,不抑制活菌细胞DNA的LAMP扩增的最大EMA质量浓度为10μg/mL,而抑制死菌细胞DNA的LAMP扩增的最小EMA质量浓度为4.0μg/mL;活菌细胞的检出限为20 CFU/mL。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 ema-LAMP 快速鉴别检测 死活细胞
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EMA-LAMP方法快速检测鉴别副溶血性弧菌 被引量：6
15
作者 金雪花 吕淑霞 +2 位作者 张超 徐彬 于晓丹 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第4期6-12,共7页
建立将DNA染料EMA(ethidium bromide monoazide)结合环介导等温扩增技术(loop-mediated isother-mal amplification,LAMP)的方法(EMA-LAMP),用于检测鉴别副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)死/活菌细胞。针对副溶血性弧菌不耐热溶... 建立将DNA染料EMA(ethidium bromide monoazide)结合环介导等温扩增技术(loop-mediated isother-mal amplification,LAMP)的方法(EMA-LAMP),用于检测鉴别副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)死/活菌细胞。针对副溶血性弧菌不耐热溶血素基因tlh(thermolabile hemolysin)特异性序列的6个位点设计4条引物及2条环引物,进行检测。结果表明,浓度为8.0μg/mL或更高浓度的EMA,至少经25 min的曝光处理,能够有效抑制浓度为1×108cfu/mL的副溶血性弧菌死细胞的扩增,而对用相同浓度EMA处理的副溶血性弧菌活细胞扩增没有影响。经EMA处理,含有不同比例的副溶血弧菌死细胞和活细胞的混合液中,活菌的最小检测限为1.0×102cfu/mL。EMA-LAMP方法比EMA-PCR方法区分死活细胞中的活细胞更为有效,是一种能够快速、灵敏且更为有效鉴别副溶血性弧菌死活细胞的新方法。 展开更多
关键词 ema-LAMP 副溶血性弧菌 死活细胞
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欧盟兽药上市许可途径介绍及EMA集中审评程序批准兽药情况分析 被引量：3
16
作者 孙雷 李丹 +4 位作者 徐倩 王亦琳 叶妮 孙红洋 汪霞 《中国兽药杂志》 2024年第8期36-46,共11页
本文介绍了欧盟兽药上市许可途径,汇总了EMA(含EMEA)成立以来由集中审评程序(CP)批准的兽药情况,并从批准动物和批准用途等方面进行统计分析,希望能对我国的兽药研发和审评工作有一定指导意义。
关键词 欧盟 ema 兽药 上市许可 集中审评程序 批准
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基于EMA3D的机载设备闪电电磁环境分析 被引量：3
17
作者 张铁纯 吴金香 齐亮 《系统仿真学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1350-1354,共5页
闪电与飞机相互作用,在机载电缆束上产生电压和电流,这些电压和电流可能会导致关键电子设备损坏或出现故障,因此危害飞行安全。随着飞机材料和机载关键电子电气设备的不断改进和提高,航空工业界越来越关注飞机的闪电电磁环境对机载设备... 闪电与飞机相互作用,在机载电缆束上产生电压和电流,这些电压和电流可能会导致关键电子设备损坏或出现故障,因此危害飞行安全。随着飞机材料和机载关键电子电气设备的不断改进和提高,航空工业界越来越关注飞机的闪电电磁环境对机载设备及飞机系统的影响。EMA3D可全面分析飞机遭遇闪电袭击后,其内外部电磁场分布情况,估算闪电对飞机里的线缆系统的间接效应。主要论述某机载设备的闪电电磁环境和EMA3D电磁仿真软件的功能,最后应用此软件分析飞机某机载设备周围的电场和磁场以及其连接线缆上的感应电流。 展开更多
关键词 飞机 闪电 电磁环境 ema3D
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马巴贝西虫EMA-1基因的克隆与表达 被引量：3
18
作者 张守发 鞠玉林 玄学南 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期33-35,4,共4页
通过聚合酶链式反应扩增出体外培养的马巴西虫USDA株基因EMA_1 ,将该片段连接到克隆质粒载体pUC1 9的BamHI酶切位点上 ,并对其序列进行测定。结果表明该基因长度为 83 6bp,编码的表面蛋白由 2 72个氨基酸残基组成 ,与佛罗里达 (Florida... 通过聚合酶链式反应扩增出体外培养的马巴西虫USDA株基因EMA_1 ,将该片段连接到克隆质粒载体pUC1 9的BamHI酶切位点上 ,并对其序列进行测定。结果表明该基因长度为 83 6bp,编码的表面蛋白由 2 72个氨基酸残基组成 ,与佛罗里达 (Florida)株的EMA_1的氨基酸序列有 95 %左右的同源性。再将EMA_1基因片段插入到表达质粒载体pGE MEX_2的BamHI位点上 ,并导入大肠杆菌JM10 9(DE3 )中。经SDSPAGE分析和Westernblot检测的结果表明 ,马巴贝西虫USDA株基因EMA_1 ,在大肠杆菌内获得表达 ,融合蛋白的分子量为 65kDa。将其免疫给小鼠可产生特异性的抗马巴贝西虫抗体 ,且同驽巴贝西虫无交叉反应。 展开更多
关键词 马巴贝西虫 ema-1基因 马 梨形虫病 基因克隆 基因表达 分子生物学
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EMA-LAMP方法快速检测食源性副溶血性弧菌活细胞 被引量：6
19
作者 张毅 王爱华 王贵春 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第10期290-292,共3页
将一种DNA染料叠氮溴化乙锭(EMA)与环介导等温扩增技术(LAMP)相结合,建立一种能快速检测食品中食源性副溶血性弧菌活细胞的新方法。结果表明,EMA-LAMP方法最低检测限为1×10 CFU/mL,PCR方法最低检测限为1×103CFU/mL。与PCR方... 将一种DNA染料叠氮溴化乙锭(EMA)与环介导等温扩增技术(LAMP)相结合,建立一种能快速检测食品中食源性副溶血性弧菌活细胞的新方法。结果表明,EMA-LAMP方法最低检测限为1×10 CFU/mL,PCR方法最低检测限为1×103CFU/mL。与PCR方法相比较,EMA-LAMP检测方法具有快速、灵敏度高、操作简便等优点,并能检测鉴定副溶血性弧菌病原活细胞。 展开更多
关键词 环介导等温扩增技术(LAMP) 叠氮溴化乙锭(ema) 副溶血性弧菌 活细胞
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肠出血性大肠杆菌O157∶H7 EMA-PCR检测技术的建立 被引量：5
20
作者 赵素君 谢晶 +6 位作者 曹冶 李江凌 王秋实 叶勇刚 罗丹丹 叶健强 廖党金 《中国草食动物科学》 CAS 2012年第4期50-53,共4页
肠出血性大肠杆菌O157∶H7是一种重要的人畜共患传染病病原菌。为建立一种特异、灵敏的O157∶H7新型检测技术,以O157抗原基因(rfbE基因)为模板设计特异性引物,利用叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)处理菌液,沸水浴法制备... 肠出血性大肠杆菌O157∶H7是一种重要的人畜共患传染病病原菌。为建立一种特异、灵敏的O157∶H7新型检测技术,以O157抗原基因(rfbE基因)为模板设计特异性引物,利用叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)处理菌液,沸水浴法制备细菌裂解液,优化PCR条件,建立一种快速、有效的O157∶H7活菌EMA-PCR检测方法。结果显示:EMA-PCR可从rfbE基因阳性菌株CVCC248和两株临床分离菌株cd0912、cd0803中扩增出大小为495 bp的特异性条带,检测灵敏度可达12 CFU/mL。经EMA处理,从含有1%～100%O157∶H7 CVCC248活菌混合悬液制备的DNA中均可扩增出目的片段。因此,成功建立了肠出血性大肠杆菌O157∶H7的EMA-PCR检测方法;该方法可避免因分析的样品中含有死细菌而造成的假阳性检测结果,检测的准确性和真实性较传统PCR大大提高。O157∶H7 EMA-PCR技术的建立为O157∶H7的临床诊断提供了新的方法,具有重要的实际应用价值和良好的应用前景。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌 rfbE基因 ema-PCR 死细菌 活细菌
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