GBA敲减通过调控EGFR信号通路抑制DDP耐药卵巢癌细胞恶性进展

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作者 代小燕 罗芳 +1 位作者 谢茂华 靖芳 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第9期60-71,共12页

目的本文旨在探究β-葡萄糖苷酶(GBA)敲减对顺铂(DDP)耐药卵巢癌(OC)细胞恶性进展的影响,并探讨其调控表皮生长因子受体(EGFR)信号通路的机制。方法将A2780/DDP细胞分成4组,对照(Con)组(空白对照)、si⁃NC组(转染阴性对照si⁃NC)、si⁃GBA... 目的本文旨在探究β-葡萄糖苷酶(GBA)敲减对顺铂(DDP)耐药卵巢癌(OC)细胞恶性进展的影响,并探讨其调控表皮生长因子受体(EGFR)信号通路的机制。方法将A2780/DDP细胞分成4组,对照(Con)组(空白对照)、si⁃NC组(转染阴性对照si⁃NC)、si⁃GBA组(转染si⁃GBA)和NSC 228155组(转染si⁃GBA并用2μmol/L的NSC 228155处理)。蛋白免疫印迹检测GBA、E⁃cadherin、N⁃cadherin、Vimentin、EGFR、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化p38 MAPK(p⁃p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、p⁃ERK的蛋白表达水平。逆转录定量聚合酶链式反应(RT⁃qPCR)检测GBA的相对表达量。细胞计数试剂盒-8(CCK⁃8)检测法、平板克隆形成实验、细胞划痕愈合实验以及Transwell迁移实验对细胞的增殖活性、迁移及侵袭潜能进行了评估。将36只裸鼠分成6组,每组6只:空白对照组(注射生理盐水)、空白对照+DDP组(进行DDP给药处理)、阴性对照组(注射转染si⁃NC的A2780/DDP细胞悬液)、阴性对照+DDP组(注射转染si⁃NC的A2780/DDP细胞悬液并进行DDP给药处理)、敲低组(注射转染si⁃GBA的A2780/DDP细胞悬液)和敲低+DDP组(注射转染si⁃GBA的A2780/DDP细胞悬液并进行DDP给药处理)。观察各组裸鼠肿瘤体积与质量。结果与A2780组相比,A2780/DDP组的GBA蛋白表达水平以及mRNA相对表达量均显著上调(P<0.05)。与Con组和si⁃NC组相比,si⁃GBA组的增殖活性、克隆细胞数、划痕修复率和穿膜细胞数显著降低(P<0.05);E⁃cadherin的表达水平显著增加(P<0.05),Vimentin、N⁃cadherin、EGFR的表达水平,p⁃p38 MAPK/p38 MAPK比值以及p⁃ERK/ERK比值显著降低(P<0.05)。与si⁃GBA组相比,NSC 228155组的增殖活性、克隆细胞数、划痕修复率和穿膜细胞数显著增加(P<0.05);E⁃cadherin的表达水平显著降低(P<0.05),Vimentin、N⁃cadherinh和EGFR的表达水平,p⁃p38 MAPK/p38 MAPK比值以及p⁃ERK/ERK比值显著增加(P<0.05)。裸鼠移植瘤实验中,与空白对照组相比,空白对照+DDP组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。与阴性对照组相比,阴性对照+DDP组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。与敲低组相比,敲低+DDP组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组相比,敲低组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。与空白对照+DDP组和阴性对照+DDP组相比,敲低+DDP组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。结论敲低GBA可显著抑制DDP耐药OC细胞的增殖、迁移和侵袭等恶性行为,并对裸鼠A2780/DDP细胞皮下移植瘤的生长发挥抑制作用,其机制可能通过抑制EGFR/MAPK/ERK信号通路来实现。 展开更多

关键词 GBA egfr信号通路 顺铂 耐药 卵巢癌

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百蕊草通过调节肠道菌群和调控EGFR/PI3K/Akt信号通路改善小鼠抗生素相关性腹泻 被引量：2

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作者 徐皓男 张放 +3 位作者 黄钰莹 姚其盛 管悦琴 陈浩 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第2期285-295,共11页

目的基于网络药理学与16S rRNA高通量测序探究百蕊草(TCT)治疗抗生素相关性腹泻(AAD)的作用机制。方法通过网络药理学收集百蕊草与AAD的共有靶点与基因,构建蛋白质相互作用网络,使用KEGG通路富集分析筛选关键信号通路,使用AutoDock Vin... 目的基于网络药理学与16S rRNA高通量测序探究百蕊草(TCT)治疗抗生素相关性腹泻(AAD)的作用机制。方法通过网络药理学收集百蕊草与AAD的共有靶点与基因,构建蛋白质相互作用网络,使用KEGG通路富集分析筛选关键信号通路,使用AutoDock Vina进行分子对接验证,并使用GROMACS进行分子动力学模拟以验证活性成分与核心靶点的静态及动态结合变化。动物实验部分采用灌胃盐酸林可霉素建立AAD小鼠模型,40只KM小鼠随机分为空白对照组、自然恢复组(NR)、TCT低剂量组(TCT-L)、TCT高剂量组(TCT-H),雌雄各半(n=10)。实验期间每天分别灌胃给予1%羧甲基纤维素钠和1.5 g/kg和3 g/kg的百蕊草凝胶溶液,观察并记录小鼠体质量变化和腹泻情况。使用HE染色观察各组小鼠结肠病理变化,使用ELISA法检测炎症因子IL-6和TNF-α含量,使用16S rRNA测序技术检测小鼠肠道菌群的变化,采用Western blotting检测各组小鼠EGFR、p-EGFR、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达。结果网络药理学筛选得到66个百蕊草活性成分,并预测得到998个相关靶点,与1304个AAD靶点基因取交集得到68个潜在靶点,其中核心靶点有EGFR、STAT3、PIK3CA等。KEGG富集分析提示百蕊草主要通过PI3K/Akt信号通路发挥作用。分子对接结果显示核心靶点EGFR与coniferin结合自由能最低,分子动力学模拟结果显示EGFR与coniferin在10 ns时保持稳定的构象,Gibbs自由能结果显示,当蛋白质回旋半径值为3.11~3.15且均方根偏差值为0.35~0.5时,EGFR与coniferin复合物处于相对稳定的构象状态。动物实验显示,百蕊草可改善小鼠结肠组织形态,减少炎症因子分布,降低结肠组织中TNF-α和IL-6水平(P<0.001);提高肠道菌群多样性(P<0.05),调节关键菌群如联合乳杆菌属、拟杆菌属等的丰度;降低结肠组织p-EGFR、p-PI3K、p-Akt蛋白水平(P<0.01)。结论百蕊草能通过调节肠道菌群结构,调控EGFR/PI3K/Akt信号通路,降低TNF-α和IL-6炎症因子水平,达到治疗AAD的作用。 展开更多

关键词 百蕊草 抗生素相关性腹泻 网络药理学 分子动力学模拟 16S rRNA基因测序 egfr/PI3K/Akt信号通路

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GTPBP4基因沉默介导EGFR/PI3K/AKT信号通路对顺铂诱导的胃癌细胞凋亡的调控机制 被引量：5

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作者 邓淑文 夏红星 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第22期2747-2752,共6页

目的:探讨GTP结合蛋白4(GTPBP4)基因介导EGFR/PI3K/AKT信号通路对顺铂诱导的胃癌细胞凋亡的调控机制。方法:选取人胃癌细胞株MGC-803、NCI-N87、SGC-7901、MKN-45及人胃黏膜上皮细胞株GES-1,筛选癌细胞中GTPBP4表达最高的细胞株并分为6... 目的:探讨GTP结合蛋白4(GTPBP4)基因介导EGFR/PI3K/AKT信号通路对顺铂诱导的胃癌细胞凋亡的调控机制。方法:选取人胃癌细胞株MGC-803、NCI-N87、SGC-7901、MKN-45及人胃黏膜上皮细胞株GES-1,筛选癌细胞中GTPBP4表达最高的细胞株并分为6组:Blank组(胃癌细胞不做处理)、阴性对照组(转染含有无关序列的重组质粒)、GTPBP4 shRNA组(转染含有GTPBP4 shRNA的重组质粒)、GTPBP4过表达组(转染含有GTPBP4片段的重组质粒)、EGFR/PI3K/AKT inhibitor组(EGFR/PI3K/AKT通路抑制剂处理细胞)、Combined treatment组(EGFR/PI3K/AKT通路抑制剂联合GTPBP4 shRNA处理细胞),分别给予顺铂处理。qRT-PCR和Western blot检测EGFR/PI3K/AKT信号通路和凋亡相关基因的mRNA和蛋白表达水平。MTT法检测各组细胞的增殖活力。Transwell检测各组细胞侵袭情况。流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果:与人胃黏膜上皮细胞相比,胃癌细胞株中GTPBP4表达显著上调(P<0.05)。给予顺铂处理后,胃癌细胞GTPBP4表达下调。与Blank组相比,GTPBP4 shRNA组及EGFR/PI3K/AKT inhibitor组Bax表达上调,Bcl-2、EGFR、PI3K、AKT、p-PI3K和p-AKT表达均下调,细胞增殖、侵袭能力降低,凋亡率上升(P<0.05),且Combined treatment组各指标变化趋势更为明显(P<0.05)。GTPBP4过表达组与GTPBP4 shRNA组、EGFR/PI3K/AKT inhibitor组及Combined treatment组变化呈相反趋势(P<0.05)。Blank组和NC组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GTPBP4基因沉默可抑制EGFR/PI3K/AKT信号通路激活,抑制胃癌细胞的增殖、侵袭能力,促进顺铂诱导的胃癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 胃癌 GTP结合蛋白4 egfr/PI3K/AKT信号通路 顺铂 凋亡

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N-乙酰半胱氨酸通过调控EGFR/MAPK信号通路对慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌的作用研究 被引量：12

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作者 白学敏 邹立考 +1 位作者 金珍木 姜利佳 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2019年第10期1120-1127,共8页

目的:研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)通过调控表皮生长因子受体/丝裂原活化蛋白激酶(EGFR/MAPK)信号通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道黏液高分泌的作用。方法:30只雄性清洁级Wistar大鼠,随机分为3组,各10只,对照组为健康大鼠,模型组为COPD气... 目的:研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)通过调控表皮生长因子受体/丝裂原活化蛋白激酶(EGFR/MAPK)信号通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道黏液高分泌的作用。方法:30只雄性清洁级Wistar大鼠,随机分为3组,各10只,对照组为健康大鼠,模型组为COPD气道黏液高分泌大鼠,NAC组自造模起予以3 mmol/kg 100 μL NAC,共30 d,比较各组肺组织病理结果、气道阻力(RL)和动态顺应性(Cdyn)、血气分析[动脉血二氧化碳分压(PaCO 2)、动脉血氧分压(PaO 2)]、黏膜层厚度/支气管壁厚度(Reid指数)、气道上皮阳性杯状细胞/总上皮细胞数、EGFR/MAPK信号通路蛋白[EGFR、磷酸化应激活化蛋白激酶(p-JNK)/总JNK、磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38(p-P38MAPK)/总P38、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)/总ERK、黏蛋白5AC(MUC5AC)]表达。结果:对照组上皮细胞、气道黏膜上皮、黏膜下腺体、支气管管壁无异常,管腔无分泌物;模型组肺间质血管充血,肺泡间隔变薄、断裂,相邻肺泡融合形成较多囊腔,上皮细胞存在明显增厚、增生、坏死脱落,黏膜下腺体肥大,杯状细胞增生,支气管周围炎性细胞浸润明显,管壁平滑肌束萎缩、断裂;NAC组与对照组相比,存在异常,但与模型组相比,各病理特征均减轻;模型组Cdyn、PaO 2低于对照组,RL、PaCO 2高于对照组(P<0.05);NAC组Cdyn、PaO 2高于模型组,RL、PaCO 2低于模型组(P<0.05);模型组Reid指数、阳性杯状细胞/总上皮细胞数高于对照组(P<0.05);NAC组Reid指数、阳性杯状细胞/总上皮细胞数低于模型组,但与对照组相比,差异仍具有统计学意义(P<0.05);模型组p-JNK/JNK、p-P38/P38、p-ERK/ERK、MUC5AC高于对照组(P<0.05);NAC组p-JNK/JNK、p-P38/P38、p-ERK/ERK、MUC5AC低于模型组,但与对照组相比,差异仍具有统计学意义(P<0.05)。结论:N-乙酰半胱氨酸能通过抑制EGFR/MAPK信号通路表达,改善慢性阻塞性肺疾病支气管黏液腺体增生、杯状细胞广泛化生,抑制气道黏液高分泌状态,提高大鼠肺功能。 展开更多

关键词 egfr/MAPK信号通路 N-乙酰半胱氨酸 慢性阻塞性肺疾病 气道黏液 高分泌

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黄芩苷通过调控MET/EGFR通路对肝癌细胞增殖的影响 被引量：6

5

作者 胡志萍 甘宁 +2 位作者 李嫚 付皓云 胡齐欣 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3456-3460,共5页

目的考察黄芩苷通过调控MET/EGFR通路对肝癌细胞增殖的影响。方法HepG-2细胞以0、25、5、75、10、125μg/mL黄芩苷分别处理12、24、48 h,CCK-8法筛选黄芩苷最适质量浓度、作用时间。将HepG-2细胞分为对照组、黄芩苷组(125μg/mL)、克唑... 目的考察黄芩苷通过调控MET/EGFR通路对肝癌细胞增殖的影响。方法HepG-2细胞以0、25、5、75、10、125μg/mL黄芩苷分别处理12、24、48 h,CCK-8法筛选黄芩苷最适质量浓度、作用时间。将HepG-2细胞分为对照组、黄芩苷组(125μg/mL)、克唑替尼组(1μmol/L)、黄芩苷+克唑替尼组(125μg/mL+1μmol/L)、吉非替尼组(1μmol/L)、黄芩苷+吉非替尼组(125μg/mL+1μmol/L)、克唑替尼+吉非替尼组(1μmol/L+1μmol/L)、黄芩苷+克唑替尼+吉非替尼组(125μg/mL+1μmol/L+1μmol/L),给药处理48 h后,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期,Western blot法检测细胞MET/EGFR通路蛋白表达。结果与对照组比较,各给药组细胞增殖抑制率、凋亡率、G1期细胞比例升高(P<005),p-MET、p-EGFR蛋白表达降低(P<005);与吉非替尼组比较,黄芩苷+吉非替尼组细胞增殖抑制率、凋亡率、G1期细胞比例升高(P<005),p-MET、p-EGFR蛋白表达降低(P<005);与克唑替尼组比较,黄芩苷+克唑替尼组细胞增殖抑制率、凋亡率、G1期细胞比例升高(P<005),p-MET、p-EGFR蛋白表达降低(P<005);与克唑替尼+吉非替尼组比较,黄芩苷+克唑替尼+吉非替尼组细胞增殖抑制率、凋亡率、G1期细胞比例升高(P<005),p-MET、p-EGFR蛋白表达降低(P<005)。结论黄芩苷可能通过抑制MET/EGFR信号通路蛋白进而抑制增殖、凋亡,并影响细胞周期。 展开更多

关键词 黄芩苷 肝癌细胞 增殖 凋亡 细胞周期 MET/egfr信号通路

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外源性硫化氢通过EGFR/PI3K/Akt信号通路促进人卵巢癌细胞增殖、侵袭和顺铂耐药 被引量：11

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作者 葛顺娜 段峥峥 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期244-253,共10页

目的·探讨外源性硫化氢对人卵巢癌细胞增殖、凋亡、侵袭和顺铂耐药的作用及其机制。方法·以人卵巢癌细胞株SKOV3细胞和人顺铂耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDP细胞为研究对象。采用CCK-8法、流式细胞术、Transwell侵袭小室实验,分... 目的·探讨外源性硫化氢对人卵巢癌细胞增殖、凋亡、侵袭和顺铂耐药的作用及其机制。方法·以人卵巢癌细胞株SKOV3细胞和人顺铂耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDP细胞为研究对象。采用CCK-8法、流式细胞术、Transwell侵袭小室实验,分别检测NaHS对SKOV3细胞的增殖、凋亡、侵袭能力的影响;通过计算细胞半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)和细胞活性抑制率(inhibition rate,IR),检测NaHS对SKOV3和SKOV3/DDP细胞顺铂耐药的影响;Western blotting检测Na HS对SKOV3和SKOV3/DDP细胞中EGFR、PI3K和Akt磷酸化水平的影响;用EGFR的抑制剂erlotinib、PI3K的抑制剂LY294002和Akt的抑制剂MK-2206处理细胞,检测SKOV3和SKOV3/DDP细胞中EGFR、PI3K和Akt的磷酸化水平以及SKOV3细胞增殖、侵袭和SKOV3/DDP细胞顺铂耐药的变化。结果·与对照组相比,Na HS能显著促进SKOV3细胞增殖(P=0.000)和侵袭(P=0.033);显著提高SKOV3和SKOV3/DDP细胞对顺铂的IC50(P=0.027,P=0.009),降低顺铂对细胞的IR(P=0.001,P=0.009);激活SKOV3和SKOV3/DDP细胞的EGFR(P=0.000,P=0.037)、PI3K(P=0.009,P=0.013)、Akt(P=0.000,P=0.023);erlotinib、LY294002和MK-2206均能阻断Na HS对SKOV3细胞的增殖(均P=0.000)和侵袭(均P<0.01)作用,也能逆转NaHS促进SKOV3/DDP细胞对顺铂耐药的作用(均P=0.000)。结论·外源性硫化氢可促进SKOV3细胞的增殖和侵袭,以及SKOV3和SKOV3/DDP细胞的顺铂耐药,其机制与激活EGFR/PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多

关键词 硫化氢 卵巢癌 细胞增殖 细胞侵袭 顺铂耐药 egfr/PI3K/Akt信号通路

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通塞颗粒对AECOPD大鼠气道上皮屏障及EGFR/ERK通路的影响 被引量：2

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作者 魏焱鑫 魏毓 +4 位作者 刘新光 田燕歌 刘学芳 赵迪 赵鹏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2204-2213,共10页

目的:探讨通塞颗粒(TSG)对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)大鼠上皮屏障功能损伤的作用及其机制。方法:24只SD大鼠随机分为对照(control)组、模型(model)组、TSG组和莫西沙星(MXF)+沙丁胺醇(STL)组。第1~8周建立COPD大鼠模型,第9周... 目的:探讨通塞颗粒(TSG)对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)大鼠上皮屏障功能损伤的作用及其机制。方法:24只SD大鼠随机分为对照(control)组、模型(model)组、TSG组和莫西沙星(MXF)+沙丁胺醇(STL)组。第1~8周建立COPD大鼠模型,第9周第3天,经鼻滴入肺炎克雷伯杆菌建立AECOPD大鼠模型。第9周的第1~2天和4~7天,control组和model组给予生理盐水灌胃,TSG组和MXF+STL组分别给予TSG和MXF+STL灌胃,灌胃结束后处死大鼠。检测大鼠呼气峰流速(PEF)的变化;HE染色观察大鼠肺组织病理变化;检测肺组织白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9、闭锁小带蛋白1(ZO-1)、上皮钙黏素(E-Cad)和闭合蛋白(OCC)蛋白表达。采用香烟烟雾提取物(CSE)刺激人支气管上皮细胞BEAS-2B,给予TSG不同活性部位干预,检测ZO-1、E-cad、OCC、表皮生长因子受体(EGFR)、磷酸化EGFR(p-EGFR)、细胞外信号调节激酶(ERK)和磷酸化ERK(p-ERK)蛋白水平。结果:TSG可显著降低AECOPD大鼠支气管壁厚度、肺泡平均线性截距,以及肺组织IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP2和MMP9表达水平,增加平均肺泡数和PEF,上调ZO-1、E-Cad和OCC蛋白表达(P<0.01)。TSG可以显著抑制CSE诱导的BEAS-2B细胞中ZO-1、E-Cad和OCC的表达(P<0.01)。网络药理分析获得TSG2所含化合物对应328个靶点以及AECOPD相关的3864个基因;整合分析显示TSG2缓解AECOPD可能与ERBB2、ERK、EGFR、IL和WNT等信号通路有关。实验结果显示,TSG2可以显著抑制CSE诱导的BEAS-2B细胞中p-EGFR和p-ERK水平的升高(P<0.05或P<0.01)。结论:TSG可以保护气道上皮屏障功能,缓解AECO-PD,其机制可能与抑制EGFR/ERK信号通路有关。 展开更多

关键词 通塞颗粒 慢性阻塞性肺疾病急性加重期 气道上皮屏障 egfr/ERK信号通路

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金雀异黄酮对三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及EGFR/PI3K/Akt通路的影响 被引量：26

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作者 韦立群 李婉婷 +3 位作者 李通 徐成飞 唐双意 甘嘉亮 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1376-1381,共6页

目的研究金雀异黄酮(genistein)诱导三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及其机制。方法 MTT法观察金雀异黄酮对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33258染色观察金雀异黄酮对MDA-MB-231细胞核凋亡形态学的影响;qRT-PCR法观察金... 目的研究金雀异黄酮(genistein)诱导三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及其机制。方法 MTT法观察金雀异黄酮对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33258染色观察金雀异黄酮对MDA-MB-231细胞核凋亡形态学的影响;qRT-PCR法观察金雀异黄酮干预MDAMB-231细胞36 h后,EGFR mRNA表达水平的变化;金雀异黄酮干预MDA-MB-231细胞36 h后,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3,EGFR、Akt、p-Akt蛋白的变化;Akt激活剂胰岛素(insulin)、金雀异黄酮单独及联合胰岛素干预乳腺癌MDA-MB-231细胞后,Western blot检测Akt和p-Akt蛋白表达量的变化。结果 MTT结果显示,金雀异黄酮呈时间浓度依赖性抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖;Hoechst 33258染色结果显示,金雀异黄酮干预乳腺癌MDAMB-231细胞36 h后细胞核呈现典型凋亡形态学改变;qRTPCR结果显示,经金雀异黄酮干预MDA-MB-231细胞36 h后,EGFR的mRNA表达水平明显下降(P<0.01);Western blot结果显示金雀异黄酮干预乳腺癌MDA-MB-231细胞36 h后,与对照组对比,Bcl-2、EGFR、Akt、p-Akt蛋白表达水平明显下调(P<0.01),Bax、caspase-3蛋白表达水平明显上调(P<0.01),Akt激活剂胰岛素可以明显激活p-Akt(P<0.01),金雀异黄酮可以明显下调被激活的p-Akt(P<0.01)。结论金雀异黄酮能抑制三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞生长并诱导其凋亡,其机制可能与抑制EGFR/PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多

关键词 金雀异黄酮 三阴乳腺癌 凋亡 增殖 人表皮生长因子受体 egfr/PI3K/Akt信号通路

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430例中国非小细胞肺癌患者EGFR、KRAS、BRAF和PIK3CA基因突变状态及其临床意义 被引量：20

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作者 杨宁 郭妹 +2 位作者 宋玉兰 李美霞 蒲晓宇 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期734-739,共6页

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancers,NSCLC)患者表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)信号通路中EGFR、Kirsten鼠肉瘤病毒癌基因(Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog,KRAS)、B-Raf原癌基... 目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancers,NSCLC)患者表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)信号通路中EGFR、Kirsten鼠肉瘤病毒癌基因(Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog,KRAS)、B-Raf原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(B-Raf proto oncogene serine/threonine protein kinase,BRAF)和磷脂酰肌醇-3-激酶α亚单位(phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit alpha,PI3KCA)基因的突变状态及其临床意义,为酪氨酸酶抑制剂(tyrasin kimase inhibitor,TKI)临床用药与科学研究提供依据。方法:采用Sur Plex-x TAG70plex液相芯片技术平台检测中国430例NSCLC患者的福尔马林固定石蜡包埋(formalin fixed paraffin embedded,FFPE)组织中EGFR、KRAS、BRAF和PIK3CA基因的突变状态,分析基因的突变率及其与临床病理特征的关系。结果:EGFR、KRAS、BRAF和PIK3CA的突变率分别为41.2%,7.9%,0.7%和3.7%。EGFR外显子19、21在女性患者中的突变率明显高于男性(P<0.01),在肺腺癌患者中的突变率明显高于其他类型肺癌(P<0.01),在无吸烟史患者中的突变率高于有吸烟史的患者(P<0.01)。相反地,KRAS突变在男性患者中的突变率高于女性(P<0.05),在肺腺癌中的突变率高于肺鳞癌(P<0.005),有吸烟史患者的突变率高于无吸烟史患者(P<0.01)。在肺腺癌患者中PIK3CA的突变率明显低于其他类型肺癌(P<0.01)。结论:EGFR和KRAS基因突变率与性别、组织学类型及吸烟史密切相关。在检测中发现EGFR和KRAS双突变,此外PIK3CA突变并非与EGFR和KRAS突变互斥。 展开更多

关键词 egfr信号通路 基因突变 非小细胞肺癌 分子标记 中国患者 液相芯片

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奥沙利铂抑制EGFR-MAPK促进HCT116细胞凋亡 被引量：5

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作者 崔珊 黄金清 +2 位作者 韦东雪 余龙龙 江绍锋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1279-1280,共2页

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是全世界最常见的肿瘤之一^([1]),致病原因复杂,发病率及复发率高。奥沙利铂(oxaliplatin,OXA)是第三代铂类化疗药的代表药物,与DNA发生交联后细胞周期停滞,诱导细胞凋亡,但在临床发现严重毒副作用^([2]... 结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是全世界最常见的肿瘤之一^([1]),致病原因复杂,发病率及复发率高。奥沙利铂(oxaliplatin,OXA)是第三代铂类化疗药的代表药物,与DNA发生交联后细胞周期停滞,诱导细胞凋亡,但在临床发现严重毒副作用^([2])。丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在细胞生长和凋亡中起关键作用^([3])。抑制MAPK/ERK信号通路促进细胞凋亡^([4]),因此探究奥沙利铂通过EGFR-MAPK信号通路中EGFR-RAS-RAF-ERK1/2的信号级联反应产生的作用机制,为奥沙利铂靶向用药及临床应用提供数据支持。 展开更多

关键词 奥沙利铂 结直肠癌 egfr信号通路 MAPK信号通路 RAS B-RAF 凋亡

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P-EGFR、P-ERK和NF-κB在中耳胆脂瘤上皮中的表达和意义 被引量：6

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作者 王晓丽 谢淑敏 +4 位作者 王月辉 刘伟 殷团芳 彭安全 任基浩 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期339-344,共6页

目的研究磷酸化表皮生长因子受体(P-EGFR)、磷酸化细胞外信号调节激酶(P-ERK)和细胞核转录因子κB(NF-κB)在中耳胆脂瘤上皮组织中的表达情况,探讨EGFR/ERK/NF-κB信号通路在中耳胆脂瘤发病机制中的作用。方法应用免疫组织化学SP法及Wes... 目的研究磷酸化表皮生长因子受体(P-EGFR)、磷酸化细胞外信号调节激酶(P-ERK)和细胞核转录因子κB(NF-κB)在中耳胆脂瘤上皮组织中的表达情况,探讨EGFR/ERK/NF-κB信号通路在中耳胆脂瘤发病机制中的作用。方法应用免疫组织化学SP法及Western blot(WB)免疫印迹法检测30例中耳胆脂瘤标本及15例正常外耳道皮肤组织中P-EGFR、P-ERK和NF-κB蛋白的表达。结果(1)P-EGFR蛋白阳性表达主要定位于细胞质和(或)细胞膜,在胆脂瘤组的阳性表达率为63%,明显高于正常外耳道皮肤组的20%(P<0.05);P-ERK蛋白阳性表达主要定位于细胞质和(或)细胞核,在胆脂瘤组的阳性表达率为70%,明显高于正常外耳道皮肤组的20%(P<0.05);NF-κB蛋白阳性表达主要定位于细胞核,在胆脂瘤组的阳性表达率为60%,明显高于正常耳道皮肤组的13.3%(P<0.05)。在30例中耳胆脂瘤组织中,P-EGFR、P-ERK和NF-κB两两之间呈正相关关系(P<0.05)。(2)Western blot免疫印迹法检测结果显示:中耳胆脂瘤组中P-EGFR、P-ERK和NF-κB的表达量明显高于正常外耳道皮肤组的表达量。结论 P-EGFR、P-ERK和NF-κB在中耳胆脂瘤上皮中表达增强,EGFR/ERK/NF-κB信号通路可能在中耳胆脂瘤组织的形成和发展过程中起重要作用。 展开更多

关键词 中耳 胆脂瘤 P-egfr P-ERK NF-ΚB egfr/ERK/NF-κB信号通路

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EGFR对血管生成拟态的诱导作用及其相关机制 被引量：3

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作者 张熙 赵启梅 尉春艳 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期739-742,共4页

目的探讨表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)对血管生成拟态的促进作用。方法应用CD34-PAS双重染色法检测不同级别胶质瘤中血管生成拟态的存在情况,应用免疫组织化学法检测不同级别胶质瘤中EGFR蛋白的表达,应用... 目的探讨表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)对血管生成拟态的促进作用。方法应用CD34-PAS双重染色法检测不同级别胶质瘤中血管生成拟态的存在情况,应用免疫组织化学法检测不同级别胶质瘤中EGFR蛋白的表达,应用化学缺氧法诱导人脑星形细胞瘤U87细胞在三维培养体系中形成血管生成拟态,Transwell法检测细胞的迁移及侵袭能力,甲基噻唑基四唑法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞的增殖能力,蛋白质印迹法(Western blot)检测EGFR、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶AKT和磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3kinase,PI3K)蛋白的表达,探讨EGFR/AKT/PI3K通路对血管生成拟态的诱导作用。结果血管拟态阳性的患者EGFR阳性率为94.4%(17/18),血管拟态阴性的患者EGFR阳性率为71.8%(56/78),两者差异具有统计学意义(P<0.05)。U87细胞三维培养后,缺氧组平均每个视野网状结构数量、迁移能力,侵袭能力和增殖能力均显著高于常氧组(P<0.01)。Western blot显示缺氧组中EGFR、AKT、PI3K蛋白的表达显著高于常氧组。结论缺氧可诱导EGFR/AKT/PI3K信号通路活化,进而诱导血管生成拟态的形成,EGFR在血管生成拟态的形成过程中起着十分重要的作用。 展开更多

关键词 血管生成拟态 缺氧 胶质瘤 egfr/AKT/PI3K信号通路

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黏蛋白13在肺腺癌组织中的表达及其对A549细胞恶性生物学行为的影响与可能的机制

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作者 穆培娟 赵哲 张冬 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期40-46,共7页

目的:探讨黏蛋白13(MUC13)在肺腺癌组织中的表达及其对A549细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及EMT的影响与可能的机制。方法:通过癌症基因组图谱(TCGA)和高通量基因表达(GEO)数据库分析MUC13在肺腺癌组织与正常肺组织、癌旁组织中的差异表达... 目的:探讨黏蛋白13(MUC13)在肺腺癌组织中的表达及其对A549细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及EMT的影响与可能的机制。方法:通过癌症基因组图谱(TCGA)和高通量基因表达(GEO)数据库分析MUC13在肺腺癌组织与正常肺组织、癌旁组织中的差异表达。qPCR法和WB法检测人肺腺癌细胞NCI-H1395、NCI-H1975、H1299、A549和人正常肺上皮细胞BEAS-2B中MUC13 mRNA和蛋白的表达水平。利用si RNA技术敲低A549细胞中MUC13表达,实验分为si-MUC13组、NC组和si-MUC13+IGF-1组。通过克隆形成实验、流式细胞术和Transwell实验分别检测敲低MUC13对A549细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭的影响,WB法检测敲低MUC13对A549细胞上皮钙黏素(E-cadherin)、神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、EGFR、p-EGFR、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT等蛋白表达的影响。结果:MUC13 mRNA和蛋白在肺腺癌组织和细胞中均呈高表达(均P<0.01),选取表达水平较高的A549细胞进行后续实验。敲低MUC13后,A549细胞的增殖能力显著降低,G0/G1期的细胞数量显著增多、G2/M期及S期的细胞数量显著减少,细胞凋亡率显著升高,细胞迁移及侵袭能力均显著降低(均P<0.01);A549细胞中E-cadherin表达显著上调,N-cadherin、vimentin表达显著下调,p-EGFR/EGFR、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比值均显著降低(均P<0.01);再加入IGF-1处理后,A549细胞中p-EGFR/EGFR、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比值均显著升高(均P<0.01)。结论:MUC13在肺腺癌组织和细胞中均呈高表达,其可能通过激活EGFR/PI3K/AKT信号通路促进A549细胞增殖、迁移、侵袭和EMT。 展开更多

关键词 黏蛋白13 肺腺癌 A549细胞 增殖 凋亡 迁移 侵袭 上皮间质转化 egfr/PI3K/AKT信号通路

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敲除Brg1基因对小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞数量和功能的影响及其机制研究 被引量：3

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作者 阮玲瑛 薛坤娇 +2 位作者 应林燕 符州 邹文静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期656-663,共8页

目的研究染色质重构复合物核心催化亚基(Brahma-related gene 1,Brg1)对C57BL/6小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞数量和功能的影响及其可能的机制。方法取6~8周龄雌性野生型C57BL/6小鼠(Wild type,WT)及Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cell ... 目的研究染色质重构复合物核心催化亚基(Brahma-related gene 1,Brg1)对C57BL/6小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞数量和功能的影响及其可能的机制。方法取6~8周龄雌性野生型C57BL/6小鼠(Wild type,WT)及Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cell Ⅱ,AECⅡs)上特异性敲除Brg1的C57BL/6小鼠(Brg1fl/fl)作为实验对象,每组选取8只小鼠,收取标本,利用免疫组化及免疫荧光分析肺组织中表面活性物质相关蛋白C(surfactant-associated protein C,SFTPC)阳性的细胞率,流式细胞术分析小鼠肺组织中表面活性物质蛋白C前体蛋白(prosurfactant protein C,pro SP-C)阳性的细胞(即AECⅡs)数量。Western blot检测各组小鼠肺组织中pro SP-C、SFTPC、表面活性物质相关蛋白A(surfactant-associated protein A,SFTPA)、表面活性物质相关蛋白D(surfactant-associated protein D,SFTPD)的表达水平。Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达及增殖相关信号转导途径中关键蛋白EGFR、p-EGFR、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT及NF-κB p65的活化水平。结果抗SFTPC免疫组化、免疫荧光显示其在肺泡上皮表达较WT小鼠增多(P<0.05);流式细胞术显示Brg1fl/fl组小鼠肺组织中pro SP-C+的细胞百分比较WT小鼠明显增高(P<0.05),Western blot检测结果显示AECⅡs的功能性蛋白pro SP-C、SFTPC、SFTPA及SFTPD在Brg1^fl/fl小鼠中明显增多;Brg1^fl/fl组小鼠肺组织中NF-κB p65及周期蛋白CyclinD1的表达增加,且p-EGFR/EGFR、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT百分比显著提高,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论特异性敲除C57BL/6小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞中的Brg1可促使AECⅡs数量和分泌功能的增加,其可能机制与敲除Brg1促进EGFR/PI3K/AKT/NF-κB信号通路的激活,且与增殖周期蛋白CyclinD1表达的增加有关。 展开更多

关键词 Brg1 AECⅡ egfr/PI3K/AKT信号通路 NF-ΚB P65 细胞周期蛋白1

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山苍子油对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影响及其可能机制的研究 被引量：5

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作者 周恩正 郭贵明 +2 位作者 苏旭 吴春凯 左丽(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期571-576,共6页

目的:研究山苍子油对体外培养的人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影响及可能机制。方法:CCK-8比色法和流式细胞术(FCM)分别检测山苍子油对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响;Western blot方法检测经山苍子油作用后MDA-MB-231细胞凋亡... 目的:研究山苍子油对体外培养的人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影响及可能机制。方法:CCK-8比色法和流式细胞术(FCM)分别检测山苍子油对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响;Western blot方法检测经山苍子油作用后MDA-MB-231细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3、EGFR、p-Akt、Akt蛋白的表达水平;山苍子油、Akt激活剂以及山苍子油联合Akt激活剂作用于MDA-MB-231细胞后Akt、p-Akt蛋白的表达水平。结果:山苍子油对MDA-MB-231细胞的增殖具有明显的抑制作用,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05),且其抑制作用呈现浓度和时间依赖性;山苍子油使细胞阻滞于S期并能够诱导细胞凋亡(P<0.01);与对照组比较,随着药物浓度的增加及作用时间的延长,可上调MDA-MB-231细胞促凋亡蛋白Bax、caspase-3的表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达(P<0.01);与对照组比较,随着山苍子油浓度的增加EGFR、Akt、p-Akt蛋白的表达量均随之下降(P<0.01)。Akt激活剂可以明显上调Akt、p-Akt的表达。山苍子油可明显下调被激活的Akt、p-Akt(P<0.01)。结论:山苍子油可显著抑制体外条件下人乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖,呈浓度和时间依赖性;可阻滞MDA-MB-231细胞分裂周期于S期并能诱导细胞凋亡,可能与抑制EGFR/PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多

关键词 山苍子油 乳腺癌 凋亡 egfr/PI3K/Akt信号通路

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