膀胱癌细胞高表达E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a)通过上调CD24抑制NK细胞的杀伤 被引量：1

1

作者 姚田军 周幸春 +2 位作者 杨帆 刘静 张波 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期333-341,共9页

目的 探讨膀胱癌细胞过表达E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a)后是否影响自然杀伤(NK)细胞的活化及杀伤并探讨其具体机制。方法 利用慢病毒载体构建E2F3a稳定过表达的人及小鼠膀胱癌细胞株并将其与NK细胞共孵育,乳酸脱氢酶释放实验及流... 目的 探讨膀胱癌细胞过表达E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a)后是否影响自然杀伤(NK)细胞的活化及杀伤并探讨其具体机制。方法 利用慢病毒载体构建E2F3a稳定过表达的人及小鼠膀胱癌细胞株并将其与NK细胞共孵育,乳酸脱氢酶释放实验及流式细胞术检测NK细胞活化及杀伤能力的变化。转录组测序分析膀胱癌细胞E2F3a过表达组与对照组之间的基因表达差异,免疫组织化学染色法检测膀胱癌组织中E2F3a与差异基因在蛋白水平上表达的相关性。进一步利用染色质免疫沉淀(ChIP)、实时定量PCR、 Western blot法及小干扰RNA(siRNA)等方法探索膀胱癌细胞过表达E2F3a后对NK细胞活化及杀伤影响的具体机制。结果 在膀胱癌细胞中过表达E2F3a能显著抑制NK细胞的活化及杀伤。膀胱癌细胞过表达E2F3a可显著上调CD24基因的表达,膀胱癌组织中E2F3a和CD24蛋白的表达呈显著正相关。CHIP结果显示,E2F3a能够结合CD24的启动子区并促进CD24基因的转录。干涉E2F3a过表达膀胱癌细胞中的CD24表达后,发现膀胱癌细胞E2F3a过表达所介导的NK细胞活化及杀伤抑制被显著缓解。结论 在膀胱癌细胞中E2F3a可结合CD24的启动子区促进CD24基因的转录及CD24蛋白的表达。膀胱癌细胞E2F3a通过上调CD24表达来抑制NK细胞的活化及杀伤。 展开更多

关键词 膀胱癌 e2因子转录因子家族成员3a(e2f3a) 自然杀伤(NK)细胞 CD24 免疫抑制

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原癌基因Pokemon及核转录因子E2F3在喉鳞癌中的表达及其临床意义 被引量：3

2

作者 刘丽英 王琳 +1 位作者 闫完平 周合心 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期258-262,共5页

目的探讨POK红系髓性致癌因子(POK erythroid myeloid ontogenic factor,Pokemon)及核转录因子E2F3(E2Ftranscrip tion factor 3)在喉鳞癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化Max Vision二步法观察61例喉鳞癌组织及46例癌旁正常喉... 目的探讨POK红系髓性致癌因子(POK erythroid myeloid ontogenic factor,Pokemon)及核转录因子E2F3(E2Ftranscrip tion factor 3)在喉鳞癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化Max Vision二步法观察61例喉鳞癌组织及46例癌旁正常喉黏膜组织中Pokemon及E2F3的表达,并结合患者年龄、性别、原发部位、TNM分期、临床分期及预后之间的关系进行分析。结果 Pokemon及E2F3在喉鳞癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常喉黏膜组织中的阳性表达率(P<0.001);颈淋巴结转移(N+)、中低分化、临床晚期(Ⅲ+Ⅳ)喉鳞癌患者中Pokemon及E2F3表达强度增强(P<0.05);Pokemon及E2F3阳性表达患者的5年累积生存率较阴性表达患者低(P<0.05)。结论 Pokemon与E2F3在喉鳞癌组织中高表达,并与其预后不良相关。两者可能在喉鳞癌发生及恶性进展过程中发挥重要作用,有望成为喉鳞癌发病机制及分子靶向治疗的新指标。 展开更多

关键词 喉鳞状细胞癌 POK红系髓性致癌因子 核转录因子e2f3 预后

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浸润性膀胱癌组织中E2F3表达与CD8^+ T细胞浸润数量的相关性分析 被引量：4

3

作者 王程远 许志斌 +3 位作者 李伟 焦勇 王江平 张波 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-8,共8页

目的探讨膀胱癌组织中E2F转录因子3(E2F3)表达与CD8^+T细胞浸润的特点及其与膀胱癌恶性生物学行为之间的相关性。方法采用免疫组织化学染色法检测110例不同病理分期、分级的膀胱癌组织和相应正常膀胱组织中E2F3的表达情况及CD8^+T细胞... 目的探讨膀胱癌组织中E2F转录因子3(E2F3)表达与CD8^+T细胞浸润的特点及其与膀胱癌恶性生物学行为之间的相关性。方法采用免疫组织化学染色法检测110例不同病理分期、分级的膀胱癌组织和相应正常膀胱组织中E2F3的表达情况及CD8^+T细胞浸润特征,Western blot法检测82例膀胱癌组织及相应正常膀胱组织中E2F3、CD8蛋白水平,直线相关分析方法分析E2F3表达与CD8^+T细胞浸润的相关性。结果膀胱癌组织中E2F3高表达,膀胱癌组织中E2F3表达随肿瘤分期、分级增加逐步增高,而相应肿瘤内CD8^+T细胞浸润数目逐步减少,E2F3高表达组肿瘤内CD8^+T细胞浸润数目显著低于E2F3低表达组。E2F3阳性率及CD8^+T细胞的浸润数量减少与肿瘤病理分期、分级、肿瘤大小、伴有淋巴结转移或远处转移等肿瘤临床侵袭性指标密切相关。相关性分析显示肿瘤E2F3表达水平与肿瘤内CD8^+T细胞浸润数目呈负相关。生存分析表明E2F3高表达患者术后5年预后更差。结论膀胱癌组织中E2F3水平与肿瘤侵袭性关系密切,与肿瘤内CD8^+T细胞浸润数量呈负相关。 展开更多

关键词 浸润性膀胱癌 e2f转录因子3(e2f3) CD8+T淋巴细胞 肿瘤逃逸

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E2F1对TFDP3表达的调控及其对前列腺癌PC3细胞凋亡的影响 被引量：1

4

作者 李蕊 马越云 +4 位作者 辛艺娟 刁艳君 杨静 岳乔红 郝晓柯 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期125-129,共5页

目的:构建含TFDP3基因启动子和荧光素酶报告基因的重组载体pGL3-TFDP3-promoter,观察E2F1对TFDP3转录及表达的调控作用以及TFDP3对E2F1诱导肿瘤细胞凋亡的影响。方法:以人前列腺癌PC3细胞系基因组DNA为模板,PCR扩增TFDP3启动子序列并克... 目的:构建含TFDP3基因启动子和荧光素酶报告基因的重组载体pGL3-TFDP3-promoter,观察E2F1对TFDP3转录及表达的调控作用以及TFDP3对E2F1诱导肿瘤细胞凋亡的影响。方法:以人前列腺癌PC3细胞系基因组DNA为模板,PCR扩增TFDP3启动子序列并克隆入荧光素酶报告基因载体,与E2F1表达载体pCMV-E2F1-HA瞬时单独或共同转染PC3细胞,测定荧光素酶活性以观察E2F1对TFDP3启动子的调控作用,Western blotting检测pCMV-E2F1-HA转染对PC3细胞内TFDP3表达的影响,流式细胞术检测TFDP3与E2F1相互作用对前列腺癌细胞凋亡的影响。结果:成功构建TFDP3基因启动子重组质粒pGL3-TFDP3-promoter,与E2F1表达载体pCMV-E2F1-HA共转染PC3细胞后,TFDP3启动子诱导的荧光素酶活性较单独转染pGL3-TFDP3-promoter显著升高[(1.14±0.06)vs(0.61±0.05),P<0.05]。转染pCMV-E2F1-HA的PC3细胞的TFDP3蛋白表达是未转染细胞的2.7倍[(0.24±0.03)vs(0.09±0.02),P<0.05]。pCMV-E2F1-HA转染后PC3细胞凋亡率较未转染组显著上升[(7.10±0.003)%vs(2.66±0.001)%,P<0.05],而pCMV-E2F1-HA与pcDNA3.1-TFDP3共转染后细胞凋亡率较pCMV-E2F1-HA组显著下降[(4.92±0.002)%vs(7.10±0.003)%,P<0.05]。结论:E2F1可增强TFDP3启动子的活性,增加TFDP3蛋白的表达,其可能通过此机制抑制E2F1诱导的前列腺癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 e2f1 转录因子二聚化配体3 双荧光素酶报告基因 启动子 前列腺癌 PC3细胞

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E2F陷阱DNA对前列腺癌PC-3M细胞凋亡的诱导 被引量：1

5

作者 王涛 姜安丽 +5 位作者 张鹏举 陈彤 贺美兰 陈蔚文 邓景惕 张建业 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1462-1466,共5页

目的:为观察转录因子E2F陷阱DNA对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M增殖和凋亡的影响。方法:采用脂质体lipofectam ine将E2F decoy DNA、ARE decoy DNA和control decoy DNA分别转染PC-3M细胞,MTT检测其对细胞增生的影响,倒置相差显微镜... 目的:为观察转录因子E2F陷阱DNA对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M增殖和凋亡的影响。方法:采用脂质体lipofectam ine将E2F decoy DNA、ARE decoy DNA和control decoy DNA分别转染PC-3M细胞,MTT检测其对细胞增生的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,并进行染色体DNA断裂的测定;通过RT-PCR检测转染的PC-3M细胞中c-Myc mRNA、cyc lin D1 mRNA表达水平的变化,通过W estern b lotting检测细胞中c-Myc蛋白、cyc lin D1蛋白表达水平的变化。结果:E2F decoy DNA转染后的PC-3M细胞的生长受到明显抑制;转染后的细胞形态变化符合凋亡的典型改变,染色体断裂明显,细胞凋亡率为26.35%;c-Myc、cyc lin D1的表达受到抑制。结论:E2F decoy DNA可诱导雄激素非依赖性前列腺癌PC-3M凋亡和抑制细胞增殖,其机制可能涉及到c-Myc mRNA、cyc lin D1的表达变化。 展开更多

关键词 转录因子e2f 前列腺肿瘤 细胞凋亡 PC-3M细胞

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泛素缀合酶E2C对肝癌细胞干细胞样特性的影响及其机制

6

作者 刘庭君 吴俊如 +4 位作者 陈柳燕 林宇晨 张珂珂 洪健 廖薮祺 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第6期1055-1065,共11页

目的:探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞中泛素缀合酶E2C(ubiquitin-conjugating enzyme E2C,UBE2C)的表达、预后价值及其对HCC细胞干性的影响和调控机制。方法:(1)采用TCGA和GEO数据库,运用生物信息学技术分析HCC组织UB... 目的:探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞中泛素缀合酶E2C(ubiquitin-conjugating enzyme E2C,UBE2C)的表达、预后价值及其对HCC细胞干性的影响和调控机制。方法:(1)采用TCGA和GEO数据库,运用生物信息学技术分析HCC组织UBE2C的mRNA表达水平及其与预后的相关性,并在107例HCC患者术后标本中进行验证;运用GEPIA数据库分析UBE2C和类固醇受体辅激活因子(steroid receptor coactivator,SRC)的相关性。(2)体外实验探究UBE2C对HCC细胞生物学行为的影响及其作用机制:采用CCK8、集落形成、划痕及细胞成球实验检测UBE2C对HCC细胞增殖、迁移及干细胞特性的影响;运用Western blot和免疫共沉淀技术,检测UBE2C与信号转导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的相互作用及其机制。(3)构建在体模型(裸鼠皮下瘤模型)探究UBE2C对体内肿瘤生长的影响。结果:(1)生物信息学分析显示,UBE2C在HCC组织中的表达显著高于癌旁正常组织(TCGA数据库P<0.05;GEO数据库P<0.01),且UBE2C高表达的HCC患者总生存期和无病生存期均显著缩短(P<0.05),与HCC临床标本结果一致。GEPIA数据库分析显示,UBE2C和SRC呈正相关(P<0.01)。(2)体外实验结果表明,UBE2C可显著促进HCC细胞的增殖和迁移,并且UBE2C可能通过调控SRC活性而影响STAT3在Y705位点的磷酸化水平,从而影响肿瘤细胞的干性特征。(3)体内实验进一步证实,抑制UBE2C可以减缓体内肿瘤的生长。结论:UBE2C促进HCC细胞增殖和迁移,并通过与STAT3结合调控HCC细胞干性。 展开更多

关键词 泛素缀合酶e2C 肝细胞癌 肝癌干细胞 信号转导及转录激活因子3

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MicroRNA-10a通过靶向作用E2F3抑制肝癌细胞的增殖 被引量：3

7

作者 赵锴 王春梅 曹雪涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期383-388,共6页

目的：探讨微小RNA-10a（microRNA-10a,miR-10a）对肝癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法：收集广西医科大学附属肿瘤医院肿瘤科2001年10月至2005年7月144例肝癌患者手术切除的肝癌组织和癌旁组织（距癌灶组织边缘2~5 cm）标本,Real-ti... 目的：探讨微小RNA-10a（microRNA-10a,miR-10a）对肝癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法：收集广西医科大学附属肿瘤医院肿瘤科2001年10月至2005年7月144例肝癌患者手术切除的肝癌组织和癌旁组织（距癌灶组织边缘2~5 cm）标本,Real-time PCR法分析144例肝癌组织及癌旁组织中miR-10a的表达量。在肝癌细胞（QGY-7701、Huh7、PCL/PRF/5）中转染miR-10a模拟物,Real-time PCR法检测转染后细胞miR-10a的表达水平;CCK-8法检测过表达miR-10a的肝癌细胞的增殖水平,流式细胞术检测过表达miR-10a的肝癌细胞的凋亡和细胞周期;生物信息学预测并以Western blotting检测过表达miR-10a的肝癌细胞中转录因子E2F3的表达量。结果：与癌旁组织相比,肝癌组织中的miR-10a显著低表达[（-9.89±1.68）vs（-7.84±1.97）,P=0.000]。转染miR-10a模拟物后肝癌细胞系中miR-10a的表达量是转染对照小RNA组或空白组细胞的16倍左右。过表达miR-10a可显著抑制7种肝癌细胞（QGY-7701、QGY-7703、Huh7、PCL/PRF/5、HepG2、BeL-7402、SMMC-7721）的增殖（均P〈0.05）,并引起肝癌细胞细胞周期G1/S期阻滞,但并不能诱导肝癌细胞发生凋亡。生物信息学预测显示E2F3是miR-10a可能的靶分子,Western blotting检测显示过表达miR-10a可明显抑制肝癌细胞中E2F3的表达[（0.50±0.12）vs（0.79±0.21）,P〈0.05]。结论：人肝癌组织中低表达miR-10a,转染miR-10a模拟物后多种肝癌细胞的增殖均受到明显抑制,其机制可能与miR-10a靶向作用转录因子E2F3并阻滞肝癌细胞细胞周期于G1/S期有关。 展开更多

关键词 肝癌 微小RNA-10a 增殖 转录因子 e2f3 G1 S期阻滞

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抑制DNMT3A促进E2F1诱导间充质干细胞向动脉内皮细胞分化及血管生成 被引量：1

8

作者 苏凯悦 车丽娜 +5 位作者 李凤娇 段晓昶 李栋 何红鹏 张同存 王楠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1972-1979,共8页

目的:探讨敲减DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)的表达是否促进细胞周期相关转录因子E2F转录因子1(E2F1)诱导人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)向动脉内皮细胞分化及血管形成。方法:体外培养hUCMSCs,将细胞分为对照组、E2F1过表达组(E2F1组)、DNMT3A... 目的:探讨敲减DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)的表达是否促进细胞周期相关转录因子E2F转录因子1(E2F1)诱导人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)向动脉内皮细胞分化及血管形成。方法:体外培养hUCMSCs,将细胞分为对照组、E2F1过表达组(E2F1组)、DNMT3A敲减组(siDNMT3A组)和联合诱导组(E2F1+siDNMT3A组);倒置显微镜下观察细胞形态变化;采用RT-qPCR和Western blot检测动脉特异性标志物ephrin-B2和HEY2的mRNA及蛋白水平;成管实验检测分化后hUCMSCs的体外管状结构形成能力;裸鼠基质胶塞实验结合CD31染色检测分化后hUCMSCs的体内生成血管情况。结果:RT-qPCR和Western blot结果显示,与对照组相比,siDNMT3A组ephrin-B2和HEY2的mRNA及蛋白水平均显著升高(P<0.01);与siDNMT3A组相比,E2F1+siDNMT3A组HEY2和ephrin-B2的mRNA及蛋白水平进一步升高(P<0.01)。体内和体外成管实验证明,除对照组外,其他3个诱导组的细胞均可形成管腔样结构,其中E2F1+siDNMT3A组的成管能力最强。结论:与单一过表达E2F1或敲减DNMT3A比较,敲减DNMT3A表达同时过表达E2F1的hUCMSCs向动脉内皮细胞分化和血管形成能力更强。 展开更多

关键词 e2f转录因子1 DNA甲基转移酶3a 间充质干细胞 血管生成

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miR-503-5p通过干扰Rb/E2F信号通路抑制膀胱癌T24和EJ细胞的增殖 被引量：13

9

作者 李小辉 韩兴涛 +2 位作者 杨金辉 孙建涛 魏澎涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1360-1364,共5页

目的研究微小RNA-503-5p(miR-503-5p)对膀胱癌T24细胞和EJ细胞生长的影响和机制。方法 T24细胞和EJ细胞转染miR-503-5p模拟物或阴性对照微小RNA(miR-NC)并验证转染效率,生物信息学软件预测miR-503-5p的靶基因。通过荧光实时定量PCR检测m... 目的研究微小RNA-503-5p(miR-503-5p)对膀胱癌T24细胞和EJ细胞生长的影响和机制。方法 T24细胞和EJ细胞转染miR-503-5p模拟物或阴性对照微小RNA(miR-NC)并验证转染效率,生物信息学软件预测miR-503-5p的靶基因。通过荧光实时定量PCR检测miR-503-5p靶基因E2F转录因子3(E2F3)及下游基因mRNA的表达水平,Western blot法检测视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)/E2F信号通路蛋白E2F3、细胞周期蛋白E(cyclin E)、细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)、Rb和磷酸化的Rb(p-Rb)蛋白水平,流式细胞术检测膀胱癌细胞周期的变化,MTT法和平板克隆形成实验检测膀胱癌细胞的增殖能力。结果转染miR-503-5p模拟物后,膀胱癌细胞中miR-503-5p的水平显著增加。过表达miR-503-5p可明显降低膀胱癌细胞中E2F3mRNA及Rb/E2F信号通路基因的表达水平,将膀胱癌细胞周期阻滞于G0/G1期,膀胱癌细胞的增殖能力明显降低。结论过表达miR-503-5p通过干扰Rb/E2F信号通路的转导,抑制膀胱癌细胞的增殖。 展开更多

关键词 微小RNA-503-5p(miR-503-5p) e2f转录因子3(e2f3) 膀胱癌 增殖

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miR-144-3p靶向调控E2F3抑制膀胱癌T24细胞的增殖与侵袭 被引量：2

10

作者 李瑞晓 李雪莲 +3 位作者 唐启胜 王磊 马善金 张波 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期37-42,共6页

目的:探讨miR144-3p在膀胱癌组织及细胞中的表达及其对T24细胞增殖与侵袭的影响。方法:选用2018年2月至2018年12月空军军医大学唐都医院手术切除的36例膀胱癌组织及10例正常膀胱上皮组织标本,以及人膀胱癌细胞株T24和正常尿路上皮细胞株... 目的:探讨miR144-3p在膀胱癌组织及细胞中的表达及其对T24细胞增殖与侵袭的影响。方法:选用2018年2月至2018年12月空军军医大学唐都医院手术切除的36例膀胱癌组织及10例正常膀胱上皮组织标本,以及人膀胱癌细胞株T24和正常尿路上皮细胞株SV-HUC-1,用qPCR法检测膀胱癌组织和细胞中miR144-3p的表达水平。用脂质体转染技术分别将miR-144-3p mimics、miR-NC等转染进T24细胞,通过MTT法、流式细胞术和Transwell小室法分别检测T24细胞的增殖、细胞周期和侵袭能力。利用TargetScan软件预测miR-144-3p与E2F转录因子3(E2F transcription factor 3,E2F3)的结合位点,用双荧光素报告基因实验验证miR-144-3p与E2F3的靶向关系,WB实验检测细胞中miR-144-3p与E2F3的表达水平。结果:miR-144-3p在膀胱癌组织和细胞中低表达(均P<0.01),其中肌层浸润性膀胱癌组织中的表达水平低于非肌层浸润膀胱癌组织(P<0.05)。双荧光素报告基因实验证实,miR-144-3p与E2F3表达存在靶向调节关系。miR-144-3p过表达可抑制T24细胞的增殖和侵袭能力(均P<0.01),同时下调E2F3的表达水平(P<0.01);当上调E2F3表达时,对细胞侵袭和增殖的抑制作用则被逆转。结论:miR-144-3p在膀胱癌组织中低表达,其通过靶向调控E2F3表达从而抑制膀胱癌细胞的增殖与侵袭。 展开更多

关键词 miR-144-3p e2f转录因子3 膀胱癌 T24细胞 增殖 侵袭

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资生肾气丸对尿酸钠诱导大鼠滑膜细胞中P62/Nrf2通路调控机制的研究 被引量：1

11

作者 范嘉懿 高一煊 +3 位作者 梁蓝云 贾凯杰 刘春红 韩洁茹 《世界中医药》 北大核心 2025年第3期404-410,共7页

目的:探讨资生肾气丸对尿酸单钠晶体(MSU)诱导的痛风性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞(GA-FLS)P62/Nrf2信号转导通路的影响。方法:按随机数字表法将18只雄性SD大鼠分为中药低、中、高3种剂量组,每组6只,连续灌胃7 d后,统一麻醉,分离血清备... 目的:探讨资生肾气丸对尿酸单钠晶体(MSU)诱导的痛风性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞(GA-FLS)P62/Nrf2信号转导通路的影响。方法:按随机数字表法将18只雄性SD大鼠分为中药低、中、高3种剂量组,每组6只,连续灌胃7 d后,统一麻醉,分离血清备用,用低、中、高3种剂量的含药血清体外干预GA-FLS,设为正常滑膜细胞组,MSU组,GA-FLS+中药低、中、高剂量组,共5组,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法检测细胞增殖能力;蛋白质免疫印迹法检测P62、Kelch样ECH相关蛋白-1(Keap-1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)含量;RT-PCR检测P62、Nrf2含量。结果:MTT结果表明,与模型组比较,各剂量资生肾气丸含药血清组FLS细胞增殖均受到抑制,其中高剂量差异有统计学意义(P<0.01);蛋白质免疫印迹法结果显示,就p62、Nrf2、NLRP3蛋白的表达水平度而言,模型组相对于空白组明显增高(均P<0.01);与模型组比较,低、中、高资生肾气丸含药血清组蛋白表达含量均降低(均P<0.05);RT-PCR结果显示,与空白组比较,模型组细胞中p62、Nrf2表达明显升高(均P<0.01);与模型组比较,加入中药血清滑膜细胞中,p62、Nrf2表达下降(均P<0.05)。结论:资生肾气丸可通过调控P62/Nrf2信号转导通路抑制GA-FSL细胞增殖,下调P62、Keap-1、Nrf2蛋白的表达、抑制Nod样受体家族pyrin结构域蛋白3(NLRP3)炎症小体产生,具有抗炎作用,从而对GA具有防治效果。 展开更多

关键词 资生肾气丸 痛风性关节炎 成纤维样滑膜细胞 尿酸单钠晶体 p62/核因子e2相关因子2(Nrf2)信号通路 Nod样受体家族pyrin结构域蛋白3炎症小体 3-(4 5-二甲基噻唑-2)-2 5-二苯基四氮唑溴盐 实验研究

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PIM1基因对急性髓系白血病U937细胞增殖、凋亡及JAK2/STAT3信号通路的影响 被引量：3

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作者 高鑫 储李婧 颜宗海 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期663-669,共7页

目的:探讨PIM1基因对急性髓系白血病(AML)U937细胞增殖、凋亡的影响,以及对JAK2/STAT3通路的调控作用。方法:收集初诊成人AML患者和单纯缺铁性贫血患者的骨髓单个核细胞,荧光定量PCR检测PIM1 mRNA表达。将AML细胞系U937细胞分为:U937组(... 目的:探讨PIM1基因对急性髓系白血病(AML)U937细胞增殖、凋亡的影响,以及对JAK2/STAT3通路的调控作用。方法:收集初诊成人AML患者和单纯缺铁性贫血患者的骨髓单个核细胞,荧光定量PCR检测PIM1 mRNA表达。将AML细胞系U937细胞分为:U937组(U937细胞正常培养)、Si-PIM1组(U937细胞转染含PIM1 mRNA的低表达腺病毒载体)、Si-NC组(U937细胞转染不含PIM1 mRNA的低表达腺病毒载体)、CoA1组(U937细胞中加入浓度为20μmol/L的JAK2激活剂CoA1)、Si-PIM1+CoA1组(U937细胞转染含PIM1 mRNA低表达的腺病毒载体并加入浓度为20μmol/L的CoA1)。培养24 h。荧光定量PCR和蛋白印迹法检测U937细胞PIM1 mRNA和蛋白、JAK2/STAT3通路、细胞周期、凋亡相关蛋白表达;噻唑蓝法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡率。结果:AML患者骨髓单个核细胞中PIM1 mRNA表达水平高于单纯缺铁性贫血患者(P<0.05)。与U937组相比,Si-PIM1组细胞PIM1 mRNA和蛋白、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、Cyclin D1、CDK2蛋白、细胞增殖活性、S期比例、G2/M期比例降低(均P<0.05),p27、Caspase-3蛋白、G0/G1期、凋亡率升高(均P<0.05),而CoA1组上述指标的变化情况与Si-PIM1组正好相反,CoA1可逆转Si-PIM1对U937细胞的作用效果。U937组、Si-PIM1+CoA1组、Si-NC组U937细胞上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:敲低PIM1基因表达可抑制U937细胞增殖、促进凋亡,缓解ALM进程,且上述作用可能与抑制JAK2/STAT3通路活化有关。 展开更多

关键词 丝/苏氨酸激酶家族成员1 急性髓系白血病U937细胞 增殖 凋亡 Janus酪氨酸激酶2/信号转导及转录激活因子3通路

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E2F1与肿瘤代谢重编程的研究进展 被引量：7

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作者 徐梦婕 黄耀 +2 位作者 谢国然 陈晓婷 秦映芬 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第23期3858-3860,共3页

细胞周期相关转录因子 E2F-1（E2F transcription factor 1）是细胞周期相关转录因子 E2F 家族成员之一， E2F1的活化可将信号传至核内，推动细胞周期由G1期进入到 S 期，是细胞周期进程中重要的转录因子。近年来研究发现，E2F1除调控... 细胞周期相关转录因子 E2F-1（E2F transcription factor 1）是细胞周期相关转录因子 E2F 家族成员之一， E2F1的活化可将信号传至核内，推动细胞周期由G1期进入到 S 期，是细胞周期进程中重要的转录因子。近年来研究发现，E2F1除调控细胞周期外也参与肿瘤细胞代谢重编程，在肿瘤的发生、发展中起到重要作用，本文综述了 E2F1与肿瘤代谢重编程特别是有氧糖酵解在肿瘤中的作用以及两者之间的关系的研究进展。 展开更多

关键词 肿瘤细胞代谢 e2f1 编程 细胞周期进程 相关转录因子 e2f-1 有氧糖酵解 家族成员

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重组克柔念珠菌14-3-3蛋白诱导奶牛乳腺上皮细胞铁死亡的信号通路分析

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作者 马月 苗宇航 +5 位作者 丁涛 辛杰 马文妍 李雅楠 周学章 杜军 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第11期5706-5720,共15页

旨在研究重组克柔念珠菌14-3-3(rCK14-3-3)蛋白诱导奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)铁死亡的特征,为揭示克柔念珠菌毒力因子损伤奶牛乳腺上皮细胞的机制提供理论依据。采用CCK-8法筛选rCK14-3-3蛋白对MAC-T的最适作用浓度和时间;将奶牛乳腺上... 旨在研究重组克柔念珠菌14-3-3(rCK14-3-3)蛋白诱导奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)铁死亡的特征,为揭示克柔念珠菌毒力因子损伤奶牛乳腺上皮细胞的机制提供理论依据。采用CCK-8法筛选rCK14-3-3蛋白对MAC-T的最适作用浓度和时间;将奶牛乳腺上皮细胞分为空白对照组、阳性对照组(10μmol·L^(-1)Erastin)、试验组Ⅰ(不同浓度rCK14-3-3蛋白(25、50、75μg·mL^(-1)))、试验组Ⅱ(不同浓度rCK14-3-3蛋白(25、50、75μg·mL^(-1))+铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(20μmol·L^(-1)))、试验组Ⅲ(不同浓度rCK14-3-3蛋白(25、50、75μg·mL^(-1))+Nrf2特异性抑制剂ML385(25μmol·L^(-1))),透射电镜检测细胞铁死亡形态学特征;Western blot检测rCK14-3-3诱导MAC-T铁死亡Nrf2-SLC7A11/GPX4信号通路蛋白表达水平;免疫荧光法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、活性氧(ROS)及线粒体膜电位(JC-1)的表达水平;比色法检测MAC-T中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和亚铁离子(Fe^(2+))的含量。结果发现,与空白对照组相比,阳性对照组、试验组Ⅰ出现明显铁死亡特征;阳性对照组、试验组ⅠNrf2、GPX4、SLC7A11蛋白表达水平及GSH含量显著下降(P<0.05),ROS、MDA、Fe^(2+)含量显著上升,JC-1含量显著下降(P<0.05),而与试验组Ⅰ相比,试验组ⅡNrf2、GPX4、SLC7A11蛋白表达水平及GSH含量显著上升(P<0.05),ROS、MDA、Fe^(2+)含量显著下降,JC-1含量显著上升(P<0.05);试验组ⅢNrf2、GPX4、SLC7A11蛋白表达水平及GSH含量显著下调(P<0.05),ROS、MDA、Fe^(2+)含量显著上升,JC-1含量显著下降(P<0.05)。本研究表明,rCK14-3-3蛋白可通过Nrf2-SLC7A11/GPX4信号通路诱导MAC-T发生铁死亡,为今后靶向干预铁死亡防治念珠菌性奶牛乳房炎提供了数据支持。 展开更多

关键词 重组克柔念珠菌14-3-3蛋白 奶牛乳腺上皮细胞 核因子e2相关因子2-溶质载体家族7A11/GPX4信号通路 铁死亡

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根皮素对2型糖尿病肾病小鼠的肾保护作用及机制 被引量：5

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作者 王兴红 马永超 +2 位作者 孙缦利 李超敏 李海霞 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第11期418-426,共9页

为探究根皮素对2型糖尿病肾病小鼠肾损伤的分子保护作用及潜在机制,将小鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、阳性药物组(二甲双胍500 mg/kg)、根皮素低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg·d)。造模成功后,各组小鼠灌胃给予相应... 为探究根皮素对2型糖尿病肾病小鼠肾损伤的分子保护作用及潜在机制,将小鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、阳性药物组(二甲双胍500 mg/kg)、根皮素低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg·d)。造模成功后,各组小鼠灌胃给予相应药物,12周后,观察肾脏肥大指数、肾脏病理形态学变化,测定血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)和尿β2-微球蛋白(β2-MG)、血清白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)等指标,并检测肾组织丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路相关蛋白表达。结果显示:与模型组比较,根皮素中、高剂量组小鼠肾脏肥大指数极显著减小(P<0.01);HE染色和Masson染色见肾小球体积明显减小、系膜增生明显减少,肾小球和肾间质纤维化明显减轻;血BUN、Scr、IL-1β、IL-18和肾组织MDA含量、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ι(CollagenΙ)、NLRP3、IL-1β和Gasdermin D(GSDMD)蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01);肾组织GSH-Px活性、Nrf2、HO-1、钙粘附蛋白-E(E-cadherin)蛋白表达显著升高(P<0.05)。结果表明:根皮素能保护2型糖尿病肾病小鼠肾功能改善肾纤维化,可能与调控Nrf2/HO-1/NLRP3通路改善氧化应激与炎症反应有关。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 根皮素 转录因子 e2相关因子2/血红素加氧酶-1/核苷酸结合寡聚化结构域 样受体蛋白3通路 氧化应激 炎症

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Hsa_circ_0087354通过hsa-miR-199-3p/SLC7A11调节MG-63细胞增殖及氧化还原状态 被引量：2

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作者 郑宝莲 何嘉轩 +3 位作者 梁珮琪 李丹 刘小川 张静莹 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期308-319,共12页

环状RNA(circular RNAs,circRNAs)是一类新型非编码RNA。已有研究表明,其在细胞氧化还原反应中发挥重要作用。在本文前期研究中,发现通过real-time PCR检测,hsa_circ_0087354与细胞的氧化还原状态密切相关。过表达hsa_circ_0087354后,... 环状RNA(circular RNAs,circRNAs)是一类新型非编码RNA。已有研究表明,其在细胞氧化还原反应中发挥重要作用。在本文前期研究中,发现通过real-time PCR检测,hsa_circ_0087354与细胞的氧化还原状态密切相关。过表达hsa_circ_0087354后,活性氧1(reactive oxygen species1,ROS1)基因表达显著下降(P<0.01),超氧化物歧化酶1(surperoxide dismutase1,SOD1)表达显著升高(P<0.05);细胞内SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)活性以及谷胱甘肽(glutathione,GSH)浓度显著升高(P<0.01),细胞增殖能力增强(P<0.05)。生物信息学分析预测,hsa-miR-199-3p与hsa_circ_0087354和溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)存在结合位点,可能存在靶向调控关系。双荧光素酶报告基因结果证实了hsa-miR-199-3p与hsa_circ_0087354和SLC7A11之间的靶向调控关系。构建过表达hsa_circ_0087354质粒和ctrl质粒,合成hsa-miR-199a-3p、hsa-miR-199b-3p和hsa-miR-NC mimics。通过Real-time PCR分析发现,转染hsa_circ_0087354后,hsa-miR-199-3p表达显著降低(P<0.01),SLC7A11表达显著升高(P<0.05)。转染hsa-miR-199-3p后,SLC7A11基因表达显著下降(P<0.001),细胞内SOD和GPx活性以及GSH浓度显著降低(P<0.01),细胞增殖能力下降(P<0.05)。研究结果表明,hsa_circ_0087354通过吸附hsa-miR-199-3p,增强SLC7A11表达,促进氧化应激MG-63细胞增殖,降低氧化应激水平。 展开更多

关键词 氧化应激 hsa_circ_0087354 hsa-miR-199-3p 核因子e2相关因子2 溶质载体家族7成员11(SLC7A11)

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