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中华蜜蜂dynactin p62基因的克隆及不同发育阶段表达分析被引量：3: 1; 作者曾晶潘其忠 +3 位作者王子龙吴小波颜伟玉曾志将《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1132-1141,共10页; 为探究中华蜜蜂Apis cerana cerana dynactin p62基因的表达特性,本研究克隆了中华蜜蜂dynactin p62的基因组DNA序列(GenBank登录号:JX101463)和mRNA序列(GenBank登录号:JX101464);采用荧光定量PCR检测了中华蜜蜂dynactin p62在不同发... 展开更多; 关键词中华蜜蜂 dynactin P62 基因克隆序列分析差异表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

营养和空间因素对中蜂幼虫dynactin p62基因表达影响: 2; 作者曾晶王子龙 +2 位作者吴小波颜伟玉曾志将《中国蜂业》 2013年第Z3期4-6,共3页; 为探究营养和空间因素对中蜂Apis cerana cerana幼虫dynactin p62基因的表达特性,本研究通过人工饲喂中蜂幼虫,采用荧光定量PCR检测了不同营养和空间发育条件下,中蜂6日龄幼虫dynactin p62基因表达量。结果表明:发育空间因素显著影响了... 展开更多; 关键词中华蜜蜂 dynactin P62 差异表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

人工注射Dnmt3 siRNA对意大利蜜蜂雌蜂发育的影响被引量：14: 3; 作者石元元曾志将 +2 位作者吴小波颜伟玉王子龙《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期272-278,共7页; 为了研究人工注射DNA甲基化转移酶3(DNA methyltransferase3,Dnmt3)siRNA对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica雌蜂的Dnmt3酶活性、Dnmt3 mRNA表达量、dynactin p62基因甲基化水平以及蜜蜂形态指标之间的影响和关系,分别给3组3日龄的... 展开更多; 关键词意大利蜜蜂蜂王工蜂 SIRNA Dnmt3 dynactin P62; 在线阅读下载PDF 职称材料

酵母双杂交筛选PMEPA1互作蛋白: 4; 作者罗深恒许丽红 +2 位作者楚雯马岳刁爱坡《华南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2012年第4期96-99,108,共5页; 采用酵母双杂交技术筛选与前列腺跨膜蛋白PMEPA1相互作用的蛋白质,构建了pGBKT7-PMEPA1诱饵质粒,获得与PMEPA1互作蛋白,GST pull-down实验确定2种蛋白间的相互作用.构建了诱饵载体转化酵母菌Y2HGold,对酵母宿主无毒性、无自激活活性.得... 展开更多; 关键词 PMEPA1 酵母双杂交 dynactin; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠动力蛋白激活蛋白1-shRNA慢病毒载体的构建及在足细胞中的敲低效应被引量：1: 5; 作者傅鹏原理 +4 位作者李金花王春花李林原爱红马骏《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1077-1081,共5页; 目的构建表达小鼠动力蛋白激活蛋白1(dynactin-1)特异性shRNA的慢病毒载体,并检测其对小鼠足细胞dynactin-1的敲低效果。方法针对小鼠dynactin-1mRNA序列,设计合成3种shRNA,克隆到入门质粒pENTR/pTER中,再利用LR反应重组到pLenti X2Pur... 展开更多; 关键词动力蛋白激活蛋白1 RNA干扰慢病毒足细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

动力蛋白激活蛋白亚单位Dynamitin具有ATP酶活性的生物化学特征(英文) 被引量：4: 6; 作者甄红英《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期953-959,共7页; 动力蛋白激活蛋白(dynactin)是一个与胞浆内动力蛋白的功能相关的多亚基复合物.动力蛋白(dynein)为向微管负端运输的马达蛋白,其多种功能包括细胞核迁移、有丝分裂纺锤体定位以及细胞间期和有丝分裂的细胞骨架再组装.Dynamitin,是一个50... 展开更多; 关键词 dynamitin ATP酶动力蛋白激活蛋白动力蛋白微管; 在线阅读下载PDF 职称材料

野生型和突变型小鼠动力蛋白激活蛋白1真核表达载体的构建及其在小鼠足细胞中的表达: 7; 作者王春花李林 +5 位作者傅鹏李金花原爱红孙向华蒋晓峰余晨《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期780-784,共5页; 目的构建野生型和突变型小鼠动力蛋白激活蛋白1(dynactin-1)真核表达载体,并观察其在小鼠足细胞中表达。方法以总RNA反转录合成的cDNA为模板,通过PCR扩增得到小鼠dynactin-1的全长cDNA,将该片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)-FLAG和pEG... 展开更多; 关键词动力蛋白激活蛋白1 真核表达载体足细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名中华蜜蜂dynactin p62基因的克隆及不同发育阶段表达分析被引量：3: 1; 作者曾晶潘其忠王子龙吴小波颜伟玉曾志将; 机构江西农业大学蜜蜂研究所; 出处《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1132-1141,共10页; 基金高等学校博士学科点专项科研基金(20103603110003) 江西省自然科学基金项目(2010GZN0044); 文摘为探究中华蜜蜂Apis cerana cerana dynactin p62基因的表达特性,本研究克隆了中华蜜蜂dynactin p62的基因组DNA序列(GenBank登录号:JX101463)和mRNA序列(GenBank登录号:JX101464);采用荧光定量PCR检测了中华蜜蜂dynactin p62在不同发育时期(3日龄和6日龄幼虫、刚羽化出房蜜蜂)三型蜂中mRNA的表达量。结果表明:该基因基因组DNA序列全长为2403bp,mRNA序列全长为1491bp,编码496个氨基酸残基,预测的蛋白分子量为56.49kD,等电点为8.31。系统发育分析表明中华蜜蜂dynactin p62与西方蜜蜂Apis mellifera dynactin p62聚成一支。该基因在不同发育时期均有表达,在雌性蜜蜂(蜂王和工蜂)中,刚羽化成虫期的表达量显著高于幼虫期(P<0.05),并且同一发育时期相比,工蜂的表达量显著高于蜂王(P<0.05);而该基因在雄蜂中表达量没有明显的规律性。这些结果提示该基因可能与中华蜜蜂级型分化有关。; 关键词中华蜜蜂 dynactin P62 基因克隆序列分析差异表达; Keywords Apis cerana cerana dynactin p62 gene cloning sequence analysis differential expression; 分类号 Q966 [生物学—昆虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名营养和空间因素对中蜂幼虫dynactin p62基因表达影响: 2; 作者曾晶王子龙吴小波颜伟玉曾志将; 机构江西农业大学蜜蜂研究所; 出处《中国蜂业》 2013年第Z3期4-6,共3页; 基金国家蜂产业技术体系资助项目(No.CARS-45-kxj12) 高等学校博士学科点专项科研基金(No.20103603110003) 江西省自然科学基金(No.2010GZN0044); 文摘为探究营养和空间因素对中蜂Apis cerana cerana幼虫dynactin p62基因的表达特性,本研究通过人工饲喂中蜂幼虫,采用荧光定量PCR检测了不同营养和空间发育条件下,中蜂6日龄幼虫dynactin p62基因表达量。结果表明:发育空间因素显著影响了中蜂6日龄幼虫dynactin p62基因表达量(P<0.05),而营养因素对中蜂6日龄幼虫dynactin p62基因表达量没有显著影响(P>0.05)。; 关键词中华蜜蜂 dynactin P62 差异表达; Keywords Apis cerana cerana dynactin p62 differential expression; 分类号 S891 [农业科学—特种经济动物饲养]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人工注射Dnmt3 siRNA对意大利蜜蜂雌蜂发育的影响被引量：14: 3; 作者石元元曾志将吴小波颜伟玉王子龙; 机构江西农业大学蜜蜂研究所; 出处《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期272-278,共7页; 基金国家自然科学基金项目(31060327) 国家现代蜂产业技术体系项目(nycytx-43); 文摘为了研究人工注射DNA甲基化转移酶3(DNA methyltransferase3,Dnmt3)siRNA对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica雌蜂的Dnmt3酶活性、Dnmt3 mRNA表达量、dynactin p62基因甲基化水平以及蜜蜂形态指标之间的影响和关系,分别给3组3日龄的意大利蜜蜂幼虫人工注射50ng Ringer,uth siRNA和Dnmt3 siRNA溶液。在幼虫的发育过程中,测定每组幼虫头部的Dnmt3酶活性、Dnmt3 mRNA表达量、dynactin p62基因甲基化水平以及刚羽化雌性蜜蜂的初生重、体长、前翅长、前翅宽、吻长、第3背板长等形态指标。结果表明:人工注射Dnmt3 siRNA不仅可以显著降低意大利蜜蜂幼虫头部Dnmt3酶活性、Dnmt3 mRNA表达量和dynactin p62基因整体甲基化水平,同时显著提高了刚羽化雌性蜜蜂的初生重、体长、第3背板长。结果说明Dnmt3的改变可以影响雌性意蜂幼虫的发育。; 关键词意大利蜜蜂蜂王工蜂 SIRNA Dnmt3 dynactin P62; Keywords Apis mellifera ligustica queen worker siRNA Dnmt3 dynactin p62; 分类号 Q966 [生物学—昆虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名酵母双杂交筛选PMEPA1互作蛋白: 4; 作者罗深恒许丽红楚雯马岳刁爱坡; 机构天津科技大学生物工程学院; 出处《华南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2012年第4期96-99,108,共5页; 基金天津市自然科学基金重点项目(10JCZDJC16800); 文摘采用酵母双杂交技术筛选与前列腺跨膜蛋白PMEPA1相互作用的蛋白质,构建了pGBKT7-PMEPA1诱饵质粒,获得与PMEPA1互作蛋白,GST pull-down实验确定2种蛋白间的相互作用.构建了诱饵载体转化酵母菌Y2HGold,对酵母宿主无毒性、无自激活活性.得到阳性克隆Dynactin6,GST pull-down实验证实PMEPA1与Dynactin6蛋白间相互作用.推测蛋白Dynactin6可能参与调控PMEPA1在细胞的运输.; 关键词 PMEPA1 酵母双杂交 dynactin; Keywords PMEPA1 yeast two - hybrid dynactin; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠动力蛋白激活蛋白1-shRNA慢病毒载体的构建及在足细胞中的敲低效应被引量：1: 5; 作者傅鹏原理李金花王春花李林原爱红马骏; 机构同济大学附属同济医院肾内科上海市中西医结合医院急诊科江西省九江市中医医院肾六科第二军医大学长征医院肾内科; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1077-1081,共5页; 基金上海市自然科学基金(09ZR1434800)~~; 文摘目的构建表达小鼠动力蛋白激活蛋白1(dynactin-1)特异性shRNA的慢病毒载体,并检测其对小鼠足细胞dynactin-1的敲低效果。方法针对小鼠dynactin-1mRNA序列,设计合成3种shRNA,克隆到入门质粒pENTR/pTER中,再利用LR反应重组到pLenti X2Puro慢病毒目的质粒,经过酶切测序鉴定后,将慢病毒质粒和包装质粒共转染293FT细胞,包装得到病毒颗粒。各组shRNA病毒载体转染小鼠足细胞后,用嘌呤霉素抗性筛选细胞,利用蛋白质印迹法检测各组细胞中dynactin-1蛋白的表达水平。结果构建的各组shRNA入门质粒和慢病毒载体经酶切及测序鉴定正确;慢病毒载体与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞,制备病毒颗粒,转染小鼠足细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定表达shRNA的足细胞系;蛋白质印迹检测结果表明转染dynactin-1-shRNA组的dynactin-1蛋白表达降低。结论构建的小鼠dynactin-1-shRNA慢病毒载体能有效降低小鼠足细胞中dynactin-1蛋白表达,为进一步研究dynactin-1在足细胞中的功能奠定了基础。; 关键词动力蛋白激活蛋白1 RNA干扰慢病毒足细胞; Keywords dynactin 1 RNA interference lentivirus podocytes; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名动力蛋白激活蛋白亚单位Dynamitin具有ATP酶活性的生物化学特征(英文) 被引量：4: 6; 作者甄红英; 机构北京大学医学部细胞生物学系; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期953-959,共7页; 文摘动力蛋白激活蛋白(dynactin)是一个与胞浆内动力蛋白的功能相关的多亚基复合物.动力蛋白(dynein)为向微管负端运输的马达蛋白,其多种功能包括细胞核迁移、有丝分裂纺锤体定位以及细胞间期和有丝分裂的细胞骨架再组装.Dynamitin,是一个50 kD的动力蛋白激活蛋白亚单位,对于稳定动力蛋白激活蛋白复合物是非常重要的.为研究这种稳定性机制,分析了dynamitin的序列,并揭示dynamitin的一些DNA序列与ATP酶的Walker A和Walker B序列具有同源性.纯化的谷胱甘肽巯基转移酶标签蛋白dynamitin和无此标签的蛋白dynamitin都特异性显示了ATP酶活性.DNA序列Walker A的失活突变可废除dynamitin蛋白的ATP酶活性,而Walker B序列无此作用.因此,突变实验进一步证实dynamitin蛋白的ATP酶活性.ATP酶活性的动力学研究结果表明Km为125·78μmol/L和kcat为7·4 min-1·; 关键词 dynamitin ATP酶动力蛋白激活蛋白动力蛋白微管; Keywords dynamitin ATPase dynactin dynein microtubules; 分类号 Q42 [生物学—神经生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名野生型和突变型小鼠动力蛋白激活蛋白1真核表达载体的构建及其在小鼠足细胞中的表达: 7; 作者王春花李林傅鹏李金花原爱红孙向华蒋晓峰余晨; 机构同济大学附属同济医院肾内科第二军医大学长征医院肾内科江西省九江市中医医院肾六科同济大学附属同济医院中心实验室; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期780-784,共5页; 基金上海市自然科学基金(09ZR1434800)~~; 文摘目的构建野生型和突变型小鼠动力蛋白激活蛋白1(dynactin-1)真核表达载体,并观察其在小鼠足细胞中表达。方法以总RNA反转录合成的cDNA为模板,通过PCR扩增得到小鼠dynactin-1的全长cDNA,将该片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)-FLAG和pEGFP-N1;利用部位特异性突变插入方法构建突变型表达载体,经酶切和测序鉴定;各载体转染小鼠足细胞MPC5后,用蛋白质印迹分析法和免疫荧光显微镜法检测dynactin-1蛋白表达。结果 PCR扩增得到大小为3.8kb的小鼠dynactin-1片段,连接到载体后,酶切鉴定电泳结果分别显示pcDNA3.1(+)-FLAG(5.4kb)、pEGFP-N1(4.7kb)以及小鼠dynactin-1(3.8kb)片段,测序分析结果显示克隆的野生型和突变型小鼠dynactin-1序列与数据库序列相同;蛋白质印迹分析法检测到重组dynactin-1的蛋白条带;免疫荧光显微镜观察到dynactin-1主要表达在小鼠足细胞的细胞质。结论成功构建了野生型和突变型小鼠dynactin-1真核表达载体,并在足细胞中表达,为进一步开展细胞生物学研究奠定了实验基础。; 关键词动力蛋白激活蛋白1 真核表达载体足细胞; Keywords dynactin-1 eukaryotic expression vectors podocytes; 分类号 R349.65 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	中华蜜蜂dynactin p62基因的克隆及不同发育阶段表达分析	曾晶潘其忠王子龙吴小波颜伟玉曾志将	《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	营养和空间因素对中蜂幼虫dynactin p62基因表达影响	曾晶王子龙吴小波颜伟玉曾志将	《中国蜂业》	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人工注射Dnmt3 siRNA对意大利蜜蜂雌蜂发育的影响	石元元曾志将吴小波颜伟玉王子龙	《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	14	在线阅读下载PDF 职称材料
4	酵母双杂交筛选PMEPA1互作蛋白	罗深恒许丽红楚雯马岳刁爱坡	《华南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	小鼠动力蛋白激活蛋白1-shRNA慢病毒载体的构建及在足细胞中的敲低效应	傅鹏原理李金花王春花李林原爱红马骏	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	动力蛋白激活蛋白亚单位Dynamitin具有ATP酶活性的生物化学特征(英文)	甄红英	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	4	在线阅读下载PDF 职称材料
7	野生型和突变型小鼠动力蛋白激活蛋白1真核表达载体的构建及其在小鼠足细胞中的表达	王春花李林傅鹏李金花原爱红孙向华蒋晓峰余晨	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料