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大赖草6-SFT基因的克隆及其转基因烟草抗旱和抗寒性分析
被引量：
11
1
作者
贺晓岚
王建伟
+5 位作者
李文旭
陈真真
赵继新
武军
王中华
陈新宏
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期389-398,共10页
果聚糖合成酶(6-SFT)在植物抵御逆境胁迫中起重要作用。利用RACE结合RT-PCR技术从大赖草(Leymus racemosus,2n=4x=28,NsNsXmXm)中克隆到6-SFT基因,其完整开放阅读框为1863 bp。该基因被命名为Lr-6-SFT(GenBank登录号KT387273),编码620...
果聚糖合成酶(6-SFT)在植物抵御逆境胁迫中起重要作用。利用RACE结合RT-PCR技术从大赖草(Leymus racemosus,2n=4x=28,NsNsXmXm)中克隆到6-SFT基因,其完整开放阅读框为1863 bp。该基因被命名为Lr-6-SFT(GenBank登录号KT387273),编码620个氨基酸,其推导氨基酸序列含有保守的果糖基转移酶结构域。氨基酸序列比对及进化树分析表明,大赖草6-SFT与华山新麦草、普通小麦、西尔斯山羊草和大麦6-SFT具有高度相似性。采用基因重组技术构建p1300-35SN-Lr-6-SFT表达载体,利用农杆菌介导法将该载体转入烟草品种W38中。对经过抗性筛选、PCR和RT-PCR验证的转基因植株进行抗旱和抗寒性鉴定,发现转基因植株与对照相比,抗旱和抗寒性明显增强;在逆境胁迫条件下,转基因植株的果聚糖、可溶性糖、脯氨酸含量都显著高于对照,而丙二醛的含量显著低于对照。本研究表明,Lr-6-SFT基因是典型的GH32家族成员,其表达能够提高烟草对干旱和寒冷胁迫的抗性。
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关键词
6
-sft
基因
干旱
寒冷
大赖草
生理指标
转
基因
烟草
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职称材料
滨麦蔗糖:果聚糖6-果糖基转移酶(6-SFT)基因全长cDNA的克隆与生物信息学分析
被引量：
2
2
作者
贺晓岚
王建伟
+3 位作者
赵继新
李文旭
武军
陈新宏
《麦类作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期549-555,共7页
为了挖掘和利用滨麦(Leymus mollis,2n=4x=28,JJNN)的优良基因,以拓宽小麦非生物胁迫抗性基因资源,以滨麦为材料,利用RT-PCR结合RACE技术从滨麦叶片中克隆到6-SFT基因cDNA的全长序列,并对其进行生物信息学分析。结果表明,其cDNA全长为2 ...
为了挖掘和利用滨麦(Leymus mollis,2n=4x=28,JJNN)的优良基因,以拓宽小麦非生物胁迫抗性基因资源,以滨麦为材料,利用RT-PCR结合RACE技术从滨麦叶片中克隆到6-SFT基因cDNA的全长序列,并对其进行生物信息学分析。结果表明,其cDNA全长为2 086bp,开放阅读框为1 866bp(命名为Lm-6-SFT),编码621个氨基酸;其推导的蛋白分子量为69.1kDa,理论等电点(pI)为5.18,属于酸性蛋白。保守结构域分析表明,该基因推导的氨基酸序列含有SDPDG、RDP和EC结构域。多序列比对及进化树分析表明,滨麦6-SFT与冰草6-SFT在氨基酸水平具有高度的序列相似性。
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关键词
滨麦
6
-sft
基因
克隆
序列分析
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职称材料
共转化6-SFT和bar表达框小麦的获得及检测
3
作者
贺晓岚
王建伟
+4 位作者
陈新宏
李文旭
秦绍钊
汤宏
吴显芝
《湖北农业科学》
2022年第24期185-188,193,共5页
为了探究源于华山新麦草和簇毛麦的果聚糖合成酶基因6-SFT改良小麦(Triticum aestivum L.)抗非生物胁迫的可行性,以bar为筛选标记基因,通过基因枪介导法将Ph-6-SFT或Dv-6-SFT基因导入普通小麦(科农199)幼胚愈伤组织中,用除草剂草丁膦作...
为了探究源于华山新麦草和簇毛麦的果聚糖合成酶基因6-SFT改良小麦(Triticum aestivum L.)抗非生物胁迫的可行性,以bar为筛选标记基因,通过基因枪介导法将Ph-6-SFT或Dv-6-SFT基因导入普通小麦(科农199)幼胚愈伤组织中,用除草剂草丁膦作为筛选剂筛选得到抗性植株,并对其进行PCR及GUS组织化学染色鉴定。结果显示,通过PPT筛选体系分别得到146株和187株抗性植株,其中PCR阳性植株分别为4株和6株,GUS组织化学染色阳性植株均为1株,转化率分别为0.24%和0.19%。结果表明,Ph-6-SFT和Dv-6-SFT基因已分别整合到小麦基因组中,获得了无抗生素标记基因的转基因小麦。
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关键词
小麦(Triticum
aestivum
L.)
共转化
Ph-
6
-sft
基因
dv-6-sft基因
BAR
基因
表达盒
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职称材料
题名
大赖草6-SFT基因的克隆及其转基因烟草抗旱和抗寒性分析
被引量：
11
1
作者
贺晓岚
王建伟
李文旭
陈真真
赵继新
武军
王中华
陈新宏
机构
西北农林科技大学农学院/陕西省植物遗传工程育种重点实验室
凯里学院环境与生命科学学院
河南省农业科学院小麦研究所
出处
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期389-398,共10页
基金
国家自然科学基金项目(31571650)
西北农林科技大学唐仲英育种基金资助~~
文摘
果聚糖合成酶(6-SFT)在植物抵御逆境胁迫中起重要作用。利用RACE结合RT-PCR技术从大赖草(Leymus racemosus,2n=4x=28,NsNsXmXm)中克隆到6-SFT基因,其完整开放阅读框为1863 bp。该基因被命名为Lr-6-SFT(GenBank登录号KT387273),编码620个氨基酸,其推导氨基酸序列含有保守的果糖基转移酶结构域。氨基酸序列比对及进化树分析表明,大赖草6-SFT与华山新麦草、普通小麦、西尔斯山羊草和大麦6-SFT具有高度相似性。采用基因重组技术构建p1300-35SN-Lr-6-SFT表达载体,利用农杆菌介导法将该载体转入烟草品种W38中。对经过抗性筛选、PCR和RT-PCR验证的转基因植株进行抗旱和抗寒性鉴定,发现转基因植株与对照相比,抗旱和抗寒性明显增强;在逆境胁迫条件下,转基因植株的果聚糖、可溶性糖、脯氨酸含量都显著高于对照,而丙二醛的含量显著低于对照。本研究表明,Lr-6-SFT基因是典型的GH32家族成员,其表达能够提高烟草对干旱和寒冷胁迫的抗性。
关键词
6
-sft
基因
干旱
寒冷
大赖草
生理指标
转
基因
烟草
Keywords
6
-sft
gene
Drought
Freezing
Leymus racemosus
Physiological indices
Transgenic tobacco
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
滨麦蔗糖:果聚糖6-果糖基转移酶(6-SFT)基因全长cDNA的克隆与生物信息学分析
被引量：
2
2
作者
贺晓岚
王建伟
赵继新
李文旭
武军
陈新宏
机构
西北农林科技大学农学院/陕西省植物遗传工程育种重点实验室
凯里学院环境与生命科学学院
河南省农业科学院小麦研究所
出处
《麦类作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期549-555,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31571650)
西北农林科技大学唐仲英育种基金项目
文摘
为了挖掘和利用滨麦(Leymus mollis,2n=4x=28,JJNN)的优良基因,以拓宽小麦非生物胁迫抗性基因资源,以滨麦为材料,利用RT-PCR结合RACE技术从滨麦叶片中克隆到6-SFT基因cDNA的全长序列,并对其进行生物信息学分析。结果表明,其cDNA全长为2 086bp,开放阅读框为1 866bp(命名为Lm-6-SFT),编码621个氨基酸;其推导的蛋白分子量为69.1kDa,理论等电点(pI)为5.18,属于酸性蛋白。保守结构域分析表明,该基因推导的氨基酸序列含有SDPDG、RDP和EC结构域。多序列比对及进化树分析表明,滨麦6-SFT与冰草6-SFT在氨基酸水平具有高度的序列相似性。
关键词
滨麦
6
-sft
基因
克隆
序列分析
Keywords
Leymus mollis
6
-sft
gene
Clone
Sequence analysis
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
S330 [农业科学—作物遗传育种]
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职称材料
题名
共转化6-SFT和bar表达框小麦的获得及检测
3
作者
贺晓岚
王建伟
陈新宏
李文旭
秦绍钊
汤宏
吴显芝
机构
凯里学院大健康学院
凯里学院理学院
西北农林科技大学农学院/陕西省植物遗传工程育种重点实验室
河南省农业科学院小麦研究所
出处
《湖北农业科学》
2022年第24期185-188,193,共5页
基金
贵州省教育厅科技拔尖人才支持计划项目(黔教合KY字[2017]094)
贵州省科技支撑计划项目(黔科合支撑[2017]2522)
+1 种基金
贵州省基础研究计划项目(黔科合基础[2017]1167)
贵州省教育厅黔教合人才团队项目([2015]70)。
文摘
为了探究源于华山新麦草和簇毛麦的果聚糖合成酶基因6-SFT改良小麦(Triticum aestivum L.)抗非生物胁迫的可行性,以bar为筛选标记基因,通过基因枪介导法将Ph-6-SFT或Dv-6-SFT基因导入普通小麦(科农199)幼胚愈伤组织中,用除草剂草丁膦作为筛选剂筛选得到抗性植株,并对其进行PCR及GUS组织化学染色鉴定。结果显示,通过PPT筛选体系分别得到146株和187株抗性植株,其中PCR阳性植株分别为4株和6株,GUS组织化学染色阳性植株均为1株,转化率分别为0.24%和0.19%。结果表明,Ph-6-SFT和Dv-6-SFT基因已分别整合到小麦基因组中,获得了无抗生素标记基因的转基因小麦。
关键词
小麦(Triticum
aestivum
L.)
共转化
Ph-
6
-sft
基因
dv-6-sft基因
BAR
基因
表达盒
Keywords
Triticum aestivumL.
co-transformation
Ph-
6
-sft
gene
dv-
6
-sft
gene
bar gene
expression cassettes
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大赖草6-SFT基因的克隆及其转基因烟草抗旱和抗寒性分析
贺晓岚
王建伟
李文旭
陈真真
赵继新
武军
王中华
陈新宏
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
11
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
滨麦蔗糖:果聚糖6-果糖基转移酶(6-SFT)基因全长cDNA的克隆与生物信息学分析
贺晓岚
王建伟
赵继新
李文旭
武军
陈新宏
《麦类作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
共转化6-SFT和bar表达框小麦的获得及检测
贺晓岚
王建伟
陈新宏
李文旭
秦绍钊
汤宏
吴显芝
《湖北农业科学》
2022
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