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流感病毒NS1蛋白与宿主蛋白DOK6的相互作用研究
被引量:
2
1
作者
黄山雨
梁立滨
+10 位作者
李俊平
王倩
赵青青
周陈陈
赵玉辉
王广文
李奇兵
孔凡迪
李呈军
陈化兰
姜丽
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期987-992,共6页
A型流感病毒非结构蛋白1(NS1)是病毒编码的必需蛋白,在病毒复制周期中发挥重要作用。NS1蛋白在病毒侵入宿主后大量表达,抑制宿主干扰素通路的激活,选择性关闭宿主基因的表达且能够增强病毒蛋白的表达。为研究宿主DOK6蛋白与NS1蛋白的相...
A型流感病毒非结构蛋白1(NS1)是病毒编码的必需蛋白,在病毒复制周期中发挥重要作用。NS1蛋白在病毒侵入宿主后大量表达,抑制宿主干扰素通路的激活,选择性关闭宿主基因的表达且能够增强病毒蛋白的表达。为研究宿主DOK6蛋白与NS1蛋白的相互作用关系,本研究利用重组质粒p CAGGS-V5-DOK6、p CAGGS-Flag-NS1共转染293T细胞,利用免疫共沉淀试验(Co-IP)检测,结果显示沉淀NS1蛋白后能够检测到DOK6蛋白条带,表明DOK6蛋白与NS1蛋白存在相互作用;将二者共转染A549细胞后利用激光共聚焦显微镜观察,发现二者在细胞质中存在共定位,表明两种蛋白在细胞质中发生相互作用。通过双分子荧光互补试验(BiFC)检测,结果显示NS1蛋白能够与DOK6蛋白的磷酸化酪氨酸结合结构域(Phosphotyrosine binding domain,PTB)结合从而发出较强荧光,表明NS1蛋白能够与DOK6蛋白(PTB)结构域发生相互作用。本研究进一步完善了A型流感病毒NS1蛋白参与的复杂分子间相互作用网络,为深入理解流感病毒在宿主体内复制的分子调控机制奠定了基础。
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关键词
流感病毒
NS1蛋白
dok6
蛋白
蛋白相互作用
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职称材料
Dok 6促进神经营养因子3诱导的过表达原肌球蛋白相关激酶C的PC12细胞突起生长
被引量:
1
2
作者
李玮琦
尤元刚
+1 位作者
阴彬
彭小忠
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期751-755,802,共6页
目的探讨胞浆接头蛋白Dok6对PC12细胞突起生长的影响。方法将Dok6的不同功能模体片段构建至TrkC/Y516F突变体中形成融合克隆。利用Western blot法验证各个融合克隆在细胞内是否稳定表达。利用瞬时转染的方法将融合克隆导入PC12细胞进行...
目的探讨胞浆接头蛋白Dok6对PC12细胞突起生长的影响。方法将Dok6的不同功能模体片段构建至TrkC/Y516F突变体中形成融合克隆。利用Western blot法验证各个融合克隆在细胞内是否稳定表达。利用瞬时转染的方法将融合克隆导入PC12细胞进行过表达,之后用NT-3刺激PC12细胞突起生长,检测不同Dok6片段的效应。结果各个融合克隆均能在细胞内稳定表达。融合了Dok6 PTB结构域+C末端以及单纯C末端的融合克隆均可以挽救由于TrkC受体516位酪氨酸突变导致的PC12细胞突起生长减少,而融合单纯的Dok6 PTB结构域则无此效应。结论Dok6可以促进NT-3诱导的过表达TrkC的PC12细胞突起生长,并且此效应与其C末端密切相关。
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关键词
dok6
PC12细胞
神经营养因子3
突起生长
融合克隆
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职称材料
题名
流感病毒NS1蛋白与宿主蛋白DOK6的相互作用研究
被引量:
2
1
作者
黄山雨
梁立滨
李俊平
王倩
赵青青
周陈陈
赵玉辉
王广文
李奇兵
孔凡迪
李呈军
陈化兰
姜丽
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期987-992,共6页
基金
国家自然科学基金(31402206、31672582)
文摘
A型流感病毒非结构蛋白1(NS1)是病毒编码的必需蛋白,在病毒复制周期中发挥重要作用。NS1蛋白在病毒侵入宿主后大量表达,抑制宿主干扰素通路的激活,选择性关闭宿主基因的表达且能够增强病毒蛋白的表达。为研究宿主DOK6蛋白与NS1蛋白的相互作用关系,本研究利用重组质粒p CAGGS-V5-DOK6、p CAGGS-Flag-NS1共转染293T细胞,利用免疫共沉淀试验(Co-IP)检测,结果显示沉淀NS1蛋白后能够检测到DOK6蛋白条带,表明DOK6蛋白与NS1蛋白存在相互作用;将二者共转染A549细胞后利用激光共聚焦显微镜观察,发现二者在细胞质中存在共定位,表明两种蛋白在细胞质中发生相互作用。通过双分子荧光互补试验(BiFC)检测,结果显示NS1蛋白能够与DOK6蛋白的磷酸化酪氨酸结合结构域(Phosphotyrosine binding domain,PTB)结合从而发出较强荧光,表明NS1蛋白能够与DOK6蛋白(PTB)结构域发生相互作用。本研究进一步完善了A型流感病毒NS1蛋白参与的复杂分子间相互作用网络,为深入理解流感病毒在宿主体内复制的分子调控机制奠定了基础。
关键词
流感病毒
NS1蛋白
dok6
蛋白
蛋白相互作用
Keywords
influenza virus
NS1
dok6
protein interaction
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
Dok 6促进神经营养因子3诱导的过表达原肌球蛋白相关激酶C的PC12细胞突起生长
被引量:
1
2
作者
李玮琦
尤元刚
阴彬
彭小忠
机构
中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期751-755,802,共6页
基金
国家重点基础研究发展计划项目(973计划)(2004CB518604)~~
文摘
目的探讨胞浆接头蛋白Dok6对PC12细胞突起生长的影响。方法将Dok6的不同功能模体片段构建至TrkC/Y516F突变体中形成融合克隆。利用Western blot法验证各个融合克隆在细胞内是否稳定表达。利用瞬时转染的方法将融合克隆导入PC12细胞进行过表达,之后用NT-3刺激PC12细胞突起生长,检测不同Dok6片段的效应。结果各个融合克隆均能在细胞内稳定表达。融合了Dok6 PTB结构域+C末端以及单纯C末端的融合克隆均可以挽救由于TrkC受体516位酪氨酸突变导致的PC12细胞突起生长减少,而融合单纯的Dok6 PTB结构域则无此效应。结论Dok6可以促进NT-3诱导的过表达TrkC的PC12细胞突起生长,并且此效应与其C末端密切相关。
关键词
dok6
PC12细胞
神经营养因子3
突起生长
融合克隆
Keywords
Dok 6
PC12 cells
neurotrophin-3
neurite outgrowth
fusion clones
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
流感病毒NS1蛋白与宿主蛋白DOK6的相互作用研究
黄山雨
梁立滨
李俊平
王倩
赵青青
周陈陈
赵玉辉
王广文
李奇兵
孔凡迪
李呈军
陈化兰
姜丽
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
Dok 6促进神经营养因子3诱导的过表达原肌球蛋白相关激酶C的PC12细胞突起生长
李玮琦
尤元刚
阴彬
彭小忠
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
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职称材料
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